课件：第章肠道感染细菌.ppt

病原生物学教研室 Department of pathogenic Biology of Gannan Medical University,医学微生物学 Medical Microbiology,第十一章 肠道感染细菌,传播途径：粪-口 包括：肠杆菌科细菌、幽门螺杆菌、霍乱弧菌、 副溶血性弧菌、弯曲菌属等,2019,-,2,肠杆菌科中与医学有关的常见菌族和菌属,埃希菌族 埃希菌属 大肠杆菌 志贺菌属 痢疾志贺菌 爱德华菌族 爱德华菌属 迟钝爱德华菌 沙门菌族 沙门菌属 伤寒沙门菌 枸橼酸菌属 佛劳第枸橼酸菌 克雷伯菌族 克雷伯菌属 肺炎克氏菌 肠杆菌属 产气肠杆菌 哈夫尼亚菌属 蜂窝哈夫尼亚菌 沙雷菌属 粘质沙雷菌 变形杆菌族 变形杆菌属 普通变形杆菌 摩根菌属 摩氏摩根菌属 普罗威登斯菌属 雷氏普罗威登斯菌 耶尔森菌族 耶尔森菌属 鼠疫耶尔菌 欧文菌族本 欧文菌属 草原居民欧文菌,菌族 菌属（菌种数） 代表种,2019,-,3,乳糖发酵试验,肠杆菌科细菌的共同特性,1、相似的形态染色 中等大小，G 杆菌，无芽胞，多数有动力,2、简单的培养条件,3、活泼的生化反应,初步鉴别肠道致病菌和肠道非致病菌,肠道致病菌,肠道非致病菌,不发酵乳糖,发酵乳糖,2019,-,4,4、抗原构造复杂,鞭毛抗原（H）,菌体抗原（O）,K或Vi抗原,2019,-,5,5、抵抗力,不强,6、易变异,溶源性转换,生化反应性变异,通过,引起,耐药性变异,毒力性变异,转导,接合,2019,-,6,第一节 埃希菌 Escherichia,一、生物学性状 形态染色 0.4-0.7 m 1-3m 短杆菌 革兰染色阴性 有鞭毛 有菌毛,2019,-,7,培养特性与生化反应 兼性厌氧 营养要求不高，S型菌落 生化反应活泼，发酵多种糖类 绝大多数发酵乳糖 吲哚、甲基红、VP、枸橼酸盐（IMViC）试验结果为+ + - - 抗原结构 O抗原：菌体抗原，170多种 H抗原：鞭毛抗原，56种以上 K抗原：荚膜抗原，100种以上 大肠杆菌血清型以O：K：H表示,2019,-,8,二、致病性,大肠埃希菌的毒力因子,型分泌系统,内毒素：,外毒素：,侵袭力：,荚膜,粘附素(定植因子抗原；Bpf;P菌毛、 紧密粘附素等),耐热肠毒素a,b(STa,STb),不耐热肠毒素和（LT-，LT-）,志贺毒素和（Stx-,Stx-）,溶血毒素,2019,-,9,不耐热肠毒素和耐热肠毒素的比较,2019,-,10,LT-作用机制：（与霍乱肠毒素作用相似）,B亚单位与肠粘膜上皮细胞表面GM1神经节苷脂结合 A亚单位穿过细胞膜 作用于腺苷环化酶 cAMP增高 肠粘膜细胞内水、氯、碳酸氢钾过度分泌至腹腔，钠吸收减少 腹泻,2019,-,11,不耐热肠毒素的作用机理,2019,-,12,STa的作用机制,作用于鸟苷环化酶 cGMP增高 肠粘膜细胞过度分泌至腹腔 腹泻,2019,-,13,志贺毒素(Stx),分Stx-和 Stx-两型,由1个A亚单位和5个B亚单位组成,作用机制：B亚单位与宿主细胞表面特异糖脂受体结合 A亚单位穿过细胞膜 裂解60S核糖体亚单位的28S rRNA 蛋白质合成受阻,2019,-,14,2、所致疾病,肠道外感染 机会感染，内源性感染 泌尿道感染最多见 化脓性感染 脑膜炎 败血症等 肠胃炎 外源性感染，某些特殊血清型的大肠埃希菌引起,2019,-,15,引起肠胃炎的大肠埃希菌,肠产毒素型大肠埃希菌 enterotoxigenic E.coli ETEC 肠侵袭型大肠埃希菌 enteroinvasive E.coli EIEC 肠致病型大肠埃希菌 enteropathogenic E.coli EPEC 肠出血型大肠埃希菌 enterohemorrhagic E.coli EHEC 肠集聚型大肠埃希菌 enteroaggregative E.coli EAggEC,2019,-,16,肠产毒素型大肠埃希菌（ETEC） 致病物质 定植因子 肠毒素:LT、ST 内毒素 K抗原 所致疾病 5岁以下婴幼儿腹泻 旅游者腹泻 水样便，恶心、呕吐，腹痛，低热,2019,-,17,肠侵袭型大肠埃希菌（EIEC） 致病物质 不产生肠毒素 侵袭结肠粘膜上皮细胞并在其中生长繁殖 所致疾病 主要侵犯较大儿童和成人 腹泻呈脓血便，有里急后重 致病类似菌痢，较少见 诊断 EIEC无动力、生化反应和抗原结构与志贺菌相似,2019,-,18,肠致病型大肠埃希菌（EPEC） 致病物质 不产生肠毒素及其他外毒素 无侵袭力 所致疾病 婴幼儿腹泻,2019,-,19,肠出血型大肠埃希菌（EHEC）亦称为vero毒素大肠埃希菌 致病物质 菌毛：粘附作用 毒素：产志贺毒素Stx-，Stx-，破坏肠绒毛结构（干扰蛋白质合成） 所致疾病 出血性结肠炎 溶血性尿毒综合征,2019,-,20,肠集聚型大肠埃希菌（EAggEC） 致病物质 毒素：肠集聚耐热毒素（EAST） 粘附素 所致疾病 引起婴儿持续性腹泻，脱水，偶有血便,2019,-,21,引起腹泻的大肠埃希菌,常见O血清型,6、8、15、25、 27、78、148、159,2019,-,22,微生物学检查法,临床标本的检查 标本 分离培养与鉴定 肠道外感染 涂片染色检查 分离培养 鉴定 肠道内感染 ETEC EIEC EPEC EHEC EAggEC,卫生细菌学检查 大肠菌群指数 每1000毫升样品中的 大肠菌群近似数 细菌总数,大肠菌群：指在37，24小时内发酵乳糖产酸产气需氧和兼性厌氧的肠道杆菌，包括埃希菌属、枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属及肠杆菌属等。,2019,-,23,防治原则,疫苗免疫预防已在畜牧业领域中开展了广泛研究 大肠埃希菌很多菌株都已获得耐一种或几种抗生素的质粒，耐药性非常普遍。进行药敏试验。,2019,-,24,第二节 志贺菌 （Shigella）,形态染色 G-杆菌 0.5-0.7 m 2-3m 无鞭毛，无荚膜 有菌毛 培养及生化反应 营养要求不高 不分解乳糖 ss选择培养基 克氏双糖管,2019,-,25,抗原构造及分类 由O和K抗原组成 分类：,菌种 群 型 亚型 甘露醇 鸟氨酸脱羧酶 痢疾志贺菌 A 110 - - 福氏志贺菌 B 16，X，Y变种 + - 鲍氏志贺菌 C 115 + - 宋氏志贺菌 D 1 + +,抵抗力 比其他肠道杆菌弱 对酸和一般消毒剂敏感：,2019,-,26,致病物质,1、侵袭力：,菌毛有利于菌粘附至肠粘膜,2、毒 素：,加重局部和全身症状,内毒素,作用于肠壁,通透性增加,粘膜炎症、溃疡,局部,全身,内毒素血症,外毒素（A群1型）,与内毒素协同作用,自主神经,2019,-,27,志贺菌侵袭肠粘膜上皮细胞过程 1：侵入M细胞；2：诱导吞噬；34：逃逸；57：从粘膜上皮细胞基底部侵入胞浆中并增殖；810：侵入邻近粘膜上皮细胞胞浆中，并生长繁殖。,2019,-,28,所致疾病 菌痢 患者和带菌者 粪-口 感染灶局限于结肠粘膜层，一般不入血 表现： 急性： 潜伏期数小时至7d 发热、腹痛、腹泻、里急后重、粘液脓血便 中毒性菌痢 慢性：病程迁移二月以上 免疫性 免疫期短，不稳固,2019,-,29,中毒性痢疾病人,2019,-,30,微生物学检查,及时送/暂用3%甘油缓冲水保存,SS平板（无色透明小菌落）,血清学反应（玻片凝集）,明确诊断,分离培养,新鲜脓血便/肛拭,双糖培养基（生化反应）,快速诊断,荧光菌球试验,协同凝集试验,2019,-,31,防治原则,隔离患者、彻底治疗 切断传播途径 试用的口服菌苗： 链霉素依赖株重组活菌苗。双价疫苗，具有广谱保护作用。 磺胺药、氯霉素、青霉素、痢特灵等均有效，亦可选用环丙沙星、菌必治等,Handwashing after defecation is the best way to prevent the spread of shigellosis.,2019,-,32,是一群革兰阴性杆菌 菌种繁多，血清型超过2400个 多对动物致病 对人类致病的占少数 伤寒沙门菌 甲型副伤寒沙门菌 肖氏伤寒沙门菌 希氏伤寒沙门菌 动物沙门菌也可对人致病 肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌,第三节 沙门菌,2019,-,33,形态染色 G-杆菌 0.6-1.0m 2-4m 周身鞭毛，有菌毛 培养和生化反应 兼性厌氧 营养要求不高 不分解乳糖,2019,-,34,抗原构造与分类,Vi抗原,2019,-,35,抵抗力 较差 水中能存活2-3W 粪便中可活1-2个月 冰冻土壤中可过冬 耐受胆盐、煌绿及其他染料 对热耐力差 5石炭酸5min杀死,2019,-,36,致病物质 侵袭力 菌毛、O和Vi抗原抗吞噬 内毒素 引起体温升高、白细胞数下降。大剂量可导致中毒和休克 炎症 肠毒素 某些沙门菌如鼠伤寒沙门菌,2019,-,37,所致疾病-人类沙门菌病,肠热症 伤寒、副伤寒 伤寒、甲型副伤寒、肖氏、希氏沙门菌引起 胃肠炎（食物中毒） 鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、猪霍乱沙门菌 败血症 鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、猪霍乱沙门菌、希氏沙门菌 无症状带菌者,2019,-,38,肠热症,伤寒沙门菌 副伤寒沙门菌,肠系膜淋巴结,（潜伏期）,胸导管,菌血症,全身疼痛、不适、发热（前驱期）,肝、脾、肾及胆囊等,吞噬细胞吞噬,菌血症,持续高热、肝脾肿大、全身中毒、玫瑰疹 （发病的第1W）,胆囊,粪便,进入肠壁淋巴组织,孤立和集合淋巴结坏死溃疡,肾脏,尿,2-3W,（典型病例病程为3-4W）,并发症：肠穿孔、血栓性静脉炎、胆囊炎,2019,-,39,伤寒,伤寒表现： 持续高热 伤寒病容 玫瑰疹 肝脾肿大 相对缓脉,Thomsons theories on typhoid, a major killer, were derided.,2019,-,40,所致疾病-人类沙门菌病,肠热症 伤寒、副伤寒 伤寒、甲型副伤寒、肖氏、希氏沙门菌引起 胃肠炎（食物中毒） 鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、猪霍乱沙门菌 败血症 鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、猪霍乱沙门菌、希氏沙门菌 无症状带菌者,2019,-,41,免 疫 性,肠热症后，能获得牢固免疫 即使发生，症状也轻，很少发生再感染 细胞免疫较重要,2019,-,42,微生物学检查法,标本 胃肠炎取粪便呕吐物或可疑食物 肠热症在病程不同阶段采取不同标本：第1w取血和骨髓；第2w后取粪便、尿 分离培养和鉴定 血液和骨髓穿刺液先增菌培养 粪、尿（沉渣）可直接接种选择培养基。置37 24h；挑选可疑菌落，生化反应和血清学鉴定 血清学诊断 肥达反应 带菌者检查,2019,-,43,肥达反应（Widal reaction） 用已知伤寒沙门菌O、H和甲型副沙寒沙门菌和肖氏沙门菌H抗原与病人血清做定量凝集试验，用以辅助诊断肠热症。,Georges Widal in 1896.,2019,-,44,判定结果时，应着重考虑： 正常凝集价 伤寒沙门菌O抗体的凝集价应在1：80以上，H抗体凝集价在1：160以上 甲型副伤寒、肖氏沙门菌H抗体凝集价在1：80以上 动态观察 O与H抗体的诊断意义 其他少数病例,2019,-,45,H与O抗体的性质及其消长意义,2019,-,46,判定结果时，应着重考虑： 正常凝集价 伤寒沙门菌O抗体的凝集价应在1：80以上，H抗体凝集价在1：160以上 甲型副伤寒、肖氏沙门菌H抗体凝集价在1：80以上 动态观察 O与H抗体的诊断意义 其他少数病例,2019,-,47,防治原则,加强水源和食品卫生管理 疫苗 伤寒、甲及乙型副伤寒3联菌苗（死菌苗） Ty2la伤寒沙门菌口服活菌苗，有显著保护作用，有效期可达3年 伤寒Vi荚膜多糖疫苗 治疗 以氯霉素效果较好,2019,-,48,第四节 霍乱弧菌 V.cholerae,弧菌属细菌的特点： 菌体短小，弯曲成弧形，革兰阴性菌 广布于自然界，水表面最多 氧化酶试验阳性 有单鞭毛,2019,-,49,2019,-,50,与人类感染有关的主要弧菌,2019,-,51,形态与染色 G- 弧形或逗点状 周身菌毛 ，有荚膜，无芽胞 单鞭毛，运动活泼 直接染色镜检，可见排列如“鱼群”状； 悬滴观察，可见穿梭运动,2019,-,52,培养 兼性厌氧 营养要求不高 耐碱不耐酸 喜pH8.0-9.0碱性环境 pH8.4碱性蛋白胨水（选择培养基） 生化反应 发酵甘露醇及蔗糖，缓慢发酵乳糖 霍乱红反应阳性，不同生物型生化反应不同,2019,-,53,抗原结构与分型,O1血清群,古典生物型Classical biotype,El Tor生物型El Torbiotype,6次霍乱大流行,西奈半岛 El Tor地区发现 第7次霍乱大流行,O139群： 1992年印度分离，流行于南亚和东南亚,2019,-,54,致病物质 鞭毛、菌毛及其他毒力因子 靠鞭毛运动，穿过粘液层 粘附于肠壁上皮细胞刷状缘的微绒毛上 霍乱肠毒素,2019,-,55,霍乱肠毒素（cholera toxin） 强烈的致泻作用 为聚合蛋白，由 1个A亚单位和5个B亚单位以共价键结合 A1为毒性部分,A2为连接部分 B是结合部分，与小肠粘膜上皮细胞膜受体（神经节苷脂GMI）结合,2019,-,56,霍乱肠毒素的作用机制,2019,-,57,传染源：患者及带菌者 人类是唯一易感者 摄入108-1010个细菌可造成感染，引起霍乱 传播途径： 经水传播 经食物传播 经生活接触传播 经苍蝇传播,霍乱： 一种残忍的瘟疫,2019,-,58,2019,-,59,霍乱,剧烈的喷射状呕吐 休克、电解质紊乱及酸中毒 腹泻物呈米泔水样 不治疗，死亡率达60%,2019,-,60,免疫性,可获得牢固的免疫力，很少再感染 血流中抗毒素、抗菌抗体、局部sIgA,2019,-,61,微生物学检查法,对首例病人应快速准确诊断，并及时报告，迅速采取防治措施，扑灭疫情。 直接镜检： 取米泔水样粪便作悬滴法检查 G-弧菌 分离培养： pH8.0-9.0的碱性蛋白胨水或琼脂平板。 镜检、生化反应、血清学试验、肠毒素 快速诊断：荧光菌球检查法、SPA协同凝集试验,2019,-,62,尽早隔离治疗 及时检出病人 治疗时适当补液和纠酸 应用抗生素缩短排菌期，减少霍乱毒素 切断传播途径 对粪便及呕吐物处理，防污染 保护易感人群 皮下接种死菌苗 口服减毒活疫苗保护率可达82-近100,防治原则,2019,-,63,第五节 副溶血性弧菌 Vparahemolyticus,形态染色 G- 一端有单鞭毛 培养 嗜盐 3.5-4.5NaCl最适 营养要求不高,2019,-,64,致病性,致病机制不清 溶血毒素 绝大多数致病性副溶血性弧菌能产生 使人或家兔的红细胞溶解 该毒素也具有肠道毒性 耐热相关溶血素,2019,-,65,所致疾病：食物中毒 夏秋季多发，病程短，恢复快 腹痛、腹泻，呕吐及发热 水便、血便 免疫性： 病后免疫力不强 可重复感染,血水样便,2019,-,66,微生物检查法 分离培养：SS琼脂平板、嗜盐菌选择平板 嗜盐性试验、生化反应、诊断血清 快速诊断：探针杂交、PCR 治疗 抗菌药 如庆大霉素或复方SMZ等 严