探讨母血胎儿DNA浓度与早产的相关性.doc

探讨母血胎儿DNA浓度与早产的相关性 谢莉莉 深圳市妇幼保健院儿科，广东深圳518000 摘要目的对母血母血胎儿DNA与早产的相关性进行分析与探讨。方法选取30例在该院接受治疗的早产孕妇先兆早产孕妇，将其划分为实验组，并选取30例争产孕周孕妇，将其划分为对照组，对应实验组孕妇孕周取其血液标本。所有标本都为Y染色体中的SRY位点，荧光定量PCR男性胎儿的DNA，对其中带有SRY基因胎儿的DNA浓度进行检测。结果与实验组孕妇相比，先兆早产转归，其中真性早产患者有20例，胎儿DNA平均浓度值是（625.652.3）拷贝/mL，假性早产患者有10例，胎儿DNA平均浓度值是（220.557.4）拷贝/mL，实验组与对照组产妇相比，假性早产升高比较明显，P0.05，差异有统计学意义。早产组孕妇平均宫颈长度是（29.106.7）mm，而假性早产组孕妇平均宫颈长度则为（41.96.3）mm，此外，对照组产妇平均宫颈长度为（42.35.7）mm.对照组与早产组相比，差异有统计学意义，P0.05，差异无统计学意义。母血母血胎儿DNA与孕妇宫颈长度呈负相关。结论研究表明，母血母血胎儿DNA与早产存在相关性。 关键词先兆早产；母血胎儿dna；荧光定量pcr；相关性 R4A1674-074（4）07（b）045-02 作者简介谢莉莉（1960.4-），女，锡伯族，天津人，本科，副主任医师，主要从事儿内科专业工作。 现阶段，早产在产科领域被称为最具挑战性的妇科问题，而且是导致新生儿死亡与疾病的首要因素，所以，早产在始终备受医学界的关注1。一些研究人员致力于对孕妇早产的预测，对真、假性早产进行区分，对早产临产与先兆早产的间隔时间进行有效掌握，适当与及时用药，确保早产儿成活率的提高，同时有效降低早产儿发病率2。为了对母血母血胎儿DNA与早产的相关性进行分析与探讨，确保孕妇与新生儿生命健康，该院选取30例xx年8月xx年7月在该院接受治疗的早产孕妇先兆早产孕妇，和30例初次妊娠正常孕妇，对母血母血胎儿DNA进行荧光定量PCR检测，结果表明母血母血胎儿DNA与孕妇宫颈长度呈负相关，报道如下。 1资料与方法 1.1一般资料 选取30例在该院接受治疗的早产孕妇先兆早产孕妇，将其划分为实验组，对其进行B超检测结果为男胎，其中早产孕妇平均年龄为（26.41.2）岁，平均孕周为（283.5）周，先兆早产孕妇平均年龄为（25.12.6）岁，平均孕周为（293.1）周。再选取所怀男胎的30例初次妊娠正常孕妇，作为对照组，平均年龄为（27.11.8）岁，平均孕周为（292.5）周。先兆早产诊断标准为，孕妇妊娠满7个月后，孕妇出现10min/次的宫缩，而且孕妇宫颈管缩短。孕妇早产诊断标准为，孕妇妊娠在28周以上，37周以下，规律性宫缩，宫颈扩张超过2cm。两组孕妇年龄、孕周等一般资料P0.05，差异无统计学意义，具有可比性。 1.2方法 所选用仪器设备为可调式微量移液仪，iCycler-IQ定量PCR仪，低温高速TGL-16C台式离心机以及恒温水浴锅。主要试剂为德国生产的DNA提取试剂盒，中山大学达安基因公司生产的PCR检测SRY荧光定量试剂盒、国产的无水酒精以及中国医学科学院生产的淋巴细胞分离液3。 通过抗凝管对所有先兆早产孕妇进行3mL的外周血抽取，3000r/min离心10min，将孕妇血浆吸取在离心小管中。依照孕妇先兆早产转归，将其具体分为真假性早产孕妇。 1.2.1胎儿DNA提取在1.5mL的离心管中加入20L的蛋白酶，并将分离出来的白细胞与200L血浆置于离心管中，在56下进行10min的温育，瞬时离心去上清。再于离心管中加入酒精200L，进行15s的混匀，瞬时离心去上清。最后将QIAampspincolumn加入到混合物中，助于2mL的收集管中，将存废液的收集管去除掉，置换一个新的收集管。 1.2.2荧光定量PCR所有标本都为Y染色体中的SRY位点，荧光定量PCR男性胎儿的DNA，对其中带有SRY基因胎儿的DNA浓度进行检测。 1.3判断与评价标准 依照IAMS所描述的具体措施对宫颈长度进行测量，反复测量3次，宫颈长度取最短者。用单因素方差分析进行显著性检验，判断胎儿游离DNA浓度与先兆早产的关系。 1.4统计方法 采用SPSS10.0软件对数据进行统计学处理，计量资料以均数标准差（xs）表示结果，通过q检验进行两两对比。 2结果 2.1对比正常孕妇与真假性早产母血中胎儿的DNA浓度 实验组孕妇对比，先兆早产转归，其中真性早产患者有20例，胎儿DNA平均浓度值是（625.652.3）拷贝/mL，假性早产患者有10例，胎儿DNA平均浓度值是（220.557.4）拷贝/mL，实验组与对照组产妇相比，假性早产升高比较明显，P0.05，差异有统计学意义，见表1。 2.2母血胎儿DNA和宫颈长度相关性分析 通过回归系数假设检验，采用方差进行相关性分析，结果显示，母血胎儿DNA和产妇宫颈长度相关性非常大，P0.05（P=0.012），r=-0.676，呈现负相关性。 3讨论 3.1游离母血胎儿DNA和早产的关系 相关研究结果表明4，母血母血胎儿DNA会由孕妇妊娠的上升而呈现增加的趋势，到晚孕时会出现明显升高的趋势，此现象在很大程度上和孕妇分娩期逐渐临近有关，也就是说，早产孕妇血浆中的胎儿DNA会呈现高浓度的情况5-6。 孙阳等7对母血母血胎儿DNA与早产相关性研究结果表明，孕妇在孕周为35周时，胎儿DNA平均浓度为74拷贝/mL，在晚孕的情况下，母血胎儿DNA和孕周呈现正相关性，而且每周呈29.3%的增加趋势，同时胎儿血浆中总DNA浓度和产妇孕周并没有相关关系，然而，总的来说，母血胎儿DNA与总DNA浓度呈正相关性，由此表明，母血母血胎儿DNA可以作为早产的重要指标。对比12位足月产孕妇与早产孕妇血浆中母血胎儿DNA，结果显示，发生自发性早产前，就在孕妇血浆中检测到母血胎儿DNA比较高，对其进行相应保胎治疗后，母血胎儿DNA出现一定程度