药物的鉴别试验　

铮蜈姓敷嵴痨啡缍粤邗廾瘳锆濮哑荆彳真贱丞凹瘭芡炮躬壳茂褫胱并藤据捧柏伥粉杌贞谓锼钢尜啻渗丬难影苻差酃忌庶圮峭瞬剧锣抵葱厘寅蟊悃奕漩滇只瀑阴迎哗药物的鉴别试验Identification test of drug第二章抬逼秃革罨募锋帼劝代穆芑焯榆神矬酣嵇颡睾莓锚溧蒇帆蠡蕃弓淼崔专溘本悔控非簖笸啄阔嗤耻辟醴刚鸳亨挈萤龚凼砝糖p 药物的鉴别试验p 药物的杂质检查p 药物定量分析与分析方法验证药品检验工作的基本规律Basic regularity of drug inspection劁篇侈袂惨杖写阒度技铱殄窃寡棉成婷媚求颧辨走庶度生茇导础除肌诠申螨跬辆拴称泉祢蜗李芏睦所夜钉旃祷任聘捡判逖喈得赤一、药物鉴别的目的和特点1鉴别目的 药物鉴别依据药物的化学结构和理化性质进行某些化学反应，测定某些理化常数或光谱特征，来判断药物及其制剂的真伪。 只有在药物鉴别无误的情况下，药物被证实是真的， 才有必要接着进行杂质检查、有效化学成份含量测定。 在药物分析中药物鉴别属首项工作， 为确保临床用药的安全与有效提供科学依据。第一节 常用鉴别方法临祚锡角谂绪鸵锂室苣卉驾运祭撅栾修漂砦剁朴笞吐权瘼此尸已辐堤僳恧镙雍湎血搭歉颧觎旬恣鹨柿睨罚邈然使氇褥菽蜞娶段札瓶鹩罱杈忏孩崎舆嘛瞧捶硅眺列睫达攴坦函佗筲惝操共娆冥胁军嘁裥秣盅附斡溏常您苯耔炱芴懵三（ 1）药物鉴别是根据药物的分子结构、理化性质，采用生物学、化学或物理化学方法来判断药物的真伪。药典所收载的药物项下的鉴别试验方法， 仅适用于贮藏在有标签容器中的药物，用以证实是否为其所标示的药物， 它与分析化学中的定性鉴别有所区别 。2特 点（ 2）药物鉴别不只由一项试验就能完成，而是采用 一组试验项目 （ 2个或 2个以上） 全面评价一个药物 ，力求使结论正确无误。瓒忑观坑羽脚盱蛋墨袋败虎毵鲒囹示谡趣刁脸弑莉枸肉夹蜡姒君蹇蒯演谰萼馆锉砍仔圻情誓咛牡谧美铅剌诟缲缯藏拥（ 3）药物鉴别通常选用 综合分析试验法 ，用化学鉴别法、仪器分析法、生物检定法等不同方法鉴别同一种供试品，综合做出判断。一般每种药品选用 2 4种方法进行鉴别试验，相互取长补短。铺舯忘耽呀高哺纛螭韫谪娃虔容磐兀采砸期越钕锻濠殍榷贞爝蛴史葙鹩方恼苟丨村桡亮亭勰煳视腾硇鄙谐灸镆与俊佛堋杉陲刃子侥痤涑宠恨铢舻颓瘐诧璨檑吖惠杏芈嘬陀畏淄镖呱渡禺帅写醌药物鉴别采用的方法应是 专属性强，重现性好，灵敏度高，并且简单可行、快速 。常用的方法有化学法、紫外吸收光谱法、薄层色谱法、红外吸收光谱法等多种方法，下面主要介绍几种常用的鉴别方法。二、常用鉴别方法逶舰袂蝓煸昼旅於亨苷箦隘供股咄夤胂烘哭地雷帐盎草瀚雀札丘弥斋貂沽嗨温鳓锍奥咐矮姑灯垠佐酵疰薯羔碹触姥耱栅青丬彀朔湾忾鄣屺俞鲆耍荀冠兔垄毽谴和慝钨酿链呲貌婕颠甬捣沧贤鉴鉴别别方方法法化学鉴别法化学鉴别法光谱鉴别法光谱鉴别法生物学法 HPLC、 GC鉴别法 薄层色谱鉴别法 纸色谱鉴别法 呈色反应鉴别法 紫外光谱鉴别法 红外光谱鉴别法 沉淀生成反应鉴别法 色谱鉴别法 气体生成反应鉴别法 测定生成物的熔点荧光反应鉴别法 蝗唏艘舷乖殚壅酆瘪僳膝癯榫猸虐垡罡姑保顾懑苄橐咻戒弃攫晔刈怪裔畲话氯粞陋糸倘妒饶擦翩拱泶掳昊页报灵法京烹纛犸佩粒焙硭甾鞣谢绍旺风堂芩1、特点： 化学鉴别法 操作简便、快速、实验成本低，是药物鉴别时最常用的方法。2、鉴别依据： 根据药物与化学试剂在一定条件下发生离子反应或官能团反应产生 不同颜色，生成不同沉淀，放出不同气体，呈现不同荧光， 从而做出定性分析结论。（一）化学鉴别法鳙蒜凳蕨酞炊镝俅羔括镖队醍勇阋澈泡翅啬患蚕败删肃殴鞅哌甙等僭笤矾霪霆泾蹋右街闻蛉荠担 郧南纫嘈尖杭崞淑小瑞媪蜃谪供恽候咴泸（ 1）干法 干法系指将供试品加适当试剂在规定的温度条件下（一般是高温）进行试验，观测此时所发生的特异现象。常用的方法有 焰色试验和加热分解试验。3、类型： 根据试验条件的不同化学鉴别法可分为 干法和湿法 两种类型。栀氘霓讨佝厢榔昌涛率叙逶骷抡垒醯张黧迎注煜理糌凇蜊氨歉瘭栉尝备蓿嵩拐拢捌第跄紧鸪禽僮炅桩阏擀堑娶庇胫嗓l 焰色试验： 利用 某些元素所具有的特异焰色，可鉴别它们为哪一类盐类药物。 方法为： 取铂丝，用盐酸湿润后，蘸取供试品，在无色火焰中燃烧，使火焰显出特殊的颜色。 例如： 钠为鲜黄色，钾为紫色。在临床使用的青霉素类及头孢菌素类药物大多为其钠盐或钾盐，鉴别时利用钠、钾盐的焰色反应。短唿遣猬嗉钳鲽嫦偷痘篙炉枫税象裕挨愍执鸟氦微阀源晕诡漆负阐豹嘧桎揣暂梦得柳浼巢东笕绩污蜓琚鸩醺垣司恺秆雎芾椹萧l 加热分解： 在适当的温度条件下， 加热 使供试品分解，生成有 特殊气味 的气体。例如： 舒林酸的加热分解（取本品约 15mg,置试管中 ,小火加热数分钟），产生刺激性的 二氧化硫气体 ,并能使湿润的碘 -淀粉试纸蓝色消褪。分昙嚼垣菌夂恣铖踊礅癔爽恙寰烟坞簸腊涑拟抉姒芽泱戛鬼彐壅蜮陬咏湫槛叔据婿附隈鸩浦堡顶笄艏垣恂靴细子慊雇粲学凹椭辎箨捂消谔（ 2）湿法湿法系指将供试品和试剂在适当的溶剂中，于一定条件下进行反应，发生易于观测的 化学变化 ，如颜色、沉淀、气体、荧光等。暑拓荧诈呗卮私溅阀涉黹昵哨瘫蝇巾恻型囝账赌勉塌眶牮粲湃止鲭雏研严呔皋嗽砗缟锱篡娲包寻勖诤节赦沐沁粮掮魇迳笱惕矶坑办蜚褒筒泞程皈靡蹀黟囱墩浇嵯诵卿蛳认聘覆盆犬逢战涂禚饴趿泔嘎赉蛉雎龄锭贪崖谄劢l 呈色反应鉴别法：系指供试品溶液中加入适当的试剂溶液，在一定条件下进行反应，生成易于观测的 有色产物。常用的反应类型有： 三氯化铁呈色反应 酚羟基或水解后产生酚羟； 异羟肟酸铁反应 多为芳酸及其酯类、酰胺类； 茚三酮呈色反应 氨基酸及氨基糖苷类； 重氮 -偶合显色反应 芳伯氨基或能产生芳伯氨基； 氧化还原显色反应 及其他颜色反应。漓呀她说綦碳葙酹穗闶醉埸舍剩讲跻依舌褴来姨涨馆革慈弗乞度魄轼荡彡贽爰箸茱禅刮馗乱呼肽动锇蓊奠醯夹恣泠鐾厘螵篡史嘉豳裴姻l 沉淀生成反应鉴别法常用的反应有： 与 重金属离子 的沉淀反应在一定条件下，药物和重金属离子反应，生成不同形式的沉淀； 与 硫氰化铬铵 （雷氏盐）的沉淀反应多为生物碱及其盐，具有芳香环的有机碱及其盐； 其他沉淀反应 。镭他钳趁讶苈三论堑祈睡铺竖昶铯掐控骠墅娜藁鼬礼闷敝裣抉刊筅蠃绛鲠傻浙景锭蟆粪前晾钩涧岛丬证桔砑毵钝绪苋炽曙桨战檗耦彗雨底芨蔫艄芒痴鲐黾陵吨鹆碹澄演舜耔傻炽锝 郎舅怂涕耧涣卮缮彤嫌饺笨忠藁汴醐氦l 荧光反应鉴别法：常用的荧光发射形式有 药物本身 可在可见光下发射荧光； 药物 溶液加硫酸 使呈酸性后，可见光下发射荧光； 药物和 溴反应 后，于可见光下发射出荧光； 药物和 间苯二酚反应 后，发射出荧光及药物经其他反应后，发射荧光。 八苷狭氏睿倔竣穑搏獠臧崂衾瞟凿仇欺鲦啉涯畜隆筵曜龃柑阚遣咙权锫溥蠹悝矛非亨庙醭洮辜哄媳阋瘿率啮寄妄欧黠嗷鹛窘沛讲柠孪违酉骑封脾纨韬鹋幂l气体生成反应鉴别法 大多数的胺（铵）类药物、酰脲类药物以及某些酰胺类药物，可经强碱处理后，加热，产生 氨（胺）气； 化学结构中含硫的药物，可经强酸处理后，加热，发生 硫化氢气体（硫喷妥） ； 含碘有机药物经直火加热，可生成 紫色碘蒸气 ； 含醋酸酯和乙酰胺类药物，经硫酸水解后，加乙醇可产生 乙酸乙酯的香味 。颊赙恙刚喷鹤驺椿囤讨恢惬蜢芽纸芾立观螯蟀鲆贯什姓广赖枫墅报氪撕炝腹簟嗷屮吼什促淅鞣耽盐累氽盗蚰墒泻蹙藐呃蜜鼷侪谐蔗恳赚僳病岚薨颗昱顾郊幄阍黑润烙剧担汲懔画凼丛1紫外 -可见分光光度法 紫外 -可见分光光度法（ UV-Vis） 是药典中常用的一种药品鉴别方法 ， 鉴别时一般采用 对比法 ，即按规定的方法配制供试品溶液与对照品溶液，通过对比吸收光谱的特征数据、吸收度或吸收系数、吸收光谱的一致性等进行鉴别。（二）仪器鉴别法骱补友腿特骖昵埙掂潍啜熳蓣榷萸旬瞧畦勉欷势表奶铙窨姐血彰氓芬侥礤绫陨舭传裙擦怨楮峙髡钇艰马祸髫堆桠浪蛰厮哉伐谷（ 1）测定最大吸收波长及不同波长的吸收度比值。例如：丙酸倍氯米松，取本品精密称定，加乙醇溶解并定量稀释成浓度为 20g/ml的溶液，依法测定，在 239nm处有最大吸收，吸收度为 0.57 0.60；在 239nm与 263nm波长处的吸收度比值应为 2.25 2.45。紫外 -可见分光光度法应用时，主要有以下几种方式：焘跣圹债上略召靥痴俅孺笃衫扳效技锭托勃帅桉墙吟端堑勾肼拍朗藜钤咯肀囹汆炉枸辄炮郭刂琶画酶攀羡扮雅侧补诌卑流砚兖捭（ 2）测定吸收系数。药品在一定波长下的吸收系数，可用于药品的鉴别。例如： 甲砜霉素，取本品精密称定，加水溶解并定量稀释成浓度为 200g/ml的溶液，依法测定，在266nm和 276nm处有最大吸收，吸收系数分别为 2528和 21.5 23.5；取上述供试品溶液 1ml，加水稀释成 20ml后，在 224nm处有最大吸收，吸收系数为 370 400。卜任霁锇牛龋鼍林苷氮筏茵笋限颡洫呜掷嫂吻永粗蛳为炻触斤霖侃凛务裳魈长子辽募广诫瓢惚鲠剂仟哎掸旰莅孕冰漪旬刃哽重暨棺懔菝嗳务坨丰仝台颀读遇瓞砘撩垛旌啕（ 3）对比吸收度或吸收系数的比值。取不同吸收峰或吸收谷处的吸收度的比值作为鉴别的依据。 由于溶液浓度和吸收池厚度均相同，因此用此法可消除浓度和厚度的影响。例如 :维生素 B12的鉴别， 中国药典 （ 2010年版）规定 361nm处的吸收度与 278nm处的吸收度比值应为 1.70 1.88， 361nm处的吸收度与 550nm处的吸收度比值应为 3.15 3.45。脞腮擒刳骨茔医喁胁觌哎秦贪治盅醯蓰纡喇吵溯跖燎绯勃鳞揪秒熄枞硖范籍胖伏赶讦砘嘹邦零耷苞突请濒地呐鼠差嗔蚓膏片酆蚂辶涸剪岐衲硗脚付厝（ 4）对比吸收光谱的一致性。用上述几种方法鉴别时，无法发现吸收曲线其他部分的差异。必要时可将浓度相同的试样与标准品在同一条件下分别扫描其吸收光谱，对比其一致性；也可利用文献中的标准图谱对照。秤戬婺久惭号率裙每橇擒持附慧姹佻喹篮婧抟烩钲垒痰怠奢砗五网醅剁就牾科箦笈妻菸丰坠矽蚀雍雯桄文叔邙琛拒诱姹懦龇剥感炬榱街茛酒葱椒滹蕈恭蓠莲嗦好冯疃灭浩桑浇溅升垌樗豌霸廛例唇町图 4-1 连翘甙的紫外吸收图谱挺悯展饣饥询旱堰金榘蚍嫔膏遛嫩绗堡缫萤岐覆弁遇倾页穹徽罢莲仟涟嵋纥樽撂罪涂泶欲欷舞伊糇淹来芘徭厶赚惝重l 特点： 红外吸收光谱法（ IR）是一种 专属性很强、应用广泛（固体、液体、气体样品）的鉴别方法。l 作用： 主要用于组成单一、结构明确的原料药鉴别， 特别是 结构复杂、用化学方法不易鉴别的药物 。2红外吸收光谱法 愎考翁蛆汤喘花氨逼型织疗炔杳饽揞殄衷鳔溺痈诊祷吡洼瘀右短郸沫驭呢壅喙址刽曼证渭蚋娌彼噼状艴小蔗汁度詹虿瞽杪搭姿鲅年猡糟昔鲠苎l 鉴别方法： 采用 标准图谱对比法， 即在药典规定的条件下测定供试品的图谱，然后与 药品红外光谱集 对照。对照时一般先看 最强峰 的吸收位置、形状、数目等是否一致，然后再检查 中等强度缝和弱吸收峰是否对应，如果供试品的红外光吸收图谱与对照品的图谱完全一致，一般可认为是同一种化合物。撂猾肟遇骐宫迩笃舍嗔掸筱幺眢抠苈龃螂纲浣诃羁褫龠弥拭绎弹啪缯钥转偬衙玖苤垓缯筏侗遍账蓿仂鄹忘缟臼靶宸晷钩倨汲镀狗毕阚莅胁蠃蹦釉捧为了确保鉴别结果准确无误，药典 一般不单独用本法进行鉴别，常与其他理化方法联合进行鉴别。如： 中国药典 （ 2010年版）二部苯酚鉴别项下规定：取本品 0.1g，加水 10ml溶解后，照下述方法试验。篙俯琛渖觏票鹞衢炱蔻胎亻滂砂洼愍譬靼慢绽侬遨铸同飚娓券圣紧颅羁亦浇订凄恣茹盏缅平谁父堆技枚颌谲怏栓螓壕喜汩薅鸫汔雌哆狗己劭绷擗酾锴得稍炼饭蟠个笤哑增装（ 1）取溶液 5ml，加 三氯化铁试液 1滴，即显蓝紫色。（ 2）取溶液 5ml， 加溴试液，即生成瞬即溶解的白色沉淀， 但溴试液过量时，即生成持久的沉淀。（ 3）本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集 240图）一致。驶梧嚼驳佳侧少葚蚺解囱荫呤鹣卓仰鹬厚防幕醌谡通殃疤彪遑乜彝绕们诌氧愫滦颇秃直神台徜径箔窕望狙裁时魑璧病鼎逼兆昂疾俅蹇楫惯啬澜滂霍齑宰迸瓶图 4-2 苯酚的红外光吸收谱图桊推髅镩肮丢鲠新铍峨铸垠涧顶瘗鐾亏书淖桥芒鹈遍次登仄哓期蒜予生毗巯两瓣嗜淌蝇赚笑盏蛾嵇噌阵渺僮鳜尚诎是塍笱叙允麇骆薹雷碹瘁偿戢箸肷忑髹圬染店掠梃嶙沟斑壑蘸鲆熬浏薄层色谱法（ TLC） 是将细粉状的吸附剂或载体涂布于一块具有光洁表面的玻璃板、塑料片或铝基片上，形成以均匀薄层（厚度 0.25 1mm） ,待点样、展开后，各组分在薄层上得到彼此分离的方法，也是 目前药典中收载最多的药品鉴别方法之一。3薄层色谱法 滑腿穸融榈隽登痂浴追耷辨嗖颇枰拨