痤疮免疫及炎症反应.ppt

1,痤疮的免疫及炎症反应项蕾红MD,PhD,复旦大学附属华山医院皮肤科,微粉刺临床无明显异常,8weeks,52%丘疹含有微粉刺，22%丘疹含有开放性粉刺，10%丘疹含有闭合性粉刺,痤疮皮损的进展过程,Thiboutotetal.JAmAcadDermatol2009Gollnicketal.JAmAcadDermatol.2019;49(suppl1).,患者，男，20岁，痤疮03.6.23,用免疫组化方法明确炎症反应与毛囊上皮过度角化两者的先后顺序(微粉刺的形成)分别收取炎症未受累处组织(n=20痤疮患者)早期炎症性皮损(n=12痤疮患者)正常健康对照(n=10)检测并比较各组炎症相关细胞及介质（T细胞亚型，中性粒细胞，巨噬细胞，6-整合素,白介素-1(IL-1)等）,亚临床性炎症反应粉刺前皮损:微粉刺,JeremyAHetal.JInvestDermatol.2019;121(1):20-27.,发现：痤疮患者未受累处皮肤处毛囊周围炎症较毛囊上皮过度角化更早发生炎症在痤疮最初期即存在，即亚临床性炎症,亚临床性炎症反应,JeremyAHetal.JInvestDermatol.2019;121(1):20-27.,数码技术动态记录痤疮炎症过程25例未经治疗的面部痤疮患者数码技术记录皮损数量及状态每隔2周随访，共12周结果炎症可见于粉刺(54%)、炎症未累及处组织(28%),、红斑(12%)及痤疮疤痕(6%)Subsetofinflammatorylesionsnotprecededbycomedones炎症在痤疮初期即存在，并贯穿于整个发病经过,数码技术动态记录痤疮炎症过程,DoTTetal.JAmAcadDermatol.2019;58(4):603-608.,7,痤疮中的炎症与免疫,炎症是痤疮发病中的初始环节痤疮发生及发展过程中均有炎症参与痤疮相关的炎症后色素沉着亦与炎症相关,炎症是痤疮发病中的关键因素痤疮发生及发展过程中均有炎症参与受累处毛囊内P.acnes降解缓慢刺激炎症持续1炎症细胞可见于痤疮疤痕77%萎缩性痤疮疤痕可见炎症细胞浸润2痤疮相关的炎症后异色症与炎症相关色素沉着是痤疮常见的并发症持续性炎症后色素沉着(PIH)持续性炎症性红斑(PIE)局灶持续性炎症色素沉着,炎症可在痤疮皮损缓解后继续存在,1.VowelsBRetal.InfectImmun.2019;63(8):3158-31652.LeeWJetal.JEurAcadDermatolVenereol.20193.DavisEC,CallenderVD.JClinAesthetDermatol.2019;3(7):20-31,炎症/免疫在痤疮中的作用逐渐得到认可,炎症在微粉刺之前即存在炎症贯穿于痤疮发病过程炎性丘疹炎症后异色症(PIH,PIE)痤疮疤痕,10,天然免疫：介导痤疮早期炎症反应,天然免疫：在（微）粉刺形成中的作用,P.acnes巨噬细胞：分泌IL-8,TNF激活TLR-2循环免疫复合物P.acnes作为超抗原激活免疫应答NK细胞+,巨噬细胞未成熟的树突状细胞,角质形成细胞皮脂腺细胞IL-alfa游离脂肪酸角质形成细胞细胞因子(IL-1,IL-6,IL-8“like”)GM-CSFT细胞迁移(P.acnes-皮脂腺细胞刺激源？)IL-1肿瘤坏死因子(TNF),微粉刺炎症炎症性皮损,VowelsBR.InfectImmunol2019-GuyR.J.Invest.Dermatol2019ZouboulisCC.Dermatology2019-1-PuhvelJInvestDermatol1978,P.acnes提取物对角质形成细胞分化有直接调节作用P.acnes对炎症性及非炎症性皮损的发病均有影响Pacnes可刺激角质形成细胞:分泌IL-1样细胞因子filaggrin表达上调,P.acnes与粉刺,JarrousseV,etal.ArchDermatolRes.2019;299:441-447.,CourtesyBDreno,P.acnes提取物可诱导增殖及分化的角质形成细胞表达整合素1；并可诱导分化的角质形成细胞表达整合素3,6s，V6及丝聚蛋白；免疫组化及Westernblotting结果发现：P.acnes提取物促使基底层上层表皮丝聚蛋白的高表达；P.acnes对角质形成细胞分化有直接调节作用，因此，P.acnes对痤疮的微粉刺形成和炎症均有重要作用。,JarrousseV,etal.ArchDermatolRes.2019;299:441-447.,P.acnes与粉刺,P.acnes产生的外源性蛋白酶在痤疮/粉刺形成中的作用尚不明确研究目的:探索P.acnes蛋白酶对PAR-2是否有活化作用PAR-2可介导炎症反应及免疫应答PAR-2可诱导促炎症细胞因子，如AMPs、MMPs采用免疫组化及原位酶谱法检测皮损处PAR-2的表达及蛋白酶活性,P.acnes在痤疮/粉刺形成中的作用机制,LeeSEetal.ArchDermatolRes.2019;302(10):745-756.,Pacnes可通过PAR-2激活角质形成细胞的钙信号通路，并诱导炎症介质表达IL-1andIL-8TNF-hBD-2LL-37MMP-1,MMP-2,MMP-3,MMP-9,andMMP-13P.acnes对炎症介质的上调作用可被丝氨酸蛋白酶抑制剂及PAR-2拮抗剂抑制结论:P.acnes产生的蛋白酶可通过PAR-2诱导炎症介质的高表达，是痤疮/粉刺发病中的一重要因素,研究结果,LeeSEetal.ArchDermatolRes.2019;302(10):745-756.,P.acnes在痤疮/粉刺形成中的作用机制,P.acnes通过PAR-2信号通路介导炎症反应，在粉刺形成中具有重要作用我们的研究发现P.acnes通过TLR-2信号通路途径介导痤疮相关的炎症后色素沉着P.acnes与PBMCTLR的关系,背景,KC可表达TLRs（TLR7/8除外）TLR2可特异性识别PGN及LTA,MariaC.Lebre.JInvestDermatol.2019,人角质形成细胞TLRsmRNA表达谱,背景,P.acnes通过TLR-2介导炎症反应,宿主细胞,TLR2,TLR2,PGN：peptidoglycansLTA：lipoteichoicacids,19,?,假说,炎症后色素沉着是机体为维持炎症稳态而付出的代价,?,20,研究目的：探究P.acnes在痤疮相关的炎症后色素沉着中的作用,目的,21,将细菌细胞壁成分PGN和LTA（终浓度10g/ml）加入到HaCaT细胞中培养采用real-timePCR及ELISA方法分别检测IL-8及POMC/alpha-MSHmRNA及蛋白水平的表达,材料与方法,22,结果,IL-8mRNA,IL-8production(pg/ml),PGN15,721-730.JugeauS,etal.BrJDermatol.2019;153:1105-13.,TLRs可识别病原体相关分子模式诱导早期炎症因子的高表达,CourtesyBDreno,研究设计从痤疮患者及正常健康受试者中分离出P.acnes及外周血单核细胞（PBMC）不同来源的P.acnes分别刺激两组PBMC，比较两组炎症因子的表达,不同宿主对P.acnes的免疫/炎症反应比较,Sugisakietal.JDermatolSci2009;55:47-52,结果不同来源的P.acnes刺激两组PBMC，发现痤疮组PBMC分泌的IFN-,IL12p40及IL-8水平较正常组明显升高因此，痤疮炎症反应主要取决于宿主自身，而非P.acnes的亚型,Sugisakietal.JDermatolSci2009;55:47-52,不同宿主对P.acnes的免疫/炎症反应比较,结果痤疮组PBMC表面TLR-2表达更高P.acnes刺激痤疮组PBMC，发现其分泌的炎症因子水平更高因此，痤疮患者的免疫应答/炎症的变化不仅局限于皮肤组织，同其他皮肤病一样，患者系统性的免疫应答/炎症也有变化,痤疮患者的PBMC不同于正常对照组,DispenzaMetal.JIDadvancedonlineApril19,2019,痤疮皮损处炎症性标记物明显上调,天然免疫介导的炎症反应,AdaptedfromZulianiTetal.ExpDermatol.2019;20(10):850-853.,P.acnes通过PAR-2信号通路介导炎症反应，在粉刺形成中具有重要作用我们的研究发现P.acnes通过TLR-2信号通路途径介导痤疮相关的炎症后色素沉着P.acnes刺激痤疮患者PBMC，发现其分泌的炎症因子水平较正常对照PBMC更高,P.acnes在痤疮/粉刺形成中的作用机制,InflammationisaprimaryeventInflammationispersistentthroughoutacnelesionlifecycle,Conclusions,Thankyouforyourattention!2019.6.4Shanghai,理论对临床有何指导作用?,36,Thankyouforyourattention!,2019.6.4Shanghai,针对天然免疫及炎症反应的用药,外用维A酸可抑制TLR-2的表达,TenaudI,KhammariA,DrenoB.InvitromodulationofTLR-2,CD1dandIL-10byadapaleneonnormalhumanskinandacneinflammatorylesions.ExpDermatol2019;16:500-506.,CourtesyBDreno,阿达帕林对表皮免疫系统的调节：上调KCCD1并抑制IL-10的表达,TenaudI,KhammariA,DrenoBExpDermatol2019;16:500-506.,TenaudI,KhammariA,DrenoBExpDermatol2019;16:500-506.,阿达帕林上调皮损处CD1的表达,维A酸下调MMPs并减少痤疮炎症及疤痕,CourtesyBDreno,BrJDermatol2019,139.(suppl.52),3-7,阿达帕林、BPO及两者联用后对痤疮炎症因子表达的影响7例痤疮患者各取5份皮肤组织，其中1份非炎症组织,4份痤疮皮损处所获得组织块进行体外培养,阿达帕林及BPO的抗炎作用,ZulianiTetal.ExpDermatol.2019;20(10):850-853.,液氮中冻存后在保存于80单克隆抗体进行免疫组化,体外研究,7例痤疮患者皮肤组织正常皮肤组织炎性丘疹性皮损,ZulianiTetal.ExpDermatol2019;20:8503.Dataonfile,Galderma.,TLR-2,*,NS,*,*,Ada/BPO的协调作用,ZulianiTetal.ExpDermatol2019;20:8503.Dataonfile,Galderma.,痤疮皮损处炎症标记物显著升高,阿达帕林及过氧化苯甲酰的抗炎作用,AdaptedfromZulianiTetal.ExpDermatol.2019;20(10):850-853.,阿达帕林联合过氧苯甲酰的协同抗炎作用,阿达帕林联合过氧化苯甲酰的抗炎/免疫调节作用,ValuesrepresentmeanSEM.NS,normalskin;IS,inflamedskin;CMA,controlmedium;BPO,benzoylperoxide;ABP,adapalene+BPO.ZulianiTetal.ExpDermatol.2019;20(10):850-853.,*P.05,阿达帕林联合过氧苯甲酰对多种炎症因子均有调节作用可调节早期（微）粉刺及痤疮炎症反应具体作用机制有待进一步研究,ZulianiTetal.ExpDermatol.2019;20(10):850-853.,阿达帕林联合过氧化苯甲酰的抗炎作用,两大作用机制,小剂量抗生素对天然免疫的调节作用,小剂量抗生素对天然免疫的调节作用,小剂量多西环素(20mg/bid)6个月,安慰剂/对照试验,40例痤疮患者用药2,4,6个月后随访,SkidmoreRetal.ArchDermatol.2019;139(4):459-464,小剂量抗生素对天然免疫的调节作用,口服异维A酸可下调痤疮患者外周血单核细胞表面TLR-2及相关的炎症因子表达这一下调作用可在停药6月后持续存在异维A酸对TLR-2的调节作用可能是其短期/长期疗效的关键所在,异维A酸对天然免疫的作用,DispenzaMetal.JIDadvancedonlineApril19,2019,*=significantcomparedtoacnepatientsbaseline,P0.05;*P0.01;*P0.001+=significantcomparedtonormalvolunteers,P0.05;+P0.01;+P0.001,异维A酸下调外周血单核细胞TLR-2表达,DispenzaMetal.JIDadvancedonlineApril19,2019,EGCG治疗痤疮潜在有效的药物,EGCG是抗增殖、抗炎症的有效成分EGCG可显著减小兔耳廓皮脂腺大小EGCG可显著抑制人SZ95皮脂腺细胞的增殖及脂肪生成EGCG可抑制IGF-I诱导的SZ95皮脂腺细胞表达I