基于苏州健雄职业技术学院食堂卫生纸中菌落总数的测定论文

毕 业 设 计 （ 论 文 ）题 目： 基于苏州健雄职业技术学院食堂卫生纸的菌落总数含量测定学生姓名： 周帅康学 号： 160305591118院（系）： 医药科技学院专业班级： 药品 1611指导教师： 方月琴职 称： 中级2017 年 12 月周帅康：基于苏州健雄职业技术学院食堂卫生纸的菌落总数含量测定中文题目：基于苏州健雄职业技术学院食堂卫生纸的菌落总数含量测定外文题目： A BRIEF DISCUSSION ON THE TOTAL AMOUNT OF COLONY TOILET PAPER OF SUZHOU JIANXIONG XOCATIONAL TECHNICAL COLLEGE 苏州健雄职业技术学院毕业设计（论文）目录前言 11 实验仪器、材料及方法21.1 实验仪器与材料21.1.1 实验仪器 21.1.2 实验材料 21.1.3 实验试剂21.1.4 实验样品21.2 实验方法 31.2.1 试剂配置 31.2.2 取材前的准备工作 31.2.3 卫生纸的取材、处理和菌落培养41.2.4 实验步骤 5周帅康：基于苏州健雄职业技术学院食堂卫生纸的菌落总数含量测定1.3 菌落计数与报告61.3.1 菌落计数方法61.3.2 菌落计数数据选择方法61.3.3 菌落计数稀释度的选择62 结果72.1 菌落计数依据 72.2 菌落计数数据记录及平板展示73 讨论83.1 菌落测定原理 83.2 空白实验分析 83.3 结果分析 84 结论9致谢10参考文献11苏州健雄职业技术学院毕业设计（论文）摘要随着改革开放的发展，在日常生活中，人们对卫生纸的需求量是很可观的，但质量令人担忧，引起广大消费者忧虑和担心。我们选取了苏州健雄职业技术学院两座食堂的卫生纸为样品，通过平板计数的方法来检验两座食堂中卫生纸微生物菌落总数的含量，根据国家标准 GB20810-2006卫生纸（含卫生纸原纸） 1中的实验步骤进行操作。按照国家标准规定.在有氧状态.37培养 48h,得至细菌菌落总数。通过实验检测发现，北食堂 1 楼卫生纸中菌落总数含量为336CFU/g，南食堂 1 楼卫生纸中菌落总数含量为 496CFU/g。其中，北食堂 1 楼的卫生纸品牌为春竹，为优等品；南食堂 1 楼的卫生纸品牌为凝点，为合格品。关键词：卫生纸；微生物；菌落总数；国家标准周帅康：基于苏州健雄职业技术学院食堂卫生纸的菌落总数含量测定AbstractAlong with the development of the reform and opening up, in daily life, peoples demand to toilet paper is very significant, but the quality concern, caused the general consumer anxiety and worry we chose suzhou institute of technology of profession of the healthy male two dining room toilet paper for sample, by plate count method to test two dining room toilet paper in the content of total microbial colony, according to the national standard GB20810-2006 toilet paper (including toilet paper base paper) 1 the experiment steps in operation in accordance with the standard regulations of the state. In aerobic condition. 37 train 48 h, to the total number of bacterial colonies, measured by the experiment of north canteen colony total content in the 1st floor toilet paper of 336 cfu/g, 1 / f, south the canteen colony total content in the toilet paper of 496 cfu/g, 1 / f, north canteen of toilet paper brand as the spring bamboo, as a classy article;The toilet paper brand on the 1st floor of the south dining hall is the 苏州健雄职业技术学院毕业设计（论文）freezing point for the quality productsKey words: Toilet paper.Microbes;Total number of colonies;National standard前言微生物对人类最重要的影响之一是导致传染病的流行。在人类疾病中有50是由病毒引起。世界卫生组织公布资料显示：传染病的发病率和病死率在所有疾病中占据第一位。微生物导致人类疾病的历史，也就是人类与之不断斗争的历史。在疾病的预防和治疗方面，人类取得了长足的进展，但是新现和再现的微生物感染还是不断发生，像大量的病毒性疾病一直缺乏有效的治疗药物。在日常生活中，人们对卫生纸的需求量是很可观的，使用量巨大，但质量直接关系着人类的健康，引起广大消费者忧虑和担心。菌落总数(coloniesmumber) ，指的是特定的条件下(例如需氧情况、营养条件、PH、培养温度和时间等) 每克(每毫升) 所检测物所生长出来的细菌茵落总数。这是用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量的重要依据，它反映食品在生产过程中是否符合卫生要求，以便对被检样品做出适当的卫生学评价。菌落总数的多周帅康：基于苏州健雄职业技术学院食堂卫生纸的菌落总数含量测定少在一定程度上标志着食品卫生质量的优劣，还可以用来预测食品的存放期限。食品中细菌数量越少.食品存放的时间就越长.反之就越短。但是菌落总数井不能区分其中细菌的种类，所以有时被称为杂菌数、需氧菌数。我们选取了苏州健雄职业技术学院两座食堂的卫生纸为样品，本实验采用平板计数的方法.根据国家标准 GB20810-2006卫生纸（含卫生纸原纸） 1中的实验步骤进行操作。按照国家标准规定.在有氧状态.37培养 48h,得至细菌菌落总数。部分不满足它们生理要求的细菌，难以繁殖生长，放不在其中。菌落总数并不表示样品中实际存在的所有细菌总数。本次试验对卫生纸采集样品2 份，分别来自南食堂 1 楼和北食堂 1 楼，对其中微生物菌落总数做了测定。1 实验仪器、材料及方法1.1 实验仪器与材料1.1.1 实验仪器使用拍击式均质器进行样品击碎、混匀，利用单子天平准确称量卫生纸的用量以及准确称量培养基进行制备，通过立式压力蒸汽灭菌锅进行制备无菌水以及试管、锥形瓶等玻璃仪器的灭菌工作，利用无菌培养皿进行细胞的倒平板技术，通过 HH 数显恒温水浴锅进行培养基的保温，利用智能生化培养箱进行细胞的培养，利用移液枪进行稀释液的移取。表 1-1 实验仪器设备仪器名称 规格及型号 生产厂家拍击式均质器 DL-1-15 上海汉诺仪器有限公司电子天平 jY-302 上海浦青计量仪器有限公司力式压力蒸汽灭菌锅 BXM-392 上海博远实业有限公司医疗设备厂苏州健雄职业技术学院毕业设计（论文）培养皿 120mm 上海五一玻璃厂台式电炉 JB25-C 天津豢斯特仪器有限公司HH 数显恒温水浴锅 RCT 上海浦青计量仪器有限公司双人双面净化工作台 SW-CJ-2F 慧科电子有限公司智能生化培养箱 SHP-160FE 上海三发科学仪器有限公司振荡器 TH2 -82A 上海浦青计量仪器有限公司移液枪 100-1000L 上海浦青计量仪器有限公司1.1.2 实验材料75%的酒精棉球，纱布，报纸，250mL 锥形瓶:4 个，PH 试纸，10mL 吸量管，试管 4 根， 9 个 120mm 细胞培养皿个表面皿，烧杯、移液枪、蒸馏水1.1.3 实验试剂表 1-2 PCA 琼脂培养基溶液原料 生产厂家牛肉膏 国药集团化学有限公司蛋白胨 国药集团化学有限公司氯化钠 国药集团化学有限公司琼脂 国药集团化学有限公司蒸馏水 自配1.1.4 实验样品卫生纸：南食堂 1 楼（春竹）为合格品、北食堂 1 楼（凝点）为优质品主要成分：原木浆1.2 实验方法1.2.1 试剂配置1.2.1.1 PCA 琼脂培养基的配制用电子天平称取 1g 胰蛋白胨,0.3g 牛肉膏、0.5g 葡葡糖、3g 琼脂，溶于 100mL蒸馏水中。放在电炉上进行加热，待微沸取下用 PH 试纸测其 PH 值并用 NaOH 调其 PH 在 7.0 左右，移到 250mL 锥形瓶中，放入高压蒸汽灭菌锅灭菌 30min。1.2.1.2 生理盐水的配制用电子天平称取 NaCl 2.125g,溶入到 200mL 蒸馏水中，并移至 250mL 锥形瓶中，放入高压蒸汽灭菌锅灭菌。1.2.1.3 75%的酒精溶液量取 98%的酒精溶液 75mL.加水稀释至 100mL周帅康：基于苏州健雄职业技术学院食堂卫生纸的菌落总数含量测定1.2.2 取材前的准备工作1) 水浴锅进行消毒处理(提前一天或当天)2) 将准备好的 6 个培养皿洗净用报纸好，试管洗净用棉花塞住用报纸包好以及装有 225mL 生理盐水的锥形瓶，封好进行灭菌3) 按照 5S 要求整理实验室并保持 4) 对于手和超净工作台进行酒精消毒5) 将超净台中的紫外灯打开灭菌 15min,再用鼓风机吹 1520min,6) 将灭菌后的仪器和试剂放入超净台7) 将配置好的营养琼脂放在水浴锅中恒温 46oC1.2.3 卫生纸的取材、处理和菌落培养1.2.3.1 样品前处理将两种不同品牌的卫生纸在超净工作台中用酒精棉消毒外包装以及取材的镊子，并对手部进行酒精消毒，充分保证在无菌情况下进行操作。1.2.3.2 样品稀释无菌称取样品各 3g，加入到盛有 100mL 生理盐水的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打 1-2min，制成 1:10 的样品匀液，即 10-1稀释液。用无菌吸管或微量移液器吸取 1:10 样品匀液 1mL，沿管壁缓慢注入盛有9mL 稀释液的无菌试管中震摇试管使其混合均匀，制成 10-2样品稀释液在进行 10 倍递增稀释时，吸取 1mL10-1、10 -2稀释液于无菌平皿内，每个稀释度做两