临床微生物学检验标本的采集.ppt

1、临床微生物学检验标本的采集，第38章，标本采集原则，发现感染时应及时采集微生物标本进行病原体检查。尝试在使用抗菌药物前或停药后一周采集样本。如果抗菌药物无法停用，应在下次使用抗菌药物前收集。应在感染急性期或伤口局部治疗前采集样本。选择正确的解剖部位，用适当的技术、方法和容器收集足够的标本。取样应严格无菌操作，以尽量减少污染。收集真正感染病灶的标本，避免污染邻近区域的常驻菌群。标本收集在特殊的无菌容器中。防腐剂不应添加到标本中。样品应在取样后立即送去检验，最好在2小时内。如果样品不能及时送检，应放在合适的储存环境中进行运输，但不能超过24小时。血液培养是将静脉穿刺获得的血液接种到一个或多个培养瓶

2、或试管中，以发现和鉴定细菌或其他微生物(如大肠杆菌、念珠菌、霉菌等)。)存在于血液中形成菌血症或真菌菌血症。血样采集和培养瓶接种、采血指征发热(38)或低温(36)寒战白细胞增多(10109/L)，特别是“核左移”未成熟或带状白细胞增多、粒细胞减少(成熟多核白细胞1109/L)血小板减少、皮肤和粘膜出血、昏迷、多器官衰竭、血压降低和呼吸加快，以及血液培养应在符合上述临床表现时采集皮肤消毒程序， 严格执行以下三个步骤：用70%乙醇擦拭穿刺部位30秒以上，用1%2%碘酊作用30秒或10%碘伏作用60秒，从穿刺部位到外圈进行消毒，直至消毒区域直径大于3厘米。 对碘过敏的患者，用70%乙醇消毒60秒，

3、乙醇蒸发干燥后采血。静脉穿刺和培养瓶接种程序，在静脉穿刺之前或期间，为防止静脉滑动，可戴乳胶手套固定静脉，但不要触摸穿刺点。用注射器进行无菌穿刺取血后，不要更换针头，直接将血样注入血培养瓶，然后轻轻倒转，混合均匀，防止血液凝固。立即送检，不要冷藏！采血量，成人：810毫升/瓶，儿童：15毫升/瓶，采血后应立即送检，或在室温下保存，切勿冷藏！采血次数和时间，只要怀疑有血液感染，立即采血，在使用抗菌药物前24小时内采集23次。使用抗菌药物的患者选择能够中和或吸附抗菌药物的介质，并有间歇性寒战或发热：寒战或发热高峰前0.51小时，寒战或发热后1小时。如果怀疑有急性原发菌血症、真菌菌血症、脑膜炎、骨髓

4、炎、关节炎或肺炎，应从不同部位采集23份血样。对于不明原因的发热，首先采集了23份血样，在估计的温度升高之前的2436小时后采集了2份以上的血样。可疑菌血症或真菌菌血症，但血培养持续阴性，因此应改变血培养方法以获得稀有或苛求的微生物。疑似细菌性心内膜炎，在12小时内采集3份血样，如果24小时后呈阴性，则采集2份血样。对特殊全身和局部感染患者的采血和培养提出建议，常见病原体，G球菌：葡萄球菌，链球菌，肠球菌G杆菌：结合分支杆菌，单核细胞增生李斯特菌，阴道革兰氏阴性杆菌G-球菌：脑膜炎奈瑟菌，淋病奈瑟菌，卡他膜球菌G-杆菌：大肠杆菌，绿脓杆菌，克雷伯氏菌，肠杆菌，变形杆菌，沙雷氏菌，沙门氏菌，不动

5、杆菌，嗜肺军团菌球虫病厌氧菌：类杆菌，产气荚膜梭菌，概念：少量菌血症患者可能没有临床症状，也可能不需要抗生素治疗。菌血症具有临床意义，根据细菌进入血液的不同机制可分为暂时性菌血症：通常人体正常菌群进入血液。间歇性菌血症：细菌来自血管外的器官和组织或传播性感染(化脓性关节炎、腹膜炎、蜂窝组织炎)，它们会间歇性地将细菌释放到血液中。持续性菌血症：通常感染源直接感染血液系统。大多数菌血症原因不明。脓毒症，概念：由病原菌或其毒素引起的血液或其他组织的全身炎症反应的表现。血培养是诊断菌血症的一种基本而重要的方法。如果从病人的血液中检测到细菌，一般认为是病原体感染，提示菌血症。血液感染特点，严重的全身感染

6、与耐药菌，条件致病菌和非致病菌显著增加与高死亡率，正常人的血液是无菌的，常见菌血症或败血症，葡萄球菌菌血症病原体：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌特点：明显的临床表现，急性发作，严重中毒症状，往往继发于菌血症和败血症从原发感染的重点，但也造成呼吸道感染，往往造成迁移损害。并发心内膜炎等。肠球菌属菌血症病原体：肠球菌属特征：患者常见于泌尿生殖道、消化道和腹腔感染，易并发心内膜炎，常对各种抗菌药物产生耐药性，病情严重。革兰阴性杆菌菌血症病原体：革兰阴性杆菌特点：主要侵袭免疫功能低下的患者，常引起泌尿生殖道、胃肠道、胆道和呼吸道感染，大面积烧伤和严重创伤，铜绿假单胞菌菌血症患者可引起感染

7、性休克和DIC，甚至多器官衰竭。厌氧菌血症病原体：厌氧菌(常见的脆弱拟杆菌)常伴有需氧菌感染，临床症状严重而复杂，常引起口腔、肠道和泌尿生殖系统感染、肝硬化、糖尿病、尿毒症、恶性肿瘤和新生儿败血症，以及真菌病病原体：真菌特征：多数细菌感染患者主要发生在菌群失调患者，可扩散并累及肝、肺和心内膜等。收集方法：腰椎穿刺，小脑延髓池穿刺，脑脊液，收集量：13毫升。要求将其放入无菌试管中立即检查，不超过1小时。特殊培养保温检查或床边接种。储存条件：立即接种，不要放在冰箱里。用于病毒检测的样品应与冰块一起放置，冰块可在4。常见病原体、临床意义、正常人脑脊液无菌病原体引起的感染通过血脑屏障进入中枢神经系统，

8、病原体种类不断增多，发病率逐年上升，诊断和治疗困难。细菌性脑膜炎是一种严重的中枢神经系统传染病，流行性脑脊髓膜炎，脑膜炎奈瑟菌引起的化脓性脑膜炎，是一种法定传染病，其中有些是暴发性的。病情严重，病死率高，且多发年龄为529岁。结核性脑膜炎常见于冬季和春季。现在，由于卡介苗的普及和结核病的大力防治，这种疾病的发病率明显低于过去。真菌性脑膜炎，病原体：真菌特征：隐球菌性脑膜炎是最常见的免疫低下和恶性疾病，患者易并发其他病原菌感染和流行性乙型脑炎，病原体：流行性乙型脑炎病毒特征：人畜共患的自然流行性疾病严重，病死率高，并可留下后遗症。感染源：病人、家禽、家畜和野生动物。媒体：蚊子通常容易受到隐性感染

9、，这可以获得持久的免疫力。肠道病毒引起的脑膜炎和脑炎、脊髓灰质炎：由于疫苗的广泛使用，脊髓灰质炎已基本消灭了新的肠道病毒，这种病毒可对中枢神经系统造成严重损害，但也会留下严重的后遗症，脓液、标本采集、症状指征、局部症状、全身症状、疾病指征、急性化脓性炎症、化脓性疾病、脓肿、伤口感染、收集注意尽可能取化脓组织与正常组织交界处的脓液。开放性病变不能进行厌氧培养，闭锁性脓肿一般采用穿刺或手术引流。采集前，用2.53%碘酊和75%酒精对周围皮肤进行消毒，用无菌注射器抽取脓液进行检查。你也可以用消毒棉签在割除和排出脓液时取样。对脓肿表面的皮肤进行消毒后，用无菌注射器抽取，将其刺入无菌橡胶塞中进行检查，用

10、生理盐水清洗烧伤伤口，在出现渗出物后，用无菌拭子在病灶底部或边缘收集标本，仅进行需氧培养。或者送一份组织样本。脓疱或水泡用酒精消毒。脓疱或水疱的表面和周围皮肤干燥后，用针打碎脓疱，用无菌拭子收集脓疱液和基底标本。厌氧菌感染标本直接从病变处采集注射器，床边接种或置于厌氧菌运输培养基中进行检查。避免接触空气。注意事项，局部病灶取样前应避免使用抗菌药物或消毒剂，用药前应服用。对于大多数开放性伤口，应在收集前进行清创以清除表面菌群。除非有渗出物，否则干燥和结痂的伤口一般不进行培养。不要只是送检脓液，而是在病变的活动区或基底部分收集标本，最好是组织标本。标本送检，标本采集应尽快送去。如果不能在1小时内培

11、养，标本应在4冷藏。(除用淋病奈瑟菌和脑膜炎奈瑟菌培养的标本外)，用厌氧菌培养的标本只能在室温下保存。常见病原体，G球菌：葡萄球菌、链球菌、肠球菌、消化链球菌、四环素G杆菌：分枝杆菌、破伤风杆菌、产气荚膜梭菌、碳杆菌G-球菌：脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、卡他膜杆菌G-杆菌：肺炎克雷伯菌、变形杆菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、流感嗜血杆菌、绿脓杆菌临床意义：G球菌常见于创伤感染，且易发生混合感染。深度伤口容易引起厌氧感染，如破伤风和气性坏疽。G-杆菌感染(如绿脓杆菌)是烧伤创面最常见的感染。急性化脓性骨关节炎通常由金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、淋球菌和肺炎链球菌感染引起，慢性骨髓炎通常由结核分枝杆菌感染引

12、起。标本采集指征：如有下列指征，应采集痰标本。咳嗽、咳痰、咯血、呼吸困难、发热和白细胞增多的胸部影像学检查表明可能存在感染。2550名肺部感染患者可能有菌血症。血液培养和采集应同时进行。晨痰是最好的自然排痰方法。咳痰前，用清水和冷开水反复漱口，然后用力咳出深呼吸道的痰。痰直接吐到痰盒中，并在1小时内送检。样本量应为1毫升。使用抗菌药物前，尽量收集样本。对于痰少或无痰者，可雾化吸入加热至45的10%氯化钠溶液，使痰易于排出。对于难以自然咳嗽的患者，可用无菌吸痰管抽取气管深层分泌物。合格痰液样本：10个鳞状上皮细胞/LP、25个白细胞/LP、特殊仪器采集、纤维支气管镜采集、防污染刷采集(PSB)、

13、支气管肺泡灌洗(BAL)、经气管环甲膜抽吸(TTA)、经胸针抽吸(TNA)、儿童痰液采集、用弧形压舌板压舌、棉签伸入咽喉、儿童咽喉儿童也可用手指轻敲胸骨柄诱发咳痰。标本的运送，标本应尽快送检，不能及时送检的标本应在室温下保存2h，并在冰箱中保存24h。一般来说，一天只需要做一次。常见病原体、细菌、真菌和病毒，临床意义，下呼吸道感染：肺实质肺炎和支气管粘膜支气管炎，它们是细菌性肺炎：最常见的下呼吸道感染类型支原体肺炎、真菌性肺炎、病毒性肺炎、粪便标本采集适应症：腹泻患者有下列情况之一时，建议采集粪便标本，并进行细菌培养和涂片镜检5个白细胞/HP；严重腹泻；体温大于38.5度；血便。大便里有脓；未

14、接受抗生素治疗的持续性腹泻患者；来自疫区的病人。标本采集注意事项，腹泻患者尽量在急性期和应用抗菌药物前采集标本；对于住院腹泻的成年患者，在住院后3天内采集粪便样本；粪便标本通常不是厌氧培养的；不同时间采集23份样品可以提高病原菌的分离率。收集法，自然排便法这是一种常规方法。直肠拭子法该方法仅适用于排便困难的患者或婴儿。消化道溃疡和幽门螺杆菌的组织活检标本可取自胃窦和胃体的胃粘膜活检标本。样品应尽快送检，不能及时送检的应在室温下保存2h。活检标本应立即用生理盐水送去检查，或标本应在运输介质中存放24小时。常见病原体、肠毒素类病原体、侵袭性病原体、临床意义、胃肠炎、细菌性食物中毒引起的细菌性痢疾、

15、细菌、真菌和病毒、肠道感染的致病性大肠杆菌、消化性溃疡、幽门螺杆菌感染、尿液、标本采集适应症疾病适应症：尿路感染；肾结核；泌尿系结石和前列腺增生；无症状菌尿、症状指征、尿路感染的典型症状；严重脓尿或血尿；尿常规检查显示白细胞或亚硝酸盐阳性；无其他局部症状的不明原因发热；留置尿管患者出现发热；膀胱排空功能受损；尿道口有脓性分泌物；术前泌尿系统疾病。收集法，清洁中段尿法：最常用的方法耻骨上膀胱穿刺法：评估膀胱细菌感染的“金标准”法，直接导尿，留置儿童导管收集袋，标本容器清洁，无菌，有盖，密封，防漏，广口，容积为50毫升，盒盖易于打开，不含防腐剂和抑菌剂。标本运输和收集后，应及时送检和接种。室温储存时间不应超过2h，储存时间不应超过8h。淋病奈瑟菌在培养过程中不能冷藏。常见病原体，革兰氏阴性杆菌：70%以上是大肠杆菌、革兰氏阳性细菌、肠球菌、支原体和衣原体真菌，临床意义上，尿路感染是指由大量微生物在尿路中生长和繁殖引起的尿路炎症。上尿路感染(肾盂肾炎)和下尿路感染(膀胱炎和