免疫学复习资料

免疫学复习资料 2012 一、名词解释 （英文-中文-翻译）10*2=20 分 1、免疫（immunit） 是指机体识别自身与非自身的抗原，对自身成份形成天然免疫耐受， 对非自身抗原发生排 斥作用的一种生理功能。 2、免疫学（immunology ) 是研究免疫系统的机构与功能，并通过对其在免疫应答过程中所产生的免疫保护与免疫 损伤机制的研究，探讨有效的免疫措施，实现以防病、治病为目的的一门现代医学学科。 3、免疫细胞（immunity cell ) 凡参与免疫应答或与免疫应答有关的细胞统称为免疫细胞。 4、免疫应答（Immune response) 是指机体免疫系统接受抗原刺激发生一系列反应，并以排出或分解该抗原为目的的过程。 5、抗原（antigen） 一类能刺激机体免疫系统，随之产生免疫应答，包括激发机体产生特异性抗体，或致敏淋 巴细胞，并能与它激发产生的抗体或致敏淋巴细胞特异性反应的物质。 6、抗体（antibody) 机体在抗原刺激下形成的一类具有与相应抗原发生特异性结合反应的特定结构球蛋白。 7、抗原抗体反应（antigen-antibody） 是指抗原与相应抗体在体内或体外发生的特异性结合反应。可发生于体内，也可发生于体 外。 8、带现象（zone phenomenon ） 抗原抗体浓度的最适比，称为等价带。在等价带的前后，由于抗体和抗原过量，形成的沉 淀物少，上清液中可测出游离的抗体或抗原，这种现象称为带现象。 当抗体过量时称为前带（prezone）,抗原过量时称为后带（postzone). 9、鱼钩效应（hook effect） 双位点一步法中，当待测抗原浓度过高时，过量的抗原可分别同固相抗体和酶标记抗体结 合而抑制夹心复合物的形成，出现钩状效应，显色降低，严重时可出现假阴性结果。 10、免疫原（immunogen） 即抗原能诱导机体产生抗体，又能与抗体在体内发生特异性反应的物质，因而制备合格免 疫原是制备高品质抗体的前提条件。 11、免疫佐剂（immunoadjuvant） 先于抗原或与抗原同时注入体内，可增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答类型的 物质被称为免疫佐剂，简称佐剂（adjuvant）,佐剂本身具有免疫原性，也可无免疫原性。 12、抗血清（antiserum）又称多克隆抗体（PcAb） 亦称免疫血清，用抗原以不同途径免疫动物，从动物血清中获取抗体，该类含有抗体的血 清称为抗血清。由于免疫动物的抗原往往具有多种抗原表位，可激活体内多个 B 细胞克隆 产生针对抗原多种表位的混合抗体，因而抗血清也称为多克隆抗体（polycloal antibody,PcAb） 。 13、单克隆抗体（McAb) 设法将单个 B 细胞分离出来加以增值形成一个克隆群落，该 B 细胞克隆产生出针对单一表 位、结构相同、功能均一的抗体，成为单克隆抗体（monoclonal antibody,McAb) 14、凝集反应（agglutination reaction） 是指细菌和红细胞等颗粒性抗原或表面包被可溶性抗原（或抗体）的颗粒性载体与相应抗 体（或抗原）特异性结合后，在适当电解质存在下，出现肉眼可见的凝集现象。 15、直接凝集反应（direct agglutination reaction) 在适当电解质参与下，细菌、螺旋体和红细胞等颗粒抗原直接与相应抗体结合出现肉眼可 见的凝集现象，称为直接凝集反应。 16、间接凝集反应（indirect agglutination) 将可溶性抗原（或抗体）先吸附于适当大小的颗粒性载体的表面，然后与相应抗体（或抗 原）作用，在适宜的电解质存在条件下，出现特异性凝集现象，称间接凝集反应（indirect agglutination)或被动凝集反应（ passive agglutination)。 17、沉淀反应(precipitation reaction) 抗原可以是多糖、蛋白质、类脂等。同相应的抗体比较，抗原的分子小，单位体积内含有 的抗原量多。在做定量试验时，为了不使抗原过剩，应稀释抗原，并以抗原的稀释度作为 沉淀反应的效价。 18、移植（transplantation) 是指将健康细胞、组织或器官从其原部位移植到自体或异体的一定部位、用以替代或补尝 机体所丧失的结构和（或）功能的现代医疗手段。被移植的细胞、组织或器官称移植物， 提供移植物的个体称为供体，接受移植物的个体称为受体或宿主。 19、移植排斥反应（tranlplantation refection ） 是针对移植抗原产生免疫应答，从而导致移植物功能丧失或受者机体损害的过程。 20、标记免疫分析（analysis of immune markers) 用标记物标记抗体或抗原进行抗原抗体反应，借以提高免疫学诊断的敏感性。包括放射免 疫技术、酶免疫技术、免疫荧光技术。 21、超敏反应（hypersensitivity) 又称变态反应，是指机体再次接受相同抗原刺激后，发生的以组织细胞损伤或生理功能紊 乱为主的特异性免疫应答。引起超敏反应的抗原称之为变应原（allergen） 。 22、肿瘤抗原（tumor antigen ） 在肿瘤发生、发展过程中新出现的或过度表达的抗原物质。肿瘤抗原大多数存在于肿瘤细 胞表面，少数在细胞质和细胞核内。而与肿瘤免疫有关的抗原主要在细胞表面，这类抗原 与细胞膜结合不易脱落，具有一定的免疫原性，可被宿主免疫系统识别。 23、肿瘤特异性抗原（tumor specific antigen,TSA） 肿瘤细胞所特有的抗原，只存在于肿瘤细胞表面，而不存在于正常组织或细胞的大分子物 质。多为突变基因产物，如突变的 ras 癌基因产物。曾被称为肿瘤特异性移植抗原（ tumor specific transplantation,TSTA）或肿瘤排斥抗原（tumor rejection antigen,TRA) 24、肿瘤相关抗原（tumor associated antigen,TAA） 非肿瘤细胞所特有的，正常组织或细胞也可表达的抗原物质，但此类抗原在癌变细胞的表 达水平远远超过正常细胞。 （22-24，三选一） 25、免疫增殖性疾病（immunopro liferative disease) 免疫器官、免疫细胞或免疫细胞（主要是淋巴细胞）异常增生所致的一组疾病称为免疫增 殖性疾病。 26、宿主抗移植物反应（host versus graft reaction,HVGR ） 主要是受者 T 淋巴细胞识别移植抗原，并激活免疫系统，产生细胞和体液免疫应答，攻击 和破坏移植物。 27、 移植物抗宿主反应（graft versus host reaction,GVHR） 当受者处于免疫无能或免疫抑制状态时，移植物内含有较多成熟的供者 T 细胞，通过识 别受者抗原而产生攻击受者的免疫应答。常见于骨髓移植、小肠移植及免疫器官移植。 28、自身免疫（autoimmunity） 是指机体免疫系统对自身成分(自身 Ag)发生免疫应答的现象。 29、自身免疫性疾病（autoimmunity disease） 由于自身免疫引起自身组织器官损伤而出现的疾病称为自身免疫病。 30、自身耐受（self tolerance) 是指机体免疫系统对自身 Ag 不发生免疫应答，无免疫排斥的现象。 31、免疫应答（immune response ） 是指机体受抗原刺激后，免疫活性细胞（T、B 细胞）识别抗原、自身活化、增值、分化 及产生特异性免疫效应的过程。 32、化学发光剂(chemiluminesent agent) 在化学发光反应中参与能量转移并最终以发射光子的形式释放能量的化合物，称为化学发 光剂或发光底物。 33、细胞因子（cytokine) 是由机体活化的免疫细胞及某些基质细胞分泌的小分子蛋白质，通过结合细胞表面的相应 受体发挥生物学效应。 34、细胞黏附因子（cell-sdhesion molecules) 是由细胞产生、介导细胞与细胞间或细胞与基质间相互接触和结合的分子。 35、发光免疫分析（chemiluminescence immune analysis) 将发光分析和免疫反应相结合而建立起来的一种新的检测微量抗原或抗体的新型标记免疫 分析技术。 36、抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用（ADCC） 指表达 IgGFc 受体的 NK 细胞、巨噬细胞和中 性 粒 细 胞 等，通过与已结合在病毒感染细胞 和肿瘤细胞等靶细胞表面的 IgG 抗体的 Fc 段结合，而杀伤这些靶细胞的作用。 2、选择题 40 分 1、免疫组织与器官（免疫组织又称淋巴结在组织） 中枢免疫器官：是免疫细胞产生、分化和成熟的场所。由骨髓、胸腺组成。 （禽类法氏囊） 外周免疫器官及组织：是免疫应答的场所，由淋巴结、脾脏、扁桃体、粘膜相关淋巴组织、 皮肤相关淋巴组织等组成。 骨髓：B 淋巴细胞发育成熟的场所。 胸腺：T 淋巴细胞发育成熟的场所。 （粘膜伴随的淋巴组织扁桃体、阑尾、小肠的派氏集合淋巴结） 2、免疫细胞： 干细胞系、淋巴细胞、单核吞噬细胞、其他 APC（抗原递呈细胞） 、其他吞噬细胞。 按免疫细胞在体内的作用不同分为三大类： 第一类为淋巴细胞，包括能特异性识别抗原，能增殖分化并产生免疫效应的 T 细胞、B 细 胞和 NK 细胞； 第二类为单核巨噬细胞，包括血液中的单核细胞和组织中的巨噬细胞，它们组成单核巨噬 系统，在免疫反应中起辅佐作用； 第三类为参与免疫应答的细胞，包括中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞和肥大细 胞等，它们参与免疫应答中的某一环节。 3、免疫分子：主要是由一些免疫活性细胞或相关细胞分泌的蛋白质及小分子多肽物质组成， 它们参与机体的免疫反应或免疫调节。主要包括免疫球蛋白、补体、细胞因子、细胞粘附 分子和人类白细胞分化抗原等。 T 细胞受体（TCR） 、B 细胞受体（BCR ） 、CD 分子、粘附分子、 MHC、其他免疫分子 免疫球蛋白、补体分子、细胞因子 4、免疫系统功能：免疫防御、免疫自稳、免疫监视。 5、免疫应答分 3 个阶段：识别阶段、活化阶段、效应阶段。 6、抗原抗体结合力范德华力最小，疏水结合力最大。 7、半抗原（hapten）：仅有抗原性而无免疫原性的物质，如多肽、甾体激素、核苷、某些 药物等小分子物质均属于半抗原，这些小分子物质无免疫原性，只有与载体结合后才具有 免疫原性。半抗原+载体= 完全抗原 8、凝胶过滤（分子筛）：按分子大小将蛋白质分离。凝胶是具有三维空间多孔网状结构的 物质。含有各种分子的样品液缓慢流经凝胶柱，大分子物质不易进入凝胶微孔中，在凝胶 颗粒之间的空隙很快通过，首先被洗脱出来；小分子物质进入凝胶的微孔中，反复洗脱后 缓慢流出。 9、半抗原与载体结合的数目与免疫原性密切相关，一般认为一个载体分子上至少要连接 20 个以上的半抗原分子，才能有效地刺激免疫动物产生抗体。 10、组织抗原：高速捣碎法、研磨法 细胞抗原：反复冻融法、超声破碎法、自溶法、酶处理法、表面活性剂处理法 11、抗原纯化方法：超速离心法、选择性沉淀法、凝胶过滤法、离子交换层析法、亲和层 析法、电泳法等 12、纯化抗原的鉴定：主要包括含量测定、分子量鉴定、纯度鉴定和免疫学活性鉴定等。 13、抗血清的鉴定：抗体特异性、效价、纯度、亲和力等 14、抗血清保存方法：4 度保存：可保存三个月或半年 冷冻保存：可保存 23 年 真空干燥保存： 510 年，保存时间最长。 15、抗体特异性：抗体对相应的抗原及结构相似抗原的识别能力。 方法：双向免疫琼脂扩散技术 16、？抗血清的制备流程：选择免疫动物-免疫动物（免疫方法和途径） -动物采血-分离 血清 17、最常应用于动物的佐剂是弗氏佐剂： 分为弗氏不完全佐剂：油剂+氧化剂 弗氏完全佐剂：弗氏不完全佐剂+卡介苗 18、佐剂的作用机制： 改变抗原的物理性状，延缓抗原降解和排除，从而更有效地刺激免疫系统。 刺激单核 -吞噬细胞系统，增强其处理和提呈抗原的能力；活化 APC 刺激淋巴细胞增殖和分化，可提高机体初次和再次免疫应答的抗体滴度； 改变抗体的产生类型以及诱导迟发型超敏反应。 19、杂交瘤细胞选择培养基（HAT 培养基）成份： H-雌黄嘌呤； A -氨甲喋呤；T-胸腺 嘧啶核苷 20、凝集反应发生分两个阶段：抗原抗体的特异性结合阶段，此阶段反应快，仅需数秒 至数分钟，但不出现可见反应。出现可见的凝集反应阶段，此阶段反应慢，一般需要数 分钟至数小时。 21、在免疫学技术中，凝集反应可分为直接凝集反应和间接凝集反应两大类。 22、间接凝集反应类型 （1）正向间接凝集反应：用可溶性抗原致敏载体以检测标本中的待检抗体，以反应数分钟 出现凝集为阳性。 （2）反向间接凝集反应：用特异性抗体致敏载体以检测标本中的待检抗原。 （3）间接凝集抑制反应：用抗原致敏的颗粒载体及相应的抗体作为诊断试剂，检测标本中 是否存在于致敏抗原相同的抗原。 （4）协同凝集反应（co-agglutination)：以葡萄球菌蛋白 A(SPA)蛋白作载体，SPA 具有与 IgG 的 Fc 段结合的特异性，当葡萄球菌与 IgG 抗体连接时， Fab 暴露，可与相应抗原结合， 葡萄球菌就称为抗体致敏的颗粒载体，与相应抗原接触，出现反向间接凝集反应。用于细 菌、病毒的直接检测。 23、凝集反应的特点：定性检测方法，即根据凝集现象的出现与否判定结果阳性或阴性。 也可以进行半定量检测，即将标本作一系列倍比稀释后进行反应，以出现阳性反应的最高 稀释度作为滴度。 24、抗球蛋白试验（antiglobulin test）：是抗球蛋白参与的间接血凝试验，又称 Coombs 试 验，用于检测抗红细胞不完全抗体。 25、不完全抗体多半是 7S 的 IgG 类抗体，能与相应的抗原牢固结合，但因其分子量较小， 体积小，不能起到桥联作用，在一般条件下不出现可见反应。 26、直接 Coombs 试验：常用于检测新生儿溶血症、自身免疫性溶血症、特发性自身免疫 性贫血和医源性溶血等疾病的患者红细胞上不完全抗体。 间接 Coombs 试验：用于检测母体 Rh(D)抗体和因红细胞不相容的输血所产生的血型抗体； 也可用专一特异性抗球蛋白血清分析与红细胞结合的不完全抗体的 Ig 亚类。 27、沉淀反应分两个阶段，第一阶段为抗原抗体特异性结合，此阶段可以在几秒到几十秒 内瞬间完成出现不可见的可溶性复合物，主要受抗原抗体特异性和结合力的影响。 第二阶段为形成可见的免疫复合物，反应慢，约需几十分钟到数小时完成，受抗原抗体比 例、分子大小、亲和力、绝对浓度、电解质浓度和反应温度的影响。 28、沉淀反应分类 （1）液相内沉淀试验分类：环状沉淀、絮状沉淀、免疫浊度沉淀（投射、散射比浊） （2）凝胶内沉淀试验分类：单向琼脂扩散试验、双向琼脂扩散试验 （3）凝胶免疫电泳技术 a 对流免疫电泳：双向免疫扩散+电泳 b 免疫电泳：双向免疫扩散+区带电泳 c 火箭免疫电泳：单向免疫扩散+电泳 d 免疫固定电泳：沉淀反应+区带电泳 29、双向免疫扩散试验原理：将抗原和抗体溶液分别加在同一凝胶板的对应孔中，两者均 在凝胶中自由扩散，相遇后特异性结合，在比例合适处形成白色沉淀线。观察沉淀线的位 置、形状以及对比关系，可对抗原或抗体进行定性分析。 应用：（1）判断抗原或抗体的存在以及估计相对含量：沉淀线靠近浓度低的一方 （2）分析抗原或抗体相对分子量：分子量越小扩散越快，反之越慢。 （3）分析抗原的性质：两种待检抗原的性质有完全相同、部分相同或完全不同三种情况， 在双向扩散试验中表现 a 两条沉淀线相互吻合相连，表明抗体与两个抗原中的相同表位结合形成沉淀，但不能说 明两个抗原完全相同； b 两条沉淀线交叉，说明两个抗原完全不同； c 两条沉淀线相切，提示有两个抗原之间有部分相同 （4）抗体效价的滴定： （5）鉴定抗原或抗体纯度 30、免疫技术分为：放射免疫技术、荧光免疫技术、酶免疫技术 31、均相酶免疫测定的类型及原理 32、酶免疫技术的方法学评价 33、酶免疫技术的常用酶和底物 标记酶：碱性磷酸酶 底物：4-甲基伞形酮（4MUP） -半乳糖苷酶 4MUG 辣根过氧化物酶 HPA 34、HCG：免疫胶体金技术 35、超敏反应的特点：（1）是病理性免疫应答。 （2）与抗原的性状及进入途径有关。 （3）与抗体的遗传或机体的反应性有关。 （4）可造成机体的组织损伤和功能障碍。 36、抗 Sm 抗体是系统性红斑狼疮（SLE ）的标记抗体。 37、抗 dsDNA 抗体是 SLE 患者的特征性标志抗体，是 SLE 的重要诊断标准之一，抗 dsDNA 抗体滴度与疾病活动度相关，抗体滴度的动态测定可监控治疗。 38、间接免疫荧光法的荧光模型：作为总 ANA 筛查试验，目前最常用核质丰富的培养细 胞-HEP-2 细胞作为抗原（人喉癌上皮细胞） 39、常见的抗核抗体（ANA）荧光图形：均质型（H） 、 斑点型（S）：又称颗粒型、 核 仁型（N） 、 核膜型（M） 、核包膜型、着丝点型、胞浆型 40、抗 ENA 抗体包括 ：抗核糖核蛋白抗体（nRNP） 、 抗 Sm 抗体、抗 SSA 抗体、抗 SSB 抗体、Jo-1 抗体、Scl-70 抗体 41、抗中性粒细胞胞质抗体（ANCA）主要有两型：胞质型（cANCA）和周围型 （pANCA） 。 cANCA 的靶抗原主要是蛋白酶 3（PR3） ，,pANCA 的靶抗原主要是髓过氧化物酶（ MOP） 42、自身免疫性病的分类：按自身抗原分布范围分： 器官特异性自身免疫性疾病，如胰岛素依赖型糖尿病，重症肌无力，多发性硬化症等。 器官非特异性自身免疫性疾病，如 SLE，类风湿性关节炎等。 按发病部位的解剖系统分类：可分为结缔组织、内分泌系统、消化系统、血液系统等自身 免疫病。 按发病原因分类：原发性和继发性。 43、自身免疫性疾病的基本特征； 1：多数病因不详，可有诱因，可无诱因。 2：以女性居多，有遗传倾向。 3：血清中存在自身抗体或致敏淋巴细胞。 5：疾病有重叠现象。 6：病程较长，多迁延为慢性。病情发展缓解反复交替。 7：病损部位有淋巴、浆细胞、中性粒细浸润。 8：免疫抑制剂有一定疗效。 44、自身免疫病的免疫损伤机制：类似于、型超敏反应 45、自身免疫病的检验方法:对流免疫电泳及免疫双扩散法（CIE，ID） 免疫荧光测定法（IFA） 酶联免疫吸附测定法（ELISA） 免疫印迹法（IB） 免疫斑点法 放射性核素法 免疫沉淀法 被动凝集试验 46、自身免疫病发生的相关因素： （1）自身抗原：隐蔽抗原的释放、自身成份的改变、共同抗原引发的交叉反应 （2）免疫调节异常 （3）遗传因素 47、自身抗体的检测及其临床意义 抗核抗体（ANA） 抗 dsDNA 抗体：系统性红斑狼疮（SLE） 抗 RNP 抗体：混合性结缔组织病（MCTD） 抗 Sm 抗体：SLE 特异性标志 抗 SS-A 抗体、抗 SS-B 抗体：干燥综合征（SS） 、SLE 抗 rRNP 抗体是 SLE 的高度特异性抗体，与中枢神经系统病变发生率高度相关。 抗中性粒细胞浆抗体（ANCA） cANCA（主要靶抗原是蛋白酶 3（PR3） ，PR3 为中性粒细胞嗜天青颗粒的主要成分） cANCA + 抗 PR3 抗体 韦格纳肉芽肿（WG） pANCA（主要靶抗原是髓过氧化物酶（MPO） ，MPO 为中性粒细胞嗜天青颗粒的另一种成 分） pANCA ：血管炎 抗磷脂抗体（APLA）中的抗心磷脂抗体（ ACLA、ACL 抗体） 抗磷脂综合征（APS ） 类风湿性关节炎（RA）：类风湿因子（RF） 、抗角蛋白抗体（AKA） 48、肝脏是免疫特惠器官 49、各恶性肿瘤的主要标志物 前列腺癌（PSA） ；乳腺癌（CA15-3）; 肺癌（NSE ）; 卵巢癌（CA125) ；胰腺癌（CA19-9） ； 原发性肝癌（AFP） ；结直肠癌（CEA） ；胃癌（CA72-4） ；淋巴瘤（2-微球蛋白） ；黑色 素瘤（黑色素瘤抗原） 50、根据被移植骨髓的来源，分为自体骨髓移植、同基因骨髓移植、同种异基因骨髓移植。 51、HLA （人类白细胞抗原）分子生物学分型法：RFLP 与 PCR-RFLP 分型法、PCR-SSO 分型法、PCR/SSP 分型法、PCR-SSCP 分型法、SBT 分型法（常用） 。 52、HIV 抗体检测：确认试验主要用免疫印迹法 53、直接检测病毒或其组分，一般不用作常规诊断。 54、HIV 初筛、确认查的都是抗体 HIV 抗体检测：初筛复检确认 初筛：ELISA 法：第三代、第四代（第四代含 P24Ag） 快速检测试剂（RAPID）：金标、硒标 明胶颗粒凝集实验（PA） 确认：免疫印迹法（WB） 免疫荧光试验（IFA） 55、免疫缺陷病的分类 原发性：体液免疫（50%、为主） 、细胞免疫、联合免疫 、非特异性 继发性：营养不良、肿瘤、感染（HIV） 56、梅毒 快速血浆反应素环状卡试验（RPR ）随病情变化，有改变。 确认试验：荧光密螺旋体吸收试验（FTA-ABS） 、免疫印迹法（WB） 梅毒螺旋体荧光抗体双染色试验（FTA-ABS-DS） 、ELISA 57、化学发光剂的种类及发光原理 （1）荧光色素：异硫氰酸荧光素 FITC:最大吸收光波长为 490495nm，最大发射光波长 520530nm，可呈明亮的黄绿色荧光。是应用最广泛的荧光素，其主要优点在于人眼对黄绿 色较为敏感，并且由于标本中的绿色荧光较少，荧光染色时背景干扰小。 四乙基罗丹明 RB200：最大吸收光波长为 570nm，最大发射光波长为 595600nm，呈橘红色 荧光。可与 FITC 的绿色荧光形成鲜明的对比，常用于双重标记或对比染色，但 RB200 荧光 效率较低。 藻红蛋白 PE:最大吸收光波长为 565nm，最大发射光波长为 578nm。由于它在 488nm 处的光 吸收率为 565nm 处的 75%，因此 PE 与 FITC 可用于双标记免疫荧光染色。 （2）其他荧光物质：镧系螯合物、酶作用后产生的荧光物质 58、临床常用的细胞因子与细胞黏附因子的免疫学检测方法：酶联免疫吸附试验方法、流 式细胞分析法、酶联免疫斑点试验 59、简述免疫应答的基本过程及特点。 （1）特异性：抗原效应 T 细胞/抗体 （2）记忆性：初次应答 再次应答 （3）放大性：少量抗原 全身性免疫应答 （4）MHC 限制性 60、血清免疫球蛋白的测定方法主要有哪些？各有何特点？ 临床上常用速率散射免疫比浊法检测 IgG、IgA 、IgM IgD 的测定方法有放射免疫分析法、乳胶颗粒免疫比浊分析法、酶联免疫吸附试验。 总 IgE 的测定方法有化学发光免疫分析法、放射免疫分析法、乳胶颗粒免疫比浊法 特异性 IgE 的检测方法主要有免疫斑点法和酶联免疫吸附试验。 IgG 的测定方法有放射免疫法、酶联免疫吸附试验、单向环状免疫扩散法、速率散射免疫 比浊法 M 蛋白：血清蛋白区带电泳、血清免疫球蛋白定量测定、免疫电泳、免疫固定电泳 冷球蛋白测定：定性测定，即血细胞比容管法。定量测定，为分光光度法。 3、问答题 56 道 1、抗原、抗体反应的特点。 抗原抗体反应的特点包括特异性、可逆性、比例性和阶段性。 特异性（specificity）：抗原与抗体结合反应的专一性称为特异性，这种特异性是由抗原 表位与抗体分子超变区之间空间构型的互补性决定的。 可逆性(reversibility) ：抗原与相应抗体结合形成复合物后，在一定条件下又可解离为游离抗 原与抗体的特性称为抗原抗体结合的可逆性。 比例性(proportionality)：是指抗原与抗体发生可见反应需遵循一定的量比关系。 阶段性：抗原抗体反应分为两个阶段，第一阶段是抗原与抗体特异性结合阶段；第二阶段 为反应可见阶段。 2、抗原、抗体反应的影响因素。 影响因素：一方面是抗原、抗体反应物的自身因素，另一方面是反应的环境因素。 （一）反应物自身因素：1.抗原 Ag：理化特性；Ag 决定簇数量； Ag 决定簇种类； 2.抗体 Ab：来源； 特异性与亲和力；浓度； （二）环境条件：1.电解质：常用 0.85%Nacl 溶液或各种缓冲液作为抗原、抗体的稀释 液 2.酸碱度： 抗原抗体反应一般在 PH 69 进行 3.温度：抗原抗体反应必须在合适的温度中进行，一般在 1540为宜，最适温度为 37。 3、单克隆抗体技术的基本原理（B 细胞杂交瘤技术原理） 将抗原免疫的小鼠脾细胞与具有体外长期繁殖能力的小鼠骨髓瘤细胞通过融合剂（聚乙二 醇，PEG）融为一体，在 HAT 选择性培养基的作用下，只让融合成功的杂交瘤细胞生长，经 过反复的免疫学检测、筛选和单个细胞培养（克隆化） ，最终获得既能产生所需单克隆抗体， 又能体外长期繁殖的杂交瘤细胞系，将这种杂交瘤细胞扩大培养，接种于小鼠腹腔，从小 鼠腹腔积液中获取高效价的单克隆抗体。 4、多克隆抗体和单克隆抗体的比较 PcAb McAb 抗原识别 特异性识别多种抗原决定簇 特异性识别单一抗原决定簇 特异性与亲和力 批与批不同 特异性高 反应能力 强 弱，弱凝集/不呈现沉淀反应 成份 不均一，成份混杂 高度均一性 环境敏感性 弱 强 5、间接凝集抑制实验原理 用抗原致敏的颗粒载体及相应的抗体作为诊断试剂，检测标本中是否存在与致敏抗原相同 的抗原相同的抗原。先将待测抗原标本与相应抗体作用，然后再加入致敏的载体，若出现 凝集现象，则说明标本中不存在相同抗原，抗体试剂未被结合，仍可与载体上的抗原起作 用。若存在相同抗原，抗体与之结合，凝集反应被抑制。同理用抗体致敏的载体及相应的 抗原检测标本中的抗体，则称反向间接凝集抑制反应。 6、凝集反应和沉淀反应有何异同？ 凝集反应 沉淀反应 抗原性质 颗粒性抗原 可溶性抗原 反应物 凝集物（振摇后不浑浊） 沉淀物（振摇后浑浊） 反应时间 几分钟至十几分钟 数小时至数天 7、放射免疫技术分析的原理 放射免疫分析原理而言属于竞争性分析，基于标记抗原和非标记抗原对同一抗体有相同亲 和力，则两者在同一系统中发生于特异性抗体的竞争性结合。将放射性核素标记在抗原分 子上，当待测物（Ag)和标记抗原（*Ag）同时与特异性抗体作用时，发生如下反应： Ag+*Ag+Ab=AgAb+*AgAb（Ag抗原、*Ag标记有放射性的抗原、Ab 抗体） 当特异性 抗体限量且总结合位点数大于 Ag 或*Ag 量，但小于 Ag 和*Ag 的总和时，Ag 和*Ag 与特异性 抗体发生竞争性结合。当标本中无待检 Ag 时，抗体全部与*Ag 结合，并有游离的*Ag 存在； 当标本中有待检 Ag 时，*Ag 与抗体结合将受到抑制，标本中待测 Ag 的与可以测量的结合 标记物*AgAb 的量形成某种反比函数关系。Ag 与*AgAb 之间的关系： 由于上述反应是竞争结 合机制，即，Ag 越多，产生 AgAb 也越多，产生*AgAb 就越少，反之亦然，因此 Ag 与*AgAb 之间呈一定的函数关系。 8、免疫放射分析 IRMA 与放射免疫分析 RIA 的异同点 RIA IRMA 标记物 抗原 抗体 原理 竞争性结合 非竞争性结合 反应体系 Ag*、Ag、Ab 固相 Ab、Ab*Ag 反应动力学 慢 快 灵敏度 相对低 高 检测范围 窄 宽12数量级 特异性 差 优 标准曲线 结合率与测值成反比 结合率与测值成正比 待测原理 大小分子 两抗原决定簇 9、化学发光免疫分析的类型和原理 （1）直接化学发光免疫分析：是用化学发光剂（如吖啶酯）直接标记抗体（抗原） ，与待 测标本中相应的抗原（抗体）发生免疫反应后，形成固相包被抗体-待测抗原-吖啶酯标记 抗体复合物，这时只需加入氧化剂（H2O2）和 pH 纠正液（NaOH）成为碱性环境，吖啶酯即 可在不需要催化剂的情况下分解、发光。 （2）化学酶免疫分析：用参与催化某一化学发光反应的酶如辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶 来标记抗体（或抗原） 。与待测标本中相应的抗原（抗体）发生免疫反应后，形成固相包被 抗体-待测抗原-酶标记抗体复合物。经洗涤后，加入底物（发光剂） ，酶催化和分解底物发 光。 （3）电化学发光免疫分析：以电化学发光剂三联吡啶钌标记抗体（抗原） ，以三丙胺为电 子供体，在电场中因电子转移而发生特异性化学发光反应，它包括电化学和化学发光两个 过程。 10、简述 ELISA 的基本原理和方法类型 原理：把抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性，也就是形成固相抗原 或抗体，它既保留了免疫活性，又保留了酶的活性；测定时将受检样品（含待测抗原或 抗体）和酶标记抗原或抗体按一定程序与结合在固相载体上的抗原或抗体反应形成固相化 抗原抗体-酶复合物；用洗涤的方法将固相载体上形成的抗原抗体-酶复合物与其他成分分 离，结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例；加入底物后，底物被 固相载体上的酶催化生成有色产物。通过定性或定量检测有色产物的量即可确定样品中待 测物质的含量。 方法类型：检测抗原的方法：双抗体夹心法（临床常用于乙型肝炎表面抗原、甲胎蛋白、 HCG 的检测） ；双位点一步法；竞争法 检测抗体的方法：间接法（用于丙型肝炎病毒抗体、人免疫缺陷病毒抗体和梅毒螺旋体 抗体的检测） ；双抗原夹心法（乙型肝炎表面抗体的测定） ；竞争法（HBeAb 和 HBcAb 检测） 11、时间分辨荧光免疫测定的原理？哪些方法类型？ 是以镧系元素标记抗原或抗体，并与时间分辨测定技术相结合而建立起来的一种新型非放 射性微量分析技术。 方法类型：双抗体夹心法、固相抗体竞争法、固相抗原竞争法 12、荧光偏振免疫测定的原理 利用抗原抗体竞争反应原理，根据荧光素标记抗原与荧光素抗原抗体复合物之间荧光偏 振程度的差异，测定体液中小分子抗原物质的含量。 13、荧光酶免疫测定的原理？有哪些类型？ 采用碱性磷酸酶标记抗体（或抗原） ，以 4-甲基伞形酮磷酸盐（4-MUP）为碱性磷酸酶反应 荧光底物，碱性磷酸酶分解 4-MUP，脱磷酸根基团后形成 4-甲基伞型酮（4-MU） 。4-MU 经 360nm 激发光照射，发出 450nm 的荧光，通过荧光检测仪测定荧光强度，并推算待检抗原 或抗体的含量。 方法分类：双抗体夹心法、双抗原夹心法、固相抗原竞争法 14、肿瘤细胞的免疫逃逸机制 与肿瘤细胞有关的因素：（1）肿瘤细胞的抗原缺失和抗原调变 （2）肿瘤细胞的“漏逸” （3）肿瘤细胞的 MHC I 类分子表达低下或缺失 （4）肿瘤细胞导致的免疫抑制 （5）肿瘤细胞缺乏共刺激信号 （6）肿瘤细胞抗凋亡 与宿主免疫系统有关的因素： （1)机体免疫系统功能低下或缺陷 （2)机体的免疫耐受状态 17、B 细胞与 T 细胞的检测试验 B 细胞缺陷病的检测：（1）血清 Ig 的测定：IgG、IgM、IgA 主要采用免疫浊度法 （2）同种血型凝集素的测定： （3）特异性抗体产生能力测定 （4）噬菌体试验 （5）B 细胞表面膜免疫球蛋白的检测 （6）CD 抗原检测 T 细胞缺陷病的检测：T 细胞功能检测（皮肤试验、T 细胞功能体外试验） ；T 细胞数量及其 亚群检测 21、比较初次免疫应答和再次免疫应答的不同。 特性 初次应答 再次应答 APC DC、Mf B 细胞 抗原浓度 高 低 抗体潜伏期 5-10天 1-3天 高峰浓度 较低 较高 维持时间 短 长 Ig 类别 主要为 IgM IgG、A 亲和力 低 高 无关抗体 多 少 22、新生儿溶血症属于哪种超敏反应类型，简述其发生机制。 新生儿溶血属于 II 型超敏反应，母子间 Rh 血型不符是引起新生儿溶血症的主要原因。初 次妊娠分娩时，胎儿 Rh+红细胞进入 Rh的母体内；胎儿 Rh+红细胞表面抗原刺激机体产 生相应的抗 Rh 抗体（IgG） ；当母体再次妊娠时，抗 Rh 抗体通过胎盘进入胎儿体内，与 Rh+红细胞结合，导致红细胞破坏，发生新生儿溶血症。 26、补体系统激活三步途径的比较 （一） 经典的激活途径 激活剂：主要是 IgG123 型，和 IgM 类抗体与相应抗原形成的抗原抗体复合物 始动因子从 C1开始 攻膜复合体：C 5b6789 激活过程：1、识别阶段 C 1识别免疫复合物至 C1s形成的阶段。 2、活化阶段 C 1s依次裂解 C4和 C2，形成具有酶活性的 C3转化酶和 C5转化酶 （二）替代途径 激活剂细菌细胞壁成分脂多糖、酵母多糖和凝集的 IgA 等 激活过程 1、旁路途径激活的准备阶段 2、激活阶段 （三）MBL 途径 激活物：甘露聚糖结合凝集素（MBL）和 C 反应蛋白 MBL（甘露聚糖结合凝集素）是一种钙依赖性糖结合蛋白可与甘露糖残基结合 27、血清 CH50 测定原理及其临床意义 原理:绵羊红细胞与相应抗体（溶血素）结合后，形成的免疫复合物可激活血清中的补体， 导致绵羊红细胞表面形成跨膜小孔，使细胞外水分渗入，引起红细胞肿而发生溶血。在特 定的反应体系中，溶血的程度与补体的活性呈正相关。以溶血百分率为纵坐标，相应血清 含量为横坐标，可见在轻微溶血和接近完全溶血时，对补体含量的变化敏感度下降，形成 一特殊的 S 形曲线。S 形曲线在 30%70%之间斜度最陡，几乎成一直线，补体量的细微变化 也会引起溶血程度的明显改变，故取 50%溶血作为判定终点，这一方法称为补体 50%溶血实 验，即 CH50。引起 50%溶血所需要的最小补体量为一个 CH50 单位（U）,通过计算可测定出 血清中总的补体溶血活性，以 CH50（U/ml)表示。 临床意义：自身免疫性疾病患者如 SLE、类风湿关节炎和强直性脊柱炎等，补体含量下降； 在严重或营养不良时，血清补体下降，补体的检测可用于某些疾病的诊断、治疗效果检测、 预后判断的参考指标。在糖尿病、大叶性肺炎、心肌梗死、甲状腺炎、妊娠等时，血清补 体含量可升高。 28、补体结合试验原理及结果解释 利用抗原抗体免疫复合物可激活补体的特点，用一定量的补体和致敏绵羊红细胞来检测有 无抗原抗体特异性结合的一类试验。试验中有 5 种成分参与反应，分属 3 个系统： （1）反应系统：已知抗原（或抗体）与待测抗体（或抗原） 。 （2）指示体系：绵羊红细胞与相应溶血素结合，成为致敏绵羊红细胞. （3）补体系统 常用豚鼠新鲜血清.反应体系与补体体系先发生反应,然后再加入指示系统,根据致敏绵羊红 细胞有无溶血来判断实验结果. 若反应系统中有相应的抗原或抗体存在,形成的抗原抗体复合物与补体结合,补体被消耗,则 补体不能与后加入的致敏绵羊红细胞结合,致敏绵羊红细胞不发生溶血,为补体结合试验阳 性.反之,反应系统中无相应的抗原或抗体存在,则补体未被消耗,他能使致敏绵羊红细胞发 生溶血,为补体结合试验阴性. 29、超敏反的类型及其特点 类型 常用名 特点 I 型 速发型，过敏型，IgE 型 1.发生快，消失也快 2.抗体为 IgE 3.一般无组织器官损伤 4.遗传性 II 型 细胞溶解型，细胞毒型 1.抗原在细胞膜上 2.抗体为 IgG，IgM 3.以细胞溶解为结局