标准解读

《GB/T 18089-2000 蓝舌病微量血清中和试验及病毒分离和鉴定方法》是一项由中国发布的国家标准，旨在为蓝舌病的诊断和研究提供一套统一、规范的检测手段。该标准详细规定了如何通过微量血清中和试验以及病毒的分离与鉴定技术来识别和分析蓝舌病病毒。

微量血清中和试验部分

这一部分介绍了如何利用微量血清中和试验来检测动物血清中对蓝舌病病毒的中和抗体。具体步骤包括：

  1. 样本准备：收集并处理实验动物（如牛、羊）的血液，分离出血清作为检测样本。
  2. 病毒株选择：标准指定了用于试验的蓝舌病病毒标准株，确保测试的一致性和可比性。
  3. 试验设置：在微孔板或类似装置中，将稀释后的血清样本与固定量的病毒混合，使两者在体外条件下反应一段时间，以模拟体内抗体与病毒的相互作用。
  4. 细胞培养：将上述混合物转移到敏感细胞系上进行培养，观察细胞是否受到病毒感染的迹象。
  5. 结果判定：通过比较病毒对照组和不同血清稀释度下的细胞病变效应（CPE），确定血清中的中和抗体水平，进而判断动物是否曾暴露于蓝舌病病毒或接种过疫苗。

病毒分离和鉴定方法部分

这部分内容阐述了从疑似感染动物体内或环境样本中分离蓝舌病病毒，并对其进行鉴定的过程：

  1. 样本采集：从可能携带病毒的组织、血液或其他生物材料中采集样本。
  2. 病毒培养：将样本接种到适宜的细胞系中，在控制条件下培养，观察病毒引起的细胞病变效应。
  3. 病毒鉴定：利用免疫荧光、酶联免疫吸附试验(ELISA)、聚合酶链反应(PCR)等技术，结合病毒的生物学特性和基因序列分析，确认分离病毒为蓝舌病病毒。
  4. 病毒株特性描述：记录病毒的生长特性、形态学特征及遗传信息，为病毒的进一步研究和流行病学调查提供依据。

该标准通过上述详细的实验操作流程和技术要求，确保了蓝舌病诊断的准确性和实验室间结果的一致性，对于疫情防控、疫苗效果评估及疾病监测具有重要意义。


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  • 被代替
  • 已被新标准代替，建议下载现行标准GB/T 18089-2008
  • 2000-04-26 颁布
  • 2000-10-01 实施
©正版授权
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文档简介

TCS.65.020.30B41中华人民共和国国家标准GB/T180892000蓝舌病微量血清中和试验及病毒分离和鉴定方法Micro-serumneutralizationtest.virusisolationandidentificationforbluetongue2000-04-26发布2000-10-01实施国家质量技术监督局发布GB/T18089-2000前艺蓝舌病(BLU)是一种绵羊、牛、山羊等反台动物的严重传染病，可通过检测血清中抗体的存在，确定动物是否感染本病。按国际上通常的方法，琼脂免疫扩散试验和酶联免疫吸附试验用于蓝舌病的定性，血清中和试验用于蓝舌病的定型。本标准根据国际常用的方法和我国多年的实践.采用鸡胚静脉接种是最为敏感、实用的病毒分离方法蓝舌病病毒分离物可通过免疫荧光试验进行定性鉴定;用病毒中和试验进行定型鉴定。本标准是在参考美国、澳大利亚实验室的检测规程和总结我国在这一领域多年研究和实践经验的基础上制定。本标准的附录A是标准的附录本标准由农业部提出。本标准起草单位：中华人民共和国昆明出入境检验检疫局。本标准主要起草人：石世区、张晓丁、徐自忠、徐维加、周晓黎中华人民共和国国家标准蓝舌病微量血清中和试验及病毒分离和鉴定方法GB/T18089-2000Micro-serumneutralizationtest,virusisolationandidentificationforbluetongue1范围本标准规定了蓝舌病微量血清中和试验及病毒分离和鉴定方法.本标准适用于动物感染蓝舌病病毒后中和抗体的检测及病毒分离和鉴定2引用标准下列标准所包含的条文通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时.所示版本均为有效。所有标准都会被修订.使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性GB/T66821992分析实验室用水规格和试验方法(eqvISO3696:1987)略语3.1（CPE致细胞病变作用。3.22TCID.a半数组织培养感染量、3.3BLP乳糖蛋白陈缓冲肉汤、3.4SPF无特定病原体原理A1血清中和试验原理特异性的血清中和抗体与病毒结合后，能使病毒失去对敏感细胞的感染能力,从而阻止病毒的繁殖。这一反应不但表现为一种病毒只能被相应的免疫血清所中和而且还表现在中和一定量的病毒必须有一定效价的免疫血清。中和试验以测定病毒的感染力为基础,必须选用对病毒敏感的细胞、动物或鸡胚为实验材料,中和抗体滴度的判定以比较病毒受免疫血清中和后的残存感染力为依据。蓝舌病病毒感染动物后,7天左右出现中和抗体，中和抗体具有高度的型特异性，因此，可通过中和试验对蓝舌病病毒进行定型鉴定4.2病毒分离及鉴定原理动物感染蓝舌病病毒后4天左右出现病毒血症，羊的病毒血症持续4周左右，牛的病毒血症持续8周左右,病毒主要存在于动物的红细胞内.并能从精液排毒。在动物病毒血症期，可从其血液、精液和脏器分离到病毒。用特异性荧光抗体做直接免疫荧光试验可对分离毒进行定
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