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文档简介
1、细胞中过氧化物酶的显示与观察,( peroxisome),微体(micro-bodies),1,电镜下的过氧化物酶体,电子致密的核心是尿酸氧化酶的结晶,即类核体,2,peroxisome,Peroxisomes are simple, membrane-bound vesicles (or microbodies, as they are also called) A diameter of 0.1 to 1.0 m that often contain a dense, crystalline core of oxidative enzymes Peroxisomes are multifu
2、nctional organelles, containing more than 50 enzymes involved in such diverse activities glyoxysome乙醛酸循环体: specialized type of peroxisome, present in plants.,3,过氧化物酶体包括2种酶类:,氧化酶(oxidases) 约占过氧化物酶体酶总量的一半 各种氧化酶作用于不同的底物 将氧还原成过氧化氢。 RH2 + O2 R + H2O2,4,过氧化氢酶(catalase) 是过氧化物酶体的标志酶 约占过氧化物酶体酶总量的40% 作用是将过氧化氢
3、还原成水 RH2 +H2O2 R + 2H2O,5,过氧化物酶体的增殖,6,实验原理,氧化还原酶类的原位显示:根据氧化还原的原理,使无色的化合物氧化成有色的物质得以定位。 过氧化物酶体系能把许多胺类氧化成有色化合物。本实验用联苯胺混合液处理标本,过氧化物酶可将其氧化为蓝色或棕色产物。 根据颜色反应,可判定过氧化物酶的有无或多少。,RH2+ O2 R + H2O2 H2O2 + RH2 R + H2O,7,实验步骤,实验一: 取洋葱鳞片表皮一薄片; 置于0.85NaCl溶液中35分钟。培养皿1 浸在溶有0.1%钼酸胺的0.85NaCl溶液中5分钟。培养皿2 在使用联苯胺溶液前,每2ml加10%的过氧化氢2滴。培养皿3 浸在联苯胺溶液中2分钟,至切片出现蓝色为止。培养皿3 在0.85%NaCl溶液中洗1min。培养皿4 将薄片置于载玻片上展开,盖上盖玻片,显微镜检查。,实验二: 取马铃薯块茎一个,用徒手切片法切取一小薄片置于载玻片上, 滴加3的过氧化氢溶液。 用煮熟的马铃薯重复上述过程,结果如何?,8,实验结果,1、在显微镜下可见到细胞中有一些染成蓝色或棕色的颗粒。即为过氧化物酶存在的部位。,2、 滴加了过氧化氢溶液的马铃薯组织四周出现气泡,提示植物中过氧化氢酶的存在。,过氧化氢酶能使H2O2分解,生成H2O和O2,H2O2 H2O + O2,RH2
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