淋巴细胞亚群.ppt

1、淋巴细胞亚群分析的临床应用,北京协和医院 免疫科 赵丽丹,如何测定,结果分析： 1)淋巴细胞总数， T淋巴细胞计数 NK细胞计数 B淋巴细胞 2）CD4T细胞比例及计数 CD8T细胞比例及计数 CD4T/CD8T比例 3) 第二信号受体CD28 4）细胞免疫异常激活：,报告单,外周血淋巴细胞,T淋巴细胞,NK细胞,外周血淋巴细胞亚群,CD16+CD56+,T辅助细胞,CD3+,CD19+,T8细胞,B淋巴细胞,CD4+,CD8+,Nave T,CD45RA+CD45RO-,Memory T,CD45RA-CD45RO+,CD95 DR CD38,CD4+/CD8+,活化标志,细胞毒T细胞,抑制

2、型T细胞,CD28,CD28,增殖标志,Ki-67,体液免疫和细胞免疫,产生抗体， 中和胞外病毒、细菌外毒素,B细胞的发育,B细胞在风湿病中的免疫效应,活化的B细胞 1 抗原呈递,提供共刺激信号，活化T细胞； 2 产生自身抗体，介导II型、III型超敏反应； 3 调节其他免疫细胞如DC 4 产生的致炎性细胞因子： TNF-（肿瘤坏死因子） IL-6（白介素-6） Lymphotoxin（淋巴毒素） IFN-（ -干扰素）,Anti-DNA Anti-SSA,RA滑膜中的B淋巴细胞,RA关节滑膜可出现弥漫性或滤泡样淋巴细胞浸润，甚至可形成生发中心，其中的B细胞可分化为浆细胞并产生RF。,免疫缺陷

3、病,X连锁无丙种球蛋白血症 XLA 外周血和淋巴组织中B 细胞减少或缺失，Ig缺乏 男性婴幼儿，69月发病，反复化脓性感染 普通变异性免疫缺陷病CVID IgG显著低下，B细胞减少或正常，nave T减少 青壮年，反复化脓性呼吸道感染 选择性IgA缺陷、选择性IgG亚类缺陷 高IgM综合征,继发：肿瘤、药物、营养不良,X连锁重症联合免疫缺陷SCID T细胞和NK细胞减少，B细胞可正常 新生儿、婴幼儿，病毒、PCP、念珠菌、败血症,理想的B细胞靶向治疗应为清除病理性B细胞和/或促进保护性B细胞的扩增和功能。,Anti-CD20,抗CD20单抗治疗,淋巴细胞亚群监测在抗CD20单抗治疗中的临床指导

4、意义,初始治疗 B细胞显著增多应用价值； CD4+T细胞显著减少应用风险； 治疗中的监测 B细胞清除效应预测治疗效果（临床效果与B细胞清除相关，*长寿命浆细胞） 随访中的病情监测 B细胞恢复病情复发强化治疗； 感染风险 化脓菌、,NK细胞：杀伤肿瘤细胞、病毒感染细胞、胞内寄生菌（分支杆菌、利什曼原虫、李斯特菌、真菌）、寄生虫； 自身免疫性疾病时降低, 病毒感染时升高 表面标志物：CD3-CD16+CD56+；,NK细胞,T淋巴细胞 从基础到临床,T淋巴细胞：CD3-TCR复合体识别MHC-抗原肽复合物 CD3+/CD4+：辅助性T细胞（Th）分泌细胞因子，调节免疫应答 CD3+/CD8+：细胞

5、毒T细胞（Ts）杀伤靶细胞、抑制功能,双重识别：MHC限制性： MHC-II / CD4；MHC-I / CD8； I类分子表达于所有有核细胞表面提呈内源性抗原（病毒、胞内病原体、肿瘤） II类分子表达于专职APC、胸腺上皮细胞提呈外源性抗原,胞内病原体（病毒、立克次体、结核杆菌、布氏杆菌、沙门氏菌、李斯特菌、军团菌、新型隐球菌 、原虫） 肿瘤免疫 抗移植排斥,第二信号分子CD28功能标记,T细胞活化的双信号： TCR- MHC-抗原肽; CD28-B7;,T4细胞亚群及免疫效应,体内免疫功能状态 辅助临床疾病的诊断 探索疾病的发病机理、病程、预后， 监测、指导临床治疗方案,淋巴细胞亚群-从基

6、础到临床,如何看淋巴细亚群检测报告？,B细胞、T细胞和NK细胞比例和绝对计数 （自身免疫病、肿瘤、免疫缺陷病） 药物感染风险、疗效评估） T4和T8细胞比例和计数 Nave 细胞和memory细胞比例和计数 功能亚群 CD4+CD28+和CD8+CD28+ 激活亚群 HLA+DR+， CD38+：异常细胞免疫激活提示微生物感染（如HIV、CMV和EBV等），激活的程度与感染的严重程度密切相关。,CD3+T淋巴细胞,CD3增高，见于甲状腺功能亢进、甲状腺炎、重症肌无力、器官移植后排斥反应、慢性活动性肝炎、瘤型麻风、恶性肿瘤、ALL、SLE等 CD3减低，见于麻疹后、麻疹脑炎、腮腺炎、流感、带状疱

7、疹、皮肌炎、SLE,T4、T8淋巴细胞,CD4增高，见于RA、SS等； CD4减低，见于SCID、CVID、PBC、慢性活动性肝炎、AIDs等； CD8增高，见于乙型肝炎、传染性单核细胞增多症、麻风、AIDs等； CD8减低，见于RA、SS等。,CD4+/CD8+的比值,应用：评价自身免疫失调 免疫缺陷 监测GVHD：较移植前显著，GVHD风险 正常参考值为1.42.5； 2.5：细胞免疫功能过度活跃 1.4：病毒感染、恶性肿瘤,CD4/CD8 1.42.5,CD4/CD8 2.5,CD4/CD8 1.4,病毒感染,HIV/AIDs EBV（传单） CMV 流感 HBV,自身免疫病,SLE M

8、S,肿瘤及其他,淋巴瘤 白血病 实体肿瘤,I型DM GVHD 变态反应 RA,Nave T细胞（ CD4+CD45RA+CD45RO-CD62L）,Nave T 细胞亚群减少容易发生机会性感染 CD28的T4或T8细胞亚群减少的个体容易发生机会性感染 CD25分子、HLA-DR分子和CD38分子是细胞活化标志，异常的T细胞免疫激活提示病毒感染感染(如HIV、CMV和EBV等) 移植后CD4CD8比值较移植前明显增加，则预示可能发生排斥反应；,淋巴细胞亚群与疾病,SLE,淋巴细胞总数减少 T4细胞减少，T8细胞正常或升高 功能亚群 CD28+表达减少 活动期激活亚群明显增加？,移植,移植后的细胞

9、免疫功能评估 移植排斥：CD25+表达显著，CD4/CD8，GVHD 移植后CMV感染： T4细胞显著下降，T8 比例明显增高； CD28 表达下降； HLADR、CD38表达升高，NK和B细胞数量降低，CD4/CD8比值0.2必须停用免疫抑制剂凶险感染.,HIV/AIDS,淋巴细胞总数显著减少 CD19+CD38+活化B细胞增多 主要感染T4细胞，T4细胞持续性下降、功能受损、异常免疫激活： nave细胞减少，CD28+表达减少，T8细胞正常或升高,晚期也减少。 CD38,DR,CD95异常升高，且与HIV血浆RNA病毒载量有良好相关性,T4 细胞数量的减少,第一期：原发感染期，T4 细胞数

10、量一过性迅速减少 第二期：无症状期，T4 细胞数量持续缓慢减少 第三期，AIDS前期，T4 细胞数较快速减少，T4 细胞数在350/mm3-200/mm3。 第四期，AIDS期，T4 细胞数再次快速减少. T4细胞数和病毒载量预测机会性感染、把握治疗时机 治疗时机：T4 105/ml； T4 200/ul，预防性抗PCP治疗；,T4细胞数与机会性感染,T4 500/ul:较少出现机会性感染； T4 350500/ul：HSV、带状疱疹病毒感染； T4 200350/ul：皮肤霉菌、口腔念珠菌、 HSV、带状疱疹 T4 100200/ul：PCP、隐球菌、弓形体 T4100：CMV、鸟分支杆菌,HIV感染时T4 细胞的减少规律,T4细胞 (cell/mm3） 800 400,急性感染期,无症状期,艾滋病前期和艾滋病期,CD4,病毒载量,艾滋病人经HAART后的 CD4+ 细胞恢复规律,1.9,0.17/l/d（CD4+ 淋巴细胞）,0.05 /l/d（记忆CD4+细胞）,0.11 /l/d（Naive CD4+细胞）,0.5,1.4,3,6,9,12,18