血液尿液标本的采集ppt课件

一、血培养标本采集、运送与处理,血培养是进行血流感染诊断的最佳手段,目前血培养常见问题：,采血时机不合适 采血套数不够 采血量不足 只做需氧培养，不同时做厌氧培养 采血前或采血时正在使用抗生素治疗,（一）血培养检测采血指征 临床上疑为败血症、脓毒血症或其他血液感染的患者 1. 发热（38）或低温（36） 2. 寒战 3. 白细胞增多（10109/L，特别有“核左移”未成熟的或杆状核白细胞增多） 4. 粒细胞减少（成熟的多核白细胞1109/L） 5. 血小板减少 6黏膜损伤性疾病 7昏迷，休克 8多器官衰竭,（一）血培养检测采血指征 9. CRP升高 10.呼吸频率加快 11.严重的局部感染(脑膜炎，心内膜炎，肺炎，肾盂肾炎， 腹部术后感染，) 12.心率异常加快 13.化脓性病灶或损坏 14.糖尿病、艾滋病 15.肝脏疾病、血液疾病及恶性肿瘤 16.长期输液或导管介入疾病、血液透析患者 17.对入院危重感染患者未进行系统性抗菌药物治疗之前，应及时采集血培养。,0,30,60,时间 (分钟),体温,血培养采血时机,细菌浓度,抗菌药物治疗前或更换抗菌药物前，一般寒战或体温高峰到来之前0.5-1小时采集血液，或于寒战或发烧后1小时内进行。,在患者接受抗生素治疗前采血 尽可能在患者寒战或开始发热时采血 如患者已经应用抗菌药物进行治疗，应在下一次用药之前采血培养,血培养采血时机,表皮葡萄球菌的临床意义,23套血培养，有助于污染的判断。,Tokars, JI. Clin Infect Dis 2004; 39:333,污染菌,致病菌,？,采集1套无法判断是病原菌还是污染菌。,CLSI规范： 每次采集23套标本，每套应包括一个需氧瓶和一个厌氧瓶 卫生部要求： 血培养送检至少为双套双瓶（ “双瓶双侧”） 双套-两部位采血，左右两侧手臂（可排除污染） 单侧表皮葡萄球菌多数为污染 双瓶-需氧瓶和厌氧瓶（可提高阳性率） 兼性厌氧菌在厌氧瓶内能生长,（二）采血套数及部位,所谓“双瓶双侧”，是指从一个部位采血接种一套培养瓶，再从另一部位采血接种另一套培养瓶。（通常是双臂） 所谓“双侧双瓶”，是指从一个部位采血接种一个需氧瓶，再从另一部位采血接种另一个厌氧瓶。 一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单个血培养。,BD公司吸附抗生素普通血培养瓶（酒瓶状）和梅里埃公司吸附抗生素普通血培养瓶各1瓶为1个组合（双侧各1瓶）” 厌氧瓶1瓶对应申请项目为“血厌氧菌培养”。 儿童普通血培养可采集1瓶血，对应申请项目为“儿童血培养+药敏”。,本科：双侧三瓶,采集部位 要求：两个需氧瓶应在不同部位采集（双臂或上下肢）；1个厌氧瓶可与任1需氧瓶在同1侧采集。采样前，在瓶上空白处注明采集部位（左或右，上或下肢等）、采集时间。必要时从下肢静脉采血做第三套血培养。 说明：不建议采集 （1）动脉血，因其诊断价值没有比静脉血更大； （2）静脉留置导管，因其常伴有高污染率。如果考虑导管相关性感染 ，选择2个相同血培养瓶，分别从静脉导管和另1侧静脉采取血液，并标明那瓶为导管血、那瓶为静脉血。,（三）血培养标本采集和运送 1.消毒： 皮肤消毒： 70%的酒精清洁局部；10%碘伏拭子从穿刺点由中央向外画圈消毒；消毒区域直径达3cm以上；待碘伏干燥；行静脉穿刺。 培养瓶消毒： （1）用75%酒精消毒血培养瓶橡皮塞，作用60秒。 （2）用无菌纱布或无菌棉签清除橡皮塞表面剩余的酒精，然后注入血液。 血培养可接受的污染率通常是3%。,2.采血量 成人： 810ml/瓶； 儿童：13ml/瓶。 婴幼儿每瓶不少于2ml。 儿童患者因为血液中病原菌浓度较高，血培养量无需等同于成人。,菌血症病人血中细菌浓度,成年病人: 链球菌心内膜炎 1 to 30 organisms/ml 葡萄球菌心内膜炎 1 to 20 organisms/ml 革兰氏阴性菌血症 少于 1 to 10 organisms/ml 革兰氏阳性菌血症 1 to 300 organisms/ml 幼儿病人: 革兰氏阴性菌血症 5 to 1000 organisms/ml 75%幼儿菌血症病人血液有 100 organisms/ml Infect Dis Clinics N Amer 2001;15:1009 所以采血量一定要足够！,采血量(ml)与检出率的关系,Overall,血培养物每增加一毫升，真性菌血症 成年人微生物的检出率增加3,但并非越多越好，超过一定数量的采血量会稀释培养瓶内的肉汤，使肉汤无法有效中和血中的抑制物质（补体、抗体、抗生素）。所以血液与肉汤的最佳比例为1：41：10,3.血液标本在需氧瓶和厌氧瓶中的分配 如使用蝶形针采血，应先放血至需氧瓶中，再放血至厌氧瓶，完成厌氧瓶采集后，先拔出与瓶口相连的针头，再拔出插入静脉的针头，不要将连接采血针塑料管中的残余血放入厌氧瓶中； 如使用针管采集，采集2瓶血的总量后，拔出针管排去空气，先注入厌氧瓶（注意不要将空气注入），再将剩余血注入需氧瓶。 用头皮针连接针管为新生儿和婴儿取血时，应更换针头再将血液注入培养瓶中。 拔出针头后用无菌棉签按压采血部位的静脉，同时轻摇血培养瓶。,4.血培养标本的运送 血培养瓶采集血液前后均无需冷藏，室温保存 即可。采集后尽快送检，如不能及时送检，常 温储存不超过24小时（不要冷藏）。,5.血培养瓶的装载 检查血培养瓶上是否注明左右侧或不同穿刺点 采集血液标本，未注明的标本，在申请单上写 “未”，已注明在申请单不同采集瓶的条形码边 注明采集部位。 6.血培养的培养周期 5天 有研究表明，95%-97%的有临床价值的细菌会在3-4天内被自动血培养系统检出。,五、尿标本的采集、运送和处理,正常人尿液是无菌的，而尿液细菌培养最大的问题是杂菌污染。正常人外尿道有大肠杆菌、葡萄球菌等存在。而这些细菌又是尿路感染中常见的病原菌。因此要作好尿液细菌学检查，首先应注意标本收集问题。 尿液经尿道排出时会受到尿道内正常菌群的污染,但定量培养时计数不会超过103CFU /m l, 泌尿系感染时定量培养在104105CFU /m l 。 另外,由于绝大多数的泌尿系感染是由肠杆菌科细菌引起,而此类细菌的硝酸盐还原实验为阳性,故可参考尿检查常规中的硝酸盐还原实验来推断是否有细菌感染。,（一）采集方法 标本采集应在使用抗生素之前，避免使用防腐剂和消毒剂。 1清洁中段尿 女性患者收集尿液前，必须先用肥皂及清水洗手，待手干后留尿。在收集尿液前用肥皂及清水，或是沾有肥皂水的干净纱布清洗尿道口。收集尿样时用手将阴唇分开。男性患者清洗阴茎，未做包皮环切手术的患者须翻开包皮，然后用肥皂水清洗。弃去先排出的少许尿液( 不要停止排尿 ) ，收集中段尿送检。 2耻骨上膀胱穿刺 穿刺之前，患者须先憋尿，直到膀胱产生膨胀感； 清洁并消毒耻骨上方覆盖膀胱的皮肤； 用注射器针头插入膀胱内取得尿液标本；收集1 ml尿液。做厌氧菌培养：立即排尽空针及针头内的气体，将针头插入无菌橡皮塞内送检。 是评估膀胱内细菌感染的“金标准”方法，主要用于厌氧菌培养或留取标本困难的婴儿尿标本的采集。,3导尿 导尿之前，患者须先憋尿，直到膀胱产生膨胀感；采集标本前先用肥皂清洗尿道口及女性的阴道前腔，再以清水仔细清洗；用无菌操作技术，将导管放入膀胱内；丢弃最初的1530ml尿液，然后收集1 ml尿液。 4导管尿 夹住导尿管下端1020min；采集前用70酒精清洁导管上部穿刺部位；将注射器针头插入导尿管抽出1 ml尿液。长期留置导尿管者，应在更换新导尿管后留取尿标本。不可从集尿袋的下端管口留取标本。,（一）采集方法,5.尿沉渣找抗酸杆菌 在一清洁广口容器中留24小时尿，静置67小时，缓缓倒去上清，不要让沉淀翻起，取沉淀1020ml，放入清洁密闭螺旋口带盖容器中送检。,（一）采集方法,（二）采集时间,最好在抗菌药物治疗前或停用抗菌药物5天之后留取。以清晨的第一次尿为好（尿液在膀胱内停留68 小时以上），最低要求距上一次排尿2小时（尿急尿频者酌情考虑间隔时间）。长期留置导尿管者，应在更换新尿管