课件：微生物应用技术常见的细菌.ppt

致病微生物,辽宁农业职业技术学院 畜牧兽医系 兽医教研室,-,第一部分 致病菌,一、葡萄球菌,五、沙门氏菌,六、厌氧芽孢杆菌,四、大肠杆菌,二、链球菌,三、炭疽杆菌,八、猪丹毒杆菌,七、巴氏杆菌,2019,-,2019,-,2019,-,第一节 葡萄球菌,葡萄球菌是常见的化脓性球菌之一， 80%以上的化脓性疾病是由本菌引起的。,2019,-,一、生物学特性 1.形态与染色 （1）典型的为圆形，成堆排列如同葡萄状。 （2）无芽胞、无鞭毛、一般不形成荚膜。 （3）革兰氏阳性菌G+。 （4）在脓汁或液体培养基中成双球或短链。,2019,-,2.培养特性 （1）对营养要求不高 在普通琼脂平板上形成圆形、隆起、 湿润、边缘整齐、表面光滑、有光泽不透 明的菌落。 致病菌最适温度37，最适Ph7.4。,2019,-,（2）不同的菌株产生不同的脂溶性色素 金黄色、白色、柠檬色 （3）出现溶血环 在血琼脂平板上培养，形成溶血环，也有不发生溶血。,2019,-,3.抵抗力 无芽胞菌中，葡萄球菌的抵抗力较强。 对碱性染料较敏感。 1%3%龙胆紫（紫药水）治疗葡萄球菌引起的化脓症，效果良好。 阳离子的表面活性剂也可杀死本菌。（新洁尔灭）,2019,-,4.抗原构造及分类 构造多达30余种。蛋白质抗原和多肽类抗原较重要。 蛋白质抗原主要是A蛋白，位于细胞壁表面，广泛应用于免疫诊断。 多糖类抗原多用于分类定型。,2019,-,二、致病性 1、致病物质 葡萄球菌的毒力因子主要是毒素和酶 （1）血浆凝固酶： 作为鉴别葡萄球菌有无致病性的重要标志。 凝固酶有游离凝固酶和结合凝固酶。 凝固酶耐热，100，30min或高压灭菌后仍具有活性，但易被蛋白分解酶破坏,2019,-,（2）溶血素 人源菌株多产生毒素，而动物分离菌株产生溶血素。,2019,-,（3）肠毒素： 是一种可溶性蛋白质，耐热抗酸,100， 30min不被破坏，也不受胰蛋白酶的影响。 误食污染肠毒素的食物后，引起急性胃肠 炎症状。,2019,-,2、所致疾病 引起的疾病为畜禽的化脓性疾病。,2019,-,案例,近日偶见一病例，40日龄左右肉鸡出现大腿关节肿胀，剖检发现关节腔内有大量脓性渗出物。,2019,-,分离划线染色，以及进行药敏试验。初步诊断为鸡葡萄球菌病。 药敏试验丁胺卡那霉素敏感， 阿奇霉素中度敏感， 庆大霉素、林可霉素、哌拉西林、吡哌酸、恩诺沙星有耐药性,2019,-,2019,-,2019,-,2019,-,2019,-,三、微生物学诊断 1、镜检 （1）形态的观察 取病料涂片，革兰氏染色后镜检，呈现 革兰氏阳性葡萄状排列。,2019,-,2、分离培养与鉴定 将病料接种于普通琼脂平板和血琼脂平 板上，35培养18-24h后观察菌落。 （1）普通琼脂平板上： 中等大小、圆形、表面光滑、边缘整齐，不透明的菌落，并产生脂溶素。,2019,-,（2）血琼脂平板 出现类似普通琼脂平板上的菌落。 金黄色葡萄球菌菌落周围有明显的溶血 环。,2019,-,3.凝固酶试验 是鉴定金黄色葡萄球菌致病性的重要指 标。,2019,-,四、防治 皮肤创伤及时处理；合理使用抗生素药 物。,2019,-,第二节 链球菌,链球菌是化脓性球菌的另一类常见的细 菌，呈链状排列，故名为链球菌。 广泛分布于自然界、人及动物粪便、健 康人畜的鼻咽部。,2019,-,一、生物学特性 1.形态与染色 （1）球形或卵圆形，链状排列，链长短不一。 （2）固体培养基链长4-8个菌，液体培养基链长20-30个菌。 （3）多数幼龄培养物中可见到荚膜。 （4）无芽孢和鞭毛，革兰氏阳性。,2019,-,2019,-,2019,-,2.培养特性 营养要求较高。在普通培养基中生长不 良，需在普通培养中加入血液、血清等才能 生长。 温度37，pH7.4-7.6。 血琼脂平板上形成灰白、光滑、圆形突起小菌落。 出现溶血现象。,2019,-,3.分类 根据链球菌在血琼脂平板上的溶血现象分为三类：,（1）甲型（）溶血性链球菌： 菌落周围有1-2mm宽的草绿色不完全溶血环。 致病力较弱。,（2）乙型（）溶血性链球菌： 菌落周围形成一个2-4mm的透明的溶血环。 致病力强。,（3）丙型（） 链球菌： 不产生溶血素。对人类无致病作用。,2019,-,4.按抗原构造分类 根据细胞壁中的多糖抗原C抗原的 不同，将乙型溶血性链球菌分为A-H K-U 19个血清群,2019,-,5.抵抗力 不强。常用消毒药10 分钟内可以杀死 本菌。5%石碳酸、2%甲醛、0.05%洗必泰、 0.01%度米芬、0.1%高锰酸钾液在5min内可将 其杀死。 青霉素是首选药物，其他有氯霉素、四 素、磺胺类。,2019,-,二、致病性 1.致病因子： 毒素、酶和外毒素。 2.不同的血清群的链球菌所引起的动物疾病不同。 （1）急性：出血性败血症和脑炎； （2）慢性：关节炎、心内膜炎及组织化脓性炎。,2019,-,2019,-,2019,-,三、微生物学检查 可采取脓汁、咽拭、血液等标本送检。 1.镜检 取脓汁涂片，革兰氏染色，镜检。若呈 革兰氏阳性，链状排列的球菌，可初步诊断。,2019,-,2.分离培养 将病料接种于血液琼脂平板上，培养 后观察菌落，观察菌落周围的溶血情况。 必要做生化及血清学试验。,2019,-,四、防治 1、创伤及时处理； 2、疫苗注射； 3、感染家畜及早使用药物治疗。,2019,-,2019,-,2019,-,2019,-,2019,-,炭疽芽孢杆菌惯称炭疽杆菌，是引起人 类、各种家畜和野生动物炭疽的病原，在兽 医学和医学上均占有相当重要的地位。,第三节 炭疽杆菌,2019,-,炭疽杆菌能从损伤的皮肤侵入，在局部 形成水泡，水泡越来越多，形成一个不断扩 大的水中区域，最后周围组织变硬，结成黑 似炭块的痂，所以称为炭疽。,2019,-,一、生物学特性 1.形态与染色 菌体粗大，两端平切，连接清 晰，竹节状。 无鞭毛，不运动。在人和动物体 内能形成荚膜。人工培养或外界环 境（2530）中形成芽孢，芽 孢椭圆形，位于菌体中央。 革兰氏阳性杆菌。,2019,-,2.培养特性 （1）培养条件 此菌为需氧菌，营养要求不高，普通培 养基中能生长良好。最适温度为37，最适 pH值为7.27.4。,2019,-,（2）琼脂平板培养 菌落灰白，边缘不整齐，呈卷发样。菌 落有黏性，用接种针钩取可拉成丝，称为 “拉丝”现象。 血液平板轻微溶血。,2019,-,（3）肉汤培养 上部液体清亮透明，管底有白色絮状沉淀； （4）明胶培养 沿穿刺线生长如“倒松树”状。能液化明胶。,2019,-,炭疽杆菌受低浓度青霉素作用，菌体可 肿大形成圆珠，称为“串珠反应”。这是炭 疽杆菌特有的反应。,2019,-,3.抵抗力 (1)繁殖体 抵抗力不强，易被一般消毒剂杀灭。 (2)芽孢 抵抗力非常强，在干燥室温环境中可存 活数十年,皮毛中存活数年。 对碘特别敏感。高压蒸汽消毒、干热均可 杀灭芽孢；,2019,-,4.抗原构造 （1）菌体抗原：与毒力无关，耐热，与特异性抗体发生环状沉淀，可用于鉴定和诊断（Ascoli氏反应）。 （2）荚膜抗原：半抗原，与毒力有关，可抵抗吞噬。 （3）保护性抗原：炭疽毒素的组成部分，有免疫原性。 （4）芽胞抗原：具有免疫原性。,2019,-,二、致病性 主要感染草食动物，牛、绵羊、鹿最 易感，马、猪次之，禽类一般不感染。 1.皮肤炭疽 最常见，由体表破损进入体内。 2.肠炭疽 由食入病兽肉制品所致，以全身中毒症状为主，发病2-3日内死亡。,2019,-,毒力主要与荚膜和毒素有关。 （1）荚膜：侵入体内后形成。 （2）毒素： 包括水肿毒素和致死毒素两种。,2019,-,三、微生物学诊断 1.镜检： 采集皮肤炭疽的脓液、渗出物，肠炭 疽的粪便以及病人的的血液等送检，兽尸 禁止解剖，可割取耳朵或舌尖一片送检。 将标本直接涂片，碱性美兰或瑞氏染 色镜检，观察形态及荚膜特征，可以初步 诊断。,2019,-,2.分离培养： 取病料进行血平板分离培养，37孵 育1215小时，钩取可疑菌落，进行青霉素 串珠试验。,2019,-,3.动物试验： 接种小鼠可引起败血症性死亡，剖检可 见皮下胶样水肿，脾脏肿大，内脏和血液中 含有大量炭疽杆菌。,2019,-,4.Ascoli反应 炭疽环状沉淀反应。 用已知炭疽沉淀血清与待测炭疽沉淀抗 原进行反应，如在接触面产生白色沉淀环， 即可诊断。,2019,-,四、防治 预防接种：常用无毒炭疽芽孢苗和II号 炭疽芽孢苗。 治疗：血清学疗法和抗生素及磺胺类药物。 尸体应焚烧或深埋2m以上。,2019,-,第四节 大肠杆菌,2019,-,大肠杆菌是动物肠道的正常菌群，在消化道后段大量繁殖而定居终生伴随，并经粪便不断散播于周围环境。 能合成维生素B和维生素K，产生大肠杆菌素，抑制致病性大肠杆菌的生长。 致病性大肠杆菌在一定条件下能引起动物大肠杆菌病的发生。,2019,-,一、生物学特性 1.形态与染色 革兰氏阴性菌，无芽胞的直杆菌，中 等大小，两端钝圆，散在或成对；多数有 周鞭毛，有菌毛，少数菌株兼具有性菌毛。 无可见荚膜，但常有微荚膜。,2019,-,2019,-,2.培养特性 对营养要求不高，最适温度37，最适ph值为7.27.4。 普通琼脂：中等大小，光滑，半透明、灰白色菌落；,2019,-,麦康凯琼脂：红色的菌落； 伊红美蓝琼脂：紫黑色带金属光泽菌落； 血液琼脂：有的菌株形成溶血环。,2019,-,2019,-,2019,-,3.抵抗力 对热的抵抗力较其他肠道杆菌强，55 经60min或60经15min仍有细菌存活。 对抗生素敏感，但易耐药，临床上应做 药敏试验，选择合适药物。,2019,-,4.抗原结构 大肠杆菌抗原主要有菌体抗原(O)、荚膜 抗原(K)、鞭毛抗原(H)三种。已确定的O抗 原有173种，K抗原有80种，H抗原有56种。 可用O:K:H排列表示其血清型。 表示O8K25H9。,2019,-,二、致病性 1.产肠毒素大肠杆菌 致病因素：2种 （1）黏附素性菌毛： 能黏附与宿主的小肠上皮细胞，避免肠 蠕动和肠液的清除作用。,2019,-,（2）肠毒素： 菌体生长时产生并分泌到胞外的一种蛋白质性毒素。 引起幼畜腹泻最常见的致病菌。,2019,-,2.产类志贺毒素大肠杆菌 引起婴幼儿腹泻、人出血性肠炎。 动物，引起仔猪黄、白痢和水肿病。,2019,-,三、微生物学诊断 1.镜检： 取病料涂片染色镜检。 如发现有革兰染色阴性，散在或成对、中等大小、两端钝圆的直杆菌，可初步诊断。,2019,-,2.分离培养： 将病料接种于培养基，培养24h,观察菌体特征。 （普通琼脂、麦康凯、伊红美蓝琼脂上）,2019,-,大肠杆菌的生长表现,普通琼脂：形成圆形、光滑、湿润、半透明、灰白色菌落，直径约2-3mm； 麦康凯：琼脂上形成红色菌落较大的菌落。,2019,-,四、防治 1.疫苗免疫（多血清型）； 2.加强管理； 3.对病畜使用敏感抗菌药物和抗血清治疗。,2019,-,2019,-,2019,-,第五节、 沙门氏菌,沙门氏菌是肠杆菌科沙门氏属的细菌， 是寄生于人类及各种动物肠道内的菌，绝 大多数沙门氏菌对人和动物有致病性。,2019,-,一、生物学特性 1.形态与染色 本菌呈直杆状，除鸡白痢和鸡伤寒沙门氏菌无鞭毛不运动外，其余各菌具有周生鞭毛，能运动。无荚膜和芽孢 革兰氏阴性菌。,2019,-,2019,-,伤寒沙门氏菌,鼠伤寒沙门氏菌,2019,-,鸡白痢沙门氏菌,2019,-,马流产沙门氏菌,2019,-,2.培养特性 本菌在普通培养基中生长缓慢，需加 入血清、血液等能良好生长。 在固体培养基上培养2d后，可见到光滑、 湿润、有光泽、圆形、隆起、边缘整齐的针 尖大小的菌落。 在血液琼脂平板上一般不溶血。,2019,-,3.生化特性 多数沙门氏菌不发酵乳糖和蔗糖，能 发酵葡萄糖、麦芽糖、和甘露醇，产酸产气。,2019,-,4.抵抗力 本菌对外界抵抗力较强。 对消毒剂的抵抗力不强。,2019,-,二、致病性： 沙门菌的毒力因子有多种：内毒素、 肠毒素等。 本菌通过动物的消化道和呼吸道传播； 也可通过自然交配或人工授精传播；还可通 过子宫内感染或带菌禽蛋垂直传播。,2019,-,与畜禽有关的沙门氏菌有： 1、猪霍乱沙门氏菌 仔猪副伤寒 2、鸡白痢沙门氏菌 雏鸡白痢 3、鼠伤寒沙门菌 畜禽的副伤寒,2019,-,三、微生物学诊断 1、采取病料 采取粪便、肠内容物、阴道分泌物、肝 脏等。,2019,-,2、分离培养 将病料接种于下列培养基： （1）麦康凯培养基 长出无色菌落（不发酵乳糖）。 （2）SS琼脂 菌落呈灰色，中心带黑色。 （3）HE琼脂 菌落呈黑色。,2019,-,2019,-,第六节 厌氧芽胞杆菌,厌氧芽胞杆菌只有一个属，称梭状芽胞杆 菌属，简称梭菌属，革兰氏染色阳性，都能产 生芽胞，芽胞直径大，多比菌体宽，使菌体膨 大成梭形，故得名。 大多数须在严格厌氧条件下才能生长，少 数可在微氧环境中繁殖。,2019,-,（一）破伤风梭菌 （二）肉毒梭菌 （三）魏氏梭菌,2019,-,是引起破伤风的病原菌，大量存在于 人和动物肠道中，由粪便污染土壤，经伤 口感染引起疾病。,（一）破伤风梭菌,2019,-,一、生物学特性 1.形态与染色： 菌体长直，多单在，周鞭毛，无荚膜。芽孢位于菌体顶端，芽胞大于菌体。繁殖体为G+，芽孢体G-。,2019,-,2019,-,2.培养特性 专性厌氧菌，对营养要求不高，最适 生长温度为37，pH7.07.5。,2019,-,（1）普通琼脂： 培养2448h后，可形成直径1mm 以上不规则的菌落，中心紧密，周边疏松，似羽毛状菌落。 （2）血液琼脂:有明显溶血环。 （3）肉肝培养基：浑浊微变黑，产生气 体和发臭。,2019,-,破伤风杆菌在厌氧血平板上的羽毛状菌落,破伤风杆菌咋肝肉培养基上生长（浑浊、变黑），右图未接种,2019,-,3.抵抗力 繁殖体，100 5分钟杀死；芽胞体 在土壤中存活数十年 对青霉素和磺胺类药物敏感。,2019,-,二、致病性 产生强烈的外毒素，即痉挛毒素或称 神经毒素。,2019,-,补充：,破伤风梭菌在一般伤口中不能生长，伤口的厌 氧环境是破伤风梭菌感染的重要条件。窄而深的伤 口(如剌伤)，或大面积创伤、烧伤、坏死组织多， 局部组织缺血或同时有需氧菌或兼性厌氧菌混合感 染，均易造成厌氧环境， 多见于战伤。平时除创伤感染外，分娩时断脐 不洁，手术器械灭菌不严，均可引起发病。新生儿 破伤风（俗称脐风）尤为常见。,2019,-,全身强直,两耳竖立,牙关紧闭,2019,-,四肢强直,脐带感染,角弓反张,2019,-,三、诊断 1.根据临床症状和有无创伤。 一般不需要作微生物检验。 2.动物试验,2019,-,四、防治 破伤风一旦发病，治疗困难，应以预 防为主。 1.每年定期接种精制破伤风类毒素。 2.防治外伤感染，发生外伤，注意伤口消毒。,2019,-,3.紧急预防 除用类毒素加强免疫外，可再注射破伤风抗毒素。即在一臂注射抗毒素，另一臂注射类毒素，612周后再注射一针类毒素。实践证明，同时注射抗毒素和类毒素，预防效果好，且互不干扰。,2019,-,4.特异治疗 早期使用破伤风抗毒素，疗效较好。 5.抗生素疗法 大剂量的青毒素能有效地抑制破伤风 梭菌在局部病灶中繁殖，故亦可用于治疗。,2019,-,（二）肉毒梭菌,肉毒梭菌是一种腐生性细菌，不能 在活的机体内繁殖，广泛分布于土壤和动 物粪便中。 肉毒梭菌是引起食物中毒的病原菌， 在自然界繁殖产生毒素，人畜误食被毒素 污染的食物后，发生中毒。,2019,-,一、生物学特性 1.形态与染色 G+大杆菌，单独或成双排列，有时可见短链状。有周身鞭毛，无荚膜。芽胞椭圆形，大于菌体，位于次极端，使菌体似网球拍状。,2019,-,2.培养特性 严格厌氧。最适温度为3037。 对营养要求不高，普通琼脂培养基上 形成直径35mm不规则的菌落；血液琼脂 平板上有溶血。能消化肉渣，使之变 黑，有腐败恶臭。,2019,-,肉毒梭菌纯培养镜下形态,肉毒梭菌在厌氧血琼脂平板上的菌落特征,2019,-,3.抵抗力 繁殖体抵抗力中等； 芽孢抵抗力极强。,2019,-,二、致病性 产生外毒素，是一种神经毒素。是已 知毒素中最强的一种，它比氰化钾毒力还 大一万倍。 人服0.1ug即可毙命；纯化的肉毒毒素1mg能杀死2亿只小鼠。,2019,-,肉毒中毒的发生，主要由于豆类、肉类、腊肠及罐头食品等被肉毒梭菌或芽胞污染，在厌氧条件下繁殖产生外毒素，被人食入所引起。,2019,-,症状： 表现头晕、无力、视力模糊不清、复视、 吞咽及呼吸困难，严重者可因呼吸衰竭或心 力衰竭而死亡。 因毒素不直接刺激肠粘膜，故无明显的 消化道症状。,2019,-,三、诊断 1.毒素检查 病料稀释液注入小鼠腹腔，12天后 观察发病情况，如流涎、眼睑下垂、四肢 麻痹、呼吸困难，最后死亡等症状。,2019,-,2.分离培养 病料煮1小时，接种于血液平板或疱肉 培养基中，培养2448小时，挑选可疑菌落，涂片检查细菌形态。,2019,-,（三）魏氏梭菌,又叫产气荚膜梭菌，危害绵羊和兔，引起羔羊痢疾、羊肠毒血症和兔魏氏梭菌性下痢 1.形态与培养 大杆菌 偏端芽胞 呈椭圆形 培养： 无糖培养基-形成芽胞 血液琼脂平板-双层溶血环 牛乳培养基-暴烈发酵,2019,-,2.致病性与抵抗力 毒素：致死毒素 坏死毒素 溶血毒素 引起局部组织分解、坏死、产气、水肿及全身中毒 毒素种类 型毒素：有坏死、溶血和致死作用 型毒素：有坏死和致死作用 抵抗力与一般病原菌相似,2019,-,3.检查 镜检 G+ 粗大钝圆杆菌不易见芽胞和荚膜 厌氧培养 血液琼脂平板 牛乳培养基等 动物试验 4.防治 三联灭活苗或五联灭活苗 多价抗毒素血清+抗生素 和磺胺类药物,2019,-,第七节 多杀性巴氏杆菌,引起畜禽出血性败血症和传染性肺炎。 本菌分布世界各地，正常存在于多种健康动物的口腔和咽部黏膜。 引起内源性传染。,2019,-,一、生物学特性 1.形态与染色 卵圆形，两端钝圆的球杆菌或短杆 菌，无芽孢和鞭毛，新分离的强毒株有 荚膜; 革兰氏阴性菌（ G-）。,2019,-,巴氏杆菌,2019,-,2.培养特性 需氧或兼性厌氧。营养要求较严格。 （1）普通培养基：生长不好。 （2）麦康凯和含胆盐的培养基:不生长。,2019,-,（3）血琼脂 生长良好，菌落特征为白色、湿润、 边缘整齐、光滑、闪光小菌落。 不具有溶血性。,2019,-,3.抵抗力 不强，无菌蒸馏水和生理盐水中很 快死亡。一般消毒剂在几分钟或十几分钟 内可杀死本菌。,2019,-,4.血清型 按照荚膜抗原（K抗原）分为ABDE四个型 按照菌体抗原