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文档简介
1、生物组织中还原糖脂肪和蛋白质的检测, 杨启虎,1、实验原理:,(1)斐林试剂鉴定还原糖时,溶液的颜色变化为:由蓝色变成砖红色(沉淀)。斐林试剂只能检验生物组织中还原糖存在与否,而不能鉴定非还原性糖。葡萄糖、麦芽糖、果糖是还原糖。 (2)苏丹染液遇脂肪的颜色反应为橘黄色,苏丹染液遇脂肪的颜色反应为红色。 (3)双缩脲试剂的成分是质量浓度为0.1 gmL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0.01 gmL的硫酸铜溶液。蛋白质可与双缩脲试剂产生紫色反应。,2、实验目的: 尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质 3、实验选材: (1)做可溶性还原性糖鉴定实验,应选含糖高,颜色为白色的植物组织,如苹果、梨
2、。(因为组织的颜色较浅,易于观察。) (2)做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子,以花生种子为最好,实验前一般要浸泡34小时(也可用蓖麻种子)。 (3)做蛋白质的鉴定实验,可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。,4、实验试剂 斐林试剂(包括甲液:质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和乙液:质量浓度为0.05g/ mL CuSO4溶液)、 苏丹或苏丹染液、 双缩脲试剂(包括A液:质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和B液:质量浓度为0.01g/ mL CuSO4溶液)、 体积分数为50%的酒精溶液,碘液、蒸馏水。,5、方法步骤: ()可溶性还原糖糖的鉴定,()脂肪的鉴定,()蛋白质的鉴定,6、讨
3、论:,(1)选取富含还原糖的生物材料时,能用甘蔗或者橘子吗?为什么? 答:不行.橘子本身富含色素,会掩盖颜色反应的结果;而甘蔗不含还原糖,蔗糖不是还原糖. (2)斐林试剂和双缩脲试剂有哪些区别? a溶液浓度不同:斐林试剂中CuSO4溶液为0.05g/ mL, 双缩脲试剂中CuSO4溶液为0.01g/ mL b使用原理不同:斐林试剂实质是新制Cu(OH)2沉淀, 双缩脲试剂实质是碱性条件下的Cu2+ c使用方法不同: 斐林试剂使用时,先把NaOH溶液和CuSO4溶液混合,然后立即使用;双缩脲试剂是先加NaOH溶液,然后再加入3至4滴CuSO4溶液,7、练习与巩固 (1)检查尿液中有无葡萄糖,下列试剂中可选用的是( ) A.斐林试剂 B.碘液 C.双缩脲试剂 D.二苯胺 (2)下列生
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