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文档简介
1、2020/10/21,1,致病性球菌,葡萄球菌属 金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 链球菌属 链球菌 肺炎链球菌 奈瑟菌属 脑膜炎奈瑟菌 淋病奈瑟菌,2020/10/21,2,肺炎链球菌 (S.pneumoniae),属链球菌科,链球菌属。 广泛分布于自然界,主要寄生于人类上呼吸道,多数不致病。,2020/10/21,3,一、生物学性状,1形态结构 2培养特性 3生化反应 4抗原结构 5抵抗力特点 6. 变异性,2020/10/21,4,1.形态结构,G+,呈矛尖状,成双排列,标本或液体培养中成链状。 有荚膜,无鞭毛,不形成芽胞。,2020/10/21,5,2020/10/21,6,2.培养特性,
2、营养要求较高,含血液或血清的培养基中生长。 兼性厌氧,C02 5-10%生长最好。 溶血性菌落周围有草绿色溶血环。 液体培养基中培养24h,呈均匀混浊,后期因产生自溶而变得澄清,2020/10/21,7,3生化反应,可分解多种糖类,产酸不产气。 胆汁溶解试验阳性:加入胆汁或10%去氧胆酸钠,37.,5-10min,激活本菌的自溶酶,出现溶菌现象。,2020/10/21,8,2020/10/21,9,Optochin敏感试验阳性:单个菌落涂于血平板上,用optochin纸片贴于接种区中央,35需氧培养过夜,抑菌圈 18mm。,2020/10/21,10,2020/10/21,11,4抗原结构,荚
3、膜多糖抗原:多糖抗原,型特异性,共85型,型引起大叶性肺炎。 菌体种属特异性抗原:多糖抗原,存在于细胞壁,称C多糖。在钙离子存在时,C多糖可与正常人血清中称为C-反应蛋白(C reactive protein,CRP)的球蛋白结合,发生沉淀。,2020/10/21,12,5抵抗力特点,较弱,加热56 ,20min即死亡。 对一般消毒剂敏感,对干燥抵抗力较强。,2020/10/21,13,6. 变异性,荚膜变异:有荚的光滑(S)型菌有毒力,失去荚膜的粗糙(R)型毒力减低或消失。,2020/10/21,14,20、把小鼠随机分成两组,进行肺炎球菌荚膜形成试验,分别将两株细菌接种于不同组动物腹腔(每
4、组接种一株细菌)。12小时后杀死小鼠解剖,取腹腔作荚膜染色试验。结果有一组只有少量细菌,且未见荚膜主要原因是什么? A、 动物对细菌不敏感 B、 染色试剂不合标准 C、 细菌毒力发生了变异 D、 采标本时间过早,2020/10/21,15,二、致病性,1致病物质 2所致疾病,2020/10/21,16,1. 致病物质,荚膜:肺炎球菌的致病力,主要是荚膜的抗吞噬作用。 溶血毒素“O”:自溶后释放,能溶解人和动物的红细胞,高浓度对动物有坏死及致死作用。,2020/10/21,17,2. 所致疾病,存在于正常人上呼吸道。 仅在人体抵抗力下降时才引起疾病。如大叶性肺炎,支气管炎等。,2020/10/2
5、1,18,三、微生物学检验,(一) 标本采集 痰、脓液、血液等。,2020/10/21,19,(二) 检验方法及鉴定,1. 直接涂片 革兰氏色染色,荚膜染色,2020/10/21,20,2. 分离培养。 胆汁溶菌试验。 菊糖发酵。 Optochin试验。 与草绿色链球菌鉴别,2020/10/21,21,3. 小鼠毒力试验 有毒力的菌株,接种后12-36h,死亡。,2020/10/21,22,第四节,奈瑟菌属 (neisseria),2020/10/21,23,为一群G-双球菌,严格寄生菌,人是自然宿主 主要致病菌是脑膜炎球菌(merningococcus)和淋病球菌(gonorrhoeae),
6、2020/10/21,24,一、脑膜炎球菌,即脑膜炎奈瑟菌, 是流行性脑脊髓膜炎的病原体,2020/10/21,25,(一)、生物学性状,1形态结构 2培养特性 3生化反应 4. 抗原结构 5. 抵抗力特点,2020/10/21,26,1形态结构,G-,肾形成双排列 在患者脑脊液标本中位于中性粒细胞内 无芽胞、无鞭毛,具有荚膜、菌毛。,2020/10/21,27,2培养特性,营养要求高,必须在含有血清或多种氨基酸、无机盐的培养基上生长良好。 血平板:半透明,灰褐色,圆形,湿润光滑露滴样菌落。 易自溶。,2020/10/21,28,巧克力平板,蓝灰色,半透明,光滑湿润的菌落。 卵黄双抗(EPV)
7、平板:为无色,光滑湿润的菌落。 血清肉汤:呈微混浊。,2020/10/21,29,3.生化反应,分解葡萄糖、麦芽糖 硝酸盐还原反应阴性,不分解尿素 氧化酶试验阳性,2020/10/21,30,4.抗原结构,可分9个血清群,对人致病的主要试A群,2020/10/21,31,5抵抗力特点,对寒冷、光、热力,干燥等十分敏感。室温3h,60 5min死亡。 采集标本:注意保温迅速送检。 对磺胺类、青霉素、链霉素均敏感。,2020/10/21,32,12、对脑膜炎奈瑟氏菌的标本采送,哪一种是错误的? A、 低温 B、 保温 C、 防干燥 D、 快速,2020/10/21,33,(二)、致病性与免疫性,1
8、致病物质 2所致疾病 3. 免疫性,2020/10/21,34,1. 致病物质:内毒素、荚膜,菌毛 2. 所致疾病:寄生在正常人鼻咽部,存在易患人群,与患者补体介导的杀菌活性缺陷有关。约2%-3%的人表现为流脑症状,2020/10/21,35,3. 免疫性:病原可产生群特异性抗体,但不持久。,2020/10/21,36,(三) 微生物学检验,1标本采集 菌血症期病人采集血液 有出血点或瘀斑者,可取瘀斑渗出液 有脑膜刺激症状,抽取脑脊液,2020/10/21,37,2检验方法,直接涂片检查 脑脊液或瘀斑渗出液,干燥固定后革兰染色,若发现G-双球菌,呈肾形成对,可初报,2020/10/21,38,
9、分离培养鉴定 过氧化酶试验:阳性 触酶试验:阴性 血清凝集试验:阳性,2020/10/21,39,二、淋球菌,即淋病奈瑟菌, 为淋病的病原体,人是唯一天然宿主和传染源,2020/10/21,40,(一)、生物学性状,1形态结构 2培养特性 3. 生化反应 4抵抗力特点,2020/10/21,41,1形态结构,G-,球形或肾形,成对排列 有荚膜,无芽胞和鞭毛,2020/10/21,42,2培养特性,营养要求高,30-37 生长,须在含有血液或血清的培养基上培养,常用血液、巧克力等培养基 初次分离,须5-10%CO2才能生长发育 菌落:凸起,光滑、圆形,灰白色,半透明,2020/10/21,43,
10、3.生化反应,氧化酶试验:阳性 触酶:阳性 只分解葡萄糖 ,不分解麦芽糖 易自溶,2020/10/21,44,4抵抗力特点,抵抗力弱, 在干燥环境中仅能存活1-2h,湿热55 5min,100 立即死亡。室温下存活1-2d。 对消毒剂极敏感,2020/10/21,45,(二)、致病性与免疫性,1致病物质 2所致疾病 3. 免疫性,2020/10/21,46,1致病物质,菌毛,外膜蛋白等,2020/10/21,47,2所致疾病,侵犯人类泌尿生殖系统引起淋病(首位性病),2020/10/21,48,3. 免疫性,病后可产生相应的细胞和体液免疫,但免疫力弱,不足以保护再感染。,2020/10/21,
11、49,(三) 微生物学检验,2020/10/21,50,1标本采集,泌尿、生殖道的各种分泌物、尿液 立即送检,2020/10/21,51,2直接涂片镜检,急性淋病:嗜中性粒细胞内大量G-,肾形双球菌具有诊断意义 慢性淋病:镜检较困难,2020/10/21,52,3.分离培养鉴定,即采集即培养,常用含有两种以上抗生素(万古霉素、粘菌素、磺胺类等)的营养培养基上培养。,2020/10/21,53,氧化酶试验:阳性 触酶:阳性(多数奈瑟菌为阴性) 发酵葡萄糖,不分解麦芽糖 PCR:灵敏,特异,标本不变限制(不需活菌),2020/10/21,54,微生物和微生物学检验,郭刚 临床微生物及免疫学教研室,
12、2020/10/21,55,绪论,2020/10/21,56,一、微生物(microorganisms):,概念:一群肉眼看不见的微小生物,包括:细菌、螺旋体、立克次体、衣原体、支原体、放线菌(原核)、病毒(非细胞)、真菌(真核)。 原核与真核细胞的区别:细胞核的区别,2020/10/21,57,最新生物进化分类法: 古细菌: (Archaeobacteria) 嵌合进化或共生进化 真细菌: 真核生物:,2020/10/21,58,微生物与人类的关系:,(1)大多数不致病,甚至是对人、动、植物有益和必需的,如:固氮菌;酿酒、制醋、抗生素、肠道正常菌群。 (2)病原微生物 : pathogeni
13、c microorganisms,2020/10/21,59,二、微生物学(microbiology):,微生物的进化分类、生命活动规律及与动植物、人类、自然相互关系。 按研究对象分:细菌、病毒、真菌学 按应用领域分:工业、农业、医学、兽医 按研究方向分:基础微生物、分子微生物学、 微生态学 等,2020/10/21,60,医学微生物学(medical microbiology):与医学有关病原微生物的生物性状、致病机理、免疫性及有关技术和理论的应用。 临床微生物学(clinical microbiology):测重研究感染性疾病诊断方法,提供诊断依据和指导用药。,2020/10/21,61,
14、三、医学微生物学发展简史,1、微生物学的经验时期: ()酿酒、制醋、腌腊等食品生产、保存; ()师道南天愚集:清乾隆年间,“东死鼠,西死鼠,人见死鼠如见虎。鼠死未几日,人死如圻堵”; “三人行未十步路,忽死两人横截路” ()人痘接种法:免疫最早概念。,2020/10/21,62,2实验微生物学时期(17世纪始): 显微镜培养基 () 微生物的发现:列文虎克、巴斯德(发现微生物的作用,创立巴氏消毒法)、李斯特、郭霍氏(固体培养、染色技术) 郭霍氏法则:、。逐渐被淘汰。 新的病原确定方法:核酸确定法 () 免疫学的兴起、分离: 牛痘、巴斯德(霍乱、炭疽、狂犬疫苗)、白喉抗毒素动物血清治愈白喉。 (
15、) 抗生素的发现: 目前遇到的问题:滥用导致耐药性增高,2020/10/21,63,3 现代微生物学时期:近二、三十年 (1)新病原微生物的发现 a传统病原卷土重来; b新型病原。 (2)致病机理的深入研究 a采用新技术; b. 各种致病因素的分子机理及调控。,2020/10/21,64,(3)诊断技术的发展: 三大标记技术 各种分子生物学技术:核酸杂交,PCR,微量化,自动化。 (4)各种新型疫苗的研制 传统疫苗、亚单位疫苗、基因工程疫苗、DNA疫苗。 (5)免疫学独立 远远超越感染免疫的范畴。,2020/10/21,65,思考: ()预测微生物学发展下一阶段; ()目前科学界研究热点?,2
16、020/10/21,66,4基因组微生物学 ()微生物在基因组前时代在生物学研究中的地位; ()结构简单,可做为模型,模式生物; ()在基因组时代,作为急先锋; ()微生物基因组的研究成功,必然极大地改变微生物学科现状。 因此,微生物学研究正面临前所未有地机遇和挑战。 从上看出,医学微生物学的发展,也是各种技术方法的发展,也是临床微生物学的发展历史。,2020/10/21,67,四、 临床微生物学的任务,研究感染性疾病的病原体特征: 传统的病原微生物 条件致病菌 提供快速、准确的病原学诊断; 指导合理使用抗生素; 目前检验科的主要任务。 对医院感染进行监控。,2020/10/21,68,五、临
17、微学习方法:,重要性:与毕业后工作紧密相关。 ()平时注意预习、复习; ()对内容上,紧紧围绕诊断,诊断又是由各种典型特性建立的方法来进行的 抓特性、去共性 ()注意新动向。,2020/10/21,69,第一篇微生物学 细菌学总论,2020/10/21,70,一、细菌(bacterium)的形态与结构,(一)形态:个体微小、形态各异 球菌(coccus) 杆菌 (Bacillus) 弧菌与弯曲菌 螺旋菌及螺旋体 不规则形。,2020/10/21,71,(二)结构:,2020/10/21,72,基本结构:包括胞壁、胞膜、胞浆及核质 细胞壁: 主要成分肽聚糖。,2020/10/21,73,乙酰胞壁
18、酸 聚糖骨架 .4糖苷键 乙酰葡糖胺 四肽侧链 五肽桥(苷氨酸) 菌肽聚糖厚、层数多、立体状坚固。,2020/10/21,74,2020/10/21,75,膜磷壁酸 菌细胞壁 壁磷壁酸 特殊结构 表面蛋白:SPA、M蛋白 菌细胞壁 磷脂 特殊结构 脂蛋白 类脂:毒性部分 (外膜) 脂多糖(LPS,内毒素): 核心多糖:属和组特异 特异多糖:种和型特异,2020/10/21,76,和菌细胞壁差异:,2020/10/21,77,型细菌:细胞壁缺陷型细菌。 高渗培养基中:油煎蛋样菌落。 在临床上注意型带来的漏诊。,2020/10/21,78,2. 特殊结构 荚膜(capsule):()保护作用;()
19、致病作用:侵袭力;()免疫原性;()鉴别与分型。,2020/10/21,79,鞭毛(flagellum):运动器官,抗原。,2020/10/21,80,菌毛(Pilus):()普通菌毛:粘附素;()性菌毛:根,长而粗,菌转移质粒,耐药及毒力质粒。,2020/10/21,81,芽胞(Spore):不利环境中的一种抵抗形式,是休眠体而非繁殖体。,2020/10/21,82,二、细菌的繁殖与新陈代谢:,掌握几个概念: 自养菌、异养菌; 需氧菌、专性厌氧菌、兼性厌氧菌、微需氧菌。,2020/10/21,83,专性厌氧菌有氧不生长,原因有二: 厌氧菌缺乏细胞色素与细胞色素氧化酶,因此不能氧化那些氧化还原
20、电势较高的氧化型物质。 厌氧菌缺乏过氧化氢酶、过氧化物酶和超氧化物歧化酶,不能清除有氧环境下所产生的超氧离子(O2-)和过氧化氢(H2O2),因而难以存活。,2020/10/21,84, 群体细菌的生长繁殖曲线: 迟缓期、对数期、稳定期、衰退期,2020/10/21,85,四、消毒与灭菌,掌握几个概念: 消毒(Disinfection):杀灭病原微生物的方法。 灭菌(Sterilization):杀灭物体上所有的微生物(包括病原体和非病原体的繁殖体和芽胞)的方法。 无菌(Asepsis):物体上或容器内无活菌存在的意思。 防腐(Antisepsis):防止或抑制微生物生长繁殖的方法。,2020/10/21,86,五、微生物的遗传变异,(一)遗传变异的物质基础 染色体 质粒(plasmid):细菌存在于染色体外的少部分(约12%)DNA,可决定细菌的一些生物学特性。 转位因子:插入顺序、转座子 、转座噬菌体,2020/10/21,87,质粒的生物学性质: 1质粒并非细菌生存所必不可少的遗传物质。 2质粒的传递(转移)是细菌遗传物质转移的一个重要方式。 3质粒可自行失去或经人工处理而消失。 4质粒可以独立复制。 5可有几种质粒同时共存在于一个细菌内。,2020/10/2
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