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文档简介
1、.,1,血液常规检验,太谷人民医院检验科 高文银,.,2,三分群血液分析仪的检测项目: 1、白细胞计数(WBC) 2、淋巴细胞百分率(LYM%) 3、单核细胞百分率(MXD%) 4、中性粒细胞百分率(NEUT%) 5、淋巴细胞计数绝对值(LYM) 6、单核细胞计数绝对值(MXD) 7、中性粒细胞计数绝对值(NEUT) 8、红细胞计数(RBC) 9、血红蛋白浓度(HGB) 10、红细胞压积(HCT),.,3,11、平均红细胞体积(MCV) 12、平均红细胞血红蛋白含量(MCH) 13、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC) 14、红细胞分布宽度(RDW) 15、血小板计数(PLT) 16、平均血小板
2、体积(MPV) 17、血小板分布宽度(PDW) 18、血小板比容(PCT) 附加三个直方图: 白细胞、红细胞、血小板直线方程图,.,4,标本的采集,1.早晨抽取空腹静脉血使用含有EDTA-K2抗凝剂的真空采血管(BD公司紫色或泰尔茂公司2ml紫色封皮),抽血后轻轻颠倒数次混匀,避免凝固,及时送检。30-60分钟取结果。 2.不要求空腹,在患者左手无名指内侧,取血约100-150微升血液,混匀检测,20分钟取结果。,.,5,标本采集注意事项,1.采指血避开水肿、冻疮、发炎部位。 2. 采血时不能用力挤压,避免细胞破碎, 造成检测结果偏低。,.,6,测定方法,仪器法: 显微镜计数法:,.,7,血细
3、胞计数原理(电阻法),根据血细胞相对非导电的性质,悬浮在电解质溶液中的血细胞颗粒,在通过计数小孔时可引起电阻的变化为基础,对血细胞进行计数和体积的测定。 将测定的某些数值经仪器设定的固定公式求出其余数据。,.,8,白细胞手工计数法,用白细胞稀释液将血液稀释20倍,并将红细胞破坏后,滴入计数池中,静置3分钟,在显微镜下计数一定范围内的白细胞数,经换算即可求得每升血液中各种白细胞的总数。,.,9,WBC生物参考区间,成人 (3.59.5)109/L 新生儿 (15.020.0) 109/L 6个月至2岁 (11.012.0) 109/L,.,10,白细胞检测的临床意义,增多: 1生理性增多:初生儿
4、、运动、疼痛、情绪变化、应激、妊娠、分娩。 2病理性增多:急性感染、严重组织损伤、大量细胞破坏、急性大出血、急性中毒、肿瘤。,.,11,白细胞减少的临床意义,病理性减少: 某些感染、某些白血病、慢性理化损伤、自身免疫性疾病、脾功能亢进。,.,12,RBC生物参考区间,新生儿 6.0-7.0 1012/L 成年男性: 4.30-5.80 1012/L 成年女性: 3.80-5.10 1012/L,.,13,红细胞检测的临床意义,增多: 相对性增多 :见于严重呕吐、腹泻、大量出汗、大面积烧伤等 绝对性增多: 可分继发与原发 1 继发:红细胞生成素代偿性增加:因血氧饱和度减低,组织缺氧所引起生理性红
5、细胞生成素代偿性增加,见于胎儿和新生儿,高原地区居民。病理性见于慢性心、肺疾患。红细胞生成素非代偿性增加:与某些肿瘤或肾脏疾患有关。 2 原发:真性红细胞增多症,是一种多能造血干细胞受累所致的骨髓增殖性疾病, 本病属慢性和良性增生。但具有潜在恶性趋向。,.,14,RBC减少,生理性减少:见于婴幼儿及妊娠妇女等 病理性减少:见于各种贫血如红细胞生成不足,红细胞破坏过多及失血等。,.,15,血小板计数,手工计数法: 用一次性无菌采血针迅速刺破皮肤,深度约2-3mm,以稍加挤液能流出为宜。擦去第一滴血,从穿刺处远端向指尖方向轻轻挤压,用20一次性采血管吸取血液20l,加到含有0.38ml血小板稀释液
6、的采血管中,颠倒混匀,充入计数池,静置10分钟后显微镜计数。,.,16,血小板计数参考值,(125-350)*109/L,.,17,血小板计数的临床意义,减少: 血小板减少( 125*109/L)见于: 1血小板生成障碍:再生障碍性贫血、急性白血病、急性放射病等。 2血小板破坏增多:原发性血小板减少性紫癜、脾功能亢进。 3血小板消耗过多:DIC等。,.,18,血小板计数的临床意义,增多: 血小板增多(400*109/L)见于 1骨髓增生综合征、慢粒、真性红细胞增多症等。 2急性感染、急性失血、急性溶血等。 3其他:脾切除术后。,.,19,嗜酸性粒细胞直接计数,用20l一次性采血管吸取血液20l
7、,擦净管外余血,加到含有0.38ml嗜酸性粒细胞稀释液中,轻轻颠倒混匀,静置20分钟,充池显微镜计数。,.,20,嗜酸性粒细胞参考值:,0.02-0.52*109/L,.,21,嗜酸性粒细胞直接计数的临床意义,主要用于观察传染病、手术后、烧伤患者的预后及测定肾上腺皮质功能等。,.,22,网织红细胞计数,用100l一次性采血管采血约100-150l,加入上述试管中,混匀编号。 静置15-20分钟后,取1滴制成薄片。 油镜下使用Miller窥盘计数法,计数1000个红细胞中网织红细胞数,以百分率报告。,.,23,网织红细胞计数参考值:,成人:0.5-1.5% 新生儿:3.0-6.0%,.,24,网
8、织红细胞计数的临床意义,1 判断骨髓红细胞造血情况 增加:表示骨髓造血功能旺盛,各型贫血均可增多,溶血性贫血尤为显著,恶性贫血或缺铁性贫血应用VitB12或铁剂治疗后显著增加,表示有疗效。 减少:再生障碍性贫血 2 观察贫血疗效:缺铁贫、巨幼贫患者治疗前,Ret仅轻度增高(也可正常或减少),给铁剂或维生素B12、叶酸、治疗3-5天后,Ret开始上升,7-10天达到高峰,2周左右Ret开始下降,表明治疗有效。 3 骨髓移植后监测,.,25,直线方程图生成原理,在上述数据的基础上,仪器对不同体积的细胞通过小孔时产生的电脉冲大小进行分群,将大小2450fl的血细胞产生电脉冲细分入256个通道,每个通
9、道为1.64fl。 同一类细胞产生的电脉冲相同或相近归属为同一区域,从而显示出各类细胞的体积直方图。,.,26,血球仪可在一分钟之内对样本同时进行红细胞、白细胞、血小板三种细胞的直方图绘制。,35 90 160 300 450,%,白细胞三分类直方图,.,27,血球仪可在一分钟之内对样本同时进行红细胞、白细胞、血小板三种细胞的直方图绘制。,.,28,一、白细胞直方图,血液分析仪器在35450fl范围内将白细胞分为3群。 正常白细胞直方图(图1-1)的左侧又高又陡,跨越3595fl定为淋巴细胞群(小细胞群),以成熟小淋巴细胞为主;最右侧又低又宽,跨越160450fl定为中性粒细胞群(大细胞群),
10、以中性粒细胞为主;左右两峰之间较平坦区定为单个核细胞区(中间细胞群),主要以单核细胞为主,也包含嗜酸、嗜碱性粒细胞及白血病细胞等。,.,29,35 90 160 300 450,%,正常白细胞三分类直方图(1-1),小细胞群,大细胞群,中间细胞群,.,30,白细胞直方图与临床应用,白细胞直方图的变化,可评价血液中白细胞群体的变化,但这种变化的细胞图并无特异性,某一类白细胞的增多或减低均可使直方图产生相似的变化。 因此,异常白细胞直方图(如图:1-41-16)只能提示白细胞分群之间比例变化或可能出现异常白细胞,故必要时可用显微镜复查血涂片(外周血细胞学分析)。,.,31,中性粒细胞比例增高(淋巴
11、细胞相对减低),中性粒细胞比例增高(淋巴细胞相对减低直方图显示淋巴细胞峰明显缩小甚至缺如,中性粒细胞右侧区域异常。 常见于各种原因引起的中性粒细胞增多、淋巴细胞减低症等。(图1-4)。,.,32,35 90 160 300 450,%,中性粒细胞比例增高(淋巴细胞相对减低) 白细胞直方图(1-4),中性粒细胞群,虚线为正常白细胞曲线,.,33,35 90 160 300 450,%,中性粒细胞比例增高(淋巴细胞相对减低) 白细胞直方图(1-4),中性粒细胞群,虚线为正常白细胞曲线,.,34,中性粒细胞比例减低(淋巴细胞比例增高),中性粒细胞比例减低(淋巴细胞比例增高),直方图显示淋巴细胞峰明显
12、增大,而中性粒细胞峰明显缩小。 多见于婴幼儿、再生障碍性贫血、中性粒细胞缺乏症、淋巴细胞增多症、传染性单核细胞增多症、慢性淋巴细胞白血病等。(图1-5)。,.,35,35 90 160 300 450,%,中性粒细胞比例减低(淋巴细胞相对增高) 白细胞直方图(1-5),中性粒细胞群,淋巴细胞群,虚线为正常白细胞曲线,.,36,35 90 160 300 450,%,中性粒细胞比例减低(淋巴细胞相对增高) 白细胞直方图(1-5),中性粒细胞群,淋巴细胞群,虚线为正常白细胞曲线,.,37,嗜酸性粒细胞、单核细胞增高直方图,嗜酸性粒细胞或单核细胞增高,直方图在98132fl区域内的细胞峰明显增高,并
13、通常仪器出现不能判断中间细胞区域值而报警,提示淋巴细胞与单个核细胞之间的区域异常、单个核细胞与中性粒细胞峰之间区域有异常,可能存在异型淋巴细胞、浆细胞、原始细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞等。 根据患者临床情况必要时行外周血细胞学分析进一步检查。(图1-6和1-7)。,.,38,35 90 160 300 450,%,嗜酸性粒细胞增高白细胞直方图(1-6),中性粒细胞群,淋巴细胞群,嗜酸性粒细胞群,虚线为正常白细胞曲线,.,39,35 90 160 300 450,%,单核细胞增高白细胞直方图(1-7),中性粒细胞群,淋巴细胞群,单核细胞群,虚线为正常白细胞曲线,.,40,35 90 160
14、300 450,%,中间细胞增高白细胞直方图(1-6/7),中性粒细胞群,淋巴细胞群,单核细胞群,虚线为正常白细胞曲线,.,41,急性白血病直方图,白血病细胞在某一区域出高大细胞峰,同时仪器报警。 白细胞总数明显增高,必须指出,不同类型的白血病可出现相似的直方图,同一标本在不同的仪器分析,其直方图也有所差异。 患者出现白血病共性特征时须骨髓细胞学明确诊断。(图1-8和1-9),.,42,35 90 160 300 450,%,急性非淋巴细胞白血病直方图(1-8) 原始、幼稚细胞增多(单一主峰),幼稚细胞主峰群,虚线为正常白细胞曲线,.,43,35 90 160 300 450,%,急性淋巴细胞
15、白血病直方图(1-9) 原始、幼稚细胞增多(单一主峰),幼稚细胞主峰群,虚线为正常白细胞曲线,.,44,35 90 160 300 450,%,急性白血病直方图(1-8/9) 原始、幼稚细胞增多(单一主峰),幼稚细胞主峰群,虚线为正常白细胞曲线,.,45,图1-8和图1-9主体坡峰极为相似,单靠血十八项不能确定急性非淋巴细胞与急性淋巴细胞,必需进行骨髓细胞学分析明确诊断。,.,46,慢性白血病直方图,治疗前白细胞总数明显增高,在单个核细胞区和中性粒细胞区左侧范围有一高大的细胞峰,图形呈一平台状; (图1-10) 冶疗后如疗效佳,白细胞总数减低,直方图可恢复正常;(图1-11) 若发生急变,直方
16、图可出现向急性白血病直方图趋势。(图1-12),.,47,35 90 160 300 450,%,慢性白血病冶疗前白细胞直方图(1-10),平台状主峰群,虚线为正常白细胞曲线,.,48,35 90 160 300 450,%,慢 性 白 血 病 冶 疗 后 好 转 白 细 胞 直 方 图 (1-11),冶疗前曲线,虚线为正常白细胞曲线,治疗后曲线,.,49,35 90 160 300 450,%,慢性白血病急变白细胞直方图(1-12),虚线为正常白细胞曲线,治疗后曲线,好转后急变倾向,.,50,异型淋巴细胞增高直方图,由于异型淋巴细胞体积比正常淋巴细胞偏大,仪器将其归属于中间细胞群,直方图上表
17、现为小细胞群与中间细胞群融合,呈骆峰形。 此曲线并非具有特异性,应与单核细胞增高直方图区别,鉴别方法为外周血细胞学分析。(图-13),.,51,35 90 160 300 450,%,异型淋巴细胞增多白细胞直方图(1-13),虚线为正常白细胞曲线,异型淋巴细胞群,单核细胞群,.,52,有核细胞干扰直方图,白细胞直方图显示淋巴细胞起点较高,分类值后均显示警号。 提示淋巴细胞左侧区有异常,可能存在有核红细胞、巨大血小板或乳糜颗粒等。(图1-141-15),.,53,35 90 160 300 450,%,巨大血小板干扰白细胞直方图(1-14),巨大血小板群,虚线为正常白细胞曲线,.,54,35 9
18、0 160 300 450,%,有核红细胞干扰白细胞直方图(1-15),有核红细胞群,虚线为正常白细胞曲线,.,55,35 90 160 300 450,%,有核红细胞干扰白细胞直方图(1-15),有核红细胞群,虚线为正常白细胞曲线,.,56,血小板聚集干扰直方图,血小板聚集易引起仪器堵塞; 若其三五成群呈微小结构聚集,仪器将血小板团误认为巨大血小板,白细胞直方图显示和巨大血小板干扰相似(图1-16) ;通常血小板聚集使血小板计数会有不同程度地下降。 仪器报警说明结果不可靠或管道堵塞,应重新取样本复查。,.,57,35 90 160 300 450,%,血小板聚集干扰白细胞直方图(1-16),
19、血小板聚集干扰群,虚线为正常白细胞曲线,.,58,二、红细胞直方图,仪器在36360fl范围内分析红细胞,横坐标表示红细胞体积,纵坐标表示不同体积红细胞出现的频率。 正常红细胞主要分布在50200fl范围内(图1-2),直方图上可见两个细胞群体,从50125fl区域有一介几乎两侧对称、较狭窄的正态分布曲线,主峰右侧约分布在125200fl区域的细胞为大红细胞和网织红细胞。 红细胞体积大小发生变化,直方图可出现左移、右移或出现双峰现象。,.,59,100 200 300400,%,正常红细胞直方图(2-1),两侧对称、正态分布曲线,.,60,100 200 300400,%,红细胞左移、右移直方
20、图(2-3),紫红色虚线为正常红细胞直方图 蓝色曲线为红细胞左移直方图 黑色曲线为红细胞右移直方图,.,61,红细胞直方图与参数关系,红细胞计数、血红蛋白测定、红细胞比容、红细胞平均指数、红细胞体积分布宽度都会影响直方图的形态; 为此先行了解各参数之间的关系对红细胞直方图的判别有较大帮助。 红细胞直方图主要对于临床贫血患者有诊断价值。,.,62,红 细 胞 平 均 指 数,包括: 红细胞平均容积(MCV):指每个红细胞平均体积的大小,用飞升(fl)表示; 红细胞平均血红蛋白含量(MCH):指每个红细胞内平均所含血红蛋白的量,以皮克表示(pg); 红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC):指每升红细胞
21、中所含血红蛋白浓度,用克每升表示(g/L)。,.,63,红 细 胞 平 均 指 数 计 算 公 式,红细胞平均容积(MCV) =每升血液中血细胞比容每升血液中红细胞个数 =HCTRBC 红细胞平均血红蛋白含量(MCH) =每升血液中血红蛋白含量每升血液中红细胞个数 = HGB RBC 红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC) =每升血液中血红蛋白含量每升血液中血细胞比容 = HGBHCT,.,64,红细胞体积分布宽度(RDW),RDW是一个较新的红细胞参数,由血液分析仪根据红细胞体积的直方图导出,反映所测标本中红细胞体积大小的异质程度,常用变异系数(CV)表示。 它比血涂片上红细胞形态大小不均的观察
22、更为客观准确。 RDW结果的判断应结合临床及红细胞直方图的变化,同时分析其异常是否由于红细胞碎片、红细胞聚集或双相性细胞引起。,.,65,红细胞参数的意义,红细胞的三个平均指数都由红细胞计数、血红蛋白含量、红细胞比容三者经固定公式计算得出。 单独某个参数对疾病无诊断意义,必须联合多个参数才能有效鉴别。 1983年Bessman提出用MCV和RDW两项参数作为贫血的形态学分类指标。 如今,我们使用MCV、RDW配合红细胞直方图,则更有助于判别贫血的病情和疗效。,.,66,红细胞直方图在贫血中的应用,1、小细胞性贫血:指细胞体积较小,MCV低于正常值。 包括以下情况: :RDW正常,红细胞主峰左移
23、,分布在55100fl,顶峰在75fl处,基底较窄为典型均一性图形,提示为小细胞低色素; 常见于轻型珠蛋白生成障碍性贫血;(图2-3),.,67,100 200 300400,%,轻型-珠蛋白生成障碍性贫血 直方图(2-3),虚线为正常红细胞曲线,小细胞均一细胞群,.,68,:RDW轻度增高: 红细胞主峰左移,分布在55100fl,顶峰在65fl处。 提示为小细胞低色素细胞不均一性,常见缺铁性贫血;(图2-4) 临床用铁剂治疗有效后,直方图有明显变化,可出现双峰图形。(图2-5),.,69,100 200 300400,%,缺铁性贫血直方图(2-4),虚线为正常红细胞曲线,小细胞不均一细胞群,
24、.,70,100 200 300400,%,缺铁性贫血经铁剂治疗后 直方图(2-5),虚线为正常红细胞曲线,治疗前曲线,治疗有效后曲线(双峰),.,71,:RDW明显增高: 红细胞直方图显示两个细胞峰,小细胞峰明显左移,峰顶位于50fl处,较大细胞峰位于90fl,基底较宽; 提示为小细胞低色素和不均一性。见于铁粒幼细胞性贫血(图2-6)。在骨髓细胞学细胞铁染色片中可见环形铁粒幼细胞,百分比15%为确诊依据。 缺铁性贫血治疗有效时,也可出现类似图形(图2-5)。,.,72,100 200 300400,%,铁粒幼细胞性贫血直方图(2-6),虚线为正常红细胞曲线,双主峰曲线,.,73,2、大细胞性
25、贫血:指MCV超过正常范围,红细胞体积较大。 包括以下情况: RDW正常:红细胞主峰 明显右移,主要分布在75130fl,顶峰位于100fl处,提示为大细胞性,体积较一致。 见于溶血性贫血、白血病前期、再生障碍性贫血。(图2-7),.,74,100 200 300400,%,再生障碍性贫血直方图(2-7),虚线为正常红细胞曲线,大细胞群,主峰在100fl,.,75,RDW轻度增高: 红细胞峰明显右移,基底增宽,主峰在75150fl,峰顶约在105fl处,提示为大细胞不均一性。 见于因叶酸、维生素B12缺乏引起的巨幼细胞性贫血。(图2-8),.,76,100 200 300400,%,巨幼细胞性
26、贫血直方图(2-8),虚线为正常红细胞曲线,曲线右移,主峰顶在105fl处,.,77,RDW明显增高: 红细胞峰明显右移,出现两峰,以100fl处细胞峰为主。 提示大细胞不均一性,常见于巨幼细胞性贫血叶酸、维生素B12治疗初期。(图2-8) 巨幼细胞性贫血经维生素B12、叶酸治疗后可出现向正态转变曲线。(图2-9),.,78,100 200 300400,%,巨幼细胞性贫血治疗有效直方图(2-8),虚线为正常红细胞曲线,治疗有效初期双峰曲线,治疗前期曲线,.,79,100 200 300400,%,巨幼细胞性贫血治疗有效直方图(2-9),虚线为正常红细胞曲线,治疗有效向正态曲线转变,治疗前期曲线,.,80,3、正细胞性贫血 直方图示正常分布,细胞大小较一致,血十八项中红细胞与血红蛋白成比例降低,RDW可正常,也可轻度增高。 常见于慢性病、骨髓纤维化、骨髓发育不良、急性失血等。(图2-10),.,81,100 200 300400,%,急性失血性贫血直方图(2-10),虚线为正常红细胞曲线,曲线无明显异常,.,82,三、血小板直方图,仪在230fl范围内分析血小板。正
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