（有机化学专业论文）α猪去氧胆酸类钳形受体的设计合成及识别性能研究.pdf

q 一猪去氧胆酸类钳形受体的设计合成及识别性能研究 有机化学专业 研究生李玲指导教师陈淑华教授 利用人工受体建立化学模型或化学仿生体系来研究生物体内的分子识别现 象已经成为生物有机化学前沿富于挑战性的课题之一本文致力于a 猪去氧 胆酸类钳形受体的设计合成及其对中性小分子和手性分子的识别及对映选择性 识别研究，取得了一系列具有重要学术意义与应用前景的创新性结果 以a 一猪去氧胆酸为s p a c e r 设计合成了酯键型受体1 2 个，氨基乙酸酯型受 体6 个，单手性臂受体4 个，共计合成三类2 2 个新化合物，所有n 猪去氧胆 酸类受体分子钳均为全新设计和首次合成较为深入地研究了目标物的台成方 法，优化了反应条件，首次运用了简便、有效、合乎绿色化学原则的微波法对 氨基乙酸酯型受体的合成进行了探索所合成的受体具有不同的裂穴大小、不 同的刚柔度及不同的手性中心，其结构均经i r ，1 h n m r ，m s 和( 或) 元素分析确 证， 利用差紫外光谱滴定法考察了所合成的受体与芳胺等中性小分子和d l 氨基酸甲酯的识别配合性能测定了配合物的结合常数及自由能变化，并利用 计算机模拟对识别现象进行了进一步的解析结果表明，大多数受体与所考察 的客体形成l ：1 型超分子配合物，对芳胺类化合物的结合常数最高达 1 0 3 m 。，对l 氢基酸甲酯的识别优于对d 氨基酸甲酯的识别，且k k d 最 高可达1 1 4 9 识别作用的推动力主要来自于受体与底物之问的氢键、r i n 堆叠等非共价键的协同作用另外，受体的刚柔性、微环境效应、受体与底 物大小、形状的匹配及几何互补等在识别中起着非常重要的作用 关键词：分子钳a 一猪去氧胆酸分子识别紫外滴定 s t u d i e so nt h ed e s i g na n d s y n t h e s i s o fm o l e c u l a rt w e e z e r s d e r i v e df r o m a h y o d e o x y c h o l i c a c i da n d m o l e c u l a r r e c o g n i t i o n m a j o r ：o r g a n i cc h e m i s t r y p o s t g r a d u a t e ：l i n g l ia d v i s o r ：p r o f s h u h u ac h e n t h e s t u d y o nm o l e c u l a rr e c o g n i t i o n u s i n gt h e c o n s t r u c t i o no fc h e m i c a l m o d e lo rb i o m i m e t i es y s t e mi so n eo ft h ec h a l l e n g e si nt h ef r o n t i e r so fb i o o r g a n i c c h e m i s t r y i nt h i sd i s s e r t a t i o n ，t h ee f f o r t sw e r ef o c u s e do nt h ed e s i g na n ds y n t h e s i s o fm o l e c u l a rt w e e z e r sd e r i v e df r o m q - h y o d e o x y c h o l i ca c i da n dt h e i rm o l e c u l a r r e c o g n i t i o na sw e l la se n a n l i o s e l e c t i v er e c o g n i t i o n s o m eu s e f u la n di m p o r t a n tn e w r e s u l t sh a v eb e e no b t a i n e d t w e l v ee s t e r b o n dm o l e c u l a r t w e e z e r s ，s i xa m i n o a c e t y l a t em o l e c u l a r t w e e z e r s f o u ro n ec h i r a la r mm o l e c u l a rt w e e z e r sh a v eb e e ns y n t h e s i z e du s i n g o h y o d e o x y c b o l i ca c i d a ss p a c e r a l lo ft h e ma r en e wc o m p o u n d s t h es y n t h e t i c m e t h o d so ft a r o tc o m p o u n d sh a v eb e e ns y s t e m i c a l l yi n v e s t i g a t e d ，a n dt h es u i t a b l e c o n d i t i o n sw e r ec h o s e n a n df o rt h ef i r s tt i m e t h es y n t h e s i so fa m i n o a c e t y l a t e m o l e c u l a rt w e e z e r sw a si n v e s t i g a t e db ym i c r o w a v ei r r a d i a t i o n ，w h i c hi s s i m p l e ， e f f e c t i v ea n df r i e n d l yt oe n v i r o n m e n t a l lt h e s et w e e z e r t y p er e c e p t o r sp o s s e s s d i f f e r e n ts i z e so fc l e f t s ，d i f f e r e n tr i g i d i t ya n df l e x i b i l i t y , a n dd i f f e r e n tc h i r a lc e n t e r s t h e i rs t r u c t u r e sw e r ec o n f i r m e db yi r ，1 h n m r ，m sa n d o re l e m e m a n a l y s i s m o l e c u l a rr e c o g n i t i o n p r o p e r t i e so f t h e s em o l e c u l a rt w e e z e r sf o rs o m es m a l l n e u t r a lm o l e c u l e s ，s u c ha ss o m ea r o m a t i ca m i n e sa n dd l a m i n oa c i dm e t h y le s t e r s w e r ee x a m i n e db yu v v i s i b l es p e c t r at i t r a t i o n t h ea s s o c i a t i o nc o n s t a n t ( k a ) a n d g i b b sf r e ee n e r g yc h a n g e s ( 一dg o ) w e r ed e t e r m i n e d t h ec o m p u t e r a i d e dm o l e c u l a r m o d e l i n gw a su s e dt oe l u c i d a t ef u r t h e rt h er e c o g n i t i o na b i l i t i e s r h er e s u l t ss h o w t h a t1 ：1i n c l u s i o n c o m p l e x e s a r ef o r m e df o rm o s to fm o l e c u l a rt w e e z e r r e c e p t o r s w i t h g u e s t s e x a m i n e d s o m em o l e c u l a rt w e e z e r ss h o w e d s t r o n g r e c o g n i t i o na b i l i t yf o ra r o m a t i ca m i n e s t h ea s s o c i a t i o nc o n s t a n tc a nr e a c h 10 3 m s o m eo ft h e s er e c e p t o r sa r ef a v o r a b l ef o rc o m p l e x a t i o nw i t hl - a m i n o a c i dm e t h y le s t e r s t h el a r g e s te n a n t i o s e l e c t i v i t yk f k di s11 4 9 t h ed r i v e f o r c e so fm o l e c u l a r r e c o g n i t i o nm a i n l y c o m ef r o mn o n - c o v a l e n tf o r c e s b e t w e e nh o s ta n dg u e s t ，s u c ha sh - b o n d ，一j is t a c k i n gi n t e r a c t i o ne t ca tt h e s a m et i m e ，t h er i g i d i t ya n df l e x i b i l i t yo f r e c e p t o r s ，m i c r o e n v i r o n m e n t a le f f e c t so f d i f f e r e n tc l e f ts t r u c t u r e s ，t h es i z e s h a p e f i ta n dg e o m e t r yc o m p l e m e n t a r yb e t w e e n h o s ta n d g u e s ta l s op l a ya ni m p o r t a n tr o l ei nr e c o g n i t i o np r o c e s s k e y w o r d s ：m o l e c u l a r t w e e z e r s ， - h y o d e o x y c h o l i ca c i d ， m o l e c u l a r r e c o g n i t i o n ，u v v i s i b l es p e c t r at i t r a t i o n 四 f 大学颁七学位论旦 第一章文献综述及选题思想 1 胆甾类人工受体的分子识别研究进展 1 1 引言 分子识别是生物体系的基本特征生物酶高效专一地催化生化反应、抗体 与抗原的强烈结合等均源于精确的分子识别【l 2j 分子识别是超分子体系具有 特殊功能( 如配合、催化、能量转换、物质输送等) 的基础，在人二 ：酶催化剂、 分子器件、传感器、新药研究等领域显示了诱人的前景利用人工受体与适当 底物间的分子识别以建立仿生模型的研究，已成为当今生物有机化学前沿富于 挑战性的领域之一1 1 1 近年来丌拓了多种人工受体模型，如环糊精、冠醚、环番、卟啉、杯芳烃、 大环多胺等，胆甾由于其自身所具有的刚性凹面结构和固有的不对称性，成为 构筑人工受体的理想结构单元，自7 0 年代以来胆甾类受体的合成就不断有所报 道，7 但是在分子识别方面的研究却始于9 0 年代，本文主要介绍以胆甾为构筑单 元合成的各种类型的人工受体及其在分子识别方面的研究进展 1 2 胆甾类人工受体对阴离子的识别 阴离子的识别是超分子化学中一个被广泛关注的研究课题识别阴离子主 要推动力为氢键和静电力胆酸中有三个指向相同且相隔有一定距离的o h 基 团，通过o h 与阴离子间形成氢键，以达到对阴离子的识别并且其识别研究 主要集中在对卤素阴离子f ，c i ，b r ，i 和磺酸根阴离子方面d a v i s 3 】通过修饰 胆酸中的3 ，7 ，1 2c t o h ，合成了钳形受体1 和2 ，由于受体中三个n h 质子 与进入其中心部位的阴离子之间匹配程度不同，导致受体1 ，2 对卤素阴离子 的选择性差异其中受体l 对f 离子的选择性最强( k a = 1 5 4 0 0 m o ) ，对i 则相对 差一些( k a = 9 3 0 m 。) ，而对于c 1 和b r 贝j j 未表现出选择性，二者结合常数均为 7 2 0 0 m 相反，受体2 对c l - 的选择性则大于b r 。，其k a 值是b r 的l o 倍 叫川大学硕卜学位论文 t s c o o c h ： t s c o o c h ， a r 。3 ，5 d j m e t b y i p h e n y l 1 2 随后d a v i s l 4 , 5 1 又通过引入脲基或硫脲基，在键连基团上接上吸电基 ( - n 0 2 ，一c b ) 以及将2 4 一c o o c h 3 换为溶解性和亲酯性更好的c o o c 2 0 h 4 1 等方 法合成了受体3 - 9 ，使膣甾作为氢键供体的能力大大增强，其中分子钳9 对 e t 4 n + c 1 一的结合常数高达l o m ，而且所有受体均显示出对c 1 的选择性优于 b r 蔼2 0 h 4 c o o c 2 0 h 4 众所周知膦脂在双层细胞膜中径向扩散速度相当快，丽在簇间横向的渗 透作用却很慢，移位酶的合成促进了磷脂的扩散，政变了磷脂在膜间的分布， 因此，移位酶作为一种药物或生物膜研究的化学手段就显得极有意义d a v i s 【6 】 及其他科研工作者以胆甾为基础合成了几种键连不同基团的移位酶，并考察了 其键连不同基团的磷酸根阴离子p o p c ，p o p e ，p o p s 的结合常数。受体1 0 与胆 碱磷酸( p o p c ) 的结合常数k a = ( 1 | 2 o 1 ) 1 0 5 m ，有效地促进了p o p c 对囊和 细胞膜的渗透 四川丈学硕。i 学位论文 厂两 i l 。 ，h 7 n 了。 ，旷毯夕一h 一卧 ，毡 h l c h 2 n + ( c h 3 ) 3 ，0q h 3 t c 】5 0 亡 c o c l 7 h 3 3 1 0 w i t h p o p c p h 1 0 c o o c h ， p o p c ( x 1 ，y 1 ，z 1 ) p o p e ( x 2 ，y l ，z 】) p o p s ( x 3 ，y i ，z i ) x 1 _ c h 2 n + ( c h 3 ) 3 y 1 = c o c l 7 h ”k 。 x 2 2 c h 2 n + h 3 y 2 ：c o c s h l o n h c f 3 c o o c h l c f 3 2 8 由于合成胍基阳离子比较困难，d a v i s 2 7 】通过改进，以相对较易合成的脲基 作为胍基阳离子的电中性类似物合成了受体2 8 ，对苄基衍生物2 9 ，3 0 的选择 性为k l k d = 5 ：1 f 3 c 除了对n 乙酰化氨基酸进行对映选择性识别外，b o n a r 1 a w 和d a v i s 2 9 ，3 0 还报道了由芳香s p a c e r 连接两分子胆酸及其衍生物形成的胆番( c h o l a p h o n e ) 一- 聚体3 1 并利用核磁滴定法考察了其与糖类化合物的识别性能1 3 t , 3 2 1 ，受体3 1 b 不仅对所测糖苷有非对映选择性( d i a s t e r e o s e l e c t i v i t y ) ( 如对p d 和“d 其结 合常数之比为5 ：1 ) ，而且还具有一定的对映选择性( e n a n t i o s e l e c t i v i t y ) 识别作 用( 如芦一d 和芦l 之比为3 ：1 ) ，其对映选择性识别熊力源予胆甾骨架的固有手 性 po嗡；吗晖 聃川人学硕士学位论文 在对d n a 的识别中，疏水作用起着重要作用g e a l l 3 4 , 3 5 与h s i e h l 3 6 1 采 用多胺作隔离基合成了质子化的二聚胆甾多胺受体如3 7 ，并研究了其与 d n a 的配合性能，与单个甾体上挂接多胺形成的甾体酰胺和d n a 的配合 性能相比较，二聚甾体多胺的配合作用要强于单个甾体的配合作用 v q ) l i 大学硕士学位论文 1 ，5 胆甾类人工受体对阳离子的识别 y a s h i a k ik o b u k e 和t a k e s h in a g a t a n i 3 7 1 合成了胆甾衍生物3 8 模拟了 离子在膜中的传输，其对金属离子的选择性为k + n a + l i + ，对k + 的选择 性是n a + 的3 1 3 2 倍，而几乎没有观察到有l i + 渗透过膜 c 0 0 h 为了更大程度上调节环状空腔的大小，以适应包结不同类型、不同形状和 尺寸的客体分子，b o n a r l a w 和s a n d e r s 3 8 1 合成了以胆酸及其衍生物为单体的多 聚大环胆酸酯3 9 4 2 这些大环有着亲脂的外壁和汇聚在空腔内的极性功能团， 在对有机分子或离子的识别和运输上有潜在的应用价值苦昧酸盐提取法”1 实 验表明部分大环对碱金属离子有识剐配合作用 、l ar l _ h r2 ；h 3 9 月；3 brl 。h r 2 ；c f 3 c o 4 0h = 4tr 。= c f 3 c o ，r2 = c f 3 c o 4 1h = 5dr ! ；c h 3 0 c h 2 c h 2 0 c h 2 4 2 一。囊嚣涮墨：墨盛c h 2 。斌邮。 r 2 = c h 3 0 c h 2 c h 2 0 c h 2 c h 。2 c h 。2 0 c h 。3 c o 最近，r e g e n 4 0 1 等人报道了由胆甾和l ，1 7 二氨基3 ，6 ，9 ，1 2 ，1 5 一五氧 正十七烷合成的开环二聚胆蹈类离子载体，并研究了此类受体在人造双分子层 膜中对阳离子的传输能力 崦 刖艳岬 眺 卜如 x卜，、藉 h = = 够 ，时 u r p 翮n f _ 四川大学颁士学位论文 1 6 本课题组的工作 我们课题组在胆甾类受体方面开展了一系列工作，以脱氧胆酸为s p a c e r 合 成了五类锚型人工受体 4 1 , 4 2 a 3 即j 钉4 3 4 7 ，考察了其对氢基酸和芳胺的识别性能 结果表明其对中性分子及手性分子如d l 一氨基酸甲酯具有优良的识别和手性 识别性能，如受体4 3 和4 4 对中性客体分子芳胺具有定的识别能力，识别作 用的推动力为氢键和范德华力【46 4 ”受体4 3 不但对所考察的系列氨基酸甲酯 庐毽令 o r o 矿00 由 4 4 f or - ( m 川 4 5 f l r = ( x m 4 6 r 1 = c h 3 ，c 6 h 5 r 2 = c 6 h 5 ，c h 2 c 6 h 5 ，c h z c 6 凰o h p 具有选择性识别能力，而且对d l 一氨基酸甲酯具有对映选择性识剐能力 4 8 a 9 1 当4 3 中r 基为2 一羟基- 1 - 萘甲酰基时，其对映选择性识别能力k z ) k l 高达6 3 此 外，通过计算机模拟和晶体结构研究，进一步考察了这类受体的构象，表明其 0 卤。 o 帕丫0 帆 蛐 幻幻 四川大学硕十学位论文 为钳形构象，并且对识别性能与机理作了解释与分析 t 7 结语 综上所述，胆甾因其独特的骨架结构特点，在人工受体的设计合成及仿生 仿酶研究中倍受关注在众多的胆甾类人工受体中，环状受体的报道居多，钳 形受体以及基于钳形受体的识别报道则较少由于胆甾本身具有刚性的凹面结 构及多个手性中心，以其为基元构造的钳形人工受体在识别及手性识剐方面的 研究不仅对进一步理解超分子体系非共价键力的作用具有重要的理论意义，而 且在以识别为基础的不对称催化、新药设计、药物分子的输送、手性化合物的 拆分、生物传感及分子器件等领域具有广阔的应用前景， 2 选题思想 纵观国内外文献报道，在胆甾类人工受体的研究中，化学家们着重于合成 具有各种结构和功能的大环受体，钳形受体相对较少，且大都集中在修饰3 - o h ， 】2 o h 和2 4 一c o o h ，羟基在3 ，6 位的。一猪去氧胆酸类钳形受体迄今尚未见 报道c 一3 ，c 一1 2o h 基团相隔约5 9 - 6 2a q 一猪去氧胆酸的c 3 ，c 6o h 相隔距 离更近，键连上功能团形成钳型受体的裂缝就更小，其合成相对于脱氧胆酸来 说就更困难为了进一步考察受体的结构、裂穴大小差异对识别性能的影响， 本文拟在3 - o h ，6 - o h 进行修饰，合成了三类钳形受体，考察其对氨基酸和芳 胺的识别性能，并与同类型的脱氧胆酸分子钳进行纵向比较，希望能将胆甾类 受体的研究工作进一步拓展与完善 i ! _ 川大学硕f 二掌位论文 第二耄q 一猪去氧胆酸类分子钳受体的设计合成 2 1s l 言 人工受体的设计合成及其识别性能研究是生物有机化学前沿富于挑战性的 领域之一，并且在生命科学、分子器件、生物传感、新药研究、仿生催化等领 域具有很好的应用前景1 ，5 0 5 引近年来己开拓了多种人工受体模型，其中分子钳 ( m o l e c u l a rt 、, v e e z e r ) 或分子裂缝( m o l e c u l a rc l e f t ) 作为一类新型受体，引起 了人们特别的兴趣与关注1 1 】理想的分子钳人工受体与生物识别一样，在于通 过氧键、静电作用、芳环n n 堆叠作用，疏水作用和v a f ld e rw a a s 作用等 非共价键作用与底物闻实现识别配合，同时这类受体易于将隙内功能团汇聚于 受体与底物结合的活性部位上，因而对于实现主一客体形状、大小和功能互补特 别有效 胆黼由于其自身具有刚性凹面结构和固有的不对称性，是构筑分子钳的理 想结构单元扯1 ”1 ，其指向凹面中心的o h 和侧链c o o h 基团可以经过不同的化 学修饰构筑成各种类型的人工受体纵观文献报道，胆甾类受体以大环居多， 另有少量枝状受体( d e n d r i t i cs p e c i e s ) 【s5 。5 6 】，钳形受体则较少国外只有印度 的m a i t r a t 垃。3 科研组以及爱尔兰的d a v i s 5 7 j 实验组迸行了胆酸钳形人工受体的 合成，国内则只有我们科研组做了一些探索性的工作i ”，4 3 ，弱 ，而d 一猪去氧胆酸 类分子钳迄今在国内外尚未见报道为了拓展甾体类人工受体的研究，并进一 步考察受体裂穴大小以及手臂结构差旯造成的微环境效应对识别性能的影响。 我们设计合成了一系列新型。猪去氧胆酸类分子钳，并考察了其对中性分子和 手性分子的识别性能 22 酯键型。一猪去氧胆酸类分子钳受体的设计合成 在。一猪去氧胆酸甲酯的3a - o h ，6d - o h 上以酯键连接不同大小、不同取代 基及不同刚柔性的芳香化合物合成了分子钳l 1 2 文献5 州报道的类似酯键 型分子钳的合成对，均以甲苯作溶剂，c a 作碱，加入相转移催化剂氯化苄基 三乙胺，与各种芳酰氯反应，我们在反应溶剂、温度、时间及碱方面进行了大 量探索，除键连邻硝基苯甲酰氯沿用文献方法外，分子钳1 7 均以c h c l 3 为 溶剂，e t 3 n 为碱合成，且产睾很高另外分子钳9 1 2 以c h 3 c o o c 2 h 5 为溶剂， 四川大学硕十学位论文 s n c l 22 h 2 0 还原而得 2 2 1合成路线 r = 由 n 0 2 a+ 0 2 1 4 - n 0 2 2 o o c h ， 0 0 c h ， 中掣 n 僦文 十 a 四川夫学硕 学位论文 a + c a 众m a + a + _ o 萨h 。 喹 4 5 h ， 1 5 6 c 审 c 曷 | 7 ：【| 川_ 人学硕卜学位论史 a + a + c o c l 占 7 8 1 p n 0 2 2m - n 0 2 8 o - n 0 2 1 6 - 9 p - n h 2 1 0m n h ， l l o n h ， h 3 r 呛 四川大学硕十学位论文 0 2 n 1 2 反应条件：( j ) c h 3 0 h h s p 0 4 6 0 c ( i i ) e t 3 n c h c l 3 r e f l u x ( i i i ) 甲苯氯化苄基三乙胺，c a h 2 r e 日u x ( i v ) s n c l 22 h 2 0 c h 3 c o o c h 3 6 0 。c 2 2 2 仪器与试剂 核磁共振：v a r i a ni n o v a 4 0 0m h z ，m e 4 s i 作内标，c d c l 3 为溶剂 红外光谱：傅立叶变换红外光谱仪p e r k i n e l m e r1 7 0 0 型 元素分析用c a r l o e r b a - 11 0 6 型 质谱：f i n n i g a n l c q 。e c “型质谱仪， 熔点：x r c l 显微熔点仪测定，温度汁未经校正 所用试剂均为化学纯或分析纯，除以下注明外未经进一步处理 硅胶h ，硅胶g ，硅胶g f 2 5 4 ：青岛海洋化工厂生产， 二氯亚砜：重新蒸馏，收集7 2 + 7 4 * ( 2 馏分 无水甲苯：加金属钠和二苯甲酮回流变蓝后，使用前蒸出 氯化苄基三乙胺：真空于燥2 4 h 使用 无水c h c l 3 ：加无水c a c l 2 干燥2 4h 后，过滤，蒸馏收集6 0 6 1 馏分 2 2 3 原料及中间体的合成： 中间体3 。，6a 一二羟基一5 一胆烷酸甲酯的合成 在2 5 0m l 三颈瓶中加入4g ( 0 0 1t 0 0 1 ) 3d ，6 口二羟基一5p 一胆烷酸，1 5 0 m l 无水c h 3 0 h ，3m l8 5 h 3 p 0 4 ，于6 0 搅拌反应4 8h ，然后减压蒸c h 3 0 h ， 叫川大学硕士学位论文 残余物用6 0m l 无水乙醚溶解后，用5 n a i - i c 0 3 ( 3 0m l 3 ) 洗涤，再用饱和 食盐水( 3 0m l 3 ) 洗涤，无水n a 2 s 0 4 干燥过夜，过滤，然后水浴蒸去乙醚柱 层析分离纯化( 固定相用硅胶h ，洗脱剂为c h c l 3 ：c h 3 c o c h 3 ：c h 3 0 h = 7 0 ： 2 0 ：2 ) 得纯品，白色粉末3 5g ，产率8 5 ，m p 6 6 5 6 86 c ； q 】d “= + 4 7 ( c0 3 5 c h 2 c 1 2 ) ；1 h n m r ( c d c l 3 ，4 0 0m h z ，p p m ) 6 ：50 5 4 4 8 ( m ，i h ，6b h ) ，4 7 5 4 7 0 ( m ，1 h ，3b - h ) ，3 6 6 ( s ，3 h ，o c h 3 ) ，2 2 5 1 0 5 ( m ，s t e r o i d a lc h a n dc h 2 ) ， 0 9 0 ( s ，3 h ，1 9 一c h 3 ) ，0 9 5 ( d ，j - - 6 4h z ，3 h ，2 l c h 3 ) ，o 、6 4 ( s ，3 h 、18 - c h 3 ) ；i r ( k b r , c m “) v ：3 3 4 5 ( - o h ) ，2 9 8 8 ，2 8 8 0 ( c - h ) ，l7 4 0 ( c = o ) ；m s m z ( ) ：4 2 9 3 ( m + 神q a + ，l o o ) 2 2 4酯键型口猪去氧胆酸类分子钳受体1 7 的合成通法 在5 0m l 三颈瓶中加入0 2 0 3g ( o 5m m 0 1 ) 3 口，6a - 二羟基一5 卢胆烷酸甲 酯( b ) ，装上配有干燥管的冷凝管，加入1 0m l 无水c h c l 3 ，新制酰氯( 2 5 m m 0 1 ) ，搅拌回流反应2 4h ( t l c 监测反应进程) ，然后减压蒸去多余的c h c l 3 ， 再加入1 0m l 乙酸乙酯稀释，抽滤，滤渣用乙酸乙酯( 1 5m l 3 ) 洗涤，合并 滤液，用饱和食盐水( 1 0m l 3 ) 洗涤，无水n a 2 s 0 4 干燥过夜，过滤，蒸除溶 剂，柱层析分离纯化得纯品 3a ，6a 二( 对硝基苯甲酰氧基) 5j ；b 胆烷酸甲酯l 以c h 2 c 1 2 ：c h 3 c o o c h 3 ：石油醚= 5 0 ：1 ：2 5 为洗脱剂进行柱层析分离得 白色固体2 7 6 m g ，产率7 8 4 ，r n p 1 6 3 1 6 4 c ；【a 】d 2 0 = + 6 3 2 ( co 2 6 7 ，c h 2 c 1 2 ) ； h n m r ( c d c l 3 ，4 0 0m h z ，p p m ) 6 ：8 3 0 8 1 4 ( i t i ，8 h ，a r - h ) ，5 5 1 5 4 6 ( m ，1 h ， 6b h ) ，5 0 6 4 9 9 ( m ，1 h ，3b h ) ，3 6 8 ( s ，3 h ，o c h 3 ) ，2 4 0 1 2 5 ( s t e r o i d a lc h a n dc h 2 ) ，1 1 0 ( s ，3 h ，1 9 - c h 3 ) ，o 9 5 ( d ，j = 6 4h z ，3 h ，2 1 一c h 3 ) ，o 7 0 ( s ，3 h ， 1 8 - c h 3 ) ；i r ( k b r , g ：m 。) p ：2 9 3 4 ，2 8 3 0 ( c - h ) ，1 7 2 2 ( c = o ) ，1 6 0 6 ，1 5 2 5 ，1 4 5 0 ( 苯 环) ；m s 【m z ( ) 】：7 2 7 3 ( m + + n a + ，1 0 0 ) ；a n a l c a l c df o rc 3 9 h 4 8 n 2 0 i o ：c6 6 4 6 ，h 6 8 6 ，n3 9 7 ；f o u n dc6 6 2 4 ，h7 0 8 、n4 1 6 3a ，6 。一二( 间硝基苯甲酰氧基) 一5 卢- 胆烷酸甲酯2 以c h 2 c 1 2 ：c h 3 c o o c h 3 ：石油醚= 5 0 ：1 ：3 0 为洗脱剂进行柱层析分离得 18 - 四川大学硕士学位论殳 淡黄色固体2 5 0 m g ，产率7 1 ，m p 5 9 5 6 0 。c ； a d “= + 4 6 3 ( co 3 7 ，c h 2 c 1 2 ) ； 1 hn m r ( c d c l 3 ，4 0 0 m h z ，p p m ) 6 ：8 9 0 7 6 1 ( m ，8 h ，a r h ) ，55 3 5 4 8 ( m ， 1 h ，6 b h ) ，5 0 8 5 0 0 ( m ，1 h ，36 - h ) ，3 6 7 ( s ，3 h ，o c h 3 ) ，2 3 5 1 1 5 ( s t e r o i d a l c ha n dc h 2 ) ，1 0 9 ( s ，3 h ，1 9 - c h 3 ) ，0 9 8 ( d ，j = 6 4h z ，3 h ，2 1 一c h 3 ) ，o 7 0 ( s ，3 h ， 1 8 - c h 3 ) ；i r ( k b r , c m “) y ：2 9 4 4 ，2 8 4 6 ( c h ) ，1 7 4 2 ( c = o ) ，1 6 1 6 ，1 5 3 4 ，1 4 4 2 ( 苯 环) ；m s m z ( ) 】：7 2 7 3 ( m + + n a t ，1 0 0 ) ；a n a l c a l c df o rc 3 9 h 4 9 n 2 0 | o ：c6 6 4 6 ，h 6 8 6 n3 9 7 ；f o u n dc6 6 4 4 h7 0 7 n4 0 0 3a ，6a 二( 对氯苯甲酰氧基) 一5j 曰一胆烷酸甲酯3 以c h 2 c 1 2 ：c h 3 c o o c h 3 ：石油醚= 5 0 ：l ：4 0 为洗脱剂进行柱层析分离得 白色固体2 7 5 2 m g ，产率8 0 5 ，n l p 7 8 8 0 。c ；【o d 2 0 = + 5 3 2 ( co 3 0 6 ，c h 2 c 1 2 ) ； 1 h n m r ( c d c l 3 ，4 0 0 m h z ，p p m ) 6 ：8 0 1 7 3 7 ( m ，8 h ，a r - h ) ，5 4 3 ( b r ，m ，lh ，6 b h ) ，4 9 8 ( b r ，m ，1 h ，31 3 一h ) ，3 6 7 ( s ，3 h ，o c h 3 ) ，2 4 01 ，1 1 ( s t e r o i d a lc h a n d e l l 2 ) ，1 0 7 ( s ，3 h ，1 9 - c h 3 ) ，o 9 3 ( d ，j = 6 4 h z ，3 h ，2 1 一c h 3 ) ，o 6 9 ( s ，3 h ，1 8 - c h 3 ) ； i r ( k b r ，c m “) v ：2 9 4 7 ，2 8 8 5 ( c h ) ，1 7 1 9 ( c = o ) ，1 5 8 4 ，1 4 5 8 ( 苯环) ；m s 【m z ( ) ：6 8 3 7 1 ( ”，1 0 0 ) ；a n a l c a l c d f o rc 3 9 h 4 8 0 6 c 2 ：c6 8 5 1 ，h7 0 8 ；f o u n dc 6 8 4 0 h7 1 6 3a ，6a - - ( 3 5 二硝基苯甲酰氧基) 一5 口一胆烷酸甲酯4 以c h 2 c 1 2 ：c h 3 c o o c h 3 ：石油醚= 5 0 ：l ：2 0 为洗脱剂进行柱层析分离碍 淡黄色固体3 0 0 4 m g ，产率7 5 6 ，m p 8 6 8 7 c ；【 d 2 0 = + 5 7 6 ( c0 3 1 2 ，c h 2 c 1 2 ) 1 h n m r ( c d c l 3 ，4 0 0 m h z ，p p m ) 6 ：9 2 4 9 1 0 ( m ，6 h ，a r - i j ) ，5 5 7 ( b r , m ，1h ，6 1 3 - h ) ，5 1 0 ( b r ，m ，l h ，3b - h ) ，3 6 8 ( s ，3 h ，o c h 3 ) ，2 4 2 1 1 5 ( s t e r o i d a lc h a n d c h 2 ) ，1 1 2 ( s ，3 h ，1 9 - c h 3 ) ，o ，9 5 ( d ，, - - 6 8 h z ，3 h ，2 1 - c h 3 ) ，0 7 2 ( s ，3 h ，1 8 - c h 3 ) ； i r ( k b r , c m l ) p ：2 9 4 7 ，2 8 8 5 ( c h ) ，1 7 3 1 ( c = o ) ，1 6 2 8 ，1 5 4 6 ，1 4 5 9 ( 苯环) ；m s m z ( ) ：7 9 4 8 1 ( m 十，1 0 0 ) ：a n a l c a l c df o rc 3 9 h 4 6 n 4 0 4 ：c5 8 9 4 ，h5 8 3 ，n7 0 5 ； f o u n dc5 8 9 4 ，h6 0 4 n6 9 6 ； 3d ，6 口一二( 萘甲酰氧基) 一5 卢- 胆烷酸甲酯5 以c h 2 c 1 2 ：c h 3 c o o c h ，：石油醚= 5 0 ：l ：4 0 为洗脱剂进行柱层析分离得 1 9 四川人学硕士学位论文 白色晶体2 5 3 m g ，产率7 0 8 7 ，i n p 9 2 5 9 2 9 ； a 】d “2 + 5 6 4 ( c 0 3 1 9 ， c h 2 c 1 2 ) ；1 h n m r ( c d c l 3 ，4 0 0m h z ，p p m ) 6 ：8 9 0 7 5 0 ( m ，1 4 h ，n a p h t h - h ) ， 5 ，6 1 5 5 6 ( m ，1 h ，6 1 3 一h ) ，5 】7 5 1 l ( m ，l h ，3b 1 4 ) ，36 7 ( s ，3 h ，o c h 3 ) ，2 1 3 1 1 6 ( s t e r o i d a lc h a n dc h 2 ) ，1 1 4 ( s ，3 h ，1 9 - c h 3 ) ，o 9 4 ( d ，j = 6 4h z ，3 h ，2 l - c h 3 ) ， o 71 ( s ，3 h ，1 8 - c h 3 ) ；i r ( k b r , c m l ) y ：3 0 6 5 ( c = c i - i ) ，2 9 4 6 ，2 8 8 0 ( c i t ) ， 1 7 1 0 ( c o ) ，1 6 7 3 ，1 5 9 4 ，1 5 1 0 ( 苯环) ；m s r n z ( ) 】：7 3 7 3 ( m + + n a + ，1 0 0 ) ；a n a l c a l c df o rc 4 7 h 5 4 0 6 ：c7 8 9 6 ，h7 8 1 ：f o u n dc7 8 7 4 ，h8 0 0 3a ，6 口一二( 苯乙酰氧基) 5 卢一胆烷酸甲酯6 以环己烷：乙酸乙酯= 6 ：l 为洗脱剂进行柱层析分离得黄色固体1 5 0 m g ， 产率4 6 7 ，m p 4 0 4 2 c ；【q 】d “；+ 5 8 2 ( co 2 1 2 ，c h z c l 2 ) ；1 h n m r ( c d c l 3 ， 4 0 0m h z ，p p m ) 6 ：7 , 4 0 6 9 8 ( m ，l o h ，a t - i t ) ，5 1 0 5 。0 6 ( m ，1 h ，60 - h ) ，4 6 3 4 5 7 ( m ，l h ，31 3 一r t ) ，3 6 0 3 ，5 2 ( m ，4 h ，o c o c h 2 p h ) ，3 5 0 ( s ，3 h ，c o o c h 3 ) ， 2 3 2 0 9 1 ( m ，s t e r o i d a lc h a n d c h 2 ) ，0 8 7 ( s ，3 h ，1 9 - c h 3 ) ，0 8 4 ( d ，, - - 6 4h z ，3 h 2 1 一c h 3 ) ，0 5 6 ( s ，3 h ，1 8 - c t t 3 ) ；i r ( k b r ，c m “) p ：2 9 4 6 ，2 8 6 4 ( c h ) ，1 7 3 6 ( c - 8 0 ) ， 1 5 2 0 ， 4 5 4 ( 苯环) ；m s m z ( ) 】：6 6 5 ( m + + 2 3 0 ，1 0 0 ) ；a n a l c a l c df o rc 4 l h 5 4 0 6 ：c 7 6 6 0 h8 4 7 ；f o u n dc7 6 4 4 h8 1 3 3 。，6d - - ( 苯氧乙酰氧基1 - 5p 胆烷酸甲酯7 以环己烷：乙酸乙酯= 6 ：l 为沈脱剂进行柱层析分离得白色固体3 0 0 9 m g ， 产率8 8 9 1 1 3 p 4 5 4 7 c ； 】d “= + 6 7 6 ( co 2 3 5 ，c h 2 c 1 2 ) ；1 h n m r ( c d c l 3 ， 4 0 0m h z ，p p m ) 6 ：7 2 6 6 7 4 ( m ，1 0 h ，a t - h ) ，5 2 3 5 1 8 ( m ，i h ，6b h ) ，4 7 5 4 6 7 ( m ，lh ，3b h ) ，4 5 7 4 4 8 ( m ，4 h ，o c o c i - 1 2 0 ) ，3 6 0 ( s ，3 h ，