GB∕T 36780-2018 辣椒轻斑驳病毒检疫鉴定方法

ICS6502001 B16 . . 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 GB/T367802018 辣椒轻斑驳病毒检疫鉴定方法 DetectionandidentificationofPeppermildmottlevirus2018-09-17发布 2019-04-01实施 国 家 市 场 监 督 管 理 总 局 发 布 中国国家标准化管理委员会GB/T367802018 目 次 前言 范围1 1 规范性引用文件2 1 病毒基本信息3 1 原理4 1 仪器 用具及试剂5 、 1 仪器 5.1 1 用具 5.2 2 试剂 5.3 2 取样6 2 种子取样 6.1 2 生长期植株取样 6.2 2 检测鉴定7 3 双抗体夹心酶联免疫吸附测定 7.1 3 斑点酶联免疫吸附测定 7.2 3 胶体金免疫层析测定 7.3 3 检测 7.4 RT-PCR 3 实时荧光 检测 7.5 RT-PCR 3 接种反应 7.6 3 结果判定8 3 样品保存与结果记录9 3 样品保存 9.1 3 结果记录 9.2 3 附录 资料性附录 辣椒轻斑驳病毒其他信息 A ( ) 4 附录 规范性附录 双抗体夹心酶联免疫吸附测定 B ( ) 6 附录 规范性附录 斑点酶联免疫吸附测定 C ( ) 9 附录 规范性附录 胶体金免疫层析测定 D ( ) 11 附录 规范性附录 检测 E ( ) RT-PCR 13 附录 规范性附录 实时荧光 检测 F ( ) RT-PCR 15 附录 资料性附录 种子感染水平和取样量 G ( ) 16 附录 资料性附录 接种反应 H ( ) 17 参考文献 19 GB/T367802018 前 言 本标准按照 给出的规则起草 GB/T1.12009 。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利 本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任 。 。 本标准由全国植物检疫标准化技术委员会 提出并归口 (SAC/TC271) 。 本标准起草单位 中国检验检疫科学研究院 中华人民共和国天津出入境检验检疫局 中华人民共 : 、 、和国甘肃出入境检验检疫局 。 本标准主要起草人 魏梅生 郭京泽 朱水芳 孔君 李桂芬 赵文军 王军平 文朝慧 尤佳 : 、 、 、 、 、 、 、 、 。 GB/T367802018 辣椒轻斑驳病毒检疫鉴定方法1 范围 本标准规定了辣椒轻斑驳病毒 Pe ermild mottlevirus 的检疫鉴定方法 ( pp ) 。 本标准适用于寄主植株和未处理种子上辣椒轻斑驳病毒的检测 。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的 凡是注日期的引用文件 仅注日期的版本适用于本文 。 , 件 凡是不注日期的引用文件 其最新版本 包括所有的修改单 适用于本文件 。 , ( ) 。 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T6682 3 病毒基本信息 学名 Pe ermild mottlevirus : pp 缩写 :PMMoV 中文名 辣椒轻斑驳病毒 : 异名 烟草花叶病毒潜隐株系 烟草花叶病毒 潜隐株系 : ; Samsun 分类地位 植物杆状病毒科 Vir aviridae 烟草花叶病毒属 Tobamovirus : ( g ), ( ) 的其他信息参见附录 PMMoV A。4 原理 的蛋白和基 因 组 特 征 是 该 病 毒 检 测 鉴 定 的 依 据 采 用 双 抗 体 夹 心 酶 联 免 疫 吸 附 测 定 PMMoV 。 斑 点 酶 联 免 疫 吸 附 测 定 胶 体 金 免 疫 层 析 测 定 实 时 荧 光 (DAS-ELISA)、 (Dot-ELISA)、 、RT-PCR、 等方法来特异性检测该病毒 并判断样品是否带有RT-PCR , PMMoV。 的侵染性是该病毒生物学活性的重要指标 采用生物学接种的方法来判断病毒的活性 PMMoV 。 。5 仪器 用具及试剂 、51 仪器 . 电子天平 感量 ( 0.001g)。 高速冷冻离心机 最大转速 ( 15000r/min)。 小型瞬时离心机 最大转速 ( 7000r/min)。 普通冰箱 (4 )