编制说明-食品中β-胡萝卜素的测定.docx

食品安全国家标准食品中-胡萝卜素的测定编制说明一、标准起草的基本情况1 任务来源受国家卫生和计划生育委员会食品安全标准与监测评估司和食品安全国家标准审评委员会的委托，编制组承担了2014-2015年食品安全国家标准整合项目中食品中-胡萝卜素的测定国家标准的整合工作。2 本标准主要起草单位 本标准主要起草单位：中国疾病预防控制中心营养与健康所, 黑龙江省乳品工业技术开发中心（国家乳制品质量监督检验中心）3 本标准主要起草人：王竹、张雪松、王晓婧、王国栋、鄂来明、张婷婷。4简要起草过程整合标准为GB/T 5009.83-2003 食品中胡萝卜素的测定（高效液相色谱法、纸层析法）、GB 5413.35-2010 食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中-胡萝卜素的测定（高效液相色谱法）、NY/T 82.15-1998 果汁测定方法-胡萝卜素的测定（分光光度计法）。在整合标准的基础上优化了天然含有胡萝卜素的食品的前处理条件和-胡萝卜素的色谱检测条件，完成了相应的方法学验证。于2015年5月完成了标准文本和编制说明的撰写工作。二、标准的重要内容及主要修改情况1. 标准方法的选择本标准整合主要采用GB 5413.35-2010 食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中-胡萝卜素的测定（高效液相色谱法），删除了GB/T 5009.83-2003 食品中胡萝卜素的测定（高效液相色谱法、纸层析法）和NY/T 82.15-1998 果汁测定方法-胡萝卜素的测定（分光光度计法）。原因如下：1.1 GB/T 5009.83-2003 食品中胡萝卜素的测定，第一法高效液相色谱法在试样提取的过程中未进行皂化，无法排除其他大分子物质的影响，导致检测结果偏低，第二法纸层析法无法分离-胡萝卜素和-胡萝卜素，导致结果不准确。1.2 NY/T 82.15-1998 果汁测定方法-胡萝卜素的测定（分光光度计法）未进行皂化，也无法有效的分离-胡萝卜素和-胡萝卜素，导致检测结果不准确。2. 天然含有胡萝卜素的食品的前处理和色谱检测条件的优化2.1 前处理条件根据编制组以往经验，天然食品中-胡萝卜素较难提取，直接进行皂化后萃取并不能将-胡萝卜素提取完全，故需要在皂化前先进行提取，本标准比较了直接皂化，乙醇回流提取后皂化，水回流提取后皂化3中前处理方法，结果见表1，其中乙醇回流提取后皂化提取效果最佳，-胡萝卜素检测结果显著高于直接皂化和水回流提取后皂化，故在天然含有胡萝卜素的食品的前处理过程增加了乙醇回流提取30分钟的步骤。表1 不同提取方法对-胡萝卜素检测结果的影响样品处理方法n-胡萝卜素（g/100g）菠菜（1）直接皂化32317.85 醇提皂化32458.70 水提皂化32059.81 菠菜（2）直接皂化31913.78 醇提皂化33134.02 水提皂化32307.69 胡萝卜（1）直接皂化35279.08 醇提皂化36239.27 水提皂化34674.41 胡萝卜（2）直接皂化34794.89 醇提皂化37396.08 水提皂化35540.92 2.2 色谱检测条件然含有胡萝卜素的食品中普遍含有离-胡萝卜素和-胡萝卜素，基质比较复杂，而根据GB 5413.35-2010 食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中-胡萝卜素的测定（高效液相色谱法）的色谱检测条件，-胡萝卜素和-胡萝卜素的并未完全达到基线分离的效果，而且也无法与其他杂质完全分离，本标准参考文献采用了C30色谱柱，并采用梯度洗脱的方法，可以很好解决-胡萝卜素和其他胡萝卜素、类胡罗卜素对-胡萝卜素检测影响，而且将-胡萝卜素的保留时间缩短至17分钟，提高了检测效率，标准物质色谱图见图1，样品色谱图见图2。天然含有胡萝卜素的食品的色谱检测条件色谱柱：C30柱，150mm4.6 mm，5 m，或具同等性能的色谱柱。流动相：A相：甲醇：乙腈=75:25（含2% H2O） B相：甲基叔丁基醚梯度程序：时间A（%）B（%）0 min100015 min594118 min208019 min208020 min010022 min1000流速：1 mL/min柱温箱温度：302 样品室温度：152 检测波长：450 nm图1 标准物质色谱图图2 胡萝卜（1）样品色谱图三、国际国内标准情况AOAC分别于1941年和1970年推出AOAC941.15和AOAC970.64两项标准，分别规定了新鲜植物原料及青贮饲料、干燥植物原料及复合饲料中胡萝卜素的测定方法，均采用分光光度计法；在2005年推出的AOAC2005.07中则采用反相高效液相色谱法进行原型食物及补充剂中-胡萝卜素的测定。国内现行标准有GB/T 5009.83-2003 食品中胡萝卜素的测定（高效液相色谱法、纸层析法）、GB 5413.35-2010 食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中-胡萝卜素的测定（高效液相色谱法）、NY/T 82.15-1998 果汁测定方法-胡萝卜素的测定（分光光度计法）。自然界中虽然以全反式的-胡萝卜素为主，但也存在其他的同分异构体如-胡萝卜素、-胡萝卜素，及由于中央共轭多烯链的变化而产生的4种单顺式异构体。这些异构体的完全分离在分光光度计法及纸