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文档简介
第五章、细胞培养 绪 论 第七章、 组培苗工厂化生产的经营与管理 第一章、实验室设备和基本操作技术 第二章、植物组织器官培养 第三章、茎尖分生组织 第四章、单倍体细胞培养 第六章、种质保存 参 考 书 植物细胞组织培养, 刘庆昌、吴国良,中国农业大 学出版社, 2003.1 植物组织培养教程,李浚明,中国农业大学出版社,第 2版 植物组织培养, 王清连, 中国农业出版社, 2004 植物组织培养实用技术,朱建华、彭士勇,中国计量出版社, 2001 植物组织培养与工厂化育苗,崔德才、徐培文,化学工业出版社, 2003果树无病毒苗木繁育与栽培,王国平、刘福昌,金盾出版社,一、植物组织培养的概念二、植物组织培养的发展简史三、植物组织培养的应用绪 论有性繁殖 扦 插嫁 接 压 条一 植物组织培养概念植物组织培养( plant tissue culture)是指利用植物体的器官、组织、细胞、原生质体,通过无菌操作接种到人工培养基上 (medium),在一定的光照和温度条件下进行培养,使其形成完整的植株。 离体培养的材料(器官、组织、细胞、原生质体)我们称为外植体 (explant)。 组织培养类型 根据外植体材料的不同1. 器官培养 (organ culture), 包括根、茎、叶、胚、花药、子房等 2. 茎尖分生组织培养(shoot tip culture,shoot apex culture, apical meristem culture) 组织培养类型 根据外植体材料的不同组织培养类型3 . 愈伤组织培养 (callus culture) 愈伤组织 (callus)是指植物在受伤后于其伤口表面形成的一团薄壁细胞。在植物组织细胞培养中,则指在人工培养基上由外植体形成的一团无序生长的薄壁细胞。 根据外植体材料的不同组织培养类型 根据外植体材料的不同4 . 细胞培养 (cell culture ) 5 .原生质体培养(protoplast culture).摇 床发 酵 罐1 固体培养2 半固体培养3 液体培养组织培养类型 根据培养基状态液体培养又包括有静止培养、振荡培养、旋转培养、纸桥培养1 平板培养2 微室培养3 悬浮培养4 单细胞培养 根据培养方法组织培养类型 根据培养基的作用 :1 诱导培养 ; 2 增殖培养 ; 3 生根培养 根据培养目的 : 1 脱毒繁殖 ; 2 微体快繁 ; 3 试管育种 ;试管嫁接 根据培养条件 :1 光培养 ; 2 暗培养 根据培养过程 :1 初代培养 ;2 继代培养组织培养类型概 念 脱分化:在细胞组织培养中,一个成熟细胞或分化细胞转变成为分生状态的过程,即形成愈伤组织的过程,叫做脱分化( dedifferentiation) 植物的成熟细胞经历了脱分化之后,既形成愈伤组织后,由愈伤组织再形成完整的植株,这一过程叫做再分化 (redifferentiation)或分化(differentiation)和再生 (regeneration)。 外植体的最初培养称为初代培养。 继代培养:将初代培养获得的培养体移植于新鲜的培养基中,这种反复多次移植的培养称为继代 培养。植物组织培养的应用原理 植物细胞具有全能性( totipotency)。 所谓全能性是指一个完整的植物细胞具有形成一个完整植株所必需的全部遗传信息。 对于植物细胞来说 ,不仅受精卵 ,体细胞也具有全能性 .植物细胞表达全能性大小是受精卵 生殖细胞 体细胞 已分化的动物体细胞的全能性是受限制的 ,但细胞核仍具有全能性 . 全能性只不过是一种潜能性 .植物组织培养的应用原理 细胞的分化和形态建立:由脱分化的细胞再分化出完整植株有两种途径:一种叫做 不定器官形成 (adventitious organ formation)或叫做 器官形成(organogenesis), 即在愈伤组织的不同部位分别形成独立形成不定根和不定芽,另一种叫做体细胞胚胎发生 (somatic embryogenesis) , 即在愈伤组织的表面形成类似于合子胚的结构,我们称其为为 体细胞胚 , 不定胚 (adventitious embryo)或 胚状体 (embryo ), 体细胞胚胎所经历的发育阶段与合子胚相似,一般经历球形胚、心型胚、鱼雷形胚和子叶胚 4个发育阶段。植物组织培养的应用原理植物组织培养的过程可以表示如下 外植体脱 分化愈伤 组织不定器官或体细胞胚完整植株再分化二、发展简史 探索阶段 奠基阶段 迅速发展阶段探 索 阶 段 1902年 Haberlandt年提出 植物细胞全能性的观点20世纪初至 20世纪 30年代中 胚 培养: 1904年 Hanning , 1925Laibach 1922年美国的 Robbins和德国的 Kotte 1925 Laibach将亚麻种间杂交的幼胚离体培养成功 奠 基 阶 段20世纪 30年代中至 50年代末 20世纪 30年代有两个重要的发现一是 认识了 B族维生素对植物生长的重要意义:美国的 White , 法国的 Gauthere 二是发现了生长素是一种天然的生长调节物质 奠 基 阶 段 20世纪 40年代和 50年代初代表人物 Skoog 另一 主要发展: Overbreek 奠 基 阶 段 20世纪 50年代开始以后1952年 Morel和 Martin 1953-1954年 Muir 1955年 Miller 1957年 skoog和 Miller 1958年 Steward 迅速发展阶段20世纪 60年代至现在 原生质培养获得重大突破: 1960年 Cocking 1962年 Murashige和 Skoog发表了 MS培养基 花药培养取得显著成绩 微繁技术的广泛应用 植物遗传转化 三、植物组织培养的应用v在植物脱毒和快速繁殖上的应用 v 在植物育种上的应用 : 胚培养、单倍体培养、体细胞杂交、体细胞无性系变异、遗传转化v 在植物种质资源保存和交换上的应用 v 植物基础理论方面的研究 v 在次生代谢物生产上的应用复 习 题一、概念1 植物组织培养;2 愈伤组织 ;3 植物细胞的全能性;4 脱分化; 5 再分化; 6 体细胞胚; 7 初代培养;8 继代培养; 9 外植体二、填空1. 1根据外植体材料的不同,将植物组织培养分为()、()、()、()、() ,其中器官培养又包括有 ( )、()、()、()、()。2. 2根据培养基状态,植物组织培养可分为()、()和()。其中液体培养又分为()、()、()和()。3. 3植物组织培养可分为三个阶段()、()、()。4. 4()和()提出了有关植物激素控制器官形成的观念5植物组织培养,根据培养基的作用可分为()、()、()根据培养目的可分为()、()、()和()
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