医院感染监测方法ppt课件

医院感染监测方法医院感染监测方法 1 医院感染监测的定义医院感染监测的定义 n 医院感染监测的定义医院感染监测的定义 : n 医院感染监测是指长期地、系统地、有计划地医院感染监测是指长期地、系统地、有计划地 、主动地观察一定人群中医院感染发生和分布、主动地观察一定人群中医院感染发生和分布 以及影响医院感染的各种因素，对监测资料进以及影响医院感染的各种因素，对监测资料进 行定期的整理分析，确定其分布动态和变化趋行定期的整理分析，确定其分布动态和变化趋 势，向有关人员和单位发送、反馈，并及时采势，向有关人员和单位发送、反馈，并及时采 取防治对策和措施，同时对其防治效果和经济取防治对策和措施，同时对其防治效果和经济 效益作出评价，不断改进，以期达到控制和降效益作出评价，不断改进，以期达到控制和降 低医院感染的目的。低医院感染的目的。 2 医院感染监测的内涵医院感染监测的内涵 n 医院感染监测的内涵医院感染监测的内涵 n 要有一个长期的监测计划，连续系统地收集资要有一个长期的监测计划，连续系统地收集资 料料 n 定期汇总并经分析和解释所收集的资料，使之定期汇总并经分析和解释所收集的资料，使之 成为有意义的材料，向有关人员或单位反馈或成为有意义的材料，向有关人员或单位反馈或 报送报送 n 准确地确定医院感染的各种问题，以便有针对准确地确定医院感染的各种问题，以便有针对 性地采取控制措施性地采取控制措施 n 对各种监测方法和手段要进行评价对各种监测方法和手段要进行评价 n 要确定诊断标准要确定诊断标准 3 医院感染监测的目的医院感染监测的目的 n 医院感染监测是医院感染控制的先行，医医院感染监测是医院感染控制的先行，医 院感染控制水平是反映医疗技术水平的重院感染控制水平是反映医疗技术水平的重 要评价指标之一。要评价指标之一。 n 目的是为了控制医院感染的各种危险因素目的是为了控制医院感染的各种危险因素 ，降低医院感染的各种危险因素、降低医，降低医院感染的各种危险因素、降低医 院感染的发生率，保证和提高医疗质量和院感染的发生率，保证和提高医疗质量和 医疗安全医疗安全 4 医院感染监测简史医院感染监测简史 n 医院感染监测源于医院感染监测源于 19世纪中叶，产褥热发生世纪中叶，产褥热发生 原因的调查研究原因的调查研究 n 医院感染监测的系统发展始于医院感染监测的系统发展始于 20世纪世纪 50年代年代 欧美欧美 MRSA感染的流行感染的流行 n 美国在美国在 60年代开始成立医院感染控制委员会年代开始成立医院感染控制委员会 ，在医院中开展空气和环境的细菌学监测，在医院中开展空气和环境的细菌学监测 5 医院感染监测的组织系统医院感染监测的组织系统 n 由下列机构和部门构成由下列机构和部门构成 n 院长领导下的医院感染管理委员会院长领导下的医院感染管理委员会 n 医院感染科医院感染科 n 科室医院感染管理小组科室医院感染管理小组 组成三级医院感染监测管理网络组成三级医院感染监测管理网络 6 7 医院感染监测的人员分工和职责医院感染监测的人员分工和职责 n 医院感染委员会负责医院感染监测与控制医院感染委员会负责医院感染监测与控制 的全面领导与管理工作。的全面领导与管理工作。 n 医院感染科由专职人员组成，是医院感染医院感染科由专职人员组成，是医院感染 管理委员会的办事机构，负责全面医院感管理委员会的办事机构，负责全面医院感 染管理工作染管理工作 8 医院感染监测的人员分工和职责医院感染监测的人员分工和职责 n 病房医院感染管理小组一般由主治医师、护士长病房医院感染管理小组一般由主治医师、护士长 、感控医生和监控护士组成。、感控医生和监控护士组成。 n 监控护士负责对空气、物体表面、医护人员的手监控护士负责对空气、物体表面、医护人员的手 进行定期监测和对本科进行全面监督检查进行定期监测和对本科进行全面监督检查 n 住院医师负责对住院病人医院感染的临床检查、住院医师负责对住院病人医院感染的临床检查、 诊断、合理使用抗菌药物并填写医院感染病例登诊断、合理使用抗菌药物并填写医院感染病例登 记表，由科主任、主治医师审核签字后上报医院记表，由科主任、主治医师审核签字后上报医院 感染管理科。感染管理科。 n 由医院感染科汇总制表，送医院感染管理委员会由医院感染科汇总制表，送医院感染管理委员会 主任审核后上报上级部门主任审核后上报上级部门 9 医院感染监测的信息反馈系统医院感染监测的信息反馈系统 n 和医院感染三级管理机构一起组成完整的管和医院感染三级管理机构一起组成完整的管 理体系理体系 n 在医院感染管理工作中具有互通情报、承上在医院感染管理工作中具有互通情报、承上 启下、发现问题、改进工作的重要作用。启下、发现问题、改进工作的重要作用。 10 11 医院感染监测内容医院感染监测内容 n 医院感染率及其病种与部位分布医院感染率及其病种与部位分布 常用的统计指标有常用的统计指标有 n 医院感染发生率医院感染发生率 n 例次发病率例次发病率 n 患病率及构成比、均数等患病率及构成比、均数等 12 医院感染监测内容医院感染监测内容 n 漏报率漏报率 采用回顾性调查，一般以月为单位采用回顾性调查，一般以月为单位 漏报率漏报率 = 漏报病例数漏报病例数 100% 原上报病例数原上报病例数 +漏报例数漏报例数 13 医院感染监测内容医院感染监测内容 n 估计（实际）发病率估计（实际）发病率 估计（实际）发病率估计（实际）发病率 = 报告发病率报告发病率 100% 1漏报率漏报率 “实际实际 ”病例数病例数 = 估计发病率估计发病率 报告病例数报告病例数 报告发病率报告发病率 14 医院感染监测内容医院感染监测内容 n 病原体与药物敏感性的监测病原体与药物敏感性的监测 n 病原体变迁趋势的监测病原体变迁趋势的监测 n 病原体耐药性的变化趋势的监测病原体耐药性的变化趋势的监测 n 平时及医院感染暴发时微生物实验室监测资料平时及医院感染暴发时微生物实验室监测资料 需及时报告，并在一定时期做出微生物报告小需及时报告，并在一定时期做出微生物报告小 结结 n 应做好菌种保存及耐药谱变化记录，将菌株生应做好菌种保存及耐药谱变化记录，将菌株生 化、血清、分子生物学分型结果存于计算机数化、血清、分子生物学分型结果存于计算机数 据库以便于分析生物型、血清型、分子生物型据库以便于分析生物型、血清型、分子生物型 变化变化 15 医院感染监测内容医院感染监测内容 n 环境卫生监测环境卫生监测 n 病房保洁制度执行情况监测病房保洁制度执行情况监测 是预防医院感染的基本要求，尤其是重点是预防医院感染的基本要求，尤其是重点 病病 房及科室房及科室 n 对医院环境细菌学监测对医院环境细菌学监测 n 医院空气微生物学检验医院空气微生物学检验 n 微生物气溶胶感染的预防：污染源的监测、对微生物气溶胶感染的预防：污染源的监测、对 “排菌排菌 者者 ”和和 “带菌者带菌者 ”的调查的调查 16 附：医院感染监测专用表格附：医院感染监测专用表格 17 18 19 20 21 22 医院感染监测方法医院感染监测方法 n 监测方法的类型监测方法的类型 n 全面综合性监测全面综合性监测 n 指对全院所有病人、工作人员及感染有关因素和环指对全院所有病人、工作人员及感染有关因素和环 境的综合监测，了解全院感染率、各科感染率、病境的综合监测，了解全院感染率、各科感染率、病 原体及其耐药性和因院感造成的经济损失等，对全原体及其耐药性和因院感造成的经济损失等，对全 院人员进行宣传教育，发现问题，采取措施，预防院人员进行宣传教育，发现问题，采取措施，预防 发生、中止流行。发生、中止流行。 n 目前我国大多数医院都需要进行全面综合性监测目前我国大多数医院都需要进行全面综合性监测 23 医院感染监测方法医院感染监测方法 n 目标性监测目标性监测 n 在全面综合性监测基础上才能进行目标性监测，包在全面综合性监测基础上才能进行目标性监测，包 括部门监测、轮转监测、从优监测等方法括部门监测、轮转监测、从优监测等方法 n 是医院感染监测的一种新观点和方法是医院感染监测的一种新观点和方法 24 医院感染监测方法医院感染监测方法 n 资料收集方法资料收集方法 n 医生自报医生自报 漏报率高，需提高医生对医感的认识，加强制度与责任漏报率高，需提高医生对医感的认识，加强制度与责任 管理。管理。 n 横断面（现况）调查横断面（现况）调查 由医院感染专职人员完成，可初步了解医院感染率的本由医院感染专职人员完成，可初步了解医院感染率的本 底及其变动情况，同时分析医院感染的危险因素，找底及其变动情况，同时分析医院感染的危险因素，找 出薄弱环节，采取控制措施，工作量大，容易做到，出薄弱环节，采取控制措施，工作量大，容易做到， 结果快速，漏报率高，可连续定期进行以使结果尽量结果快速，漏报率高，可连续定期进行以使结果尽量 符合医院感染的真实情况符合医院感染的真实情况 25 医院感染监测方法医院感染监测方法 n 回顾性调查回顾性调查 n 一般回顾性调查（无对照组）一般回顾性调查（无对照组） n 病例病例 -对照感染危险因素调查对照感染危险因素调查 为分析感染原因提供初步依据，常因原始病历记载不完为分析感染原因提供初步依据，常因原始病历记载不完 整，漏诊难以避免，不能真实反映医院感染水平整，漏诊难以避免，不能真实反映医院感染水平 n 感染监控护士登记感染监控护士登记 每个病房应设一名兼职医院感染监控护士，加以培训每个病房应设一名兼职医院感染监控护士，加以培训 ，对其病房发生的感染病例进行登记，随时与感染，对其病房发生的感染病例进行登记，随时与感染 控制科联系控制科联系 26 医院感染监测方法医院感染监测方法 n 医院感染专职人员做前瞻性调查医院感染专职人员做前瞻性调查 要监测医院感染的发病率，必须由专职医院感染要监测医院感染的发病率，必须由专职医院感染 人员组织进行前瞻性调查人员组织进行前瞻性调查 n 有计划地对某些重点科室或全院进行某时期的医院有计划地对某些重点科室或全院进行某时期的医院 感染前瞻调查，以发现该时期某病房或全院发生的感染前瞻调查，以发现该时期某病房或全院发生的 感染病例感染病例 n 计算医院感染发病率，以及有关危险因素的分析计算医院感染发病率，以及有关危险因素的分析 n 也可对暴露与未暴露于某危险因素的病例进行队列也可对暴露与未暴露于某危险因素的病例进行队列 研究，以进一步证实感染的原因。研究，以进一步证实感染的原因。 n 结果较为真实可靠，但需一定人力、物力及较长时结果较为真实可靠，但需一定人力、物力及较长时 间，有时难于坚持间，有时难于坚持 27 医院感染监测方法医院感染监测方法 n 资料整理资料整理 n 原始资料整理核实原始资料整理核实 n 是否按要求认真完整填写院感病例登记表及其它相是否按要求认真完整填写院感病例登记表及其它相 关表格，缺项要立即补上关表格，缺项要立即补上 n 对诊断不确定的感染病例再核实对诊断不确定的感染病例再核实 n 去除重复的病例去除重复的病例 28 医院感染监测方法医院感染监测方法 n 统计指标统计指标 对核实好的资料计算以下指标对核实好的资料计算以下指标 n 前瞻性调查资料，要计算全院及各科的医院感染病前瞻性调查资料，要计算全院及各科的医院感染病 例发病率及例次发病率例发病率及例次发病率 n 横断面调查资料可计算医院感染现患率及各部位感横断面调查资料可计算医院感染现患率及各部位感 染率及构成比染率及构成比 n 对平时医生自报资料，要定期整理计算以上各指标对平时医生自报资料，要定期整理计算以上各指标 29 医院感染监测方法医院感染监测方法 除以上指标外，可根据调查登记表项目进行统计，如除以上指标外，可根据调查登记表项目进行统计，如 n 抗生素使用率抗生素使用率 n 病原菌及其耐药率病原菌及其耐药率 n 各种危险因素情况等各种危险因素情况等 应对各项指标进行编号以便输入计算机管理应对各项指标进行编号以便输入计算机管理 30 医院感染监测方法医院感染监测方法 n 结果分析（一）结果分析（一） n 比较医院感染率的变动性况，与本底感染率比较是否比较医院感染率的变动性况，与本底感染率比较是否 有上升或下降，分析其原因是什么有上升或下降，分析其原因是什么 n 分析各种危险因素与医院感染病例发生的关系分析各种危险因素与医院感染病例发生的关系 n 抗生素使用率与细菌耐药性的情况抗生素使用率与细菌耐药性的情况 n 各种感染病原菌变动及流行株情况各种感染病原菌变动及流行株情况 31 医院感染监测方法医院感染监测方法 n 结果分析（二）结果分析（二） n 医院感染对本院医护人员健康的损害及影响出勤率等医院感染对本院医护人员健康的损害及影响出勤率等 情况情况 n 因医院感染增加病人痛苦、延长住院天数以及造成的因医院感染增加病人痛苦、延长住院天数以及造成的 经济损失等经济损失等 n 如医院感染暴发，则需立即查清原因，采取针对性措如医院感染暴发，则需立即查清原因，采取针对性措 施并观察其效果如何施并观察其效果如何 32 院感监测资料的利用院感监测资料的利用 n 对医院感染发展趋向预测和预报对医院感染发展趋向预测和预报 n 发现某时期散发感染病例增加，已明显超过了发现某时期散发感染病例增加，已明显超过了 本底感染率本底感染率 n 流行菌株及耐药性有变化流行菌株及耐药性有变化 可预测将有可能发生医院感染的流行或暴发可预测将有可能发生医院感染的流行或暴发 33 院感监测资料的利用院感监测资料的利用 n 探索危险因素探索危险因素 除传统的院感危险因素外，我们面临着：除传统的院感危险因素外，我们面临着： n 各种新型侵入性医疗检查治疗手段的大量使用各种新型侵入性医疗检查治疗手段的大量使用 n 患者增加、床位增加、老年与婴幼儿、免疫低下、慢患者增加、床位增加、老年与婴幼儿、免疫低下、慢 性病患者不断增加性病患者不断增加 n 新型广谱抗生素的大量使用、多重甚至泛耐药细菌、新型广谱抗生素的大量使用、多重甚至泛耐药细菌、 “ 超级细菌超级细菌 ”的出现的出现 n 高致性微生物不断出现（高致性微生物不断出现（ SARS、 H5N1、禽流感、禽流感 ） 使医院感染不断出现新的危险因素，亟需通过监测使医院感染不断出现新的危险因素，亟需通过监测 去探索与专题研究去探索与专题研究 34 院感监测资料的利用院感监测资料的利用 n 防治效果的评价防治效果的评价 n 通过监测工作可跟踪观察某项防治措施对医院通过监测工作可跟踪观察某项防治措施对医院 感染发病率的动态变化，凡是使用后发病率能感染发病率的动态变化，凡是使用后发病率能 明显降低者，可认为该项措施是有效的，反之明显降低者，可认为该项措施是有效的，反之 则认为无效。则认为无效。 35 医院微生物监测方法医院微生物监测方法 36 环境空气的监测环境空气的监测 n 采样时间采样时间 清毒处理后与进行医疗活动之前清毒处理后与进行医疗活动之前 n 采样方法采样方法 n 仪器采样法仪器采样法 :精确精确 ,结果接近实际结果接近实际 ,有有 JWL 、 LWC- 、 Anderson等型号空气采样器。等型号空气采样器。 n 自然沉降法自然沉降法 :简便易行、国内应用广泛。简便易行、国内应用广泛。 37 环境空气的监测环境空气的监测 n 自然沉降法自然沉降法 n 培养基：直径培养基：直径 9cm普通营养琼脂平板普通营养琼脂平板 n 布点方法：室内面积布点方法：室内面积 30m2,设内、中、外对角线设内、中、外对角线 3 点，内、外点布点部位距墙壁点，内、外点布点部位距墙壁 1m处；室内面积处；室内面积 30m2，设，设 4角及中央角及中央 5点，点， 4角的布点部位距墙壁角的布点部位距墙壁 1m处。处。 n 采样方法：采样方法： 将直径将直径 9cm的普通琼脂平板的普通琼脂平板 放在室内放在室内 各采样点处，高度各采样点处，高度 距地面距地面 1.5m，将平板盖打开，将平板盖打开， 盖子扣在平板的边缘上盖子扣在平板的边缘上 暴露暴露 5分钟分钟 后送检后送检 。 38 环境空气的监测环境空气的监测 n 培养方法：送检平板置培养方法：送检平板置 361 温箱培养温箱培养 48小时，小时， 计数各平板菌落数并计算平均菌落数（小数点后计数各平板菌落数并计算平均菌落数（小数点后 一位、四舍五入），并分离致病菌。一位、四舍五入），并分离致病菌。 n 结果报告结果报告 计算公式：计算公式： 细菌总数（细菌总数（ cfu/m3)=50000N/(AT) A：平板面积（：平板面积（ cm2)； T：暴露时间（：暴露时间（ min) N：平均菌落数（：平均菌落数（ cfu) 39 环境空气监测的结果计算（自然沉降法环境空气监测的结果计算（自然沉降法 ） 6cm 7.5cm 9cm 5min 354 226 158 10min 177 113 79 15min 118 76 52 30min 59 38 26 40 物体表面的监测物体表面的监测 n 采样时间采样时间 n 消毒处理后消毒处理后 4h内进行采样内进行采样 n 采样方法：采样方法： n 棉拭子采样法棉拭子采样法 n 压印法压印法 41 物体表面的监测物体表面的监测 n 拭子采样法：拭子采样法： n 采样面积：被采表面采样面积：被采表面 100cm2 时时 ,取全部表面取全部表面 ；被；被 采表面采表面 100cm2时时 ,取取 100cm2。 n 采样方法：用采样方法：用 55cm2的标准灭菌规格板，放在被的标准灭菌规格板，放在被 检物体表面。用浸有含相应中和剂的无菌采样液检物体表面。用浸有含相应中和剂的无菌采样液 的棉拭子的棉拭子 1支，在规格板内横竖往返各涂抹支，在规格板内横竖往返各涂抹 5次，次， 并随之转动棉拭子，连续采样并随之转动棉拭子，连续采样 1 4个规格板面积个规格板面积 ，剪去或折去手接触部份，棉拭子放入装有，剪去或折去手接触部份，棉拭子放入装有 10ml 采样液的试管中送检，门把手等小型物体则采用采样液的试管中送检，门把手等小型物体则采用 棉拭子直接涂抹物体的方法采样棉拭子直接涂抹物体的方法采样 42 物体表面的监测物体表面的监测 n 检测方法：检测方法： n 将采样管在混匀器上振荡将采样管在混匀器上振荡 20s或用力振摇或用力振摇 80次，用次，用 无菌吸管吸取无菌吸管吸取 1.0ml接种于灭菌平皿，每一样本接接种于灭菌平皿，每一样本接 种种 2个平皿，内加入已溶化的个平皿，内加入已溶化的 45 480C的营养琼脂的营养琼脂 15 18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固后置，边倾注边摇匀，待琼脂凝固后置 36 1 温箱培养温箱培养 48小时，计数菌落数。小时，计数菌落数。 43 物体表面的监测物体表面的监测 n 结果报告（菌落总数）结果报告（菌落总数） 计算公式：计算公式： 物体表面细菌菌落总数物体表面细菌菌落总数 (cfu/cm2)=平皿上菌落的平均数平皿上菌落的平均数 其中小件物品以其中小件物品以 cfu/件报告结果件报告结果 采样面积 (cm2 ) 44 医务人员手生物学监测医务人员手生物学监测 n 采样时间采样时间 n 清毒后立即采样清毒后立即采样 n 采样方法：采样方法： 被检人五指并拢被检人五指并拢 ,用浸有含相应中和用浸有含相应中和 剂的无菌洗脱液的棉拭子在双手指屈面从指根到剂的无菌洗脱液的棉拭子在双手指屈面从指根到 指端往返涂擦指端往返涂擦 2次次 (一只手涂擦面积约一只手涂擦面积约 30 cm2),并随并随 之转动采样棉拭子之转动采样棉拭子 ,剪去操作者手接触部位剪去操作者手接触部位 ,将棉拭将棉拭 子投入子投入 10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内含相应中和剂的无菌洗脱液试管内 ,立立 即送检即送检 . 45 医务人员手生物学监测医务人员手生物学监测 n 检测方法：同前。检测方法：同前。 n 计算公式：计算公式： 手细菌菌落总数手细菌菌落总数 (cfu/cm2)=（平皿上菌落的平均数（平皿上菌落的平均数 采样液稀释倍数）采样液稀释倍数） /（ 30 2） 46 皮肤黏膜的监测皮肤黏膜的监测 n 采样时间：消毒后立即采样采样时间：消毒后立即采样 n 采样方法：用采样方法：用 55cm2的标准灭菌规格板，放在被的标准灭菌规格板，放在被 检皮肤处，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的检皮肤处，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的 棉拭子棉拭子 1支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各 5次次 ，并随之转动棉拭子，剪去手接触部位后。将棉，并随之转动棉拭子，剪去手接触部位后。将棉 拭子投入拭子投入 10ml含相应中和剂的无菌洗脱液的试管含相应中和剂的无菌洗脱液的试管 内，立即送检。不规则的粘膜皮肤处可用棉拭子内，立即送检。不规则的粘膜皮肤处可用棉拭子 直接涂擦采样。直接涂擦采样。 47 皮肤黏膜的监测皮肤黏膜的监测 n 检测方法：将采样管在混匀器上振荡检测方法：将采样管在混匀器上振荡 20s或用力振或用力振 摇摇 80次，用无菌吸管吸取次，用无菌吸管吸取 1.0ml接种于灭菌平皿，接种于灭菌平皿， 每一样本接种每一样本接种 2个平皿，内加入已溶化的个平皿，内加入已溶化的 45 480C 的营养琼脂的营养琼脂 15 18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝，边倾注边摇匀，待琼脂凝 固后置固后置 36 1 温箱培养温箱培养 48小时，计数菌落数。小时，计数菌落数。 48 n 结果报告（菌落总数）结果报告（菌落总数） 计算公式：计算公式： 皮肤粘膜表面细菌菌落总数皮肤粘膜表面细菌菌落总数 (cfu/cm2)=（平皿上菌落（平皿上菌落 的平均数的平均数 采样液稀释倍数）采样液稀释倍数） /55 皮肤黏膜的监测皮肤黏膜的监测 49 使用中消毒液染菌量测定使用中消毒液染菌量测定 n 涂抹法涂抹法 : 用无菌吸管吸取消毒液用无菌吸管吸取消毒液 1.0ml,加入加入 9.0ml含有相应含有相应 中和剂的采样管内混匀中和剂的采样管内混匀 ,用无菌吸管吸取上述溶液用无菌吸管吸取上述溶液 0.2ml,滴于干燥普通琼脂平板滴于干燥普通琼脂平板 ,每份样品同时做每份样品同时做 2个个 平行样平行样 ,一平板置一平板置 200C培养培养 7天天 ,观察霉菌生长情况观察霉菌生长情况 , 另一个平板置另一个平板置 350C温箱培养温箱培养 72h,记数菌落数记数菌落数 ,同时同时 检测致病菌检测致病菌 消毒液染菌量消毒液染菌量 (cfu/ml)=每个平板上菌落数每个平板上菌落数 50 50 使用中消毒液染菌量测定使用中消毒液染菌量测定 n 倾注法倾注法 : n 用无菌吸管吸取消毒液用无菌吸管吸取消毒液 1.0ml,加入到加入到 9.0ml含有相含有相 应中和剂的无菌生理盐水采样管内混匀应中和剂的无菌生理盐水采样管内混匀 ,分别取分别取 0.5ml放入放入 2只灭菌平皿内只灭菌平皿内 ,加入已溶化的加入已溶化的 45 480C 的营养琼脂的营养琼脂 15 18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝，边倾注边摇匀，待琼脂凝 固固 ,一平板置一平板置 200C培养培养 7天天 ,观察霉菌生长情况观察霉菌生长情况 ,另一另一 个平板置个平板置 36 10C温箱培养温箱培养 72h,记数菌落数记数菌落数 ,同时检同时检 测致病菌测致病菌 消毒液染菌量消毒液染菌量 (cfu/ml)=每个平板上菌落数每个平板上菌落数 20 51 使用中消毒液染菌量测定使用中消毒液染菌量测定 n 结果判断结果判断 : 消毒液染菌量消毒液染菌量 100 cfu/ml,并未检出致病菌并未检出致病菌 为合格为合格 n 注意事项注意事项 :采样后采样后 1h内监测内监测 52 消毒灭菌的卫生学标准消毒灭菌的卫生学标准 环境环境 类别类别 范围范围 标准标准 空气空气 物体表面物体表面 手手 类类 洁净手术室、洁净病洁净手术室、洁净病 房房 10cfu/m3 5cfu/cm2 5 cfu/cm2 类类 普通手术室、产房、普通手术室、产房、 婴儿室、烧伤病房、婴儿室、烧伤病房、 重症监护病房等重症监护病房等 200 cfu/m3 5 cfu/cm2 5cfu/cm2 类类 各类普通病房、急诊各类普通病房、急诊 室、化验室、治疗室室、化验室、治疗室 等等 500cfu/m3 10cfu/cm2 10cfu/cm2 类类 传染科及病房传染科及病房 15cfu/cm2 15cfu/cm2 53 沙门菌检验程序沙门菌检验程序 样品样品 胆盐乳糖采样管胆盐乳糖采样管 SS或伊红美蓝平板或伊红美蓝平板 三糖铁琼脂三糖铁琼脂 血清凝集试验血清凝集试验 葡萄糖葡萄糖 乳糖乳糖 甘露醇甘露醇 靛基质靛基质 尿素尿素 赖氨酸脱羧酶赖氨酸脱羧酶 54 大肠菌群检验程序大肠菌群检验程序 样品样品 胆盐乳糖采样管胆盐乳糖采样管 麦康凯平板或伊红美蓝平板麦康凯平板或伊红美蓝平板 染色镜检染色镜检 乳糖复发酵乳糖复发酵 55 金黄色葡萄球菌检验程序金黄色葡萄球菌检验程序 样品样品 7.5%氯化钠肉汤氯化钠肉汤 血平板或甘露醇高盐平板血平板或甘露醇高盐平板 染色镜检染色镜检 甘露醇发酵试验甘露醇发酵试验 血浆凝固酶试验血浆凝固酶试验 56 绿脓杆菌检验程序绿脓杆菌检验程序 样品样品 胆盐乳糖采样液胆盐乳糖采样液 普通琼脂平板或血琼脂平板普通琼脂平板或血琼脂平板 染色镜检染色镜检 氧化酶试验氧化酶试验 阴性阴性 绿脓菌素试验绿脓菌素试验 阴性阴性 阳性阳性 明胶液化试验明胶液化试验 硝酸盐还原试验硝酸盐还原试验 42C0生长试验生长试验 57 乙型溶血性链球菌检测程序乙型溶血性链球菌检测程序 样品样品 1%葡萄糖肉汤葡萄糖肉汤 血平板血平板 染色镜检、生化反应染色镜检、生化反应 58 医疗器械采样及检查方法医疗器械采样及检查方法 n 无菌检验的定义：指检查经灭菌的敷料、缝线、无菌检验的定义：指检查经灭菌的敷料、缝线、 一次性使用的医疗用品、无菌器械以及适用于无一次性使用的医疗用品、无菌器械以及适用于无 菌室的其他品种是否无菌的一种方法。菌室的其他品种是否无菌的一种方法。 n 无菌检验应在洁净度为无菌检验应在洁净度为 100级单向流空气区域内进级单向流空气区域内进 行行 n 应严格遵守无菌操作，避免微生物污染应严格遵守无菌操作，避免微生物污染 n 对单向流空气区域及工作台面，必须进行洁净度对单向流空气区域及工作台面，必须进行洁净度 验证验证 59 医疗器械采样及检查方法医疗器械采样及检查方法 n 采样时间采样时间 n 在灭菌处理后，存放有效期内采样在灭菌处理后，存放有效期内采样 60 医疗器械采样及检查方法医疗器械采样及检查方法 n 采样方法采样方法 n 缝合针、针头、刀片等小件医疗器械：缝合针、针头、刀片等小件医疗器械： 取取 5件直接浸入件直接浸入 6管需管需 -厌氧培养管（其中一管作阳厌氧培养管（其中一管作阳 性对照）与性对照）与 4管霉菌培养管。培养基用量为管霉菌培养管。培养基用量为 15ml/ 管管 61 医疗器械采样及检查方法医疗器械采样及检查方法 n 注射器：注射器： 取取 5付注射器，在付注射器，在 5ml洗脱液中反复抽吸洗脱液中反复抽吸 5次，洗下次，洗下 管内细菌，混和后接种需厌氧菌培养管（共管内细菌，混和后接种需厌氧菌培养管（共 6管，管， 其中其中 1管作阳性对照）与霉菌培养管（共管作阳性对照）与霉菌培养管（共 4管）接管）接 种量为种量为 1ml注射器注射器 0.5ml, 2ml注射器注射器 1ml, 5 10ml注注 射器射器 2ml ,20 50ml注射器注射器 5ml。培养基用量为接。培养基用量为接 种量种量 2ml以下以下 15ml/管管 ,接种量接种量 5ml为为 40ml/管。管。 62 医疗器械采样及检查方法医疗器械采样及检查方法 n 手样钳、镊子等大件医疗器械：手样钳、镊子等大件医疗器械： 取取 2件用蘸有无菌洗脱液的棉拭子反复涂抹采样，件用蘸有无菌洗脱液的棉拭子反复涂抹采样， 将棉拭子投入将棉拭子投入 5ml无菌洗脱液中，将采样液混匀，无菌洗脱液中，将采样液混匀， 接种于需氧接种于需氧 -厌氧培养管（共厌氧培养管（共 6管，其中管，其中 1管作阳性管作阳性 对照）与霉菌培养基（共对照）与霉菌培养基（共 4管）。接种量为管）。接种量为 1ml/管管 ，培养基用量为，培养基用量为 15ml/管。管。 63 医疗器械采样及检查方法医疗器械采样及检查方法 n 检测方法：检测方法： n 需设阳性及阴性对照管需设阳性及阴性对照管 n 待检样品的需氧待检样品的需氧 -厌氧培养管及阳性与阴性对照管厌氧培养管及阳性与阴性对照管 30 35 培养培养 5天，霉菌培养管与阴性对照管天，霉菌培养管与阴性对照管 20 25 培养培养 7天，培养期间逐日检查是否有菌生天，培养期间逐日检查是否有菌生 长。如不能从外观判断的样品需作涂片染色镜检长。如不能从外观判断的样品需作涂片染色镜检 。 64 医疗器械采样及检查方法医疗器械采样及检查方法 n 无菌检验的结果判断无菌检验的结果判断 n 阳性对照在阳性对照在 24h内应有菌生长，阴性对照在培养期内应有菌生长，阴性对照在培养期 间应无菌生长间应无菌生长 n 如需如需 -厌氧管及霉菌培养管内均为澄清或虽显混浊厌氧管及霉菌培养管内均为澄清或虽显混浊 但经证明并非有菌生长，判为灭菌合格。但经证明并非有菌生长，判为灭菌合格。 n 如任何一管明显混浊并证实有菌生长，应重新取如任何一管明显混浊并证实有菌生长，应重新取 样，分别按同样方法复试样，分别按同样方法复试 2次，除阳性对照外，其次，除阳性对照外，其 他各管均不得有菌生长，否则判为灭菌不合格。他各管均不得有菌生长，否则判为灭菌不合格。 65 无菌检验注意事项无菌检验注意事项 n 送检时间不得超过送检时间不得超过 6h，若样品保存于，若样品保存于 0 4 则则 不得超过不得超过 24h n 被采表面被采表面 100cm2 时时 ,取全部表面取全部表面 ；被采表面；被采表面 100cm2时时 ,取取 100cm2。 n 若消毒因子为化学消毒剂，采样液中应加入相应若消毒因子为化学消毒剂，采样液中应加入相应 中和剂。中和剂。 66 医疗用品细菌菌落卫生标准医疗用品细菌菌落卫生标准 类别类别 标准标准 进入人体无菌组织、器官进入人体无菌组织、器官 或接触破损皮肤、黏膜的或接触破损皮肤、黏膜的 医疗用品医疗用品 无菌无菌 接触黏膜的医疗用品接触黏膜的医疗用品 20cfu/g或或 100cm，致病性微生物，致病性微生物 不得检出不得检出 接触皮肤的医疗用品接触皮肤的医疗用品 200cfu/g或或 100cm，致病性微生，致病性微生 物不得检出物不得检出 67 洗脱液的配制方法洗脱液的配制方法 蛋白胨蛋白胨 10g 氯化钠氯化钠 8.5g 吐温吐温 80 1.0ml 加加 0.03mol/L PBS至至 1000ml 注：注： 0.03mol/L PBS（ PH7.2-7.4）配方：）配方： 磷酸氢二钠磷酸氢二钠 2.84g 磷酸二氢钾磷酸二氢钾 1.36g 加加 H2O至至 1000ml 68 常用消毒液的相应中和剂常用消毒液的相应中和剂 消毒剂（浓度消毒剂（浓度 ） 中和剂（浓度中和剂（浓度 ） 含氯（碘）消毒剂（含氯（碘）消毒剂（ 0.1-0.5） 硫代硫酸钠（硫代硫酸钠（ 0.1-1.0） 过氧乙酸（过氧乙酸（ 0.1-0.5） 硫代硫酸钠（硫代硫酸钠（ 0.1-0.5） 过氧化氢（过氧化氢（ 1.0-3.0） 硫代硫酸钠（硫代硫酸钠（ 0.5-1.0） 福尔马林（福尔马林（ 1.0） （ 1）双甲酮（）双甲酮（ 1.0）与吗啉（）与吗啉（ 0.6）混合）混合 液；（液；（ 2）亚硫酸钠（）亚硫酸钠（ 0.1-0.5）；（）；（ 3）氢）氢 氧化铵（氧化铵（ 25.0） 戊二醛（戊二醛（ 2.0） 甘氨酸（甘氨酸（ 1.0） 季胺盐类消毒剂（季胺盐类消毒剂（ 0.1-0.5） 吐温吐温 80（ 0.5-3.0） +卵磷脂（卵磷脂（ 1.0-2.0） 洗必泰（洗必泰（ 0.1-0.5） 同季胺盐类同季胺盐类 酚类消毒剂（酚类消毒剂（ 30.0-50.0） 吐温吐温 80（ 0.5-3.0） 汞类消毒剂（汞类消毒剂（ 0.002-0.5） 巯基醋酸钠（巯基醋酸钠（ 0.2-2.0） 碱类消毒剂碱类消毒剂 等当量酸等当量酸 酸类消毒剂酸类消毒剂 等当量碱等当量碱 69 手术室环境的监测手术室环境的监测 n 层流手术室的空气监测方法层流手术室的空气监测方法 n 浮游菌浓度监测法（浮游菌浓度监测法（ CFU/m3） n 沉降菌浓度监测法（沉降菌浓度监测法（ CFU/皿）皿） 70 手术室环境的监测手术室环境的监测 n 沉降菌浓度监测法沉降菌浓度监测法 n 采样时间采样时间 : 级洁净手术室和洁净辅助用房检测前级洁净手术室和洁净辅助用房检测前