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文档简介

1、b,1。血脂和血浆脂蛋白的测定。血脂是血浆中中性脂肪(甘油三酯和总胆固醇)和脂质(磷脂、糖脂、甾醇和类固醇)的总称。甘油三酯参与人体能量代谢,而胆固醇主要用于合成细胞膜物质、类固醇激素和胆汁酸。b,2,血浆脂蛋白的分类,1。乳糜微粒2、极低密度脂蛋白3、低密度脂蛋白4、病理状态下的高密度脂蛋白、中等密度脂蛋白出现在极低密度脂蛋白和低密度脂蛋白之间。颗粒依次变小,b,3,血浆脂蛋白的组成和结构,b,4,载脂蛋白,其蛋白质部分称为载脂蛋白,具有结合和转运脂质和稳定脂蛋白结构的功能,b,5,血浆脂蛋白代谢,甘油三酯代谢途径,b,6,胆固醇代谢途径,b,7,胆固醇反向转运途径,b。(胰岛素的缺乏不仅促

2、进肝脏中VLDL的产生, 而且由于LPL活性的降低而降低了极低密度脂蛋白的清除,这主要表现在血清甘油三酯和极低密度脂蛋白水平的升高,并且那些甘油三酯严重升高的人有发展成急性胰腺炎的危险。 )2。甲状腺功能减退症常表现为IIa型或IIb型高脂蛋白血症患者的血总胆固醇水平可与血甘油三酯水平同时升高(LPL活性降低、IDL代谢紊乱、LDL受体功能降低、血浆LDL清除减慢等)。)3。肾病综合征肾病中的高脂蛋白血症是由脂蛋白降解障碍和过量产生的双重机制引起的。b,10,高脂蛋白血症的因素,4,药物:抗高血压药,利尿剂,受体阻滞剂,甘油三酯和高密度脂蛋白。糖皮质激素长期治疗可增加甘油三酯和总胆固醇。其他:

3、肝胆疾病,胰腺炎,长期过量饮酒,b,11,低脂血症,1,家族性低脂血症(肝脏VLDL受体上调,伴有)2。-脂蛋白缺乏(ApoB合成和分泌缺陷,使含ApoB的脂蛋白如CM、VLDL和LDL的合成和代谢紊乱,伴有脂肪吸收和代谢紊乱,血浆TC也很低),B,12,血脂检测方法和临床意义,总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),载脂蛋白A1(ApoA1),载脂蛋白B(ApoB),B,13,总胆固醇(TC), 化学测定法L-B(ALBK)和Zak法ALBK(美国疾控中心脂质标准化实验室与相关学术机构合作评价银铃法并优化实验条件)用正己烷提取,

4、L-B显色银铃法(血清加醇溶性氢氧化钾分离胆固醇和脂蛋白,同时胆固醇酯用水分解成游离胆固醇,加入石油醚振荡提取)。 将胆固醇转移到石油醚层,分离取一定量的石油醚层,蒸发至干,然后进行利贝曼-伯查德显色反应,在620纳米处进行比色定量。该方法可用于组织和细胞中胆固醇的基本训练、提取和定量。)酶CEH-化学需氧量-巴氏法(优点:灵敏度高,准确度高,线性范围宽。缺点:1。胆固醇酯酶对胆固醇酯的不完全水解;2.表面活性剂吐温-40对酯酶的干扰:3.受尿酸、胆红素、VC)、b、14、CEH-化学需氧量-巴氏法等还原性物质的影响,胆固醇酯被胆固醇酯酶水解生成脂肪酸和胆固醇,胆固醇被胆固醇氧化酶氧化生成4-

5、胆酮和过氧化氢,然后被过氧化物酶H2O2催化,醌亚胺的最大吸收峰约为500纳米,吸光度与样品中胆固醇含量成正比。反应方程式如下:胆固醇酯H2O胆固醇游离脂肪酸胆固醇O24-胆固醇酮H2O 2 H2O 2 4-氨基安替比林酚醌亚胺,CEH,化学需氧量,过氧化物酶,b,15,血清胆固醇参考范围,TC5.20摩尔/升边缘上升:5.235.69摩尔/升上升:5.72毫摩尔/升,b临床意义,TC不能作为除高胆固醇血症以外的任何疾病的诊断指标。胆固醇是动脉粥样硬化和冠心病的明确危险因素,与冠心病的发病率呈正相关。影响总胆固醇水平的因素:1 .年龄和性别,(上升)2。长期高胆固醇、高饱和脂肪酸、高热量饮食3

6、。遗传4。缺乏锻炼、精神压力等。b,17。相关疾病中,有两种类型的高胆固醇血症:原发性高胆固醇血症、家族性apoB缺乏症、多源性高胆固醇血症、混合型高脂蛋白血症等。hypoTC的原发性和继发性疾病,如家族性缺失或低脂血症,以及继发性疾病,如甲状腺功能亢进、营养不良和慢性消耗性疾病等。b,18,测定血清甘油三酯,酶法测定磷酸甘油氧化酶法(灵敏度高,试剂稳定,线性范围宽),乳酸脱氢酶法(结果准确,灵敏度低,试剂不稳定),甘油氧化酶法(直接测定甘油),b,19,磷酸甘油氧化酶法的原理,利用脂蛋白酯酶(LPL)将血清中的甘油三酯水解成脂肪酸和甘油,甘油被甘油激酶(GK)和三磷酸腺苷(三磷酸腺苷)磷酸化

7、,3-甘油磷酸被甘油磷酸氧化酶氧化生成H2O2甘油三酯H2O甘油脂肪酸甘油ATPG-3-P ADP G-3-P O2二羟丙酮磷酸酯H2O2 H2O 2 4-AAP 4-氯酚苯醌亚胺氮酮H2O 2,b,20,甘油三酯临床意义,原发性高甘油三酯血症有多种遗传因素,包括家族性高甘油三酯血症和家族性高脂蛋白血症。继发性高甘油三酯血症可见于糖尿病、糖原累积病、甲状腺功能减退、肾病综合征、妊娠、口服避孕药、酒精中毒等。富含甘油三酯的脂蛋白是冠心病的独立危险因素。甘油三酯的升高表明患者患有代谢综合征,需要治疗。甘油三酯减少是罕见的,这可以在甲状腺功能亢进、肾上腺皮质功能减退和严重的肝脏损伤中看到。b,21,

8、甘油三酯参考范围,甘油三酯1.70摩尔/升增加:1.70摩尔/升,b,22,血清脂蛋白测定,HDL-C测定,b,23,HDL-C测定法和原理,高密度脂蛋白直接测定法可分为三类:1。聚乙二醇/抗体包被法2。酶修饰法3。选择性抑制法的原理分为两步:第一步试剂使用聚阴离子和分散的表面活性剂(反应抑制剂),其与低密度脂蛋白、极低密度脂蛋白和胆固醇表面的疏水基团具有高亲和力,并吸附在这些脂蛋白表面形成掩蔽层,但不沉淀,这可以抑制这些脂蛋白中的胆固醇与酶试剂反应。第二种试剂含有胆固醇测量酶和表面活性剂(反应促进剂),表面活性剂对高密度脂蛋白表面的亲水基团有亲和力,使酶与高密度脂蛋白中的胆固醇发生反应。HD

9、L-C与冠心病呈负相关,HDL-C低于0.9毫摩尔/升是冠心病的危险因素。HDL-C 1.55毫摩尔/升被认为是冠心病的一个负风险因素。HDL-C下降在脑血管疾病、糖尿病、肝炎和肝硬化患者中很常见。高渗状态常伴有低HDL-C,而肥胖人群的HDL-C也很低。吸烟减少,适度饮酒,长期体力劳动和运动增加高密度脂蛋白胆固醇,b,26,HDL-C参考范围,高密度脂蛋白胆固醇1.04摩尔/升减少:0.91摩尔/升,b,27,低密度脂蛋白测定方法和原理,一种直接均质化方法是用环糊精、硫酸葡聚糖和聚氧乙烯聚氧丙烯封闭共聚醚,抑制非低密度脂蛋白与胆固醇酯酶和胆固醇氧化酶的反应,另一种是用不同表面活性剂的双试剂分

10、两步水解非LDL-C和LDL-C(目前广泛使用),B,28,低密度脂蛋白的临床意义,和增加LDL-C是动脉粥样硬化发生和发展的主要脂质危险因素。总胆固醇水平也受HDL-C水平的影响,所以LDL-C最好取代总胆固醇作为冠心病的危险因素指标。b,29,LDL-C参考范围,低密度脂蛋白-c 3.12摩尔/升边缘升高:3.153.61摩尔/升升高:3.64摩尔/升,b,30,血清载脂蛋白测定,免疫比浊法,免疫比浊法,b,31,临床意义,载脂蛋白B1是高密度脂蛋白的主要结构在某些病理条件下,载脂蛋白A1与高密度脂蛋白不呈正相关,载脂蛋白b与低密度脂蛋白不呈正相关。载脂蛋白和脂蛋白的同时测定有助于病理发生

11、的分析。冠心病、肾病综合征、糖尿病等。所有患者的载脂蛋白A1均降低,载脂蛋白b增加。载脂蛋白A1与载脂蛋白b的比值通常被用作冠心病的风险指数。b,32,载脂蛋白参考值,载脂蛋白a1: 1.001.5 g/l,载脂蛋白b: 0.81.00 g/l,b,33,糖的来源和途径,b,34,葡萄糖的测定,葡萄糖氧化酶法(优选法),己糖激酶法,葡萄糖脱氢酶法,b,35后者在过氧化物酶(POD)和色素氧受体存在下将过氧化氢分解成水和氧,并将色素氧受体4-氨基安替比林和苯酚脱氢和缩合成红色醌,即它的颜色在一定范围内与葡萄糖浓度成正比。葡萄糖O2 H2O葡萄糖酸内酯H2O 2 H2O 2 4-氨基安替比林红醌化

12、合物,b,36,临床意义,生理性或暂时性血糖升高:进食高糖饮食后病理性高血糖和情绪激动;应激性高血糖如糖尿病甲状腺功能亢进和肾上腺皮质功能亢进,脱水引起的血药浓度升高如颅脑损伤和颅内压升高,如呕吐、腹泻、高热等严重肝硬化不能将糖转化为糖原贮积的胰腺疾病,b,37,临床意义上的血糖升高,生理性或暂时性低血糖,饥饿和剧烈运动等病理性低血糖可见于胰岛细胞增生或肿瘤引起的胰岛素分泌过多,而严重的肝病不能调节血糖。影响血糖升高的药物:口服避孕药、儿茶酚胺、咖啡因、甲状腺素、肾上腺素等降糖药物:降糖药物、酒精、普萘洛尔等。b,38,血糖参考值,成人:3.95.9毫摩尔/升,b,39,葡萄糖耐量试验,口服葡萄糖耐量试验指征:空腹血糖水平处于临界值(67毫摩尔/升),怀疑糖尿病患者空腹或餐后血糖正常,但有可能发展为糖尿病。妊娠期糖尿病患者糖耐量试验异常的诊断在临床上无法解释。b,40,世卫组织标准化OGTT,1。在实验的前三天,受试者的每日糖含量应不低于150克。2.应在三天前停用影响健康的药物,并空腹10-16小时。3.坐位采血

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