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文档简介
1、,第二章 临床血液学检测,第四节 血型鉴定与交叉配血试验,2,各种血液成分包括红细胞、白细胞、血小板及某种血浆蛋白在个体之间均具有抗原成分的差异,受独特的遗传基因控制。 血型是各种血液成分的遗传多态性标记。 血型系统:由若干个相互关联的抗原抗体组成的血型体系。1983年,已发现20多个人类红细胞血型系统,400多种血型抗原。 “免疫血液学” 重点讲述与输血工作有密切联系的红细胞血型系统。,3,血型系统,红细胞血型系统 ABO血型系统,1900年,Landsteiner发现 Rh血型系统, 1940年,Landsteiner和Weiner发现 其他血型系统 白细胞抗原系统 血小板抗原及抗体 血清
2、蛋白成分的抗原特异性,4,(一)ABO血型系统1、ABO血型系统的抗原和抗体 根据红细胞表面是否具有A或B抗原,血清中是否存在抗A或抗B抗体,ABO血型系统可分为四型: ABO三个基因组成六种基因型:AA、AO、BB、BO、AB、OO;A、B为显性基因,O为隐性基因,所以只有四种表现型A、B、O、AB。,一、红细胞血型系统,5,一、红细胞血型系统,(一)ABO血型系统1、ABO血型系统的抗原和抗体 A或B抗原在胚胎期及出生时便能检出,但敏感性较低,到20岁左右时才达高峰。抗原性终身不变,但到老年敏感性有所下降。 A和B血型物质除存在于红细胞和其他组织细胞表面外,还广泛存在于体液和分泌液中,以唾
3、液中含量最丰富,脑脊液中无。,6,(一)ABO血型系统1、ABO血型系统的抗原和抗体 人在出生前尚未产生抗体,出生后3-6个月才开始出现,至青春期达高峰。产生抗体的功能可延续终身,但其效价随着年龄增长而逐渐降低。 天然抗体:无明确的抗原刺激而天然存在的抗体,主要是IgM。 环境中广泛存在的微生物、花粉、粉尘等与A或B血型抗原相似,通过隐性刺激产生血型抗体。 免疫性抗体:由已知抗原刺激产生的抗体,主要是IgG。 一般通过输血、妊娠、注射三种途径接触同种异体抗原。,一、红细胞血型系统,7,天然抗体和免疫性抗体的区别,8,(一)ABO血型系统1、ABO血型系统的抗原和抗体 抗A、抗B抗体: 抗A与抗
4、B主要是IgM,也有少量的IgG和IgA类抗体。 分泌液和体液中多为IgA类抗体。 抗A、B抗体: O型人血清中,以IgG为主。 不是抗A和抗B的混合物。 识别A抗原和B抗原的共同表位。,一、红细胞血型系统,9,(一)ABO血型系统2、 ABO血型的亚型 (1)A亚型 A1亚型红细胞上有A1和A抗原,其血清中含有抗B抗体。 A2亚型红细胞上只有A抗原,血清中含有抗B抗体和少量抗A1抗体。 AX亚型红细胞与B型血清不发生凝集或凝集反应甚弱,但却能与O型血清发生凝集。血型鉴定时,应加O型血清,以防将AX型误定为O型。 (2)B亚型 亚型不多见,临床意义不大。,一、红细胞血型系统,10,ABO血型的
5、亚型,11,(一)ABO血型系统3、ABO血型鉴定和交叉配血试验 (1)ABO血型鉴定:ABO血型抗体能在生理盐水中与相应红细胞抗原结合而发生凝集反应。由于血液持续存在ABO抗体,所以血型鉴定必须正反定型。 直接试验(正定型、细胞定型):用标准的抗A及抗B血清以鉴定被检者红细胞上的抗原。 反转试验(反定型、血清定型):用标准的A型及B型红细胞鉴定被检者血清中的抗体。 只有抗原鉴定和抗体鉴定完全相符才能肯定其血型类别。,一、红细胞血型系统,12,患者在生病进行治疗的过程中,身体状况不是始终保持一致的,当血型抗原有一方表达减弱,有可能AB型就成了A型,或者B型就变异成了O型。因此,也许三家医院存在
6、验错血型的可能,也可能三家医院都没有验错,而是病人血型出现了变异。 某些病人特别是肿瘤病人在生病治疗时可能发生血型变异。,案例二,13,加入O型血清:检出抗原性较弱的AX亚型红细胞。 加入O型红细胞:检出被检者血清中是否含有与ABO血型系统无关的红细胞异常抗体。,14,血型鉴定方法 - 玻片法,15,血型鉴定方法 - 微柱凝胶法,凝胶为填充物,只允许游离红细胞通过 抗A管、抗B管、抗D管:含抗体的凝胶,用于红细胞上A、B及D抗原检测 A细胞、B细胞及Ctl管:不含血型抗体凝胶 A细胞、B细胞用于检测血浆中的抗体 Ctl管用于自身对照,ABO/D血型正反定型卡,16,一、红细胞血型系统,(一)A
7、BO血型系统3、ABO血型鉴定和交叉配血试验 (2)交叉配血试验 输血前必须进行交叉配血实验。 分别将供血者的RBC与受血者的血清及供血者的血清与受血者的RBC进行的配合试验。 交叉配血试验的意义 (1)检验血型鉴定是否有误。 (2)检验血清中是否有不规则抗体。,17,案例三,18,凝集,凝集,不凝集,不凝集,交叉配血试验,交叉配血的主侧:供血者红细胞+受血者血清,交叉配血的次侧:供血者血清+受血者红细胞,配血不合,不能输血,配血相合,可以输血,紧急情况少量缓慢输血,密切 观察,如有输血反应,立即停止,不凝集,19,一、红细胞血型系统,(一)ABO血型系统3、 ABO血型鉴定和交叉配血试验 (
8、2)交叉配血试验 配血方法 1、生理盐水法:无输血史及妊娠史 2、间接抗人球蛋白法:有反复输血史及妊娠史,尤其是有输血反应史、生育过新生儿溶血病婴儿的妇女、大量输血时须同时做供血者之间的交叉配血实验。 3、卡式微柱凝胶法,20,一、红细胞血型系统,(一)ABO血型系统4、ABO血型系统的临床意义 (1)输血:坚持同型输血。 (2)新生儿同种免疫溶血病:母亲与胎儿血型不合引起血型抗原免疫所致的一种溶血疾病。主要见于O型母亲、A或B型胎儿,可发生在第一胎。 (3)ABO血型与器官移植 (4)亲缘鉴定、法医鉴定、疾病相关性调查等,案例四,案例七,案例八、九,案例五、六,21,22,案例五,孕妇陈某,
9、24岁,血型O型RhD阳性;丈夫A型RhD阳性,预产期日入院。次日孕妇肝功能检查异常:ALT:369 U/L,TBIL:54mol/L。剖腹生1子。3h后 婴儿皮肤、巩膜黄染明显。肝功能检查:ALT:41 U/L,TBIL:298mol/L。 用蓝光照射及白蛋白注射治疗黄疸进行性加深,全身重度黄染,送上级医院,已错过换血治疗的最佳时间,婴儿病情进展成核黄疸,大脑运动中枢受损。 实验室检查见下表。,23,案例六,孕妇华某,28岁,血型O型RhD阳性,3年前曾因IgG-抗A抗体效价1:256致死胎。丈夫血型A型,基因型AA型,RhD阳性。怀孕前数月口服甘草、黄芩、茵陈、大茵等中药。 怀孕1个月,测
10、IgG-抗A效价1:8,继续服中药,每半个月复查,孕期IgG-抗A抗体效价控制在1:32内。孕8个月剖腹产。婴儿出生后肝功能检查见表。,案例七,25,案例八,父 母 子 子,AB,O,AB,O,26,案例九,父母O型 ,孩子B型?,27,一、红细胞血型系统,(二)Rh血型系统 1、Rh血型系统的抗原和抗体 抗原 主要有5种。抗原性强弱依次为D、E、C、c、e,以D抗原性最强。 粗略地称含D抗原的红细胞为Rh阳性,不含D抗原的为Rh阴性。我国Rh阴性者甚为少见。 Rh抗体主要是不完全抗体 抗D抗体最常见 主要为免疫性抗体,Rh阴性者接受Rh阳性血后通过免疫产生。 绝大多数为IgG抗体,28,一、
11、红细胞血型系统,(二)Rh血型系统 1、Rh血型系统的抗原和抗体 Rh血型的亚型 弱D最有临床意义。弱D是D抗原的变异体,其免疫原性较弱。不能与所有的抗D血清发生反应,易被误定为Rh阴性。 做为供血者,弱D是Rh阳性。 如果将弱D血输给Rh阴性受血者时,仍有产生抗D抗体的可能性,因此不能将弱D输给Rh阴性的受血者。 做为受血者,弱D是Rh阴性。 当弱D型人接受输血时应是Rh阴性血,否则可能产生抗D。,29,一、红细胞血型系统,(二)Rh血型系统 2、Rh血型系统的鉴定 仅用抗D血清进行鉴定,粗略地分为Rh阳性和阴性两类。 鉴定方法 完全抗体:生理盐水凝集试验 不完全抗体:胶体介质法、木瓜酶法、
12、抗人球蛋白法、微柱凝胶法等,30,一、红细胞血型系统,(二)Rh血型系统 3、Rh血型系统的临床意义 (1)Rh血型系统所致的溶血性输血反应: Rh血型系统一般不存在天然抗体,故在第一次输血时,不会发现Rh血型不合,Rh阴性的受血者接受了Rh阳性血液输入后便可产生免疫性抗Rh抗体,再次输入Rh阳性血液时,发生溶血性输血反应。 第一次输血不必考虑Rh血型,第二次输血需考虑Rh血型是否相同。,31,谢小榕AB型Rh阴性 1997年5月30日,车祸。 天津医院抢救时未做Rh血型鉴定,输入了AB型Rh阳性的血。 第二次取钢板的手术不能再输AB型Rh阳性血。 以后存在生育障碍。,2002年9月3日,二审
13、判决要求天津医院对谢小榕因输血引起的损害后果承担60%的责任,肇事司机承担40%的责任。 但判决也同时要求谢小容有防止损害结果发生的注意义务。即尽量注意保护自身安全,防止各种危险情况发生,避免各种医学文献上记载的损害结果出现。,案例十,32,33,(二)Rh血型系统 3、Rh血型系统的临床意义 (2)新生儿Rh溶血病 母亲为RhD阴性,胎儿RhD阳性 Rh溶血病一般不发生在第一胎 由于自然界无Rh血型物质 第一次孕儿为Rh+,胎儿的RBC因某种原因(如胎盘绒毛脱落)进入母体,或分娩时进行胎盘剥离过程中血液挤入母体,孕妇体内产生抗Rh的抗体。第二次妊娠时,孕妇体内的抗Rh的抗体,通过胎盘导致胎儿
14、溶血 Rh阴性母亲输过Rh阳性血、有流产或人工流产史,也可发生在第一胎,一、红细胞血型系统,34,35,案例十二,孕妇王某,25岁,孕7个月后死胎。病史:10岁时因贫血曾输血多次。 实验室枪查:孕妇血型为O型RhD阴性,抗D强阳性,滴度1:128。 脐血检查见表。,36,二、其他血型系统,1白细胞抗原系统 (1)白细胞抗原有两类: 第一类为白细胞上特有的抗原, 如中性粒细胞上的NA、NB、ND等系统的抗原; 第二类为其他血液成分共有的 HLA抗原 红细胞血型抗原,即ABO等系统中含有的各种抗原。,37,二、其他血型系统,1白细胞抗原系统 (2)HLA检测临床意义 HLA与移植 HLA与输血 H
15、LA与临床:反复流产、胎儿血小板减少性紫瘢、粒细胞减少症、早产、畸胎前期等可能与母胎的HLA系统相容有关。 法医:应用HLA分型技术,排除亲子或证实亲子关系,可靠性可达95%以上。,38,二、其他血型系统,2血小板血型系统 (1)人类血小板上的抗原主要可分为两大类: 一类为非特异性抗原; 另一类为特异性抗原,即血小板上所特有的,不存在于其它组织、细胞上的抗原,主要为HPA-1(旧称Zw系统)、HPA-2(旧称Ko系统)等。 (2)临床意义 血小板输注无效 输血后紫癜(PTP) 新生儿同种免疫性血小板减少性紫癜,39,3血清蛋白抗原 血清蛋白抗原按其性质,可分为免疫球蛋白、血清酶、血清蛋白及补体
16、等几类, 这些蛋白有型的差异,具有抗原性和刺激同种不同个体产生抗体的特性, 通常与输血反应有关的血清蛋白抗原主要是免疫球蛋白。,二、其他血型系统,40,思考题,1. ABO血型系统的分类? 2. ABO血型系统的临床意义? 3. 输血前为什么要进行交叉配血试验? 4. 交叉配血试验的结果判断? 5. 输血的原则? 6. 配血方法的选择? 7. 名词解释 血型;交叉配血;直接试验;反转试验,41,测试题,1.与O型血易混淆的A亚型是 A. A1 B. A2 C. A3 D. Am E. Ax,2. A亚型之间输血可能引起输血反应的是: A. A1与A2 B. A1与A3 C. A1与Am D.
17、A1与Ax E. A2与A3,42,测试题,3.ABO血型鉴定采用的试验为: A、抗人球蛋白试验 B、盐水介质法 C、木瓜酶法 D、蛋白酶法 E、胶体介质法 4.交叉配血的次侧为: A、受者红细胞供者血清B、受者血清 C、供者红细胞受者血清D、供者血清 E、受者红细胞 5.ABO血型中能通过胎盘的抗体主要是: A、IgAB、IgM C、IgG D、IgE E、IgD,43,测试题,6.最主要的红细胞血型系统是: A、ABO血型系统B、Rh血型系统 C、P血型系统 D、Lewis血型系统 E、Li血型系统 7. ABO血型系统最重要的亚型是: A、A型B、B型 C、O型 D、AB型 E、Ax,44,测试题,8、Rh血型系统的抗原中抗原性最强、临床意义最重要的是: A、 C B、 E C、 D D、 c E、 e 9、 Rh血型系统是指: A、 红细胞抗原 B、 白细胞抗原 C、 血小板抗原 D、 血清蛋白抗原 E、 细菌抗原,45,测试题,10、保证输血安全的关键措施为: A、ABO血型鉴定 B、同型输血 C、交叉配血 D、输入O型血 E、盐水介质凝血试验 11、ABO血型鉴定:抗A和抗B血清中受检者红细胞均凝集, A型 B型红细胞加入受检者血清均不凝集,其血型为: A、A型B、B型 C、O型 D、AB型 E、 Ax,46,测试题,12.患儿出生2周,有明显贫血伴皮肤、巩膜黄染、
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