TAHFIA 005-2018 植物提取物及其制品中总多酚含量的测定 分光光度法.doc

T/AHFIA安徽省食品行业协会团体标准T/AHFIA 0052018植物提取物及其制品中总多酚含量的测定 分光光度法Determination of total polyphenol in plant extracts and its products Spectrophotometric method2018 - 12 - 26发布2019 - 01 - 15实施安徽省食品行业协会发布T/AHFIA 0052018 前言本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。本标准由安徽省食品行业协会提出并归口。本标准起草单位：安徽瑞思威尔科技有限公司、安徽古井贡酒股份有限公司、安徽润安信科检测科技有限公司。本标准主要起草人：陆玮、刘国英、刘智慧、李安军、王玉良、何宏魁、王录、芮君君、杨恩贺。IT/AHFIA 0052018植物提取物及其制品中总多酚含量的测定 分光光度法A1 范围本标准规定了植物提取物及其制品中总多酚含量的测定 分光光度法。本标准适用于药食同源植物提取物、以提取物为基本原料的相关制品总多酚含量的测定。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法3 方法原理本标准采用福林酚分光光度法测定植物提取物及其制品中的总多酚含量。酚类化合物在碱性条件下将磷钨钼酸还原，生成蓝色的化合物，在一定浓度范围内，吸光度与酚类化合物的含量成正比，符合朗伯-比尔定律。4 试剂与材料4.1 试剂4.1.1 无水乙醇：分析纯。4.1.2 福林酚试剂：分析纯。4.1.3 碳酸钠：分析纯。4.1.4 水为符合 GB/T 6682 规定的一级水。4.2 试剂配制4.2.1 碳酸钠溶液（15%）：精确称取15 g无水碳酸钠，用水溶解定容至100 mL。4.2.2 乙醇溶液（60%）：量取600 mL无水乙醇，用水溶解定容至1000 mL。 4.3 标准品没食子酸（C7H6O5，CAS号：149-91-7），纯度 99.0%。4.4 没食子酸标准储备液配制 准确称取20 mg（精确至0.1 mg）没食子酸标准品，用蒸馏水溶解定容至100 mL，此溶液中没食子酸含量为200 mg/L。于4冰箱中避光保存。5 仪器与设备5.1 紫外可见分光光度计：配1 cm比色皿。5.2 分析天平：感量0.1 mg。5.3 电热恒温水浴锅：0100。6 分析步骤6.1 试样制备6.1.1 植物提取物试样吸取5 mL提取液于100 mL烧杯中，加入30 mL60%乙醇溶液，超声10min，以60%乙醇溶液定容至50 mL容量瓶，摇匀，过滤，待测。6.1.2 植物提取物制品试样准确量取40 mL液体于50 mL具塞离心管中，离心，取上清液备用。当上清液基质较复杂时，需过滤至澄清液备用。6.2 仪器条件6.2.1 测定波长：778 nm。6.2.2 比色皿：1 cm。6.3 标准曲线的制作准确吸取没食子酸标准储备液（4.4）0.0，0.2，0.4，0.6，1.0，1.5 mL分别置于10 mL容量瓶中，用60%乙醇溶液（4.2.2）定容，得到没食子酸工作液。然后分别移取没食子酸工作液1.0 mL于10 mL比色管中，加入2.5 mL福林酚试剂（4.1.2），摇匀，加入2.5 mL15%Na2CO3溶液（4.2.1），加水定容至刻度，摇匀。在40水浴60min，静置冷却20min。配制成浓度为0 mg/L、4 mg/L、8 mg/L、12 mg/L、20 mg/L、30 mg/L的标准系列，测定其吸光度值。以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。6.4 试样溶液的测定吸取1.0 mL滤液于10 mL比色管中，加入2.5 mL福林酚试剂（4.1.2），摇匀，加入2.5 mL15%Na2CO3溶液（4.2.1），加水定容至刻度，摇匀。在40水浴60min，静置冷却20min，测定其吸光度值。根据标准曲线计算待测液中总多酚的浓度。7 分析结果表述总多酚的含量按式（1）计算： （1） 式中： X 样品中总多酚的含量，单位为毫克每升（mg/L）； c 由标准曲线计算得出的待测液中总多酚的含量，单