（公共卫生与预防医学专业论文）一种广东凉茶的毒理学安全性评价实验研究.pdf

摘要 目的：广东“凉茶 是广东地区广泛饮用的传统保健饮品，具有清热解暑、去湿消滞、 生津止渴等功效。近年来随着人民生活水平的提高，越来越多的人开始关注保健和养生， 其中成品凉茶的市场发展更为快速，作为以中草药为基础的一类茶饮料饮品不但越来越 受到南方广东居民的喜爱，而且凉茶已经发展至全国各地。我国凉茶行业已经迅速崛起 成为现代化的茶饮，凉茶的概念范围已经扩大，已经成为种大众饮料。但目前亟需进 行对凉茶的功效及其安全毒理评价问题，尤其要阐明凉茶的安全性。主要的争议问题有 以下几点：一、凉茶长期应用是不是会有毒性，目前尚没有充分的证据。二、凉茶是颇 具广东特色的夏季清凉饮料，但凉茶实际是根据中医辨证原理组方形成的一种特殊饮品， 由于其特有的中药寒凉药性对少数消费者产生了不良后果而受到质疑，对其食用安全性 研究就十分迫切。三、广东凉茶长期以来在沿海南方地区应用，目前随着凉茶的逐渐推 广，其正在走向全国和世界，其能否在全国各地尤其北方地区推广应用。从科学理论、实 验研究和消费者使用情况来看都有意向指出广东凉茶尚缺乏功效和安全性依据。因此为 了保证食品安全，很有必要对其进行系统的理化成分、功效学和毒理学研究和评价。本 课题组选用广东凉茶中具有代表性的黄福兴清火排毒茶作为研究对象，对其安全性进行 了系统研究，为凉茶的安全性评价提供科学依据。 方法：一、第一部分黄福兴清火排毒茶的急性毒性实验研究 二、第二部分黄福兴清火排毒茶的a m e s 实验、小鼠骨髓微核实验、小鼠精子畸 形实验研究 三、第三部分黄福兴清火排毒茶的9 0 天喂养实验、微生物学实验研究。 结果：一、受试物黄福兴清火排毒茶粉按g b l 5 1 9 3 3 - - 2 0 0 3 ，采用最大耐受剂量法( 大鼠 l o m l k g b w 、小鼠2 0 m l k g b w ) 经口染毒受试实验鼠，连续观察1 4 天，未见中毒症状 出现及死亡，测得受试物大、小鼠经1 2 1 急性毒性试验l d 。 1 5 9 k g b w ，可以判定为无 毒。 二、受试物黄福兴清火排毒茶凉茶样按g b 一1 5 1 9 3 - - 2 0 0 3 ，在受试物采用一次最大 灌胃量为高剂量组设计，下设中、低剂量组。另设阴性对照组、阳性对照组。经统计软 件进行处理，判定受试物凉茶粉各剂量组与阴性对照组无显著性差异，a m e s 、骨髓微核、 精子畸形等试验结果均为阴性。即在所测试水平，凉茶粉对实验鼠没有毒性。 - 3 一 三、黄福兴清火排毒茶的9 0 天喂养实验表明，在实验期内各实验组动物生长发育良 好，体重增重、食物利用率、脏器系数等各项指标均在本实验室正常值范围之内，与对 照组之间均无显著性差异( p o 0 5 ) 。实验组中血常规及血生化各指标与对照组之间差异 亦无显著性( p o 0 5 ) 。病理组织学检查实验组被检脏器未见有意义的病理改变。结果表 明该样品3 0 d 喂养对大鼠各项观察指标未产生明显影响：初步判断此凉茶用于人体安全 可靠，可以安全食用。 四、微生物学实验表明、本凉茶粉在不同时点的微生物学检测结果与开始时检测结 果没有显著变化，检测值均在标准范围内，表明该产品的卫生学稳定性良好。 关键词：广东凉茶；急性毒性；致畸性实验；安全性评价 i n v e s t i g a t i o no ns a f e t ye v a l u a t i o no ff u x i n gt a n gg u a n g d o n gh e r b a lt e a a b s t r a c t ： m a j o r ：f o o dh y g i e n ea n dn u t r i t i o n n a m e ：w a n gl a n s u p e r v i s o r ：p r o f w a n gy u g u a n g d o n g ”h e r b a lt e a ”i sw i d e l yc o n s u m e di ng u a n g d o n ga st r a d i t i o n a lh e a l t hd r i n k s w i t hc l e a ra w a ys u m m e rh e a ta n d s o m eo t h e re f f e c t s w i t ht h ei m p r o v e m e n to fl i v i n gs t a n d a r d s i nr e c e n ty e a r s ，m o r ea n dm o r ep e o p l ea r ec o n c e r n e da b o u th e a l t hc a r ea n dh e a l t h ，a sac l a s so f l l e r b a l b a s e dd r i n k st e an o to n l ym o r ea n dm o r eo ft h es o u t hg u a n g d o n gr e s i d e n t sl o v e b u t a l s oh e r b a lt e ah a sb e e nd e v e l o p e dt h r o u g h o u ta l lc h i n a c h i n e s eh e r b a lt e ai n d u s t r yh a s r a p i d l ye m e r g e da sam o d e mt e a , h e r b a lt e ac o n c e p th a sb e e ne x p a n d e d ，h a sb e c o m eap o p u l a r b e v e r a g e b u tn o wa nu r g e n tn e e df o r t h ee m c a c ya n ds a f e t yo ft h eh e r b a lt e at o x i c o l o g i c a l e v a l u a t i o n , i np a r t i c u l a r , t oc l a d f yt h es a f e t yo fh e r b a lt e a t h em a i nc o n t e n t i o u si s s u e si n c l u d e t h ef o l l o w i n g ：f i r s t ，t h e r ei si n s u f f i c i e n tt o x i c i t ye v i d e n c ei nl o n g t e r ma p p l i c a t i o no fh e r b a l ： s e c o n d ，h e r b a lt e ai sq u i t er e f r e s h i n gs u m m e rd r i n kg u a n g d o n gc h a r a c t e r i s t i c s ，h o w e v e r ，t h e a c t u a lh e r b a lt e ai sn o tas i m p l es o f td r i n k s b u ta c c o r d i n gt ot c mt h e o r yt h ef o r m m i o no fa s p e c i a lr e c i p ed r i n k s “c o o lc h a r a c t e r i s t i c i t s ”t r a d i t i o n a lc h i n e s em e d i c i n eh e r b sa g a i n s tt h e n e g a t i v ei m p a c to fas m a l ln u m b e ro fc o n s u m e r s t h e i rc o n s u m p t i o ns a f e t ys t u d i e so nv e r y u r g e n t t h i r d ，g u a n g d o n gh e r b a lt e ah a sl o n gb e e na p p l i e di nt h ec o a s t a ls o u t h ，n o w 谢t l lt h e g r a d u a lp r o m o t i o no fh e r b a lt e 巩w h i c hi sm o v i n gt o w a r d sa l lt h ec o u n t r ya n dt h ew o r l d p a r t i c u l a r l yi t sa b i l i t yt op r o m o t et h eu s eo fn o r t h e r na r e a s t h e r e f o r e ，f r o ms c i e n t i f i ct h e o r i e s e x p e r i m e n t a lr e s e a r c ha n dc o n s u m e ri n t e n t i o nt ou s et h ec i r c u m s t a n c e st h a th a v ey e t g u a n g d o n gh e r b a lt e ab a s e do nt h el a c ko fe m c a c ya n ds a f e t y t h e r e f o r e t oe n s u r ef o o ds a f e t y , i ti sn e c e s s a r yf o rt h es y s t e mt oi t se 伍c a c ya n dt o x i c o l o g ys t u d i e s u s e dh e r b a lt e ai no u r g r o u pr e p r e s e n t a t i v eo fh u a n gf u x i n gg u a n g d o n gt e af o rt h es t u d y , c a r r i e do u ti t ss e c u r i t y s y s t e mf o rs a f e t ye v a l u a t i o no fh e r b a lt e at op r o v i d et h es c i e n t i f i cb a s i s t h em a i nw o r k i n c l u d e st h ef o l l o w i n gc o m p o n e n t s ： p a r ti ：t h ef u x i n gq i n gh u a n gf i r ed e t o xt e aa c u t et o x i c i t ys t u d y ；p a r ti i ：a m e st e s t m o u s e b o n em a r r o wm i c r o n u c l e u st e s t ，s p e r ms h a p ea b n o r m a l i t yt e s to fm i c eo fh u a n gf u x i n g g u a n g d o n gt e a ；p a r t l i i ：9 0d a y sf e e d i n ge x p e r i m e n t ，e x p e r i m e n t a ls t u d yo ns t a b i l i t y t h e r e s u l t sa r ea sf o l l o w s ： f i r s t ，a c c o r d i n gt og b l 5 1 9 3 3 2 0 0 3 ，t h et e s t e dc o m p o u n d sh u a n gf u x i n gg u a n g d o n gt e a w i t ht h em a x i m u mt o l e r a t e dd o s e ( 2 0 m l k g b w lw i t he x p o s e do r a l l yi n f e c t e dm i c ew e r e o b s e r v e dc o n t i n u o u s l yf o r1 4d a y s ，n os y m p t o m so fp o i s o n i n ga n dd e a t ho c c u r s ，t h em e a s u r e d p e n t a c h l o r o p h e n o lo r a la c u t et o x i c i t yl d 5 0 15 9 k g b w , c a nb ej u d g e dt ob en o n t o x i c s e c o n d ，a c c o r d i n gt og b 1519 3 3 2 0 0 3 ，t h et e s t e dc o m p o u n d sh u a n gf u x i n gg u a n g d o n gt e a w a sa d m i n i s t e r e db yo n eo ft h el a r g e s td e s i g nc a p a c i t yo ft h eh i g hd o s eg r o u p ，c o n s i s t so f m e d i u ma n dl o wd o s eg r o u p s e p a r a t e n e g a t i v e c o n t r o lg r o u p ，p o s i t i v ec o n t r o lg r o u p p r o c e s s e db ys t a t i s t i c a ls o f t w a r e ，d e t e r m i n et h ed o s eo ft e s t e dd r u g sh e r b a lp o w d e rg r o u pa n d n e g a t i v ec o n t r o lg r o u pn os i g n i f i c a n td i f f e r e n c e ，a m e s ，b o n em a r r o wm i c r o n u c l e u sa n ds p e r l n a b n o r m a l i t ys u c ha st e s tr e s u l t sw e r en e g a t i v e t h a ti s t h el e v e lo ft h et e s t h e r b a lt e ap o w d e r i sn o tt o x i ct ot h em i c e t h i r d ，9 0d a yf e e d i n gt e s ts h o w e dt h a tt h ee x p e r i m e n t a la n i m a l si n - 5 e a c he x p e r i m e n t a lg r o u pd u r i n gt h eg r o w t ha n dd e v e l o p m e n to fg o o db o d yw e i g h tg a i n ，f o o d u t i l i z a t i o n ，o r g a nc o e f f i c i e n ta n do t h e rp a r a m e t e r sw e r ei nn o r m a lr a n g ei no u rl a b o r a t o r y w i t h i n ，a n db e t w e e nt h ec o n t r o ig r o u pt h e r ew a sn os i g n i f i c a n td i f f e r e n c e ( p o 0 5 ) e x p e r i m e n t a lg r o u p ，b l o o da n db l o o db i o c h e m i c a li n d e x e sa n dt h ec o n t r o lg r o u p h a dn o s i g n i f i c a n td i f f e r e n c e ( p 0 0 5 ) h i s t o p a t h o l o g i c a ls t u d yw e r es e i z e do r g a n sn os i g n i f i c a n t p a t h o l o g i c a lc h a n g e s t h er e s u l t ss h o w t h a tt h es a m p l e so ft h e3 0 df e e d i n go nr a t sn oe f f e c to n o b s e r v e di n d i c a t o r s ；i n i t i a la s s e s s m e n to ft h i sh e r b a lt e as a f ef o rh u m a nu s e ，s a f et oe a t ：t h e s t a b i l i t yt e s t ss h o w e dt h a tt h eh e r b a lp o w d e rw i t hn os i g n i f i c a n tc h a n g ei nt h es t a n d a r dr a n g e o ft e s tv a l u e s ，i n d i c a t i n gt h a tt h ep r o d u c tw a ss t a b l eh y g i e n e k e yw o r d s ：g u a n g d o n gh e r b a lt e a ；a c u t et o x i c i t y ；a m e st e s t ；m o u s eb o n em a r r o w m i c r o n u c l e u st e s t ；m o u s es p e r ma b n o r m a l i t yt e s t ；9 0d a y sf e e d i n ge x p e r i m e m 6 - 原创性声明 本人郑重声明：本人所呈交的学位论文，是在导师的指导下 独立进行研究所取得的成果。学位论文中凡引用他人已经发表或 未发表的成果、数据、观点等，均已明确注明出处。除文中已经 注明引用的内容外，不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写 过的科研成果。对本文的研究成果做出重要贡献的个人和集体， 均己在文中以明确方式标明。 本声明的法律责任由本人承担。 论文作者签名：王兰e l期：型翌! ! ! 兰翌 关于学位论文使用授权的声明 本人在导师指导下所完成的论文及相关的职务作品，知识产权归 属兰州大学。本人完全了解兰州大学有关保存、使用学位论文的规定， 同意学校保存或向国家有关部门或机构送交论文的纸质版和电子版， 允许论文被查阅和借阅；本人授权兰州大学可以将本学位论文的全部 或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用任何复制手段保存和 汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该论文直接相 关的学术论文或成果时，第j 署名单位仍然为兰州大学。 保密论文在解密后应遵守此规定。 论文作者签名i 垒导师签名： 第一章文献综述 凉茶，是指将药性寒凉和能消解人体内热的中草药煎水做饮料喝，以消除夏季 人体内的暑气，或治疗冬日干燥引起的喉咙疼痛等疾患。吃火锅、吃小龙虾、吃辣 子鱼、吃烧烤，凡是遭遇可能让人内火上升的食物，很多人总会在同一时刻将目光 投向凉茶。凉茶总的作用是清热解毒、清肺润燥解暑，凉茶对于广东人，可以说是 “生命源于水，健康源于凉茶”。制作凉茶所使用的草药能有效去除人体的毒素，起 到提高人体免疫能力、抗御细菌、病毒的感染，平衡阴阳、柔润肌肤的作用。除了 清热解毒外，凉茶还可去湿生津、清火、明目、散结、消肿等，还可治目赤头痛、 头晕耳鸣、疔疮肿毒和高血压，夏天完全可以当清凉饮料饮用。另有一说为，凉茶 是广东、广西地区对煮好的中药的液体部分的通称。与某些针对特点疾病的中药茶， 凉茶又一般指具有清热、下火功效的，一般人都可以喝的中药。 一、凉茶的发展状况 凉茶是用茶叶制成具有寒凉清热，生津止渴作用的一种饮料。因茶叶本身就有这种 作用，因而称为凉茶。发展到后来，不少凉茶虽有茶之名称，实际上全部由中草药组成， 因此，凉茶的作用兼有去湿消滞及解表发散等功效n 1 。广东凉茶大多数都是采用广东民 间草药，如金钱草、布渣叶、岗梅根、木蝴蝶、火炭毋、淡竹叶、金沙藤、五指柑等， 功效清热解暑、去湿消滞、生津止渴，主治外感风热、喉痛、声沙、口苦尿黄，兼有泄 泻、腹痛、食少体倦等症状者。近年来随着人民生活水平的提高，越来越多的人开始关 注保健和养生，其中成品凉茶的市场发展更为快速，广东凉茶不仅在沿海地区而且发展至 全国各地。凉茶自身具有深厚的文化内涵，2 0 0 6 年中国公布的首批世界文化遗产中，被 认定为首批国家级“非物质文化遗产。可以看出，近2 0 年以来，我国凉茶行业已经迅 速崛起成为现代化的茶饮，凉茶的概念范围已经扩大，中国凉茶从古代发展到现在，已经 成为一种大众饮料 1 。 凉茶的保健功能及药理研究 - 7 目前凉茶的形式主要表现为两种：一是凉茶的半成品，即未煲制成汤剂的固态草药 配方形式：二是凉茶的最终成品，即己煲制好的汤剂。根据功效强弱和使用目的的不同， 凉茶可分为食品、保健食品、药品三大类。凉茶“预防上火”的功效一直以中医理论作 为支撑，制作凉茶所使用的草药能有效去除人体的毒素，起到清热解毒、清肺润燥解暑、 提高免疫功能、抗御细菌、病毒感染、去湿生津、清火明目、散结消肿、平衡阴阳的作 用。凉茶常用的夏枯草有消肿散结、清肝明目等作用；仙草有清热解暑、利湿解毒的功 效；金银花有抗炎、解热抑菌等功效；蛋花有清热解毒、润肺止咳的功效；布渣叶有清 热消食的功能；菊花有清肝明目、清热疏风的功效；甘草有解毒、润肺的功能等等“1 。 国内在1 9 9 0 年代以前对凉茶配方的药理研究资料较少，但迄今凉茶已经由以前的模式改 装为十分符合现代人的特点的灌装凉茶，配方也有很大的改进，所以很有必要从科学理 论、实验研究和消费者使用情况来研究目前凉茶的功效和安全性据。 1 9 8 0 年代以前，国内外对凉茶的保健功能研究主要集中于清热解毒等功能的研究。 湖南医学院卫生学教研组，长沙市卫生防疫站曾进行过两种中药凉茶与含盐饮料对高温 作业工人影响的比较研究，凉茶的配方如下：玄参，陈皮，滑石，土茯苓，麦冬，甘草等，经测 定该凉茶1 0 0 克凉茶含维生素为1 8 5 毫克，可以补充抗坏血酸，满足机体对抗坏血酸的 需要“1 。宋振玉，籍秀娟在1 9 6 0 年代对凉茶中使用的十三种中药及民间草药进行了对大 鼠蛋白性及甲醛性关节炎的影响，发现腰骨藤茎叶及白花地胆草等对大鼠蛋白性关节炎 有抑制作用“1 。叶木荣、李锐等在1 9 7 0 年代对王老吉冲服凉茶进行药效研究，实验表明 王老吉对呼吸道和消化道常见的十多种疾病菌均有较强的抑制作用，并有显著抗炎作用。 在低剂量时，有较强的利尿作用，药后1 小时开始作用，可维持6 小时，随着剂量增加而利 尿作用减弱。实验还表明，本品有促进家免离体胃肠道收缩与加快整体小鼠胃肠道推进运 动。有收缩离体豚鼠气管链和减少肺支气管灌流量，提示临床上对于哮喘患者可能不适使 用m 。 近2 0 年来对凉茶的药效学研究日益增多，刘建雄等对沙溪凉茶进行研究表明沙溪凉 茶具有清热解毒、导滞除湿的功效，可应用于预防和治疗四时感冒和作为清凉饮料使用。 其对干酵母引起的发热有明显的降低体温作用，对呼吸道和消化道感染常见九种细菌均 有不同程度的抑制作用。其中对金葡萄球菌，乙型溶血性链球菌、白喉杆菌抑制作用较强， 8 对柯萨奇b 族病毒( c o x 2 8 1 ) 和甲3 型流感病毒有抑制作用，并具有抗炎、镇痛、解痉的 作用n 。廖惠芳等对石岐外感凉茶进行了药效学研究，结果表明石歧外感凉茶可显著降 低伤寒、副伤寒疫苗所致发热大鼠的体温，有退热作用，能显著抑n - 甲苯致小鼠耳部炎 症反应，能显著减少醋酸致小鼠腹腔伊文思蓝的渗出量，表明石岐凉茶具有退热、抗炎、 利尿、镇咳作用9 1 。李纪强等观察了亚健康通便凉茶的通便效果，表明亚健康通便凉茶 能明显加强小肠运动，具有显著的通便效果n 们。 何蓉蓉等进行了王老吉凉茶对氧化应激负荷小鼠脂代谢的影响，结果表明王老吉凉 茶明显增加应激小鼠血浆甘油三酯消除速率及肠系膜脂肪组织中脂肪酶活性。此外，王老 吉凉茶有效改善拘束负荷升高的血浆脂质过氧化反应产物丙二醛( m d a ) 含量，提高体内抗 氧化能力指数( o r a c ) 水平。说明王老吉凉茶改善拘束负荷诱发小鼠脂代谢机能低下，其作 用机制可能与缓解机体内的过氧化状态有关“。同时研究了王老吉凉茶对拘束负荷诱发 小鼠免疫机能低下及体内过氧化状态的影响，结果证实王老吉凉茶给药可以改善拘束负 荷小鼠脾脏t 淋巴细胞亚群比例，增加脾脏n k 细胞数，提高n k 细胞杀伤活性。此外，王老 吉凉茶可以明显改善拘束负荷引起的淋巴细胞内脂质过氧化反应的产物丙二醛( m d a ) 含 量升高、提高细胞内o r a c 水平。证明王老吉凉茶改善拘束负荷诱发小鼠免疫机能低下， 其作用机制可能与缓解免疫细胞内的过氧化状态有关1 幻。王老吉凉茶对应激小鼠糖代谢 机能及体内过氧化状态的影响实验表明，王老吉凉茶给药组能提高应激小鼠血糖消除速 率，降低血浆酮体水平并促进肝糖原合成能力n 。宝丽等进行广东凉茶颗粒对应激小鼠 生殖器官过氧化状态的改善作用，研究广东凉茶颗粒对拘束负荷诱发小鼠生殖器官过氧 化状态的改善作用。结果表明，广东凉茶颗粒可以明显降低因拘束负荷引起的小鼠睾丸和 卵巢组织m d a 水平、n 0 含量和x o d 活性升高，同时显著升高睾丸和卵巢组织中的g s h 含 量、g s h p x 活性和o r a c 指数，表明广东凉茶颗粒对拘束负荷诱发的小鼠生殖器官过氧 化状态具有一定的改善作用1 钉。宝丽等还进行了广东凉茶颗粒对拘束负荷诱发小鼠应激 性肝损伤的保护作用研究，结果证实广东凉茶颗粒可以明显降低因拘束负荷引起的小鼠 血浆a l t 活性，保护拘束负荷诱发的应激性肝损伤，有效地提高应激小鼠肝组织中o r a c 指数、g s h 含量、g s h p x 及g s t 活性，降低m d a 和n o 水平n 。胡晨霞等通过观察广东凉 9 茶对热休克大鼠肝组织h s p 7 0 基因表达的影响，探讨了广东凉茶对热休克大鼠热护作用 机制。采用逆转录聚合酶链反应( r t - p c r ) 对各组大鼠肝组织进行h s p 7 0m r n a 表达的检测， 观察凉茶对大鼠肝脏h s p 7 0 m r n a 表达的影响。结果表明邓老凉茶凉茶能够通过抑制热休 克大鼠肝脏h s p 7 0 的表达，其清热降火作用能够对抗热应激因素所导致的h s p 7 0 表达增加， 使机体趋于正常状态n 钉。 三、凉茶的安全性及毒理研究 凉茶作为以中草药为原料煎服的保健饮品，可以起到消暑祛湿、清热解毒、利咽化痰、 明目等作用，但凉茶并非人人适宜。章淑萍在临床发现不正确服用凉茶可导致脾胃损伤， 腹痛嗳气、腹胀腹泻、食欲减退、精神疲乏。傅世华发现病人自行服用大剂量的甘草等 中药凉茶5 - - - 1 2 d ，结果出现水钠潴留的浮肿副作用，停用后恢复m 1 。叶木荣等对王老吉 冲服凉茶毒性试验表明，王老吉浸膏最大耐受量为体重2 2 0 0 0m g k g ，即小鼠一天口服王 老吉浸膏最大耐量为临床口服量的2 2 0 倍7 1 。夏勇等对胖大海凉茶( 胖大海0 4 、茶叶 4 5 、甘草0 1 、蔗糖) 进行了毒性试验，结果表明大、小鼠的半数致死量l d 5 0 均大于 l o g k g - 1 体重，属实际无毒级，三项致突变试验结果未显示出致突变作用n 。王瑞国等 对余甘子的最大耐受量试验研究表明小鼠的最大耐受量为临床用药量的2 0 0 倍，认为余 甘子在常用剂量范围内是安全的n 。有人对茅根冬瓜袋泡茶的急性毒性试验研究表明小 鼠的最大耐受量为临床用量的4 5 8 倍，说明茅根冬瓜袋泡茶按常用剂量服用是安全的伽。 万红平等对邓老凉茶进行了小鼠致突变安全性评价，以小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠睾 丸体畸变试验为指标，结果小髓细胞微核试验中邓老凉茶高、中、低剂量组的微核发生率 为o 3 、o 5 和0 2 0 ，与溶剂对照组比较差异无统计学( p o 0 5 ) ，表明邓老凉茶无诱 发小鼠骨髓微核的作用。小鼠睾丸染色体畸变试验中邓老凉茶高、中、量组的畸变细胞 率分别为4 1 2 、3 1 5 和3 1 7 ，表明邓老凉茶无诱发小鼠初级精母细胞睾丸染色体畸变的 作用2 。范瑞泉等对黄振龙牌凉茶( 由金银花、菊花、桑叶、淡竹叶、车前草、麦冬、 金钱草、桔梗、鱼腥草与白茅根等中草药制成) 的毒性进行了研究。结果急性毒性试验中 小鼠经口给药最大耐受量：l d 5 0 大于4 3 2 0 0m g k g 。亚慢性经口毒性试验结果显示黄振龙 牌凉茶小鼠微核试验阴性。a m e s 试验结果显示阴性。提示黄振龙牌凉茶为实际无毒，未 显示出致突变作用，该产品对人体无害，可安全饮用“2 1 。 四、目前凉茶存在的问题 当前亟需阐明以下问题：一、凉茶配方中对广东凉茶配方各成分的合理性评价缺乏 重要的科学依据，因此必须以通用的药理药效评价标准来印证其药效药理。二、在凉茶 的配料中，菊花、金银花、夏枯草以及甘草都是属于中药的范畴，能否当作普通食品食 用。卫生部关于进一步规范保健食品原料管理的通知“既是食品又是药品的物品名 单 中，也没有将“夏枯草 列为可作为食品的药材，凉茶究竟算茶还是药一直是各界 专业人士尚未达成认同的一个重要问题n 钉，因此，对凉茶的系统研究迫在眉睫。三、凉 茶的使用范围。从配方上看，凉茶本质上也是中药，并非人人都能喝。应根据具体对象 的身体状况对症使用。脾胃虚寒的人服用后会引起胃寒、胃部不适，吐清水等症状。而 糖尿病者服用后则会导致血糖升高，脾胃虚寒者以及糖尿病患者不宜服用。这些都是需 要高度关注的问题。 综合以上，对凉茶进行安全性评价，包括对凉茶配方各成分搭配的合理性评价，评 价凉茶主要原料具有的功效以及可能存在潜在的副作用，可为凉茶功效定性提供理论依 据，也可为凉茶开发更科学的配方提供理论依据。随着温室效应的影响，全球气温在缓慢 升高，加上近年s a r s 、禽流感、甲流等传染病的发生，中医药的广泛传播和发展，以及人 们对回归自然的向往，人们的日常保健意识在逐步提高，相信凉茶在今后的发展还会进一 步扩大。因此，为保证饮料食品产品的安全，也为促进凉茶的进一步长远发展，避免和预 防出现食品突发和不良事件，目前必须进行凉茶进行安全性评价，提供凉茶有效的科学根 据。 参考文献： 1 叶强，中国食疗本草新编 m 广州：广东高等教育出版社，1 9 9 9 ，1 2 党毅，肖颖主编中药保健食品研制与开发( m ) 北京：人民卫生出版社，2 0 0 2 ：3 6 3 7 3g u a n g d o n gh e r b a lt e a 广东凉茶( 英文) 中国对外贸易( 英文版) 2 0 0 6 ，1 4 ：7 5 4 杨春成中草药保健凉茶饮料的开发( j ) 饮料工业，2 0 0 3 ，6 ( 5 ) ：3 0 5 湖南医学院高温作业工人饮料的研究一两种中药凉茶与含盐饮料的比较( j ) 湖南 医学院学报，1 9 5 9 ，4 ：9 3 9 9 6 宋振玉：籍秀娟十三种中药及民间草药对大鼠蛋白性及甲醛性关节炎的影响( j ) 药 学学报，1 9 6 3 ，( 1 0 ) 1 2 ：7 0 8 7 1 2 7 叶木荣，廖惠芳，廖雪珍，黄桂英，李锐王老吉冲服凉茶的药理研究( j ) 中成药， 1 9 9 3 ，1 5 ( 1 ) ：2 9 3 1 8 刘建雄，吴清和，方燮帆，黄萍，商丽华，胡卓平沙溪凉茶的药效学研究( j ) 中药 材，2 0 0 6 ，9 ( 5 ) ：9 5 7 - 9 6 0 9 廖惠芳：叶木荣：李锐：廖雪珍：黄桂英石岐外感凉茶药理实验研究( j ) 新中 医，1 9 9 4 ，s 1 ：1 0 4 1 0 5 1 0 李纪强，罗仁，李玉萍，戴红芳，葛鑫宇亚健康通便凉茶的药理学研究【j ) 中华中医 药学刊，2 0 0 9 ，2 7 ( 6 ) ：1 2 0 7 - 1 2 0 9 1 1 何蓉蓉，栗原博，宝丽，姚新生王老吉凉茶对氧化应激负荷小鼠脂代谢的影响( j ) 中国实验方剂学杂志2 0 0 8 ，1 0 1 2 何蓉蓉：栗原博；宝丽：李满妹：姚新生王老吉凉茶对应激小鼠免疫机能及体内 过氧化状态的影响( j )中国实验方剂学杂志，2 0 0 8 ，1 4 ( 2 ) ：3 8 4 2 1 3 何蓉蓉；栗原博；宝丽；李满妹；姚新生王老吉凉茶对应激小鼠糖代谢机能及体内 过氧化状态的影响( j )中成药，2 0 0 8 ，3 0 ( 8 ) ：1 9 2 3 1 4 宝丽：姚新生：何蓉蓉：栗原博广东凉茶颗粒对应激小鼠生殖器官过氧化状态的 改善作用( j )中药新药与临床药理，2 0 0 8 ，1 9 ( 4 ) ：2 5 3 - 2 5 8 1 5 宝丽，姚新生，何蓉蓉，栗原博广东凉茶颗粒对拘束负荷诱发小鼠应激性肝损伤 的保护作用( j )中国中药杂志，2 0 0 8 ，3 3 ( 6 ) ：6 6 4 6 6 8 1 6 胡晨霞，王静元，唐远广东凉茶对热休克大鼠肝组织h s p 7 0 基因表达的影响( j ) 中 华中医药学刊2 0 0 8 ，2 6 ( 5 ) ：1 0 7 9 - 1 0 8 1 1 7 傅世华含甘草中药凉茶致浮肿5 例( j ) 海南医学，1 9 9 5 ，6 ( 1 ) ：6 6 1 8 夏勇，傅剑云，徐彩菊“胖大海凉茶 急性毒性和致突变试验( j ) 浙江预防医 学，1 9 9 6 ，8 ( 5 ) ：5 7 5 8 1 9 王瑞国，林久茂，郑良朴等余甘子的最大耐受量试验( j ) 福建中医学院学 报，2 0 0 4 ，1 4 ( 3 ) ：3 6 2 0 罗友华：黄亦琦：杨辉中草药凉茶的研究概述( j ) 海峡药学，2 0 0 6 ，1 8 ( 5 ) ：9 5 - 9 8 2 1 万红平，梁礼珍，蔡五妹等邓老凉茶对小鼠致突变安全性评价( j ) 毒理学杂志， 2 0 0 7 ，2 1 ( 4 ) ：3 3 0 2 2 范瑞泉：魏青：邓丽霞等凉茶的某些毒性试验观察( j )卫生毒理学杂 志，2 0 0 2 ，1 6 ( 2 ) ：1 3 1 2 3 无忧康广东凉茶老火汤可致癌? 5 2 种草药疑是元凶( j )医疗保健器具，2 0 0 6 ，5 2 4 卫生部关于王老吉凉茶有关问题的批复 中国食品卫生杂志，2 0 0 5 ，5 第二章绪论 “凉茶 是我国南方沿海地区居民根据当地气候、水土特性，在长期预防疾病与保 健的过程中以中医养生理论为指导，由天然中草药为原料，用独特的煲制方法煎熬而成的 一种汤剂，具有清热解毒、生津止渴、防治疾病等功效，也是民间世代流传的被广泛饮用的 传统保健饮品【l 】。目前，作为以中草药为基础的一类茶饮料饮品，可以起到消暑祛湿、清 热解毒、利咽化痰、明目等作用，但凉茶并非人人适宜。章淑萍2 1 在临床发现不正确服用 凉茶可导致脾胃损伤，腹痛嗳气、腹胀腹泻、食欲减退、精神疲乏。凉茶配方各成分的合 理性评价缺乏重要的科学依据 4 1 ，因此必须以通用的药理药效评价标准来印证其药效药 理；另外在凉茶的配料中，菊花、金银花、夏枯草以及甘草都是属于中药的范畴，能否 当作普通食品食用，甚至一些专业人士尚未认同【5 l ，目前亟需进行对凉茶的功效及其安 全毒理评价问题【3 1 ，尤其要阐明凉茶的安全性【6 7 1 。 一、国内外研究现状 凉茶是颇具广东特色的夏季清凉饮料，已有近2 0 0 年的历史，目前，凉茶已入选国 家级非物质文化遗产名录，得到世界范围内的保护，著名品牌有王老吉凉茶、夏桑菊凉 茶、邓老凉茶、黄振龙等。凉茶等现在已成为倍受人们喜爱的清凉饮品。但凉茶实际并 不是一种简单的清凉饮料，而是根据中医辨证原理、组方原则和药物功效形成的一种特 殊饮品【5 1 。有些品种的凉茶中药成分偏重于治疗保健作用，甚至可以作为o t c 药物【4 3 】。 凉茶多由多种性凉的天然植物组成，用作为“泻火”虽然迄今为止的研究显示某些 凉茶的组成中药具有抗菌消炎，提高免疫力及平衡人体机能等作用。各种凉茶中以多宝 集团的王老吉凉茶知名度最广，也成为了夏季广泛接受的饮料之一，但是由于其含有的 夏枯草、布渣叶等中药成分未列入食品添加物的名录中，并且由于其特有的中药寒凉的 药性，对少数消费者产生了不良后果，因此受到消费者的质疑，并诉诸法院，引起轩然 1 4 大波【6 】川；但专家认为由于广东人药食同源的饮食习惯，以及中药在中国的广泛使用，都 可以解释王老吉凉茶中中药成分的合理性 2 a 6 。按照传统既是食品又是中药材的物质是可 以添加的。中山市福兴堂凉茶是受到广东人欢迎的一个凉茶品牌，具有百年历史配方中 含有鸡骨草、鱼腥草、金银花、夏枯草等清热，下火，利尿的中药成分。 ( 一) 鸡骨草【8 】( j i g u c a o ) 甘、微苦，凉。归肝、胃经。清热解毒，舒肝止痛。用于黄疸，胁肋不舒，胃脘胀 痛；急、慢性肝炎，乳腺炎。鱼腥草别名侧耳根、猪鼻孔等，鱼腥草入药具有清热解毒、 消痈排脓、利尿通淋的作用，现代药理实验表明，本品具有抗菌、抗病毒、提高机体免 疫力、利尿等作用。白茅根甘，寒。归肺、胃、膀胱经。应用：凉血止血，清热利尿。 主治血热吐衄，热淋尿血，热病烦渴，黄疸，水肿，胃热呕吐，肺热咳嗽，湿热黄疸。 ( 二) 鱼腥草嘲( c h a m e l e o n ) 别名侧耳根、猪鼻孔等，凉拌侧耳根是民间的一道传统佳肴。鱼腥草入药具有清热 解毒、消痈排脓、利尿通淋的作用，在我国传统医学中具有较为广泛的应用。常与芦根、 桔梗、瓜蒌等同用于肺痈吐脓( 相当于现代医学讲的肺脓疡) ，痰热喘咳。用于热毒疮疡 时，可与野菊花、蒲公英、金银花等同用，亦可单用鲜品捣烂外敷。若皮肤瘙痒，蚊虫 叮咬，疗疖红肿痒痛，亦可单用本品制成搽剂，外涂患处( 如中国药物大全提及的 皮炎宁) 。现代药理实验表明，本品具有抗菌、抗病毒、提高机体免疫力、利尿等作用。 临床报道广泛用于治疗肺炎、咯血、上呼吸道感染、慢性支气管炎、百日咳、流感、肺 脓疡、癌性胸水、感冒发烧、肺癌、宫颈糜烂、化脓性关节炎、习惯性便秘、急性细菌 性痢疾、急性黄疸性肝炎、肾病综合征、单纯疱疹性角膜炎、鼻炎、化脓性中耳炎、流 行性腮腺炎、丘疹状荨麻疹、慢性咽炎、肛肠病、前列腺炎、红斑狼疮、血管瘤、预防 钩端螺旋体病等。 以鱼腥草为主要成分的常用中成药制剂有鱼腥草注射液，具有清热、解毒、利湿的 作用，用于肺脓疡，痰热咳嗽，白带，尿路感染，痈疖等。又如复方鱼腥草片( 由鱼腥 草、黄芩、板蓝根、连翘组成) 具有清热解毒的作用，用于外感风热引起咽喉疼痛、扁 桃腺炎等。 ( - - - ) 金银花嘲( h o n e y s u c k l ef l o w e r ) 又名忍冬、银花、双花等，性甘，寒。归肺、心、胃经。清热解毒，凉散风热。自 古被誉为清热解毒的良药。气芳香，甘寒清热而不伤胃，芳香透达又可祛邪。金银花既 能宣散风热，还善清解血毒，用于各种热性病，如身热、发疹、发斑、热毒疮痈、咽喉 肿痛等证，均效果显著。神农本草经载：”金银花性寒味甘，具有清热解毒、凉血化 淤之功效，主治外感风热、瘟病初起、疮疡疔毒、红肿热痛、便脓血”等。用于痈肿疔疮， 喉痹，丹毒，热血毒痢，风热感冒，温病发热。美容功效：能调节女性内分泌，去除黄 气及色斑，令容颜润泽。 芳香的金银花是我国古老的药物，享有“药铺小神仙”之誉。“金银花露”则可成为夏 令保健清凉饮料，经常喝些金银花水当茶饮用，能防暑降温，还有疏散风热、清肝明目、 清热解毒等作用，清热凉血、解毒散痛、治疗面部座疮。清火润喉，清热解毒( 咽喉肿 痛，扁桃体炎) ，润肺化痰，补血养血，通筋活络，咳嗽抗病毒等功效。 金银花的原花冲之代茶，嗅之气味芬芳，饮后神清气爽。夏秋服用金银花茶，既能 防暑降温、降脂减肥、养颜美容，又能清热解毒、百病不生，是现代人保健养生和防疫 防病的绝好佳品。二十世纪八十年代，国家卫生部对金银花先后进行了化学分析，结果 表明：金银花含有多种人体必须的微量元素和化学成分，同时含有多种对人体有利的活 性酶物质，具有抗衰老，防癌变，轻身健体的良好功效。 这几味中药联合配伍制成的凉茶毕竟是中药汤剂，不能滥服，如果作为保健品长期 服用，则易损伤人体阳气和脾胃，导致出现神疲体倦、面色白光、多汗易感冒、纳差便 溶：舌淡苔薄或剥、脉弱无力等脾肺气虚等症候；尤其是婴幼儿，脏腑娇嫩、形气未充、 血少气弱，若长期服用凉茶，攻伐不止，会损伤小儿正气，反而影响小儿健康成长【2 2 】。 因此对于凉茶的食用安全性问题就成为当前毒理学上亟待解决的问题】。 二、研究目的和意义 凉茶制作选用的中药均具有清热泻火的作用，他们联合配伍后作用明显，对于消痈 排脓、清热凉血作用疗效确定，可是作为日常饮用的饮品，长期服用是否合适，还没有 确定数据。对于药食同源的饮食习惯，以及中药在中国的广泛使用都提示我们对凉茶进 行毒理学安全性评价的工作已经迫在眉睫，包括对凉茶配方各成分搭配的合理性评价、 凉茶主要具有的功