SC 1042-2000 奥利亚罗非鱼.pdf

s C 1 0 4 2 -2 0 0 0前言 奥利亚罗非鱼， 原产于非洲， 8 0 年代引进我国。为保护和保存引进的奥利亚罗非鱼的优良经济性状， 防止苗种生产中种质混杂和性状退化， 并开展该鱼种质的有效监测， 特制定本标准。 本标准是“ 七五” 、 “ 八五” 科技攻关成果的总结。 本标准的附录A、 附录B , 附录C都是标准的附录。 本标准由农业部渔业局提出. 本标准由中国水产科学研究院长江水产研究所归口。 本标准起草单位: 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心。 本标准主要起草人: 潘锋、 王和海、 胡玫。准标网 w w w .z h u n b i a o .c o m 免费下载中华人民共和国水产行业标准奥利亚罗非鱼s c 1 0 4 2 一2 0 0 0B l u e t i l a p i a1 范围 本标准给出了奥利亚罗非鱼( O r e o c h r o m i s a u r e a ) 主要生物学性状、 生长与繁殖、 遗传学特性及检测方法。 本标准适用于奥利亚罗非鱼的种质检测。2 名称与分类2 . 1 名称2， . ， 学名 奥利亚罗非鱼( O r e o c h r o m i s a u r e a ) e2 . 1 . 2 别名 蓝罗非鱼、 奥利亚非娜、 奥利亚丽绷等。2 . 2 分类位置 属妒形目( P e r c i f o r m e s ) ， 丽鱼科( C i c h l i d a e ) , 孵光鳃罗非鱼属( O r e o c h r o mi s ) ,3 主要生物学性状3 . 1 外部形态特征3 . 1 . 1 形态特征 体形侧扁， 背部隆起， 腹部呈弧形， 无腹棱。吻圆钝， 突出。口小端位， 口裂不达眼前缘， 无口须。体披栉鳞。体色蓝灰色， 鳃盖后部有一深蓝色斑块。咽喉部呈银灰色。体侧上鳞片中央的色素较边缘深，鱼体两侧有垂直暗带。 成鱼背部略带蓝黑色， 腹部颜色较淡。背鳍边缘红色。 胸鳍淡灰色透明。 臀鳍深蓝色。尾鳍终生有蓝绿色斑点， 不形成明显的纵向或横向暗带条纹， 其末端平截不分叉， 呈现橙红色， 腹鳍深蓝色， 长有生殖突起。 稚鱼青灰色带金色光泽， 体侧有深灰色垂直暗带， 背鳍硬棘幼鱼前期有一较大黑点， 以后逐渐消失。各龄鱼体色因环境改变而迅速变淡或加深。奥利亚罗非鱼外形见图1 a准标网 w w w .z h u n b i a o .c o m 免费下载S C 1 0 4 2 一2 0 0 03 . 1 . 2 可数性状3 . 1 . 2 . 1 背鳍鳍式: D . X V -XV 0 , 1 1 -1 3 ,3 . 1 . 2 . 2 胸鳍鳍式: P . 0, 1 1 -1 4 .3 . 1 . 2 . 3 腹鳍鳍式: V. 1 , 5 .3 . 1 . 2 . 4 臀鳍鳍式: A. 1 , 9 -1 1 .3 . 1 . 2 . 5 左侧第一鳃弓外侧鳃耙数: 2 5 - - 2 9 03 . 1 . 2 . 6 侧线断折， 呈不连续两行。侧线鳞数: 上段为 1 8 - 2 9 ， 下段为 1 2 1 8 ,3 门. 2 . 了 领齿 上下领有圆锥状领齿各为三列， 最外一列为“ Y 型。3 . 1 . 3 可量性状 可量比例性状变动值见表 t o 表 1 可量比例性状变动值项目范围全长， c m2 0 . 5 - 3 4 . 5体长 ， c m1 7 . 0 - 2 9 . 6体长/ 体高2 . 5 3 - 2 . 9 4体长/ 头长2 . 5 6 . 4 . 2 9体长/ 尾柄长5 . 8 9 - 9 . 8 7体长/ 尾柄高6 . 0 6 . 1 0 . 2 1头长/ 吻长2 . 3 9 - 3 . 5 0头长/ 眼径3 . 7 2 - 5 . 2 4头长/ 眼间距2 . 0 6 - 2 . 3 5注: 此表为无锡地区2 至 3 龄奥利亚罗非鱼的实侧数据，3 . 2 内部结构特征3 . 2 . 1 缥 缥分二室， 前室较大， 后室细长。3 . 2 . 2 肋骨 肋骨数 1 3 对。3 . 2 . 3 下咽齿 左、 右下咽骨愈合， 其上有浓密的蓖齿。3 . 2 . 4 脊椎骨 脊椎骨总数( 颅后椎数、 腹椎数、 尾椎数之和) 为2 9 - 3 0 ,3 . 2 . 5 腹膜 黑色。4 生长与怪殖4 . 1 生长 池塘饲养条件下， 不同年龄组鱼的体长和体重的理论值见表2 。准标网 w w w .z h u n b i a o .c o m 免费下载S C 1 0 4 2 一 2 0 0 0表 2 不同年龄组鱼的体长和体重理论值年龄， 龄123体长， c m1 3 . 0 6 士 0 . 4 71 9 . 4 9 士1 . 2 32 3 . 9 3 士1 . 4 9体重. 98 5 . 6 9 士1 0 . 1 72 3 1 . 9 5 士 3 7 . 64 1 7 . 1 4 士4 4 . 9 9注: 主要根据鳞片上的年轮数。 在同等饲养条件下， 雌鱼的生长率仅为同龄雄鱼的5 4 %-9 0 %.4 . 2 繁殖4 . 2 . 1 性成熟年龄 雌、 雄鱼初次性成熟为4 - 6 月龄。4 . 2 . 2 产卵 越冬鱼种在水温 2 4 - 2 6 条件下， 饲养 1 - 1 . 5个月即可繁殖， 年产卵 3 -5次， 每次间隔 1 5 -3 0 d o4 . 2 . 3 繁殖水温 繁殖最适水温为2 4 2 6 0C. 水温低于 2 0 或高于3 0 0C 繁殖减少。4 . 2 . 4 怀卵量 不同年龄组鱼的个体怀卵量见表 3 , 表 3 不同年龄组鱼的个体怀卵量年龄， 龄123体重, g5 0 - 1 5 02 0 0 3 5 04 0 0 - 6 0 0绝对怀卵量日 ， 粒2 5 0 - 6 0 08 0 0 - 1 2 0 01 3 0 0 2 5 0 0相对怀卵ta , 粒5 - 34 - 33 - 21 ) 绝对怀卵f, 指直观可数的卵位数2 ) 相对怀卵t, 指单位体重( 9 ) 所含卵粒数。5 遗传学特性5 . 1 同功酶 醇脱氢醇( A D H) 电泳图谱， 肝中AD H有 2 个位点， 2 条谱带， 无多态( 见图 2 )邸 即 靡 一辱0 图 2 奥利亚罗非鱼肝组织A D H同工酶电泳图谱5 . 2 染色体数 体细胞染色体数2 摊 =4 4 ,5 . 3 核型 雌、 雄鱼核型完全一致， 有亚中部着丝粒染色体( s m组) 3 对， 亚端部着丝粒染色体( s t 组) 1 2 对， 端部着丝粒染色体( t 组) 7 对， 染色体育数( N F ) 5 0 ( 见图3 ) e准标网 w w w .z h u n b i a o .c o m 免费下载S C 1 0 4 2 一 2 0 0 0八人几井古住p.nU入 八沪 、侧 . .办 介八 沪 i t 几八晚八 八六 扣介 八图 3 奥利亚罗非鱼染色体组型核型公式: 6 s m+ 2 4 s t + 1 4 t ,6 检测方法6 . 1 生化遗传分析6 . 1 . 1 电泳样品制备 将鱼杀死， 取肝脏组织0 . 3 g ， 以4 倍体积0 . 3 %的氧化型辅酶I 液匀浆. 在冷冻离心机中以1 7 0 0 0r / m i n离心 2 次， 第一次离心后， 去除上层油膜， 再第二次离心， 至上层溶液澄清为止， 取上清液点样。6 . 1 . 2 电泳步骤 使用水平平板电泳仪和浓度为7 . 5 Y o 聚丙烯酞胺凝胶。 电极缓冲液采用E B T缓冲液 见附录A( 标准的附录) 。步骤为: a )预电泳。恒温 5 时， 将预先制备好的象丙烯酸胺凝胶放在冷却板上， 在 5 0 mA电流下， 预电泳3 0 mi n , b ) 前电泳。预电泳后， 用微量加样器在每个点样孔内加人 8 K L样品， 在2 5 m A电流下， 前电泳1 0 m i n ， 再进行正式电泳. c )正式电泳。在 2 7 5 V电压下， 电泳时间为3 -5 h , d ) 染色。将电泳后的电泳胶板放人在恒温箱3 7 保温的染色液中染色， 至酶带清晰显示为止。染色液配方见附录 B ( 标准的附录) 。62 染色体检测6 . 2 - 1 标本制备 采用肾组织细胞加植物血凝聚素( P H A) 短期培养法及空气自然干燥法， 制片， 吉姆萨( G i e m s a ) 染色。吉姆萨染色液配方见附录C ( 标准的附录) 。6 . 2 . 2 计数 在光镜下， 选取染色体铺散良好、 完整的中期分裂相计数染色体数目， 确定 2 n 数。6 . 2 . 3 形态分类 选择 1 0 个以上的分裂相， 进行显微拍照， 按放大照片对染色体组型分析， 按形态归类。6 . 3 结果判定 各项测定结果， 对照标准指标， 综合分析判定， 是否符合标准。同时， 计算出符合标准的百分数。准标网 w w w .z h u n b i a o .c o m 免费下载s C 1 0 4 2 一 2 0 0 0 附录A ( 标准的附录)E B T电极级冲液的配制A l 原液配制 三轻甲基氛基甲烷( T r i s ) 6 5 . 4 g 乙二胺四乙酸钠盐( N a , E D T A) 3 . 5 1 g 蒸馏水1 3 0 0 m L 另称硼酸约2 7 g ， 用来调节p H值至8 . 6 ， 并稀释至1 5 0 0 m L ,A 2 电极用液正极用液: 取原液 7 9 . 4 mL稀释至 1 0 0 0 mL, 浓度为 。 . 0 2 8 6 m o l / L ,负极用液: 取原液 1 1 1 m L稀释至 1 0 0 0 m L ， 浓度为0 . 0 4 m o l / L . 附录B( 标准的附录)染 色 液 配 方B l 0 . 2 5 m o l / L T i r s - H C I 染色级冲液的配制 称取T i r s 3 0 . 2 9 g ， 加燕馏水 9 0 0 m L ， 和盐酸调节p H值至8 . 0 ， 再稀释至1 0 0 0 m L ,B 2 染色液配方。 . 2 5 m o l 染色缓冲液氧化型辅酶I抓化硝基四氛哇兰( N B T )吩喃甲醋硫酸盐( P MS )9 5 %乙醇1 4 0 mL2 2 mg1 0 . 5 mL1 0 . 5 mg4 . 5 mL 附最C ( 标准的附录)古姆萨( G i e m s a ) 染色液配制C l G i e m s a 染色母液的配制 称取。 . 5 g G i e m s a 粉， 量取3 3 m L甘油， 在研钵中先用少I甘油与G i e m s a 粉混合， 研磨至无颗粒时再将剩余甘油加人， 在5 6 条件下保温2 h ,-后， 加人3 3 m L申醇， 保存于棕色瓶内。C 2 0 . 2 m o l 确睑级冲液配制C 2 . 1 A液 0 . 2 mo l / L磷酸氢二钠( N a 2 H P O , ) 液液、 称取磷酸氢二钠( N a , H P O , H z 0 ) 3 6 . 6 1 g 定容于1 L蒸馏水中. 或称取磷酸氢二钠( N a z H P O , 准标网 w w w .z h u n b i a o .c o m 免费下载s c 1 0 4 2 一2 0 0 02 H 2 0) 7 1 . 6 4 g 定容于1 L蒸馏水中。C 2 . 2 B液 0 . 2 mo l / L磷酸二氢钠( N a H 2 P O, ) 溶液 称取磷酸二氢钠( N a H , P O , H , 0 ) 2 7 . 6 g 定容于1 L蒸馏水中， 或称取磷酸二氢钠( N a H , P O ,2 H 2 0 ) 3 1 . 2 1 g定容