丝裂霉素及氟尿嘧啶对人肝癌smmc7721细胞株的细胞毒作用课件

奈达铂与阿霉素、丝裂霉素及 5-氟尿嘧啶对 人肝癌SMMC7721细胞株的 细胞毒作用 奈达铂是一新型铂类抗肿瘤药，其与顺铂 相比具有肾毒性和胃肠道副反应较轻等优 点。Muramatsu等对犬的研究表明，经肝动 脉给药时奈达铂有相对低的肝排出率，认 为比顺铂更适于动脉灌注。但目前尚缺乏 奈达铂对人肝癌细胞的研究资料。 目的：研究奈达铂对人肝癌SMMC7721细胞 株的细胞毒作用及其与阿霉素、丝裂霉素 及5-氟尿嘧啶的相互作用。 材料与方法 细胞株 为人肝癌SMMC7721细胞株，引自上海细 胞研究所，常规传代培养。 药物与试剂 奈达铂（南京东捷药业有限公司，批 号：20030501）；顺铂（江苏豪森药业股份有限 公司，批号：030801）；阿霉素（日本明治医药 有限公司，批号：960202）；丝裂霉素（浙江海 达药业股份有限公司，批号：030303）；5-氟尿 嘧啶（南通制药厂，批号031202），四氮甲唑蓝 （MTT）系Merk公司产品 实验方法 取处于对数生长期的SMMC7721细胞，用 0.25%胰酶消化后，以含10%灭活小牛血清，2mmol/l谷 氨酰胺，4万U/L庆大霉素的PRMI1640培养液调至 1105/ml，加入96孔板（Nunc产品），每孔100l，置 37，5%CO2条件下培养24小时，然后按嵌套设计，加 入不同浓度的药物100l（每种浓度3个复孔），以单纯培 养液为对照，继续在上述条件下培养48小时，每孔加入 MTT溶液50l，再培养4小时后弃去上清，每孔加入100l 二甲基亚砜，震荡5分钟后用酶联免疫测定仪在波长 570nm处测定各孔的光密度（OD）值，按下列公式计算 细胞毒指数（CI）： 细胞毒指数CI=（1-实验孔OD均值/对照组 OD均值）100% 用Karber法计算奈达铂对SMMC7721细胞的 半数抑制剂量（IC50）。 统计学处理 奈达铂与对SMMC7721细胞CI 的关系用直线相关分析；联合用药与单纯 用药的比较采用t检验，数据用SPSS 11.5软 件处理。 结 果 单纯奈达铂对SMMC7721细胞株有抑制作用 （IC50为20.1g/ml），其CI与药物浓度呈 正相关。 顺铂对对SMMC7721细胞株有抑制作用（ IC50为13.7g/ml），其CI与药物浓度呈正 相关。 Suppression of nedaplatin combined with adrimycin on SMMC7721 cell(OD,xs) 奈达铂 g/ml 阿霉素（g/ml） 00.040. 44.0 00.770.006 0.720(6.5% ) 0.580.012(2 4.7%) 0.370.012(5 1.9%) 5 0.580.017(2 4.7%) 0.540.006(2 9.9%)* 0.450.015(4 1.6%)* 0.280.006(6 3.6%)* 10 0.540.02(29. 9%) 0.510.006(3 3.8%)* 0.460.017(4 0.3%)* 0.270.01(64. 9%)* 20 0.40.02(48. 1%) 0.390.012(4 9.4%)* 0.330(57.1 %)* 0.260.01(66. 2%)* *为P0.01与单用阿霉素比较；括号内为CI Suppression of nedaplatin combined with mitomycin on SMMC7721 cell(OD,xs) 奈达铂 g/ml 丝裂霉素 （g/ml） 0110100 00.760.01 0.350.006(5 3.9%) 0.150.01(80. 3%) 0.0030.006( 99.6%) 5 0.530.015(3 0.3%) 0.290.01(61. 8%)* 0.140.026(8 1.6%) 0.0070.006( 99.1%) 10 0.500.006(3 4.2%) 0.290.006(6 1.8%)* 0.120.01(84. 2%) 0.0030.006( 99.6%) 20 0.390.01(48. 7%) 0.260.012(6 5.8%)* 0.140.01(81. 6%) 00(100%) *为P0.01与单用丝裂霉素比较；括号内为CI Suppression of nedaplatin combined with mitomycin on SMMC7721 cell(OD,xs) 奈达铂 g/ml 丝裂霉素 （g/ml） 0110100 00.760.01 0.350.006(5 3.9%) 0.150.01(80. 3%) 0.0030.006( 99.6%) 5 0.530.015(3 0.3%) 0.290.01(61. 8%)* 0.140.026(8 1.6%) 0.0070.006( 99.1%) 10 0.500.006(3 4.2%) 0.290.006(6 1.8%)* 0.120.01(84. 2%) 0.0030.006( 99.6%) 20 0.390.01(48. 7%) 0.260.012(6