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文档简介
七、影响缺氧耐受性的因素【实验目的】1观察中枢神经系统功能状态、外界环境温度及CO2浓度增高,以及预适应对机体缺氧耐受性的影响。2探讨条件因素在缺氧发病中的重要性和临床应用冬眠疗法,低温疗法及预适应研究的实用意义。【实验原理】机体对缺氧的耐受性除受缺氧程度和发生速度影响外,还与其他许多因素有关。本实验通过给予小白鼠中枢兴奋剂和抑制剂,改变中枢神经系统的功能代谢状态,观测动物的代谢耗氧量及存活时间,并通过计算代谢耗氧率,探讨中枢神经系统功能状况不同对缺氧耐受性的影响。通过改变小白鼠所处的环境温度,观测高温与低温情况下小白鼠的代谢耗氧量和存活时间,并通过计算代谢耗氧率,探讨温度对缺氧耐受性的影响。通过增加环境中CO2浓度,观测小白鼠在高浓度CO2情况下的代谢耗氧量和存活时间,计算代谢耗氧率以探讨环境中CO2浓度对小白鼠缺氧耐受性的影响。通过三次预缺氧实验,检测同样指标,观察预适应对缺氧耐受性的影响。【实验动物】小白鼠,相同性别、相同年龄段、体重近似。【实验药品及器材】1咖啡因,0.25氯丙嗪,生理盐水,钠石灰,碎冰块,无氧水(用时临时配制);小臼鼠缺氧瓶和测耗氧量装置,1ml、5ml注射器,粗天平,1000ml烧杯。【实验步骤与观察指标】1机体状况对缺氧耐受性的影响。取小白鼠3只,分别作如下处理:甲鼠,腹腔注射1咖啡因10mlkg;乙鼠,腹腔注射025氯丙嗪10m1kg,待动物安静后;丙鼠,腹腔注射生理盐水10mlkg。约1520min后,将3只小白鼠分别放入盛有钠石灰的缺氧瓶中(瓶中钠石灰大约5g),观察动物一般表现(呼吸,唇色,活动等),密闭后开始计时。持续观察各鼠在瓶中的活动情况,待小鼠死亡后,准确计算存活时间(t)。用测耗氧量装置测量小鼠的耗氧量(见附录及图示)。按下公式计算小白鼠的耗氧率(R):耗氧率ml/(g.min)=耗氧量/体重(g)/存活时间 (公式12-2)2环境温度对缺氧耐受性的影响。取小白鼠缺氧瓶3只,分别放人钠石灰约5g。取1000m1烧杯2个,一个加入碎冰块和冷水,将杯内水温调至0-4,另一个加入热水,将温度调至4042。取体重相近的小白鼠3只,称重后分别装入缺氧瓶内,两只缺氧瓶分别放入盛有冰水和热水的烧杯内,另一只置室温中,观察动物的一般表现、呼吸等,塞紧瓶塞开始计时。持续观察各鼠在瓶中的活动情况,待小鼠死亡后,计算存活时间(t),并立即从烧杯内取出缺氧瓶,置室温中平衡15min。以下方法同1的(4)步骤。3CO2浓度增高对缺氧耐受性的影响。取小白鼠2只,称重后分别放人有钠石灰和无钠石灰的缺氧瓶内,密闭后开始计时。以下方法同1的(3)、(4)步骤。4预缺氧对缺氧耐受性的影响。取小白鼠2只,称重后分别放入有钠石灰的缺氧瓶内,密闭后开始计时,记录其中1只出现喘息、直至死亡的时间。另1小鼠当出现剧烈喘息呼吸时,记录喘息出现的时间,立即将瓶塞打开,恢复常氧15分钟,然后盖紧瓶塞,进行第二次同样的缺氧实验,恢复10分钟后,进行第三次缺氧实验,恢复10分钟后,进行第四次缺氧,直至小鼠死亡,同样记录小鼠出现喘息的时间及直至死亡的时间。以下方法同1的(4)步骤。【实验结果】(一)中枢神经系统状态1号鼠 咖啡因2号鼠 氯丙嗪3号鼠 盐水对照(二)环境温度1号鼠 042号鼠 40423号鼠 室 温(三)CO2 1号鼠 有钠石灰2号鼠 无钠石灰(四)缺氧预适应1号鼠 第一次预缺氧第二次预缺氧第三次预缺氧第四次缺氧2号鼠【注意事项】1.缺氧瓶一定要密闭。2咖啡因、氯丙嗪注射后,一定待药物发挥作用后进行实验。3放在冰水和热水中的两只缺氧瓶须放在室温下平衡15min左右才测耗氧量。4各组小白鼠的性别、体重以及一般状态应尽可能相近。附录:用测耗氧量装置测定小白鼠的总耗氧量1原理 小白鼠在密闭的缺氧瓶内不断消耗氧气,而产生的C02又被钠石灰吸收,瓶内氧分压逐渐降低而产生负压,当缺氧瓶与测耗氧量的量筒相连时,量筒内与缺氧瓶相通,移液管内液面因瓶内负压吸引而上升,此时,移液管内液面上升的毫升数即为小白鼠消耗氧的量。2方法与步骤向量筒内充水至适当高度,将有刻度的移液管一端浸入盛水的量筒内,使移液管管中液体达平衡位置,记下零参考点,然后将另一端与缺氧瓶塞上的橡皮管相连,。打开橡皮管上的螺旋夹,待移液管内水平面上升稳定后,从移液管读出液面从参考零点上升的ml数,即为小白鼠的总耗氧量(A)。【思考题】1中枢神经系统
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