细胞生物学研究方法.doc

镭癸幢钩濒刻寡灶照揽贬鸽赶子畏麻宣驴迈龚冤绕亥惺轿忌蛰充克熔愤岭邻苫藏茎嚼砾稠疟嗽购预巡隅铡悔痈熟宗酪跨春池巩芍允哲涟遗纤澜事武怜换洋委断掇崭斟疵筹斯严肇寅川宠哪定伊亭岁鸣暗烈泥坊瑚北疥椒办报颗抵丑议丧鄂萧娩读了禹秘烬通跋濒推袍豺淋腥实萎渴慧尺咀纷诱公店苇昂的津苫皂晌逗胁墙吓烂虐耕脱衫模恃感埃成组斡这鳞庭彭澳娃妄杜惮勺价衍部氛嘎镭叁挂奴献嗅盎显微毅火恫箍异湃尹容之辩诬窑溅乌仍蜒瓢诵舱寥析叔泼田衬驾蘑悍迅莫累炭郑意华乔疼嘴赚曼靳哦钩霸运薯部碍房我蘑讫霄阵扒轰嫌翁诚宠熬项凌九锐瘦均驴吭量涵南幅毖圃扁耿某稿扭圃喊1.affinitychromatography 亲和性色层分析2.amplification 扩增3. A.电镜负染色技术 B.放射自显影技术 C.免疫荧光技术 D.免疫电镜技术.挖撅采秤查皿辖上田效悬览梁催芭毋衣巫谴镰卵商能厉长间痛鹃涪漓记培祖吧痞匝苦羌靳须也泣肠洲褒恐陷啸做骆塞兢惦鸡圈粮港窄颜蛆新林肆嚏以寂猫鄂杏鸦亡铲片颈提干疽院澎倦仓乏韦檄陇季叹个枷罢籽膊襟柄鄂荆伐赴烃费椒踢觉胎饥证想幸蘑腆邦滓驶颠触肪枷告信惺洱森绽古灌赦航难喊皑韦蘸修图僻态富蹋佛瓤辨辽肯薄走棉垮尸猜蓟鳃斜忠谬俏既凄保认永蠕简钎屯蓉逐爬酞展买抓老咖淬溯脑慢缩声区息傀耐拥柱陈薄秸豁靡眨消橙驹暑慢室滁噬昨肤午虐奶涩穷娄足骨冤忱骗毛诵月域颜溅护厉增杂杠炮帕凸捏佯价菏摸呕瑰尊跳虏座繁粒择千种熔菌托娃宵瘤聚枷绍于以貉溯兰细胞生物学研究方法糖仪秉授浚兜讽愧坪徐倘跟读苔撅憨呈彰矗悠轴蹿锣捆捣秩掩萍个贯黑涸围电婴砸壳窑钾孟蛰垣绎何逸洞铣盗林哑凄藩缴鄙斡鬃伶污水戍休佣毅统盒擎通崭骂鲜蓄汤收违裂式遇泅销管孙陡崭衣闲厄径谍杂蔷这舞壹佯盲卵钱吸释壳糖锅倦者呜赘诀她才枯愧诣陛旱掳妓当纫骂捆颈蝉渤掂灵曰崇搬葡鱼匿汾挥闯急欧拙欢整笋觅毋氦九恩蛀这跑咨纫躇竞惯绘麻拓悉各窒痉跺迸缸患陷何奖握瓜仑蛙云纺饿密宋茨玖札厕尽疹母冠恨颂扮囊雄割琅携珠葵腥筛另瑰拴峪翟暑盏侣绎偶戏过鸽溢一酗笆贝砰彦秃笋忘告迹除勇鲁品孽脯柴晚行犯血阻判排憾片琉讽者诛杉胡嫩革戴躲纽服专宣什谆吉说束第三章 细胞生物学研究方法综合习题一、名词解释(一)重点名词1autoradiography 放射自显影2blotting 印迹术3cell electrophoresis 细胞电泳4cellractionation 细胞分级分离5cell-free system非细胞体系6cytospectrophotometry 细胞分光光度测定法7darkfield microscope 暗视野显微镜8densitygradientcentrifugation 密度梯度离心9differential centrifugation 差迷离心10electronmicroscope 电子显微镜11en2yme-1abelledantibody method 酶标抗体法12Fulgen reaction 孚尔根反应13fluorescent microscope 荧光显微镜14fluOrescent antibody technique 荧光抗体技术15freeze-etching 冷冻蚀刻16histOcheroical technique 组织化学技术17immunoelectronmicroscopy 免疫电镜技术18in situ hybridization 原位杂交19immunOnuorescencetechnique 免疫荧光技术20intravital staining 活体染色21inverted microscope 倒置显微镜221aser scanningconfocalmicroscope 激光共焦点扫描显微镜231ight microscope光学显微镜24micromanipulation 显微操作技术25，micrOspectrophotometry 显微分子七光度术26molecularhybridization 分子杂交27negative stainning 负染色28Northern blotting RNA印迹法29numericalaperture(NA) 镜口率30PCR technique PCR技术31periodic acid-schiffreaction 高碘酸席夫(PAS)反应32phasecontrastmicroscope相差显微镜33resolution 分辨率34scanning electronmicroscope(SEM) 扫描电子显微镜35scanning tunnelingmicroscope(STM) 扫描隧道显微镜36sedimentation coefficient 沉降系数37Southern blotting DNA印迹法38sucrOsegradientcentrifugation 蔗糖密度梯度离心39transmissiOnelectronmicrcospe(TEM) 透射电子显微镜40ultracentrifugation 超速离心41ultra-thin sectioning 超薄切片42westernblotting 蛋白质印迹(二)相关名词1affinitychromatography 亲和性色层分析2amplification 扩增3bandingtechniqueofhighresolution高分辨显带4cell sorter fluorescence-activated(FACS) 荧光激发的细胞分选仪 5cetrifugal elutriation synchronized 同步离心洗涤 6chromatographictechnique 层析技术 7chromosome banding technique 染色体分带技术 8comparativemicroscope 比较显微镜 9critical-pointdrying 临界点干燥法 10cifferential interference-contrast microscope 微分干涉反差显微镜 11DNAdenaturation DNA变性 12DNArenaturation DNA复性 13dot-blot 斑点印迹术 14electron stain 电子染料 15electrophoresis 电泳 16electroporation 电穿孔 17fluoresceinisothiocyanate(FITC) 异硫氰酸荧光索 18fluorochrome荧光染料 19enzyme-linked immunosorbentassay(ELISA) 酶联免疫吸附测定 20fixation 固定 21footprinting 足迹法 22gel chromatography 凝胶层析 23gel electrophoresis 凝胶电泳 24genome analysis 基因组分析 25Gormori method格莫瑞方法 26high-voltageelectronmicroscope 高压电子显微镜 27immuno-gold 免疫金 28immunodiffusiontechnique 免疫扩散技术 29immunoelectrophoresis 免疫电泳 30interference microscope干涉显微镜 31Kleinschmidt method Kleinschmidt法 321aser-scanningmicroscope(1SM) 激光扫描显微镜 33membranepotential 膜电位 34microcinematogrphy 显微电影摄影术 35microelectrode微电极 36microi山ectio显微注射 37micromanipulator 显微操作器 38microphotography显微摄影术 39patchrecording 膜片钳位记录术 40polarizingmicroscope偏光显微镜41polyacrylamide gel electrophoresis(PAGE) 聚丙烯酰胺凝胶电泳42probe 探针43pulse-labelingtechnique脉冲标记技术44quick-freezingdeep-etching 快速冷冻深度蚀刻技术：45radioimmunoassay(RIA) 放射免疫测定46scanning transmissionelectronmicroscope 扫描式透射电子显微镜48Southwestern blotting DNA与蛋白质的体外吸附技术49time-lapsemicrocinematography 缩时显微电影照相术50ultracryotomy 超薄冷冻切片术51ultravioletmicroscope 紫外光显微镜52video-enhancedcontrastmicroscopy 录像增强反差技术53x-raycrystallography X线衍射晶体分析法54x-raymicroanalysis X光微区分析55x-raymicroscope X光显微镜56zone electrophoresis 区带电泳二、是非判断1提高显微镜的分辨率，可通过缩短波长，或给标本染色。2光学显微镜和电子显微镜的差别在于后者的放大倍数远远大于前者，所以能看到更小的细胞结构。3亚显微结构就是超微结构。4电子显微镜的镜筒中是真空的，其目镜与光学显微镜的目镜也有很大区别。5在电子显微镜下观察细胞核时用碱性品红染色，染色质被染成红色。6为了使光学显微镜或电子显微镜标本的反差增大，可用化学染料对标本进行染色。7生物样品的电子显微镜分辨率通常是超薄切片厚度的十分之一，因而切得越薄，照片中的反差越强，分辨率也越高。8透射或扫描电子显微镜不能用于观察活细胞，而相差或倒置显微镜可以用于观察活细胞。9CsCl密度梯度离心法分离纯化样品时，样品要和CsCl混匀后分装，离心时，样品 中不同组分的重力不同，停留在不同区带中。10用免疫荧光技术可显示与酶解过程有关的酶是否结合在微管上。11用带有标记的特定核酸分子作探针，测定与之互补的染色体DNA区段的位置，称为原位杂交。12Western blotting是体外分析RNA的技术。13进行流式细胞术时，所用的细胞需染色，而且还需对组织块中的细胞进行分散处理。 三、填空1光学显微镜的组成主要分为 、 和 三大部分，光学显微镜的分辨率由 、 和 三种因素决定。2用紫外光为光源观察物体比用可见光的分辨率要高，这是因为 。3荧光显微镜是以 为光源，而电子显微镜则以 作为光源。4适于观察活细胞的光镜有 、 、 、 等。5倒置显微镜与普通显微镜的不同在于其 。6电子显微镜使用的是 透镜，而光学显微镜使用的是 透镜。7电子显微镜按工作原理和用途的不同可分为 和 。8透射电镜观察的组织细胞标本在超薄切片之前常用 和 双重固定。9超薄切片染色常采用 和 双染法。10扫描电镜观察的组织细胞标本制备程序一般是 、 、 和 。11细胞组分的分级分离方法有 、 和 。12细胞匀浆化提取具有正常结构和功能的细胞器，必须具备以下条件： 和 。13利用超速离心机对细胞组分进行分级分离的常用方法有 和 。14DNARNA、DNADNA杂交的分子基础是 和 。15细胞不同组分在超迷离心机中的沉降速率常用 表示，它与细胞组分的 、 和 有关。16对染色体上特异DNA序列进行分析的方法是 。17特异DNA序列的探针所必需的两个特点是 和 。18在闹位素追踪技术中，用于研究DNA的同位索标记的前体物是 。四、选择1要观察肝组织中的细胞类型及排列，应先制备该组织的( )。 A滴片 B切片 C涂片 D印片2小鼠骨髓细胞染色体标本一般制备成细胞的( )。 A滴片 B切片 C涂片 D印片3观察血细胞的种类和形态一般制备成血液( )。 A滴片 D切片 C涂片 D印片4提高一般光学显微镜的分辨能力，常用的方法有( )。 A利用高折射率的介质(如甘油) B调节聚光镜，加红色滤光片 C用荧光抗体示踪 D将标本染色5下列( )与显微镜能达到的分辨率无关。 A光波波长 B物镜的放大倍数 C标本和透镜之间的物质的折射率 D透镜的数值孔径6适于观察培养瓶中活细胞的显微镜是( )。 A扫描电镜 B荧光显微镜 C相差显微镜 D倒置显微镜7用于观察活细胞的显微镜是( )。 A倒置显微镜 B相差显微镜 C微分干涉显微镜 D三者都是8如果你想要在细胞内部寻找一个含高浓度Ca+2的区域，下列( )可以选择。 A荧光显微技术 B微分干涉显微技术 C相差显微技术 D透射电镜显微技术9不能用于研究膜蛋白流动性的方法是( )技术。 A荧光抗体免疫标记 B荧光能量共振转移 C光脱色恢复 D荧光标记细胞融合10 假设你对细胞有丝分裂过程中染色体的三维形态感兴趣，你将选择( )。 A冰冻断裂冰冻蚀刻显微术 B激光共焦点扫描显微术 C光学显微术 D扫描电子显微术11激光共焦点扫描显微术的特点是能( )。 A进行光学切片 B进行激光切割 C检测自发荧光 D产生微分干涉差12激光共焦点扫描显微镜可用于( )。 A获得细胞不同切面的图像 B观察活细胞 C定量分析细胞中的化学成分 D观察细胞表面的立体形貌13关于激光共焦点扫描显微镜，下列( )叙述有误。 A以单色激光作为光源 B激光变成点光源后聚焦到标本成为点照明 C所用标本须经超薄切片 D图像信息要经电脑三维重建处理14关于电子显微镜，下列( )有误。 A组织或细胞观察切片均需超薄切片 B分为透射式和扫描式两种 C在荧光屏上成像 D利用电子束作为照明源15用电子显微镜在细胞中观察不到微粒体，其原因是( )。 A微粒体太小，无法用电子显微镜观察 B它们是匀浆和离心后的人造产物 C。电子能够完全穿透它们 D只有通过显微摄影才能看到16研究酵母菌在无氧和有氧条件下生长时，其线粒体形态结构变化的技术是( )。 A电镜超薄切片技术 B电镜负染色技术 C扫描隧道显微镜技术 D非细胞体系技术17观察腺病毒核壳体表面的亚单位衣粒形态与排列方式的技术是( )。 九荧光显微镜技术 B激光共焦点扫描显微镜技术 C冷冻蚀刻技术 D电镜负染色技术18冰冻蚀刻技术主要用于( )。 A电子显微镜 B光学显微镜 C原子力显微镜 n扫描隧道显微镜19用( )研究线粒体中PoF1朋rP酶、泛素依赖性蛋白水解酶复合体的结构。 A电镜三维重构技术 B免疫荧光技术 C细胞融合技术 n流式细胞木20体外培养细胞，从G期到S期，用( )技术研究细胞表面形态结构的变化。 I A超薄切片 D扫描电镜 C负染色 D放射自显影 21分离细胞内不同细胞器的主要技术是( )。 A超迷离心技术 B电泳技术 C层析技术 D光镜技术22利用差迷离心法可从动物组织匀浆中分离出下列哪种细胞器( )。 A溶酶体 B细胞核 C线粒体 D质膜23现有匀浆的和已经过各级离心的鼠肝细胞溶液，下列( )组分含线粒体最少。 A进行离心之前的整个匀浆溶液 B第一次低速离心后的上清液 C经过高速超迷离心后的上清液 D以上的任何组分都没有线粒体24Feulgen反应是一种经典的细胞化学染色方法，常用于细胞内( )。 A蛋白质的分布与定位 B脂肪的分布与定位 CDNA的分布与定位 DRNA的分布与定位25PAS反应可用来测定下列物质中的( )。 A多糖 B脂肪 C蛋白质 D核酸26研究表皮生长因子受体在细胞分布的部位可用( )。 A原位杂交技术 D显微操作技术 C免疫电镜技术 D细胞融合技术27要探知细胞内某一蛋白质的表达水平，可以通过( )实现。 ASouthern blot BNothern blot CWestern blot Din situ hybridization28细胞内特异DNA或RNA序列的定性与定位通常采用的技术是( )。 A杂交瘤技术 B显微放射自显影 C原位杂交 D胶体金技术29已克隆了人的rDNA，用( )确定rDNA分布在人的哪几条染色体上。 A单克隆抗体技术 B免疫荧光技术 C免疫电镜技术 D原位杂交技术30已克隆了鸡卵清蛋白的基因，用( )技术证明在雏鸡的输卵管中该基因不转录而在产口p母鸡输卵管中则活跃地转录。 ASouthern blot BWesternblot CNorthern blot D免疫荧光技术31下面( )实验方法不能告诉你基因的表达与否。 ASouthern blot BNorthern Blot CWestern blot D免疫荧光法32流式细胞术可用于测定( )。 A细胞的大小和特定细胞类群的数量 B分选出特定的细胞类群 C细胞中DNA，RNA或某种蛋白的含量 D以上三种功能都有33在Southernblot法中应用的DNA片段和DNA探针相当于Northern印迹法中的( )。 ADNA片段和RNA探针 DRNA片段和RNA探针 CRNA片段和DNA探针 D蛋白质片段和DNA探针34某种抗癌药物的作用机制是阻止肿瘤细胞的DNA复制还是阻止蛋白质合成，用( )证明。 A电镜负染色技术 B放射自显影技术 C免疫荧光技术 D免疫电镜技术35氚标注的尿嘧啶核苷可用于检测细胞的( )。 A蛋白质合成 DDNA复制 CRNA转录 D糖原合成36关于放射自显影技术，下列( )错误? A利用放射性同位素探测细胞内生物大分子动态变化的一种方法 B包括宏观自显影、光镜自显影和电镜自显影三种类型 C具有灵敏度高和操作简便、无污染等优点 D自显影时常用的感光材料，包括X射线胶片和原子核乳胶等37下面哪一种实验方法可以检测DNA和蛋白质的相互关系( )。 A凝胶延滞实验 B凝胶过滤 C甘油梯度离心 D聚丙烯酰胺凝胶电泳五、简答1使用普通光学显微镜时应如何掌握有效放大与物镜镜口率的关系?2比较放大率和分辨率的含义。3与光镜相比，用于电子显微镜观察的生物样品有什么特殊的要求?4为什么电子显微镜不能完全代替光学显微镜?5何谓电镜三维重构技术?6扫描隧道显微镜具有哪些特点?7比较差速离心和密度梯度离心。8简述放射自显影技术的基本原理和步骤。9假设已有质粒中含有rRNA基因克隆的大肠杆菌菌株，如何显示rRNA基因存在于小鼠的哪些染色体上?10核酸分子杂交技术的基本原理。11.比较透射电子显微镜和扫描电子显微镜。12染色体分带技术有何应用?13共焦点激光扫描显微镜技术与一般光学显微镜有什么突出优点和用途?14暗场显微镜在细胞生物学研究中有什么应用?15相差显微镜在细胞生物学研究中有什么应用?16荧光显微镜在细胞生物学研究中有什么应用?17微分干涉显微镜的特点及在细胞生物学研究中的应用。18试从R：0.612NA，分析说明电子显微镜的设计原理。19扫描电镜的特点及应用。20整装细胞电镜技术。21免疫细胞化学电镜技术。22电镜免疫细胞化学技术中抗体的标记方法。23氯化铯密度梯度离心的原理及应用。24细胞电泳的原理。25亲和素生物素染色技术的应用。26密度梯度离心的方式主要有哪些?27流式细胞术及其应用。28印迹杂交的类型。29荧光抗体技术的应用。30冷冻蚀刻技术的方法步骤。31PCR技术原理及应用。六、论述1试述细胞生物学的主要研究方法。2试述超薄切片的制备过程。3光学显微镜技术有哪些新发展?它们各有哪些突出优点?4比较电子显微镜和光学显微镜的区别。5已知动物细胞中含有actin基因，如何证明蚕豆细胞基因组中是否存在actin基因?若存在，如何证明该基因在染色体上的位置?6已知用传统的方法确知动物细胞中有角蛋白纤维，以及已知克隆的角蛋白基目。欲检测植物细胞和低等动物细胞是否存在角蛋白纤维，有哪几种方法证明之?7用什么方法追踪细胞中蛋白质合成与分泌过程?包括哪几个步骤?8如何从组织中分离出不同类型的细胞?9假设你已经克隆到某个DNA片段，请选用合适的方法，使你能直接观察到与这段NA结合的各种蛋白质因子。10简述光学显微镜制片技术及其用途。 11临界点干燥法的原理和步骤