目前比较公认的部分标志抗体PPT课件

目前比较公认的部分标志抗体 双链DNA抗体SLE Sm抗体SLE SS-B抗体干燥综合症 着丝点抗体-进行性系统性硬化症局限型 Scl-70抗体-进行性系统性硬化症弥散型 PM-Scl抗体多肌炎/皮肌炎/重叠综合症 Jo-1抗体-多肌炎/皮肌炎 高滴度RNP抗体混合性结缔组织病 肾小球基底膜抗体肺肾出血综合症 肝肾微粒体抗体II型自身免疫型肝炎 平滑肌抗体-I型自身免疫型肝炎 线粒体抗体2原发型胆汁性肝硬化 ANCA的历史 1982年，Davies等在8例节段性坏死性肾小 球肾炎患者中发现。 1985年，Van der Wouder等首先报告Webner 肉芽肿患者中存在ANCA,对诊断具有特异 性，与疾病活动度有关。ANCA才引起学术 界注意，研究迅速开展。 1989年，Targen发现与炎症性肠病有关。 1999年为止，已召开7次以ANCA为主体的 的国际会议。 已发现 ANCA存在十余种特异性抗体。 ANCA对系统性血管炎、炎症性肠病等 疾病的诊断与鉴别诊断具有重要意义。 ANCA已成为自身免疫性疾病重要的临 床常规项目。 ANCA的两种荧光染色型 -应用酒精固定的白细胞 抗原底物片 cANCA:中性粒细 胞胞浆弥漫性颗粒 样染色，核叶之间 有染者 其靶抗原主要是蛋 白酶3(PR3). 自身抗原：自身抗原为丝氨酸蛋白酶-蛋 白酶3 （ proteinase 3，PR3）。免疫沉淀 法证实，其29kDa、30.5kDa及32kDa蛋白 为主要自身抗原。该靶抗原为可溶性蛋 白，存在于正常中性粒细胞的嗜苯胺蓝 颗粒中。非典型性cANCA的自身抗原还 可能为杀菌性/通透性增强蛋白（ bactericidal/permeability-increasing protein, BPI）。 乙醇固定的 中性粒细胞 甲醛固定的中性 粒细胞 临床意义： cANCA可见于多种系统性血 管炎。主要见于韦格纳（Wegener）氏肉 芽肿，约占ANCA阳性率的80-95。 cANCA被认为是活动性韦格纳氏肉芽肿 及微多动脉炎的特异和敏感的标志抗体 。很多资料提示，ANCA阳性的微多动 脉炎，通常与肾小球肾炎及/或肺毛细血 管炎相关。该抗体还见于变应性肉芽肿 性脉管炎（Churg-Strauss 综合征）等。 PR3-ANCA PR3能降解许多细胞外基质，如弹性蛋白、血 红蛋白、Fn、IV胶原、层粘连蛋白 抑制因子：1-抗胰蛋白酶，可与PR3不可逆结 合从肝脏清除，从而抑制PR3水解活性 PR3抗体与PR3结合抑制了PR3与1-抗胰蛋白 酶的结合，PR3抗原抗体复合物在炎症部位分 解，PR3发挥水解作用，致血管内皮损伤。 PR3在血管炎的发病中可能起重要的作用。 间接免疫荧光实验被认为是筛选ANCA 抗体的标准、可靠的方法。 cANCA进一步确认可使用抗蛋白酶3抗体 特异性ELISA试剂盒。 pANCA：中性粒 细胞环绕细胞核周 围胞浆亮染者，称 之为核周型ANCA 靶抗原主要为髓过 氧化物酶 ANCA的两种荧光染色型 -应用酒精固定的白细胞 抗原底物片 乙醇固定的中性 粒细胞 甲醛固定的中性 粒细胞 自身抗原：pANCA的主要抗原为髓过氧 化物酶（myeloperoxidase, MPO），其它 抗原还有白细胞弹性蛋白酶（leucocyte elastase）、组织蛋白酶G（cathepsin G） 、溶菌酶 (lysozyme)、乳铁蛋白 (lactoferrin)以及非典型性pANCA的BPI抗 原。 临床意义：pANCA见于多种系统性血管 炎。该抗体可见于Wegener氏肉芽肿，但 仅占ANCA阳性率的5-20，靶抗原主要 为MPO。40-80的微多动脉炎与 pANCA/MPO-ANCA相关。大部分资料 提示，ANCA阳性的微多动脉炎，通常 与肾小球肾炎及/或肺毛细血管炎相关。 pANCA还见于变应性肉芽肿性脉管炎（ Churg-Strauss 综合征）、炎症性肠病（ 通常为非MPO抗原；溃疡性结肠炎阳性 率40-80，克隆病阳性率10-40）、I 型自身免疫性肝炎、原发性硬化性胆管 炎、系统性风湿病（如RA、SLE、SS、 PM及DM等，但许多靶抗原尚属未知） 等。 目前已较多用ELISA法进行抗MPO抗体 测定。 还应用抗白细胞弹性蛋白酶（HEL)、抗 组织蛋白酶、抗溶菌酶(LYS)及抗乳铁蛋 白(LF)自身抗体ELISA进行pANCA的进 一步确认。 什么时候使用ANCA？ 每一个怀疑血管炎或肾小球肾炎的，只 要原因不明 与ANCA自身抗体相关疾病 相关疾病IIF荧荧光染色模型靶抗原 WGcANCA pANCA(少见见)PR3(85%)MPO(10% ) 显显微型多动动脉炎（ MPA) cANCA pANCAPR3(45%)MPO(10% ) 坏死性新月体肾肾小球肾肾 炎（NCGN) pANCA cANCA(少见见 ） PR3(25%)MPO(65% ) 过过敏性肉芽肿肿性血管炎 （CSS) pANCA cANCA(少见见 ） PR3(10%)MPO(60% ) 结节结节 性多动动脉炎（ PAN) ANCA(阳性率低）PR3(5%)MPO(15%) 抗肾肾小秋基底膜疾病（ 抗GBM) pANCA MPO(30%) SLEpANCA LF HIEL RApANCA aANCALF MPO(少见见） 与ANCA自身抗体相关的其它 疾病 药物性狼疮 溃疡性结肠炎（50-80%） 克隆氏病（10-20%） 原发性硬化性胆管炎（60-80%） 原发性胆汁性肝硬化（30%） 自身免疫性肝炎 其它：囊性纤维化、急慢性感染（HIV、阿米 巴等） 病因小结 在内因与外因的共同作用下，机体的自身免疫应答失 控，反应过度，产生有破坏性的自身免疫抗体及自身 致敏的T淋巴细胞所引起的免疫反应，直接或间接破坏 自身组织，则为自身免疫病( autoimmune diseases )。 内因包括遗传易感、免疫耐受性减失、调节失常、衰 老体弱等； 外因主要包括感染、物理、化学等因素。自身免疫病 患者中，有相当一部分病人的血清或其他体液中可检 测到一种或多种自身抗体，为自身免疫病的诊断提供 了非常有价值的依据。 自身免疫性疾病 ANA阳性率 系统性红斑狼疮 活动期 95-100 非活动期 80-100 药物诱导的红斑狼疮 100 混合性胶原病（MCTD、Sharp综合征） 100 类风湿性关节炎 20- 40 其他风湿病 20- 50 进行性系统性硬化症 85 - 95 多发性肌炎及皮肌炎 30-50 干燥综合征 70- 80 慢性活动性肝炎 30- 40 溃疡性结肠炎 26 抗核抗体的阳性率 ANA历史 1948年发现LE细胞与自身抗体有关 1957-93年冰冻动物组织血清试验，方便、敏感，不同 病人有不同的荧光模型，培养的单层细胞核大核仁大 、存在各种分裂期细胞。 说明靶抗原是不同的，已经能够识别一些靶抗原。 可用于纯化抗原。 某些抗原的抗体是疾病特异的，或是某些疾病的亚类 。 抗核抗体是敏感的筛选试验。 ANA是SLE分类的11项指标之一。 抗核抗体重要的相关疾病 间接免疫 荧光法核 型 抗原类 别 疾病发生率（% ） 均质型 双链DNA (dsDNA) 系统性红斑狼疮60-90 核仁型RNA系统性红斑狼疮 硬皮病、干燥综合症 50 65 均质型组蛋白药物诱导狼疮 系统性红斑狼疮 类风湿性关节炎 95 30-70 15-50 粗颗粒性U1-RNP混合性结缔组织病（Sharp综合症） 系统性红斑狼疮 类风湿性关节炎（重叠综合症） 90-100 30-40 3 粗颗粒性Sm系统性红斑狼疮20-40 细颗粒性 SSA（Ro ） 干燥综合症 系统性红斑狼疮 新生儿狼疮综合症 40-95 20-60 100 细颗粒性SSB（La ） 干燥综合症 系统性红斑狼疮 40-95 10-20 核仁型原纤维 蛋白 进行型系统性硬化症（弥散性）5-10 核仁型RNA-多 聚酶I 进行型系统性硬化症（弥散性）4 核仁型PM-Scl多肌炎/皮肌炎/重叠综合症 进行型系统性硬化症 50-70 5-10 着丝点型着丝点进行型系统性硬化症（局限型）80-95 均质+核仁Scl-70进行型系统性硬化症（弥散性）25-75 增值性核 抗原 颗粒型系统性红斑狼疮3 RA核抗 原 类风湿性关节炎90-95 Ku系统性红斑狼疮 多肌炎/皮肌炎，进行型系统性硬化症 10 50 Mi-1、 Mi-2 皮肌炎5-10 Jo-1多肌炎/皮肌炎、雷诺现象25 典型症状 年轻女性蝴蝶样 发烧 关节疼痛，但未变形 胸膜炎性胸痛 光敏感 其他症状 原因不明的发热 肾病 精神 血液学紊乱 类风湿性关节炎 关节 非化脓性增生性滑膜炎导致关节 软骨破坏 其他器官 皮肤, 心脏, 血管, 肌肉, 肺 普遍性 1% 发生率 女 男 任何年龄 ，最常见30多岁或 40多岁 干燥综合症 眼干燥 干燥性角膜结膜炎 口干燥 口腔干燥 免疫介导的泪腺唾液腺破坏 SS-A SS-B (Ro La) 与 RA 和 RF 相关 淋巴瘤发生率升高 系统性硬化症 (硬皮病