神经母细胞瘤组织mycn扩增水平 与ki67 li等生物学指标的关系课件

神经母细胞瘤组织神经母细胞瘤组织MYCNMYCN扩增水平扩增水平 与与Ki-67 LIKi-67 LI等生物学指标的关系等生物学指标的关系 王会娟 王焕民 宫丽平 伏利兵 秦红 吕蓓蓓 神经母细胞瘤(NB) 儿童最常见的颅外实体恶性肿瘤 具有自然消退和快速进展两种截然不 同的生物学特点 N-Myc基因扩增主要发生于进展期NB 中，与肿瘤的侵袭行为和不良预后密 切相关 为NB危险度的评估、治疗方案的选择 、预后的判断提供分子学依据 N-MycN-Myc基因 是一种具有代表性的细胞增殖标记，是一种具有代表性的细胞增殖标记， Ki-67 LIKi-67 LI定量地反映肿瘤的增殖情况。定量地反映肿瘤的增殖情况。 Ki-67Ki-67标记指数标记指数( Labeling Index, LI)( Labeling Index, LI)： 指肿瘤细胞中指肿瘤细胞中Ki-67Ki-67阳性细胞所占的百分比。阳性细胞所占的百分比。 Ki-67Ki-67抗原抗原 N-Myc N-Myc 扩增与扩增与Ki-67 LIKi-67 LI和和NBNB的临床病理因的临床病理因 素间分别有何关系素间分别有何关系？ N-MycN-Myc扩增与扩增与Ki-67 LIKi-67 LI N-Myc N-Myc 扩增与扩增与Ki-67 LI Ki-67 LI 间有何关系？间有何关系？ 2008.92008.9至至2009.32009.3 30 30例石蜡包埋组织标本例石蜡包埋组织标本 神经母细胞瘤（神经母细胞瘤（NBNB） 节细胞性神经母细胞瘤节细胞性神经母细胞瘤(GNB)(GNB) 研究对象 性别：男：性别：男：1919例，女：例，女：1111例；例； 年龄：年龄：2 2月月9 9岁岁6 6月月 1818个月个月 1313例，例， 1818个月个月 1717例例 原发部位：肾上腺原发部位：肾上腺 2323例，例， 非肾上腺非肾上腺 7 7例例 研究对象 病理分型：病理分型： NBNB： 分化型分化型 8 8例，分化差型例，分化差型 7 7例，例， 未分化型未分化型 1 1例，不明确型例，不明确型 7 7例例 . . GNB: 7GNB: 7例例 临床参照临床参照INSSINSS系统分期：系统分期： 1 1期期 5 5例，例， 2 2期期 4 4例，例， 3 3期期 6 6例，例， 4 4期期 1111例，例， 4S4S期期 4 4例例 研究对象 研究内容 1. 1. N-Myc N-Myc 扩增与扩增与Ki-67 LIKi-67 LI分别与分别与 NBNB的临床病的临床病 理因素理因素( (性别性别 、年龄、原发部位、分期、分、年龄、原发部位、分期、分 型、型、NSENSE、VMA)VMA)间的关系。间的关系。 2. N-Myc 2. N-Myc 扩增与扩增与Ki-67 LI Ki-67 LI 间的关系。间的关系。 N-Myc基因的检测：FISH 探针：位点特异性探针：位点特异性 N-myc/CEP2N-myc/CEP2双色探针双色探针 实验方法 N-Myc基因 获得：拷贝数49个； 扩增：拷贝数10个。 Ki-67 LI:Ki-67 LI: 免疫组化二步法免疫组化二步法 抗体抗体: :鼠抗人鼠抗人Ki-67Ki-67抗原免疫组化单克隆抗体抗原免疫组化单克隆抗体 阳性细胞是指细胞核内出现棕黄色颗粒阳性细胞是指细胞核内出现棕黄色颗粒 25是 2/NBM/3岁岁左肾肾上腺3未分化型80%15是 3/NBM/21月左肾肾上腺1分化差型50%15否 4/NBM/28月右肾肾上腺3不明确80%50是 5/NBM/5岁岁左肾肾上腺2分化差80%15是 表1.5例扩增病例的临床资料 N-MycP值值 扩扩增（10） 获获得（49） 无异常 INSS分期 1+2+4S13256Pa=0.222 3+4173131Pb=0.021 Pc=0.025 组织组织 学分型 NB23 5153Pa=0.081 GNB 7 034Pb=0.066 Pc=0.033 N-MycN-Myc拷贝数水平与临床病理因素的关系拷贝数水平与临床病理因素的关系2 Pa ：N-Myc扩增组和N-Myc无异常组之间的P值 ; Pb : N-Myc获得组和N-Myc无异常组之间的P值 ; Pc : N-Myc增多组（获得组+扩增组）与无异常组之间的P值。 病例数 表2. 2.1 N-MycN-Myc扩增水平在另外扩增水平在另外6 6组（包括患者性别、年组（包括患者性别、年 龄、肿瘤原发部位、是否接受化疗以及血清龄、肿瘤原发部位、是否接受化疗以及血清 NSENSE、2424小时尿小时尿VMAVMA水平）中的差异均无统计水平）中的差异均无统计 学意义（学意义（P P0.050.05）。）。 N-MycN-Myc拷贝数水平与拷贝数水平与NBNB临床病理因素的关系临床病理因素的关系2 N-MycN-Myc无异常，无异常，4010040100 绿色信号代表绿色信号代表N-MycN-Myc基因基因 附图附图 N-MycN-Myc扩增扩增 40x10040x100 绿色信号代表绿色信号代表N-MycN-Myc基因基因 Ki-67 LIKi-67 LI 与NB其它临床因素间的关系3 表3. Ki-67 标记指数与肿瘤组织学类型之间的关系 例数 Ki-67 LI 平均秩次 P值 + + NB23 4 5 1418.130.003 GNB7 5 2 06.86 P50% 10x10 MYCNMYCN扩增水平与扩增水平与Ki-67 LIKi-67 LI 之间的关系4 例数Ki-67 LIMean rankP值 + + MYCN 扩增5 1 0 423.000.092 获得18 5 7 614.67 无异常7 3 1 312.29 扩增5 1 0 423.000.036 非扩增25 8 8 714.00 获得+扩增23 6 7 1016.480.267 无异常7 3 1 312.29 总之，总之，N-MycN-Myc扩增与扩增与Ki-67 LIKi-67 LI在在NBNB分期、分分期、分 型中的意义并不是完全一致的。型中的意义并不是完全一致的。 N-MycN-Myc扩增率仅为扩增率仅为20-25%20-25%，而，而 Ki-67 LI Ki-67 LI 容易容易 受化疗的影响，因此，两者结合分析肿瘤的侵袭受化疗的影响，因此，两者结合分析肿瘤的侵袭 行为和恶性程度会更加合理。行为和恶性程度会更加合理。 Ki-67 LIKi-67 LI在在NBNB中明显高于中明显高于GNBGNB，在，在NBNB分化差型中的表分化差型中的表 达明显高于分化型；化疗影响达明显高于分化型；化疗影响Ki-67Ki-67的表达。的表达。 2 N-MycN-Myc基因拷贝数增多在基因拷贝数增多在NBNB中较中较GNBGNB中多见，在进展中多见，在进展 期（期（3 3、4 4期）期）NBNB中较早期（中较早期（1 1、2 2、4S4S期）期）NBNB中多见中多见。 1 3 Ki-67 LI Ki-67 LI在在N-MycN-Myc基因扩增组明显高于非扩增组。基因扩增组明显高于非扩增组。 结 论 应该将应该将N-MycN