免疫与临床课件

,第七章 免疫与临床,曹元应,病原生物与免疫学,高职高专护理,知识要点,机体抗感染免疫 超敏反应 自身免疫病 免疫缺陷病 肿瘤免疫 移植免疫 免疫学防治及免疫学诊断。,学习目标,1.掌握抗感染免疫的概念、种类和特点； 2.掌握超敏反应概念、分型及各型临床常见疾病；能解释型超敏反应的发生机制； 3.掌握人工免疫的概念和种类；熟悉常用生物制品的种类和用途； 4.熟悉自身免疫病、免疫缺陷病概念及特点； 5.了解肿瘤免疫、移植免疫的概念和应用。 6.了解临床常用的免疫学检验技术。 7. 加强工作责任心，防止超敏反应的发生。,非特异性免疫（天然免疫）,特异性免疫（获得性免疫）,第一节 抗感染免疫,一、非特异性抗感染免疫,非特异性免疫:是机体在长期的种系发育和生物进化过程中逐渐形成的一种天然防御功能。 特点：生来就有，有遗传倾向，故又称为先天 性免疫； 人人都有，无个体差异； 作用无特异性。,大吞噬细胞,屏障机构,吞噬细胞,非特异性免疫的组成,先天免疫,皮与黏膜,血脑屏障,胎盘屏障,小吞噬细胞,体液因素,补体,溶菌酶,乙型溶素,（一）屏障结构作用,1、皮肤黏膜屏障,功能：抵抗病原体入侵的第一道防线,皮肤和黏膜的阻挡作用 黏膜上纤毛的清扫作用 皮肤分泌物的杀菌作用,2、血脑屏障：,作用: 阻止微生物及其代谢产物从血液进入大脑或脑脊液，从而保护中枢神经系统。,小儿血脑屏障发育不完善，因此，小儿较成人更易发生颅内感染。,3. 胎盘屏障：,组成：由于母体子宫内膜的基蜕膜和胎儿的绒毛膜 滋养层细胞共同构成。 作用: 防止母体血液中的病原体及其代谢物进入胎 儿，因此能保护胎儿免受感染。 注意：妊娠的前三个月胎盘屏障发育不完善，巨细胞病毒、风疹病毒等易经胎盘侵入胎儿体内，导致胎儿流产、畸形甚至死亡。,（二）固有免疫细胞作用,1.吞噬细胞 吞噬细胞种类： （1）大吞噬细胞：包括游走及固定类型的巨噬细胞和血液及淋巴管中的单核细胞，即单核-巨噬细胞系统。 （2）小吞噬细胞：即血液中的嗜中性粒细胞和嗜酸性粒细胞。,吞噬细胞的吞噬过程示意图,吞噬过程：吞噬细胞与病原菌接触 吞入病原菌 消化病原菌 病原菌杀灭、清除,吞噬结果： （1）完全吞噬：大多数细菌被吞噬细胞吞噬后，可被完全彻底的消化或杀灭。 （2）不完全吞噬：一些病毒和兼性细胞内寄生菌（如结核杆菌、布氏杆菌等），虽可被吞噬，但却不能被杀灭，称为不完全吞噬。 （3）造成组织损伤：吞噬细胞在吞噬过程中，有时向胞外释放多种溶酶体酶，破坏邻近组织细胞，损伤组织，如损伤肾小球基底膜，引起肾小球肾炎等。,2. NK细胞:非特异杀伤病原体 自然杀伤细胞无需抗原预先致敏，就可杀伤某些病毒或胞内寄生菌感染的靶细胞，因此可以在病原体感染的早期即体现杀伤功能；也可通过ADCC效应定向杀伤IgG、C3b、C4b特异性结合的病毒感染的靶细胞。,（三）免疫分子作用,正常人体血液、淋巴液等体液中存在多种杀菌物质，其中重要的有补体、干扰素、溶菌酶、乙型溶素等十多种。,概念,其实质是一种病理的免疫应答。,抗原,再次刺激,机体,过强免疫应答,组织损伤,或功能紊乱,变应原,超敏反应性疾病,第二节 超敏反应,超敏反应:是指机体再次接受相同抗原刺激时所发生的一种以生理功能紊乱或组织细胞损伤为主的病理性免疫应答，亦称变态反应。,分类,型超敏反应 速发型超敏反应（IgE） 型超敏反应细胞毒型（IgG，细胞溶解型） 型超敏反应免疫复合物型（IgG） 型超敏反应迟发型超敏反应（TH1,TC）,一、型超敏反应,特点： 发生快，但消退也快； 具有明显个体差异和遗传倾向； 主要由特异性抗体IgE介导； 以生理功能紊乱为主，一般不发生组织细胞损伤。,（一）参与超敏反应的物质和细胞,1.变应原：吸入性、食入性抗原及药物、动物血清等； 2.抗体：IgE 3.肥大细胞和嗜碱性粒细胞 4.嗜酸性粒细胞 5.生物活性介质：组胺 激肽原酶激肽 酸性粒细胞趋化因子 白三烯 前列腺素,吸入性变应原 - 花粉、尘螨及其代谢产 物、真菌菌丝及孢子，昆虫毒液、动物皮毛； 食物性变应原 - 奶、蛋、鱼虾、蟹贝、 防腐剂、添加剂等； 某些药物或化学物质 - 青霉素、磺胺、 普鲁卡因、有机碘等；,某些药物或化学物质,组织蛋白,变应原,吸入性变应原 花粉 尘螨或其排泄物 真菌或其孢子 动物皮屑或羽毛,药物 青霉素 磺胺 普鲁卡因 有机碘化物,食入性变应原,常见I型过敏原,昆虫及其毒液,(二)I型超敏反应的发生机制,I型超敏反应的发生机制,2019/4/11,（三）临床常见疾病,1.过敏性休克,2呼吸道过敏反应,3消化道过敏反应,4皮肤过敏反应,1.过敏性休克,药物过敏性休克,血清过敏性休克,抗生素：以青霉素引发最为常见，此外头孢菌素、 链霉素等也可引起。,某些麻醉药物：如利多卡因和普鲁卡因等。,生物制剂：如临床应用动物免疫血清如破伤风抗毒 素、白喉抗毒素等。,食用鱼、虾、蛋等食物后引起。,2呼吸道过敏反应：,吸入花粉、尘螨、真菌孢子、动物皮屑出现过敏性鼻炎或 支气管哮喘。,3消化道过敏反应：,4皮肤过敏反应：,见于接触食物、药物、花粉或寄生虫后出现，主要表现为荨麻疹、湿疹、血管神经性水肿。,2019/4/11,湿 疹,常见疾病,荨麻疹,（四）I型超敏反应的防治原则,2.脱敏治疗和减敏疗法,3.药物治疗,1.查明变应原，避免接触,青霉素皮试,动物免疫血清皮试,含25u/ml的青霉素 0.1ml,前臂屈侧皮内,1530分钟,红肿0.1cm 注射部位痒 全身不适,阳性,1：100稀释的 抗毒素0.1ml,前臂屈侧皮内,2019/4/11,方法：采用小量(0.1ml、0.2ml、0.3ml),短间隔 （2030分钟）、多次注射； 原理：微量变应原进入机体 与致敏靶细胞上的IgE 结合释放少量的生物活性物质，不足以引起 明显的临床症状，经多次注射逐渐消耗了致 敏靶细胞，使机体处暂时的脱敏状态。 应用：外毒素所致疾病危及生命又对抗毒素血清过 敏者。,脱敏疗法,2019/4/11,方法：采用微量(g、ng)，长间隔、逐渐增量、反复 多次皮下注射。 原理：诱导机体产生IgG抗体，阻止变应原与IgE结合 应用：已查明且难以避免接触的环境中抗原如尘土、花 粉、螨虫、霉菌类等的病人。,减敏疗法,2019/4/11,药 物 治 疗,抑制免疫功能的药物 地塞米松、氢化可的松等； 抑制生物活性介质释放的药物 (1)色苷酸二钠 - 稳定肥大细胞膜，阻止脱颗粒 (2)肾上腺素、异丙肾上腺素、儿茶酚胺类、前列腺 素E和氨茶碱 - 提高细胞内cAMP的浓度 生物活性介质拮抗剂 (1)组胺拮抗剂 - 苯海拉明、扑尔敏、异丙嗪等 (2)缓激肽拮抗剂 - 水杨酸 (3)多根皮苷酊磷酸盐 - 白三烯拮抗剂 改善效应器反应性的药物 肾上腺素,二、II型超敏反应,又称细胞毒型或细胞溶解型超敏反应。是由IgG或IgM类抗体与靶细胞表面相应抗原结合后，在补体、吞噬细胞及NK细胞等参与下，引起的以细胞溶解或组织损伤为主的病理性免疫反应。 靶细胞主要是血细胞和某些自身组织细胞； 抗体主要为IgG或IgM； 补体、巨噬细胞和NK细胞参与反应，使靶细胞破坏。 多数有个体差异（输血反应除外）,特点,2019/4/11,参与型超敏反应的成分 1.抗原-常为细胞性抗原 2.抗体 - 调理性抗体，主要为IgG和IgM 3.效应细胞和分子 - 补体、吞噬细胞、NK细胞 损伤细胞机制 1.激活补体的经典途径 2.促进吞噬细胞的吞噬作用（调理作用） 3.ADCC作用,2019/4/11,（一）发生机制,靶细胞表面抗原：血细胞表面的同种异型抗原、外源性抗原与正常组织间具有的共同抗原、改变的自身抗原、结合在细胞表面的抗原表位或抗原抗体复合物。,型超敏反应发生机制,输血反应,新生儿溶血症,自身免疫性溶血性贫血,药物过敏性血细胞减少症,甲状腺功能亢进,（二）临床常见的疾病,肺出血-肾炎综合征,2019/4/11,1.输血反应,输入异型血液后，因人体血液中有天然ABO血型抗体，可形成Ag-Ab复合物，激活补体破坏红细胞。,血型 Ag Ab/血清 A A-Ag B-Ab B B-Ag A-Ab AB A、B-Ag none O H A-Ab、B-Ab,由母子血型抗原不同引起（主要是Rh血型不符所致），发生于孕妇为Rh-, 胎儿Rh+, 再次妊娠的新生儿。,2、新生儿溶血症,临床上可出现 溶血性贫血 粒细胞减少症 血小板减少性紫癜,原因：药物半抗原（如异烟肼、对氨基水杨酸、早基多巴、氯霉素、磺胺、苯海拉明等）与血液中有形成分或血浆蛋白质结合成完全抗原后，刺激机体发生免疫应答，产生抗体，当药物再次进入时发生超敏反应。,3.药物过敏性血细胞减少症,2019/4/11,RBC,自身免疫性溶血性贫血,药物或病毒,RBC,自身抗体,RBC,抗原抗体复合物,激活补体,红细胞膜,C9,C8,C 5b,6,7,自身抗原,4.自身免疫性溶血性贫血,2019/4/11,肺泡基底膜抗原改变,呼吸道病毒或细菌感染,产生IgG类抗体,肺泡基底膜和肾小球基底膜存在共同抗原,肾、肺组织损伤,临床特点：以肺出血和进行性肾功能衰竭为特征 发生机制：,5.肺出血肾炎综合征,6.甲状腺功能亢进,三、 型变态反应,特点： 1.由IgG、IgM类抗体介导可溶性免疫复合物沉积于毛细血管基底膜； 2.补体及血小板、肥大细胞、嗜碱性、中性粒细胞等参与； 3.以充血水肿、局部坏死和中性粒细胞浸润为主要特征的炎症反应和组织损伤； 4.有个体差异性。,（一）型超敏反应的发生机制,1.中等大小免疫复合物的形成,抗原,+,抗体,抗原抗体复合物,大分子的免疫复合物,易被吞噬细胞清除,小分子的免疫复合物,不沉淀、易被滤过排出,中等大小免疫复合物,存在于循环，可能沉淀,3.免疫复合物的致病作用,补体的作用,中性粒细胞,血小板作用,过敏毒素：使肥大细胞和嗜碱性粒细胞 脱颗粒，释放组胺等介质； 趋化因子：吸引中性粒细胞。,局部中性粒细胞聚集，释放蛋白水解酶等物质，使血管基底膜及周围组织损伤。,血小板活化，产生5-羟色胺等物质 导致局部充血水肿等改变。,2.中等大小可溶性免疫复合物的沉积,2019/4/11,活化补体,产生 C3a 、C5a,募集中性粒细胞,释放血管活性胺,释放蛋白酶类,组织损伤,形成微血栓,活化血小板,活化肥大细胞、嗜碱性粒细胞,缺血坏死,充血水肿,组织损伤,2019/4/11,（二）临床常见疾病,局部免疫复合物病 Arthus反应 吸入性型超敏反应 农民肺 养鸽者病 全身免疫复合物病 血清病 链球菌感染后肾小球肾炎 类风湿性关节炎 系统性红斑狼疮,1.局部免疫复合物病,Arthus反应,临床上给病人多次注射胰岛素、生长激素、狂犬疫苗及类毒素等药物时，也可出现类似反应。,给已免疫的动物皮下再注射相同抗原时，1小时后注射部位即出现红肿，甚至出血和坏死。,2.全身免疫复合物病,血清病,链球菌感染后肾小球肾炎,类风湿性关节炎,系统性红斑狼疮,血清病,初次大量注射抗毒素（如TAT）后，经过714天，可出现局部红肿、皮疹、关节肿痛、淋巴结肿大、发热及蛋白尿等。原因是体内产生的抗异种动物血清抗体与残余的动物血清相结合形成IC，引起全身疾病。,链球菌感染后肾小球肾炎,多发生在链球菌感染后的23周。由链球菌M蛋白与相应抗体形成IC，沉积于肾小球基底膜所致。 此外，葡萄球菌、肺炎球菌、 某些病毒或疟原虫等的感染 也可引起类似的肾小球肾炎。,类风湿性关节炎,体内变性IgG刺激机体产生抗体(称为类风湿因子， IgM类)，形成IC，沉 积于全身小关节滑膜处，引起 小关节红肿、变形僵直、失去运动功能。,系统性红斑狼疮,细胞核物质(如DNA、RNA、核内可溶性蛋白)刺激机体产生抗核抗体，形成IC，沉积于周身毛细血管、关节滑膜、心脏瓣膜等处，引起全身性损伤。,四、型超敏反应,型超敏反应是由效应T细胞与相应抗原作用后，引起的以单个核细胞浸润和组织细胞损伤为主要特征的炎症反应。,特点： （1）反应发生迟缓（48-72小时达高峰）； （2）T细胞介导，抗体和补体不参与； （3）以巨噬细胞、淋巴细胞浸润为主的炎症,（一）型超敏反应发生机制,（二）临床常见的疾病,在胞内寄生菌、一些病毒及真菌等感染过程中，机体可对相应微生物抗原表现迟发型超敏反应。即传染发生与细胞免疫、超敏反应共存。,1.传染性超敏反应,2.接触性皮炎,半抗原（如油漆、青霉素、染料、塑料、农药）接触皮肤时，可与角质蛋白结合成完全抗原，使机体致敏，当再次接触相同变应原时，表现局部红肿或表皮水肿，形成水疱，湿疹样皮炎。,2019/4/11,3、移植排斥反应,由HLA引起,超敏反应知识拓展,1.I、和型超敏反应由抗体介导。 2.补体参与、型超敏反应，但必须依赖补体才能致病的只有型超敏反应。 3.同一变应原在不同个体或同一个体可引起不同类型的超敏反应。 4.同一个体可能同时存在两种或两种以上的超敏反应。 5.有时同一疾病也可由不同类型的超敏反应引起。,2019/4/11,第三节 临床相关免疫,一、自身免疫病,1.概念: 是自身免疫超越了生理限度，导致自身组织或器官发生病理损伤、功能障碍等临床症状的病理状态。,2.共同特征： 发病率女男，老人青年；初发多在育龄阶段， 有明显的遗传倾向； 多呈反复发作和慢性迁延趋势； 可检出高效价自身抗体和或自身反应性T细胞； 易伴发其他自身免疫性疾病。,2019/4/11,自身免疫的分类,1. 器官特异性自身免疫病：胰岛素依赖型糖尿病、桥本甲状腺炎和艾迪生病,2 .全身性自身免疫病：系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、强直性脊柱炎、硬皮病等。,2019/4/11,自身免疫病的发生机制,1.隐蔽抗原释放： 眼晶状体、精子 血液 免疫反应 2.自身抗原性质改变 理化因素-X线、药物 组织抗原变性 溶血性贫血 生物学因素-病毒感染 自身抗原变性 过敏性紫癜 3.共同抗原诱导的交叉反应： 外源性抗原 类似 交叉 风湿性心脏病 机体某组织 成分 反应 肾小球肾炎,手术、感染、外伤,2019/4/11,4T-B细胞旁路化：佐剂、病毒、细胞产物以及某些药物可通过旁路机制获取T细胞辅助信号，使B细胞活化，产生自身抗体，引起细胞介导的自身免疫性损伤，如甲状腺炎等。 5遗传因素：先天易感性遗传因素对自身免疫病的发生也起一定的作用。例如某些带有特殊HLA抗原的人群容易发生自身免疫病。,2019/4/11,2019/4/11,特点：患者对各种病原体的易感性增加； 易发生恶性肿瘤； 易发生自身免疫性疾病； 有遗传倾向； 临床表现复杂多样。,二、免疫缺陷病,概念：免疫缺陷病是免疫系统先天发育不全或后天因素所致免疫功能低下或不全所引起的以反复感染为临床特征的疾病。有原发性和继发性免疫缺陷病两类。,2019/4/11,原发性免疫缺陷病,（一）体液免疫缺陷 1.原发性丙种球蛋白缺乏症 2.选择性IgA缺乏症 3.X-性联高IgM综合征 (二)T细胞免疫缺陷 1.德乔治综合征 2.T细胞信号转导缺陷 （三）联合性免疫缺陷病 （四）吞噬细胞功能障碍,（一）诱发继发性免疫缺陷病的主要因素 1.非感染性因素：恶性肿瘤、营养不良、医源性免疫缺陷病如化疗使患者免疫功能受损等。 2感染因素：人类免疫缺陷病毒、麻疹病毒、结核杆菌、疟原虫、真菌感染等。 （二）获得性免疫缺陷综合征,继发性免疫缺陷病,2019/4/11,2019/4/11,三、肿瘤免疫,肿瘤免疫是研究肿瘤的抗原性、机体的免疫功能与肿瘤发生、发展的相互关系，机体对肿瘤的免疫应答及其抗肿瘤免疫的机制、肿瘤的免疫诊断和免疫防治的科学。,概念,2019/4/11,肿瘤抗原：理化因素、病毒、自发、胚胎及分化,1,肿瘤免疫逃避机制：免疫原性低、漏逸等,3,肿瘤的免疫诊断和治疗。,4,机体抗肿瘤免疫：细胞免疫为主,2,2019/4/11,四、移植免疫,类型：自体移植； 同种移植； 同系移植；异种移植。 目前临床进行的移植术大多是同种移植。,概念：在组织移植或器官移植中，受者接受供者的移植物后，移植物与受者免疫系统相互作用并产生免疫应答的现象，称为移植免疫又叫移植排斥反应。,2019/4/11,同种移植排斥反应的类型,（一）宿主抗移植物反应（HVGR） 是指临床进行实质器官（如心脏、肾脏等）移植后，受者免疫系统识别移植物抗原并产生应答，进而发生的排斥反应。分超急性排斥、急性排斥和慢性排斥三种类型。 （二）移植物抗宿主反应（GVHR） 在同种异体骨髓或胸腺移植时，供者移植物中存在的淋巴细胞被宿主同种异型抗原激活后，通过免疫应答对宿主细胞产生的排斥反应称为移植物抗宿主反应。,2019/4/11,同种移植排斥反应的防治,（一）选择合适的供者 （二）移植物和受者的预处理 移植前应对移植物进行处理，清除 “过客白细胞”,防止早期急性排斥反应；在骨髓移植前清除骨髓移植物中的成熟T细胞以防止GVHR发生。 （三）免疫抑制药物的应用 （四）诱导免疫耐受,2019/4/11,第四节 免疫学应用,2019/4/11,免疫学防治,免疫预防：利用各种生物或非生物制剂来建立机体的免疫应答，以达到预防疾病的目的。,用免疫学原理， 防病、治病所 采取的措施,免疫治疗：应用免疫学原理，针对疾病的发生机制，增强机体的免疫功能，以达到治疗目的所采取的措施。,2019/4/11,特异性免疫类型,自然免疫,人工免疫,自然主动免疫：自然感染,自然被动免疫： IgG通过胎盘、初乳SIgA,人工自动免疫：接种疫苗、类毒素,人工被动免疫：动物免疫血清、胎盘球蛋白等,2019/4/11,（一）免疫学预防,1.人工免疫的概念和种类 通过人工的方法使机体获得免疫力，包括人工自动免 疫、人工被动免疫。 （1）人工自动免疫：是指给机体接种疫苗、类毒素等抗原 物质,刺激机体产生特异性免疫应答，以获得免疫力的方 法，也称预防接种。主要用于传染病的特异性预防。 （2）人工被动免疫：是给人体输入抗体等制剂，使机体获 得特异性免疫力。临床多用于治疗和紧急预防。,2019/4/11,人工自动免疫与人工被动免疫的比较,2019/4/11,（1）死疫苗（灭活疫苗）是选用免疫原性强的病原体，经理化方法使其失去活力制备而成的疫苗。如伤寒、乙型脑炎、霍乱、狂犬病疫苗等。 （2）减毒活疫苗是用减毒或无毒力的活病原体制成的疫苗。脊髓灰质病毒、卡介苗、麻疹病毒疫苗是常用的减毒活疫苗。,2.人工自动免疫常用生物制剂,（3）类毒素：外毒素 类毒素,0.3-0.4%甲醛,2019/4/11,灭活疫苗与减毒疫苗比较,2019/4/11,3.人工被动免疫生物制品 抗毒素：外/类毒素马Ab 人丙种球蛋白：血浆和胎盘丙种球蛋白 细胞因子 单抗/基因工程抗体 人工被动免疫注意事项 注意防止超敏反应 早期和足量 不滥用丙球,被动免疫不能激活免疫系统，故不能产生记忆反应，其保护作用是短暂的。,温馨提示,2019/4/11,4 新型疫苗,1）亚单位疫苗：提取有效免疫原成分。如HA、NA，HBSAg 2）合成肽疫苗：人工合成抗原肽。 3）基因工程疫苗 编码免疫原基因载体体内 酵母菌、大肠杆菌（体外培养） 如：重组抗原疫苗、重组载体疫苗、DNA疫苗、转基因植物疫苗,2019/4/11,5.计划免疫 我国儿童计划免疫程序,2019/4/11,人工自动免疫的注意事项,接种对象：免疫功能低下、与病原体接触机会多、易感者。 接种剂量、次数和间隔时间：死疫苗：23次，间隔710天。活疫苗接种一次。类毒素接种2次，间隔需46周。 接种途径：死疫苗：皮下；活疫苗：皮内注射、皮上划痕和自然途径接种，脊髓灰质炎疫苗以口服为佳，流感、腮腺炎疫苗以雾化吸入为好。 接种后反应：常于接种后24小时发生，表现为局部红肿、疼痛、淋巴结肿大。 禁忌症：高热、严重心血管疾病、急性传染病、恶性肿瘤、甲亢、活动性肺结核、糖尿病和免疫缺陷病等患者，均不宜接种疫苗。,2019/4/11,（二）免 疫 治 疗,2019/4/11,（二）免 疫 治 疗,2019/4/11,二、 免疫学诊断,目的：用于多种免疫性疾病（感染性疾病、免疫缺陷 病、超敏反应、自身免疫病、免疫增殖病、移 植排斥反应和肿瘤等）的诊断、疗效评估、发 病机制探讨、以及对抗原性物质或免疫细胞的 定性、定量，对细胞因子、粘附分子及细胞受 体的检测等。 方法：检测抗原和抗体的体外实验 免疫细胞的测定,（一）体外免疫学检测,1.体液免疫检测 抗原与相应抗体在体内外均可发生特异性结合，体外可出现凝集、沉淀等反应现象。据此可利用已知的抗原（抗体）检测未知的抗体（抗原），抗原抗体结合反应也称为血清学反应。具有特异性、可逆性、可见性、比例性等特点。 常见的血清学反应有凝集反应、沉淀反应及免疫标记技术等。,凝集反应,定义：颗粒性抗原+抗体凝集现象 （颗粒性抗原：细菌、细胞等）,沉淀反应,定义：可溶性抗原+抗体沉淀现象 （可溶性抗原：血清蛋白质、细胞裂解液或组织浸液等） 大多沉淀反应是用半固体琼脂凝胶为介质，进行琼脂扩散故也称免疫扩散。,单向琼脂扩散试验,是将一定量已知抗体混于琼脂凝胶中制琼脂板，在适当位置打孔后将抗原加入孔中扩散。抗原在扩散过程中与凝胶中的抗体相遇，形成以抗原孔为中心的沉淀环，环的直径与抗原含量成正比相关。本法常用于测定血清IgG、IgM、IgA 和 C 3等的含量。,含抗体的凝胶,沉淀环,双向琼脂扩散试验,是将抗原与抗体分别加入琼脂凝胶的小孔中，二者自由向周围扩散并相遇，在比例合适处形成沉淀线。如果反应体系中含两种以上的抗原抗体系统，则小孔间可出现两条以上的沉淀线。本法常用于抗原或抗体的定性 、组成和两种抗原相关性分析的检测。,对流免疫电泳,是先将待侧血清标本作琼脂凝胶电泳，血清中各蛋白组分被分成不同的区带，然后与电泳方向平行挖一小槽，加入相应的抗血清，把分成区带的蛋白抗原成分作双向免疫扩散，在各区带相应的位置形成沉淀弧。该法常用于血清蛋白种类分析，以观察Ig的异常增多或缺失。,定义：是用酶、荧光素、放射性核素等标记物标记抗原或抗体的试验技术。通过检测标记物来反映抗原抗体反应情况，间接测出待检抗原或抗体的含量。本法特异性强，敏感性高。,主要的免疫标记物,类别 标记物 用途 荧光素 FITC、RB200、TRITC 免疫组化 镧系元素螯合物 免疫分析测定 放射性核素 3H、14C、32P、57Gr 免疫分析测定 125I、131I 酶 HRP、AP 免疫组化 免疫分析测定 化学发光物 Luminol、lucigenin 免疫分析测定 金属颗粒 胶体金、铁蛋白 免疫组化 免疫分析测定,是用酶（常用的有辣根过氧化物酶，HRP和碱性磷酸酶，AP) 标记的抗体进行的抗原抗体反应。EIA将抗原抗体反应的特异性与酶催化作用的高效性相结合，通过酶作用于底物后显色来判定结果。 酶联免疫吸附试验( ELISA) ：是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，使抗原抗体反应在固相表面进行。用洗涤法将液相中游离成分洗除。主要有双抗体夹心法、间接法等。测定可溶性抗原或抗体 酶免疫组化法：测定组织中或细胞表面的抗原。,酶免疫技术,概念：用荧光素（常用的有异硫氰酸荧光素，FITC) 与抗体连接成荧光抗体，再与待测标本的抗原反应，置荧光显微镜下观察，抗原抗体复合物散发出荧光，借此对标本中的抗原作鉴定和定位。有直接、间接及补体结合荧光法。 直接荧光法：将荧光素直接标记抗体作标本染色。该法的优点是特异性强，但其缺点是每检测一种抗原必须制备相应的荧光抗体。,荧光免疫技术,间接荧光法：用一抗与标本中的抗原结合，再用荧光素标记的二抗染色。该法的优点是敏感性比直接法高，制备一种荧光素标记的二抗可用于多种抗原的检测，但非特异性荧光亦会增加。 补体结合荧光免疫法：此法是在间接法的第一步抗原抗体反应时加入补体，使之与抗原抗体复合物结合；再用荧光素标记的抗C3抗体进行示踪。,(RIA),是用放射性核素标记抗原进行的免疫学检测技术。它将放射性核素显示的高灵敏性和抗原抗体反应的特异性结合，使检测的敏感性达pg水平。常用于标记的放射性核素有I125和I131。 常用于胰岛素、生长激素、药物等微量物质的测定。,放射免疫技术,放射免疫测定法(RI