课件：感染性疾病与感染免疫检测.ppt

,感染性疾病与感染免疫检测,感染（infection）是病原体以某种传播形式从传染源传播到易感者，并在宿主体内生长繁殖，释放毒素或导致机体内微生态平衡失调的病理生理过程。 大多数病原体是由外界侵入的，受病原体侵袭力、致病力及宿主免疫状态等多种因素的影响，其破坏人体内的微生态平衡后产生各种不同的感染症状，即出现感染性疾病（infection diseases）。,感染性疾病的概念,第一节 细菌感染的免疫检测,抗细菌特异性免疫应答,T细胞介导的细胞免疫应答,B细胞产生抗体介导的体液免疫应答,在感染、烧伤、大型手术、炎症、组织损伤等应激原出现后，可诱发机体产生快速反应，称为急性时相反应。 急性时相反应蛋白包括-抗胰蛋白酶、结合珠蛋白、血浆铜蓝蛋白、C4、C3、纤维蛋白原、C-反应蛋白、前降钙素原等等。其血浆浓度在炎症、创伤、心肌梗死、感染、肿瘤等情况下显著上升。 另外有3种蛋白质：前白蛋白、白蛋白及转铁蛋白则出现相应的低下。,一、急性时相反应蛋白,（一）前降钙素原PCT,PCT是无激素活性的降钙素前肽物质,健康人血浆PCT含量极低. PCT选择性地对系统性细菌感染、真菌感染及寄生虫感染有反应，而对无菌性炎症和病毒感染无反应或仅有轻度反应。,PCT水平异常增高，增高的程度与感染的严重程度及预后相关，在全身性细菌感染和脓毒症辅助鉴别诊断、预后判断、疗效观察等方面有很高的临床价值。.,检测方法： 双抗体夹心免疫化学发光法 放射免疫分析法,（二）C-反应蛋白CRP,CRP是第一个被认为是急性时相反应蛋白的，在急性创伤和感染时其血浓度急剧升高。,CRP本身不仅是炎症标志物，本身也直接参与炎症过程。,免疫学检查 抗链球菌溶血素“O” 抗链激酶试验 抗透明质酸酶（ADH） 抗DNA酶B（DNA-B） 抗链球菌多糖体（ASP）,生物学性状 是引起化脓性疾病的常见细菌 A群链球菌有较强的侵袭力 可产生多种酶和外毒素,（一）化脓性链球菌,二、链球菌感染,胶乳凝集试验,免疫散射比浊法,ASO的临床检测,ASO增高常见于： 急性咽炎等上呼吸道感染 风湿性心肌炎 心包炎 风湿性关节炎 急性肾小球肾炎等 免疫功能不全ASO可不增高,ASO检测的临床意义,生物学性状 引起猪多种临床症状的传染病 猪链球菌病血清型众多、抗原结构复杂 目前该病分布范围极广,（二）猪溶血性链球菌,ELISA 免疫荧光技术 SPA协同凝集试验 乳胶凝集试验,猪链球菌的免疫学诊断,免疫学检测方法,直接凝集试验,酶联免疫吸附试验 (ELISA）,凝集时抗体效 价1:80为阳性,检测伤寒杆菌 的抗原和抗体,三、伤寒沙门菌感染,生物学性状 分枝杆菌科分枝杆菌属 人型和牛型是人类的主要致病菌 可诱导抗感染细胞免疫和体液免疫反应,痰涂片结核杆菌抗酸染色,四、结核分枝杆菌感染,免疫学检测方法,结核菌素试验 分枝杆菌抗体检测 外周血干扰素（IFN-）检测,第二节 病毒感染性疾病的免疫检测,病毒入侵后能引起全身感染，抗病毒的防御机制和抗细菌机制相似，但巨噬细胞、NK细胞、干扰素和补体等所发挥的作用更为明显。病毒具有较强的免疫原性，能诱导机体产生免疫应答，有助于病毒的清除并预防再次感染。,生物学性状 流感病毒可分为甲、乙、丙三型 甲型和乙型流感病毒经常发生变异 易造成暴发和新的流行,流感病毒电镜照片,（一）流感病毒,一、流感病毒感染,病毒抗原的检测 常采用免疫荧光或酶标记技术 快速、灵敏度高 有助早期诊断,病毒抗体的检测 血凝抑制试验 补体结合试验 时间分辨免疫荧光技术,免疫学诊断,禽流行性感冒（AI）简称禽流感 是一种从呼吸系统到严重的全身性败血症等多种症状的综合病征 高致病性禽流感亚型多为H5或H7血清型,抗体检测 特异性IgM 特异性IgG,抗原检测 血凝抑制试验 神经氨酸抑制试验 琼脂免疫扩散试验 ELISA法 抗体斑点-ELISA（Dot-ELISA）,免疫学诊断,（二）禽流感病毒,轮状病毒（rotavirus）是婴幼儿胃肠炎和腹泻的重要病原体,轮状病毒感染的实验室检查 电镜检查病毒颗粒 免疫学检测 RT-PCR法,轮状病毒电镜照片,二、轮状病毒感染,免疫学诊断,抗原检测 ELISA 免疫酶斑点试验,抗体检测： 可采用ELISA法 检测血清中特异性IgM、IgG抗体， 通常感染5天后可测出IgM水平升高,（一）甲型肝炎病毒,生物学性状 属小RNA病毒科 仅有1个血清型,免疫学检测,特异性抗体检测 ELISA 化学发光法,三、肝炎病毒感染,（二）乙型肝炎病毒,乙型肝炎的诊断标志物,乙型肝炎表面抗原（HBsAg） 乙肝病毒前S1抗原 抗乙肝病毒前S1抗体 乙肝病毒前S2抗原 抗乙肝病毒前S2抗体 乙型肝炎核心抗原（HBcAg）,乙肝核心抗体-IgM 乙肝核心抗体-IgG 乙型肝炎表面抗体（抗-HBs） 乙型肝炎e抗原（HBeAg） 乙型肝炎e抗体（抗-HBe ）,乙型肝炎表面抗原(HBsAg),生物学性状 存在于Dane颗粒的表面 位于病毒表面 是一种糖蛋白 4种亚型(adr,adw,ayr,ayw) 判断HBV感染的指标之一 刺激机体产生保护性抗体即抗-HBs,检测方法： SPRIA（固相放射免疫法） ELISA（酶联免疫吸附试验） RPHA（反向间接血凝试验） 化学发光法,可对血清中的HBsAg进行定量检测，对肝炎病人动态疗效观察很有价值,临床意义 （1）乙肝的筛选和普查。 （2）HBsAg阴性不能完全排除乙型肝炎。 （3）同时出现HBsAg和抗-HBs，可能是不同亚型重复感染。 （4）如果仅表现为HBsAg阳性者，传染性较弱。,乙型肝炎表面抗体(HBsAb),生物学性状 是一种保护性抗体 位于病毒表面 是机体感染或接种乙肝疫苗的标志 如一过性HBsAg阳性，则抗-HBs可以为阴性,临床意义 （1）抗-HBs阳性提示急性感染后的康复。 （2）在接受抗-HBs阳性血液的受血者中，可出现短暂性的抗-HBs阳性。 （3）HBV疫苗接种后，可出现抗-HBs阳性。 （4）抗-HBs与HBsAg同时阳性可见于暴发性肝炎或慢性活动性肝炎患者。 （5）HBsAg含量消失同时伴抗-HBs的出现，是目前临床上慢性乙型肝炎治疗的最终目标。,乙型肝炎e抗原(HBeAg),生物学性状 是乙肝传染性的标志 HBsAg效价越高检出率就越高 HBeAg阳性标志着较强的感染和传染性,乙型肝炎e抗体(HBeAb),生物学性状 多出现于急性肝炎恢复期的病人中 比抗-HBs转阳要早 常在HBsAg即将消失或已经消失时检出 存在于乙肝恢复期及痊愈的病人血清中 也可出现于慢性肝炎 肝硬化或无症状的HBsAg携带者可长期存在,乙型肝炎核心抗原(HBcAg),乙型肝炎核心抗体(HBcAb-IgM),生物学性状 早期HBV感染的特异性血清学标志 效价降低常提示预后较好 有助于区分慢性活动性或非活动性肝炎 暴发型乙型肝炎诊断,乙型肝炎核心抗体(HBcAb-IgG),生物学性状 出现较早 不是保护性抗体 有流行病学调查意义,不同血清标志物组合模式的临床意义,乙肝病毒前S1蛋白(pre-S1),生物学性状 仅在HBV-DNA阳性血清中检出 传播病毒的危险性明显高,乙肝病毒前S2蛋白(pre-S2),生物学性状 有一个高免疫性的抗原决定蔟 具有多聚蛋白受体 HBV的感染和复制有密切的关系 作为HBV复制标志之一 与HBV-DNA活动呈正相关,两对半的检测方法,（三）丙型肝炎病毒感染,生物学性状 丙肝病毒（HCV） 是导致丙型肝炎的重要病原体 抗HCV不是中和抗体，无保护性 抗HCV是HCV感染的标志性物质,免疫学检测,HCV-IgM阳性可作为HCV活动性复制的血清学标志。 HCV-IgM与慢性丙肝患者的急性发作有关。,（四）丁型肝炎病毒感染,生物学性状 HDV是一种缺陷病毒 丁肝的临床表现一定程度上取决 于同时伴随的HBV感染状态 HDV是一种单股负链RNA病毒,免疫学检测,主要针对HDV Ag 、抗HDV总抗体、HDV IgG、HDV IgM,（五）戊型肝炎病毒感染,戊型肝炎病毒是一单股正链无包膜的RNA病毒,实验室检查,病毒分离 免疫学检查 分子生物学检测,抗原检测： 可用免疫荧光法、免疫电镜直接检测组织内的HEVAg。 用ELISA法检测分泌物如粪便或胆汁中的HEVAg。,抗体检测： HEVIgM出现和消失均较早 HEVIgM持续时间短 是HEV急性感染的诊断指标,免疫学诊断,生物学性状 是一种新型的冠状病毒 病毒是单链RNA病毒 是一种人畜共患病原体 目前已发现SARS病毒有6个变种,实验室检测,免疫学检测 分子生物学技术,四、SARS,免疫学诊断,免疫荧光技术,ELISA技术,感染早期 抗体可无法检出，急性期到恢复期的阳转或者是抗体效价的4倍增长，提示有近期感染。,第三节 性传播疾病的免疫检测,梅毒螺旋体感染 HIV感染 淋病 尖锐湿疣感染,第四节 真菌感染性疾病的免疫检测,真菌（fungus）的种类繁多，但能引起人类疾病的真菌仅有100多种。真菌感染除可引起表面感染外，部分真菌可以导致人类深部组织感染，甚至全身感染，严重者可致死亡。,一、深部真菌感染,深部真菌是指侵犯表皮以外组织器官即皮肤深层和内脏如肺、脑、消化道等的病源真菌和条件治病真菌。,（一）念珠菌感染,最常见和主要的深部真菌 近年在菌血症中的比例明显升高,最常用的免疫学检测 循环抗原检测 循环抗体检测 联合检测,（二）隐球菌感染,主要的致病菌为新型隐球菌 新型隐球菌的感染虽为全身性， 但主要累及中枢神经系统和肺部。,常用的免疫学检测 循环抗原检测 胶乳凝集试验 ELISA 循环抗体检测,（三）曲霉菌感染,可在身体许多部位引起病变， 以肺部病变最为常见 主要包括过敏性肺曲霉菌、 侵袭性肺曲霉菌,常用的免疫学检测 循环抗原检测 胶乳凝集试验 ELISA RIA 循环抗体检测,ELISA 胶乳微粒凝集试验,常用的免疫学检测：,二、类真菌感染,第四节 先天性感染的免疫检测,流产、死胎、胎儿畸形等,先天性感染指的是胎儿在母体内所受到的感染。 包括：弓形体、巨细胞病毒、风疹病毒单纯疱疹病毒等。,！,生物学特性 弓形虫（toxoplasma ，TOX）寄生于各种有核细胞内，引起弓形虫病。 活体组织检查或动物接种如获得阳性可确诊 目前多使用免疫学的方法进行,一、弓形虫感染,免疫学诊断,循环抗原（CAg）的检测 （双抗体夹心ELISA）,特异性抗体的检测 以全虫抗原检测 用虫体裂解后的提取物质为抗原 以滋养体为抗原,生物学特性 是由风疹病毒（rubella virus，RUV）引起的出疹性呼吸道感染病。 病后可获得终身免疫力 孕早期感染可导致胎儿畸形 属RNA病毒 仅有一个血清型,二、风疹病毒感染,总抗体效价,IgG检测,免疫学诊断,免疫学诊断,IgM检测,常采用血凝抑制试验、中和试验 或补体结合法来测定总效价,免疫学诊断,BACK,常采用血凝抑制试验、中和试验或补体结合法来测定总效价,IgG的测定尚可帮助了解人群风疹隐性感染水平及观察疫苗接种的效果,免疫学诊断,BACK,常采用血凝抑制试验、中和试验或补体结合法来测定总效价,婴儿出生时如有特异高效价IgM抗体，可确诊为先天性风疹,IgG的测定尚可帮助了解人群风疹隐性感染水平及观察疫苗 接种的效果。,免疫学诊断,BACK,生物学性状 由人巨细胞病毒(HCMV)引起的一种全身性感染综合征 又称为巨细胞包涵体病 属疱疹病毒科 是人类疱疹病毒组中最大的一种 核心为双股线形DNA,HCMV抗原检测 免疫荧光检查（DEAFF） HCMV抗原血症诊断 HCMV抗体检测 特异性IgG和IgM抗体,免疫学诊断,三、巨细胞病毒感染,巨细胞病毒感染产后婴儿,生物学性状 单纯疱疹病毒（HSV）是一种DNA病毒 HSV可分为HSV-1和HSV-2两个亚型。 HSV-1型主要引起生殖器以外的部位 感染-2型主要引起生殖器部位皮肤粘膜的感染。,HSV抗原检测 免疫荧光法 ELISA法 HSV抗体检测 间接免疫荧光法 ELISA法,免疫学诊断,四、单纯疱疹病毒,第五节 寄生虫感染的免疫学检测,寄生虫寄生的部位对其致病性有着重大影响。控制感染同时不造成严重组织损坏需要抗寄生虫免疫应答的诱导和维持与对此应答的调节间的精细平衡。,疟原虫寄生于人体红细胞和肝细胞 中，可引起疟疾(malaria)。,抗原的检测 放射免疫试验 固相放射免疫抑制试验,免疫学诊断,抗体的检测 间接荧光抗体试验。 间接红细胞凝集试验 ELISA 斑点免疫结合试验,一、疟原虫感染,血吸虫病是指血吸虫寄生在静脉系统引起的疾病 血吸虫病是一种免疫性疾病 宿主感染血吸虫后一般发生两类免疫反应 一是对沉着于组织中的虫卵的反应 另一是对幼虫或成虫诱导的感染具有保护性的抵抗反应,免疫学诊断,环卵沉淀反应（COPT） 间接红细胞凝集试验（IHA） ELISA 乳胶凝集试验（LA） 酶联免疫印迹技术,二、血吸虫感染,血吸虫病（大肚子病）,血吸虫,猪囊尾蚴病，俗称“囊虫病”， 猪带绦虫的幼虫寄生人体各组织所致的疾病。 猪囊尾蚴病的实验室诊断主要为免疫学技术，包括 对其抗原及抗体的检测。,免疫学诊断,抗体检测 IgE 抗体 IgG 抗体 循环抗原检测,生物学性状,三、猪囊尾蚴病（囊虫病）,皮下的囊尾蚴,猪囊虫病,1.感染性疾病的免疫应答与机体哪一类免疫反应有关？ 2.细菌感染与病毒感染的免疫防御机制有何异同点？ 3.化脓性链球菌感染后可致哪几种最常见的超敏反应性疾病？ 4.肝炎病毒的感染及乙型肝炎病毒的主要免疫诊断指标？ 5.HCV与HBV重叠感染在临床上主要的危害是什么？ 6.HDC和HBV的同步感染可引起哪种类型肝炎？实验室如何检测？ 7.刚地弓形体的终宿主是什么？孕妇初次感染弓形体的危害性？ 8.先天性感染的主要涉及哪几类病原体？其感染的后果是什么？ 9.人类感染猪溶血性链球菌的主要途径是什么？疑有感染时如何确诊？ 10.临床上哪几类疾病患者易出现深部真菌感染？为什么？,思考题,各种病原微生物（如细菌、病毒、立克次体、衣原体、螺旋体、分枝杆菌、真菌及寄生虫等）在适当的条件下均可感