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成 都 医 学 院 教 案 首 页2013年级 护理学专科1-2班 任课教师： 殷建华 课程医学微生物学与免疫学题目第六章 球菌 第七章 肠道杆菌 学时讲授3实验练习行课时间2014年4月14日第3节至5节课次第 3 次教 材病原生物学和免疫学（第六版），陈兴保主编.人民卫生出版社.北京.2011.6教 具化脓性细菌 肠道感染细菌（ppt）教 学目 的要 求1.掌握化脓性细菌、埃希菌、志贺菌属的致病物质和所致疾病。2. 熟悉了解各类球菌的微生物检测法及防治原则。3.了解化脓性杆菌的主要生物学形状。各种肠道感染菌的生物学特征，检验及防治原则。教学重点难点及其解决方案重点：各类化脓性细菌的致病物质和所致疾病；化脓性细菌的主要鉴别要点。埃希菌和志贺菌属的形态、生物学特性以及相关治病机理。难点：各类球菌的致病物质和所致疾病。埃希菌和志贺菌属的形态、生物学特性以及相关治病机理。解决方案：强调记忆，图片展示，注意观察现象。参 考资 料1.沈萍.微生物学.北京：高等教育出版社.2003.2. Lansing M. Prescott, Microbiology 5th ed 影印版，高等教育出版社，2000.3.医学免疫学本科教材（第三版），陈慰峰主编.人民卫生出版社.北京.2000.84.医学微生物学本科教材（第六版），周正任主编.人民卫生出版社.北京.2003.12实 施情 况小 结教研室主任签名： 2014年2月21日成 都 医 学 院 教 案 续 页教学过程、内容及时间分配教学方法与手段第六章 球菌请同学们回忆一下是否有过伤口化脓的经历？（3min）化脓性细菌：是一类能够感染人体并引起化脓性炎症的细菌。 第一节 葡萄球菌属一、生物学性状（2min）1形态与染色 球形或椭圆形，葡萄串状，革兰染色阳性。 2培养特性 在普通基础培养基上生长良好3抗原结构 1葡萄球菌A蛋白(staphylococcalproteinA，SPA) 2荚膜 3多糖抗原 4抵抗力 葡萄球菌对外界因素的抵抗力强于其他无芽胞菌。二、致病性（一）致病物质（6min） 1凝固酶2葡萄球菌溶素 3杀白细胞素4肠毒素 5表皮剥脱毒素 6毒性休克综合征毒素-1(toxicshocksyndrometoxinl，TSST1)（二）所致疾病（6min）1侵袭性疾病 主要引起化脓性炎症。 (1)局部感染(2)全身感染2毒素性疾病 由葡萄球菌产生的有关外毒素引起。 (1)食物中毒 (2)假膜性肠炎 (3)烫伤样皮肤综合征 (4)毒性休克综合征三、免疫性（1min）人类对葡萄球菌有一定的天然免疫力。四、微生物学检查法（1min）五、防治原则（1min）第二节 链球菌属链球菌属(Streptococcus)细菌是化脓性球菌中的另一大类常见细菌，为链状或个别种成双排列的革兰阳性球菌。链球菌分类：（1min）1.根据溶血分：甲型溶血性链球菌、乙型溶血性链球菌、丙型链球菌问答法讲授法图片展示葡萄球菌形态讲授法重点讲解，结合临床症状使用图片展示表皮剥脱毒素所致症状讲授法图片展示临床症状讲授法讲授法分类原则教学过程、内容及时间分配教学方法与手段2.根据抗原结构分：A、B、C、D、E、F、G、H、K、L、M、N、O、P、Q、R、S、T、U、V共20群。对人致病主要为A群。3.根据对氧的需要分类：需氧、兼性厌氧、厌氧链球菌。一、A群链球菌（一）生物学性状（2min）1形态与染色：球形或椭圆形，呈链状排列， 2培养特性：大多兼性厌氧，少数菌株专性厌氧。营养要求较高，需补充血液、血清、葡萄糖等。3抗原结构：（1）蛋白质抗原（2）多糖抗原（3）核蛋白抗原 （二）致病性1致病物质（3min）（1）链球菌溶素 （2）致热外毒素，曾称红疹毒索或猩红热毒素，是人类猩红热的主要毒性物质。（3）透明质酸酶 又名扩散因子。（4）M蛋白 （5）链激酶 （6）链道酶 （7）F蛋白 2所致疾病（3min）链球菌引起人类多种疾患，可分成化脓性、中毒性和超敏反应性三类。传染源为病人和带菌者。传播方式有空气飞沫传播、经皮肤伤口感染和经污染食品传播等途径。（三）免疫性（1min） 链球菌因其型别多，各型间无交叉免疫力，因此反复感染。（四）微生物学检查法（1min）（五）防治原则（1min） 链球菌感染主要通过飞沫传播，应对病人和带菌者及时治疗，以减少传染源；注意对空气、器械和敷料等消毒。A群链球菌感染首选药物为青霉素G。二、肺炎链球菌 肺炎链球菌，经常寄居于正常人的鼻咽腔中，多数不致病或致病力弱，仅少数有致病力，是细菌性肺炎的主要病原菌。（一）生物学性状（2min）1形态与染色：革兰阳性球菌，菌体呈矛头状，多成双排列。2培养特性：营养要求较高，在含有血液或血清的培养基中才能生长。讲授法 图片展示菌体形态讲授法 结合临床症状讲解讲授法结合病例讲授法简单讲解讲授法强调治疗药物为青霉素讲授法图片展示菌体形态强调矛头状教学过程、内容及时间分配教学方法与手段3抗原结构与分型：（1）荚膜多糖抗原 （2）菌体抗原4抵抗力：抵抗力较弱。（二）致病性1致病物质（3min）（1）荚膜 （2）肺炎链球菌溶素O （3）脂磷壁酸 （4）神经氨酸酶 2所致疾病（1min） 主要引起大叶性肺炎。（三）免疫性（1min）能建立较牢固的型特异性免疫（四）微生物学检查法（1min）（五）防治原则（1min）多价肺炎链球苗荚膜多糖疫苗第二节 奈瑟菌属 、脑膜炎奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌，是流行性脑脊膜炎(流脑)的病原菌。(一)生物学性状（2min）1形态与染色：肾形或豆形，革兰阴性双球菌2培养特性：营养要求较高，需在含有血清、血液等培养基中方能生长；菌落呈圆形、光滑、透明，似露滴状。3抵抗力：对理化因素的抵抗力很弱。对干燥、热力、消毒剂等均敏感。(二)致病性1致病物质（2min）荚膜能抗吞噬作用，菌毛可粘附至咽部粘膜上皮细胞表面。主要致病物质是内毒素。2所致疾病 （2min）脑膜炎奈瑟菌是流脑的病原菌。(三)免疫性（1min）以体液免疫为主。(四)微生物学检查法（1min） 标本采取后应注意保暖保湿并立即送检。(五)防治原则（1min） 流脑荚膜多糖疫苗二、淋病奈瑟菌 淋病奈瑟菌，是人类淋病的病原菌，主要引起人类泌尿生殖系统粘膜的急性或慢性化脓性感染。(一)生物学性状（1min）1形态与染色：肾形或豆形，革兰阴性双球菌2培养特性：专性需氧，初次分离培养时需供给5C02；营养要求高。3抵抗力：对热、冷、干燥和消毒剂极度敏感。讲授法 讲授法举例说明讲授法讲授法图片展示双球菌形态，强调凹面相对讲授法强调内毒素是主要致病物质举例：安徽流脑流行讲授法治疗使用青霉素G，过敏者使用红霉素讲授法图片展示双球形态教学过程、内容及时间分配教学方法与手段(二)致病性（5min）1 致病物质：淋病奈瑟菌通过菌毛粘附到尿道的柱状上皮细胞表面，在局部形成小菌落后，再侵入细胞增殖。2所致疾病：淋病(三)免疫性（1min）无天然抵抗力；免疫不持久，再感染和慢性患者较普遍存在。(四)微生物学检查法（1min） 形态学鉴定(五)防治原则（1min） 通过性接触传播，污染的毛巾、衣裤、被褥等也能间接传播。第七章 肠道杆菌第一节 埃希菌 一、生物学性状（2min）1形态与染色：G-杆菌，有菌毛，鞭毛2培养：普通琼脂培养基上生长良好3生化反应（活跃而复杂）(1)糖发酵试验葡萄糖+ 乳糖+麦芽糖+ 甘露糖+ 蔗糖+ （2）麦康克培养基：红色菌落EMB（伊红-亚甲兰）培养基：紫黑色，金属光泽（3）枸橼酸盐（IMViC）试验：+-二、致病性（一）致病物质（5min）.侵袭力：1荚膜2黏附素：使细菌黏着在泌尿道和肠道细胞上，有高特异性（1）定植因子抗原，（CFA/, CFA/,CFA/）（2）菌毛：.毒素：1.内毒素2.外毒素：（1）志贺毒素和（2）耐热肠毒素a,b（3）不耐热肠毒素和（4）溶血素A(二)所致疾病1肠道外感染（2min）多数大肠埃希菌在肠道内不致病，但如移位至肠道外引起肠外感染。(机会感染，内源性感染)（1）泌尿道感染：常见。上行感染，90% 由本菌引起（2）化脓性感染（3）败血症（4）新生儿脑膜炎讲授法 举例讲解讲授法强调治疗使用青霉素等，新生儿1%硝酸银滴眼讲授法图片展示菌体和菌落形态图片展示生化反应结果讲授法重点讲解外毒素举例说明讲授法注意学生理解教学过程、内容及时间分配教学方法与手段2肠胃炎（外源性感染，某些特殊血清型的大肠埃希菌引起）（1）肠产毒素性大肠埃希菌 (enterotoxingenic E. coli, ETEC) （1 min）致病物质a.定植因子：使细菌黏附到小肠上皮细胞上b.肠毒素 分类性质：LT(不耐热肠毒素)ST（耐热肠毒素）稳定性65，30min破坏100，20min不失活抗原性可刺激机体产生相应中和抗体免疫原性差所致疾病：5岁以下婴幼儿和旅游者腹泻（2）肠侵袭性大肠埃希菌 (enteroinvasive E. coli, EIEC) （1min）不产肠毒素，侵袭结肠粘膜上皮细胞，与志贺菌相似。细菌侵入结肠上皮细胞细胞生长复制空泡结肠上皮细胞杀死感染细胞 导致组织破坏和炎症发生所致疾病：侵犯较大儿童，成人，症状类似菌痢（3）肠致病性大肠埃希菌（enteropathogenic E. coli, EPEC）（1 min）致病原因：无肠毒素及其他外毒素，无侵袭力病菌在十二指肠，空肠和回肠上段黏膜表面大量繁殖，造成一系列损伤所致疾病：婴幼儿腹泻，严重可致死(4)肠出血性大肠埃希菌（enterohemorrhagic E.coli, EHEC）（1 min）致病原因：产志贺毒素Stx-，Stx-，破坏肠绒毛结构（干扰蛋白质合成）所致疾病：出血性结肠炎，溶血性尿毒综合症（5岁以下儿童易感）三、微生物学检查法：（1min）（一）临床标本的检查1标本采集：中段尿，血，脓，脑脊液，粪便等2分离培养与鉴定肠道外感染：涂片染色，分离培养，鉴定：IMVic(+-)，生化反应肠道内感染：粪便接种鉴别培养基 ELISA，核酸杂交，PCR(二)卫生细菌学检查大肠菌群数：饮水小于3个/升，果汁小于5个100ml四、防治原则（1min）1耐药性普遍，需做药敏试验2减少院内交叉感染，严格无菌操作3水，食品严格消毒讲授法 重点讲解四型导致肠胃炎的大肠埃希菌注意之间的一些区别讲授法讲授法教学过程、内容及时间分配教学方法与手段第二节 志贺菌 细菌性痢疾的病原菌，通称痢疾杆菌 (dysentery bacterium)一、生物学性状1形态染色（1min）G-杆菌，无鞭毛，有菌毛培养特性：普通琼脂平板即可生长2生化反应（1 min）（1）乳糖发酵：-EMB平板：无色菌落（2）糖发酵试验葡萄糖+ 乳糖- 麦芽糖-甘露糖- 蔗糖- 二、致病性与免疫性感染只限于肠道，不入血，人是唯一自然状态宿主（一）致病物质（4min）1侵袭力（1）菌毛（2）型分泌系统2内毒素（1）作用：使肠粘膜通透性增高，破坏肠粘膜作用于肠壁自主神经系统，使肠功能紊乱（2）症状：发热，休克，炎症，腹痛，里急后重3外毒素：由A群志贺菌型和型产生（Stx和Stx），作用上皮细胞损伤（二）所致疾病（5min）1传染源：病人，带菌者2所致疾病：细菌性痢疾急性细菌性痢疾潜伏（1-3d），腹痛，水样腹泻，发热，不适，脓血粘液便，腹痛，里急后重，2-5d自发消退慢性细菌性痢疾病程两个月以上（三）免疫性（1 min） 消化道黏膜表面分泌型IgA(SIgA)，免疫期短讲授法图片展示菌体和菌落形态图片展示生化反应结果讲授法重点讲解致病机理，举例说明。讲授法强调临床症状教学过程、内容及时间分配教学方法与手段三、微生物学检查法（1 min）1标本：粪便脓血，黏液，肛拭2分离培养与鉴定：37，鉴别/选择培养基，可疑菌落，生化实验3毒力实验（1）侵袭力：Sereny实验（2）ST实验：Hera/Vero细胞，PCR技术4快速诊断法（1）免疫染色法（2）免疫荧光球菌法（3）协同凝集实验（4）乳胶凝集实验（5）分子生物学方法：PCR技术，基因探针四、防治原则（1 min）1及时治疗、隔离病人2水、食物、牛奶卫生监测3减毒活疫苗第三节 沙门菌 大多数能感染人类的沙门菌属于肠道沙门菌肠道亚种一、生物学性状（1 min）1形态染色：G-杆菌，有菌毛，周生鞭毛，无荚膜、芽孢2培养特性：普通琼脂平板即可生长3生化反应：4抗原构造O抗原：LPS中特异性多糖，耐热，用于沙门菌分组H抗原：鞭毛蛋白，不耐热，分为两相，可用于沙门菌分型Vi抗原：存在于菌表面，与细菌毒力有关。 5抵抗力：较弱，65，15-30min杀死；对胆盐，煌绿等化学物质抵抗力强于其他肠道菌二、致病性与免疫性（一）致病物质（4min）1侵袭力（1）菌毛：与M细胞结合（2）型分泌系统（沙门菌致病岛、） （3）耐酸应答基因（4）Vi抗原：有微荚膜功能，抗吞噬，阻挡抗体补体作用讲授法 讲授法讲授法图片展示菌体和菌落形态，以及生化反应讲授法教学过程、内容及时间分配教学方法与手段2内毒素：发热，中毒症状3肠毒素：个别沙门菌产生，类似ETEC产的肠毒素（二）所致疾病1肠热症（5 min）（1）疾病：伤寒，副伤寒（2）病程特点：二次菌血症，超敏反应侵入M细胞，巨噬细胞吞噬，肠系膜淋巴结大量繁殖，进入血流（第一次菌血症），随血进入肝、脾、肾、胆等器官，再次入血（第二次菌血症），再次进入肠壁淋巴组织（超敏反应），局部组织坏死溃疡。2胃肠炎（细菌性食物中毒）：最常见的沙门菌感染（2min）（1）致病机制：细菌侵袭肠粘膜，释放内毒素（2）症状：发热，呕吐，腹泻3败血症（1min）4无症状带菌者（1 min）指在症状消失后一年或更长的时间内仍可在其粪便中有相应沙门菌。病菌滞留于胆囊或尿道中。（三）免疫性：主要防御机制：特异性细胞免疫三、微生物学检查法（3min）1标本：病程不同，采取不同标本2分离培养与鉴定（1）传统方法：血液、骨髓液、增菌生化反应、接种与肠道鉴别培养基、可疑菌落、粪便、尿、离心、玻片凝集试验 （2）近期发展：新的免疫学方法，分子生物学方法，Vi噬菌体分型3 血清学诊断： （1）概念：肥达试验：是用已知伤寒沙门菌菌体（O）抗原和鞭毛（H）抗原，以及引起副伤寒的甲型副伤寒沙门菌、肖式沙门菌和希氏沙门菌H抗原的诊断菌液与受检血清做试管或微孔板凝集试验，测定受检血清中有无相应抗体及其效价的试验。（2）结果：正常值：伤寒沙门菌O凝集效价小于1:80，H效价小于1:160,引起副伤寒沙门菌H效价小于1:80动态观察：逐周复查O与H抗体的诊断意义其他4伤寒带菌者的检出四、防治原则（1min）1水源食品卫生管理2Vi荚膜多糖疫苗讲授法 致病机制和症状讲授法强调症状讲授法讲授法重点讲解肥达试验，掌握原理，了解试验结果的判断讲授法教学过程、内容及时间分配教学方法与手段第四节 霍乱弧菌 (V.cholerae)弧菌属 (Vibrio)：是一大群菌体短小、弯曲成弧形、运动活泼的G-菌。36个种，12种与人类感染有关。如霍乱弧菌，副溶血性弧菌，创伤弧菌等。一、生物学性状（1 min）1形态与染色G-弧菌，无芽孢，有菌毛、 单鞭毛，运动活泼2培养特性与生化反应碱性培养基（PH：8。8 -9.6）生长良好，