第九章 凝集试验

1、,第九章,凝集试验,agglutination,抗原 = 凝集原（agglutingen） 抗体 = 凝集素（agglutinin）,直接凝集反应,间接凝集反应,玻片凝集试验,试管凝集试验,凝集反应 分类,正向间接凝集反应（ Ag ）,反向间接凝集反应(Ab),间接凝集抑制反应(Ag和Ab),协同凝集反应(IgG-SPA),间接血凝试验(RBC),抗球蛋白试验 冷凝集反应,明胶凝集试验（粉红色明胶颗粒）,自身红细胞凝集试验,致敏载体的Ag 或Ab,载体,特殊的凝集反应,凝集反应的特点？,1、阶段性 抗原抗体的特异性结合 出现可见的凝集反应（适量的电解质）,2、一般参与反应的抗体为多价的IgM型

2、。,4、方法评价：方法简便，灵敏度高，结果直观、无需特殊仪器,3、凝集试验是一个定性或半定量的检测方法,第一节 直接凝集试验,细菌、红细胞等颗粒性抗原直接与相应抗体结合，在适当电解质的作用下，出现肉眼可见的凝集现象。,(direct agglutination test),直接凝集反应定义：,第一节 直接凝集试验,直接凝集反应的特点： 1、抗原呈颗粒状，制成的液体为悬液 2、抗原颗粒相对抗体大，故反应所 形成的凝集物主要成分为抗原。 3、抗原的比表面积比抗体大，试验时为使抗体不过甚，通常需要稀释抗体。 4、因为要稀释的是抗体，故以出现凝集现象的抗体最高稀释度判断效价。,直接凝集试验原理示意图,

3、一 玻片凝集试验,1、原理及方法,阳性,阴性,阳性标准：出现凝集颗粒+液体变澄清,2方法评价：简便快速、多定性且敏感度低,3临床应用：菌种鉴定、血清学和血型鉴定,（已知抗体检测未知抗原）,二、试管凝集试验,常见：已知细菌抗原液检测血清相应抗体效价,1、原理,滴度：通常以产生+凝集现象的最高稀释度作为血清中抗体的效价，也称为滴度。,2、方法,+,+,+,+,+,3、方法评价： 半定量试验简便、快速，敏感度低可有假阳性,4、临床应用： 肥达试验、外斐试验和交叉配血试验,三、与凝集反应有关的概念,O抗原（菌体抗原）结合抗体反应比较慢 H抗原（鞭毛抗原）结合抗体反应比较快 Vi抗原（表面抗原）包绕在菌

4、体表面,第二节 间接凝集试验 (indirect agglutination test),1、间接凝集试验的定义： 将可溶性抗原（或抗体）吸附于与适当大小的颗粒性载体表面，使之成为致敏颗粒，再与相应抗体（或抗原）作用，在适宜电解质存在的条件下，出现肉眼可见的特异性凝集现象。也称为被动（passive）凝集反应。,2、载体(carrier)： 指试验体系中与免疫无关，可以吸附抗体或可溶性抗原的颗粒。 3、致敏（sensitization）： 可溶性抗原(或抗体)吸附或偶联于颗粒载体表面的过程。 4、致敏颗粒（sensitized particle): 指吸附有已知可溶性抗原或抗体的载体颗粒,一、

5、间接凝集试验基本类型,根据致敏载体用的是抗原或抗体以及凝集反应方式，分如下三类,1、正向间接凝集试验,2、反向间接凝集试验,3、间接凝集抑制试验,特点：抗原致敏载体检测标本中相应抗体,特点：抗体致敏载体检测标本中相应抗原,特点：抗原致敏载体与相应抗体作为诊断试剂，用于检测标本中是否存在与致敏抗原相同的抗原。,1,2,3,第三节其他凝集反应,协同凝集试验 抗人球蛋白凝集试验 自身红细胞凝集试验,(一)协同凝集试验,特殊载体：葡萄球菌A蛋白SPA:SPA - Fc-IgG; 原理：抗体致敏SPA颗粒-测标本中相应抗原,应用： 微生物的快速诊断 注意： 要做阴性对照,载体：未经致敏的受检者新鲜红细胞

6、 试剂：抗人O型红细胞的单克隆抗体,二、自身红细胞凝集试验,特点：受检标本为全血,原 理,临床应用：HIV检测、HBsAg检测,双功能抗体,三、抗球蛋白试验（Coombs试验）,1、相关概念,不完全抗体：多数是IgG类抗体，能与相应抗原特异性结合后因其分子量较小，不能出现可见的凝集现象。,Coombs试剂：是Coombs等人用与不完全抗体有共同抗原的免疫球蛋白免疫动物，获得的抗球蛋白抗体。,2、原理：,（1）直接Coombs试验,3、技术类型,新生儿溶血症、自身免疫性溶血症等,（2）间接Coombs试验,输血前交叉配不相容输血后抗体检测和检测母体Rh抗体,直接凝集反应,间接凝集反应,玻片凝集试验,试管凝集试验,凝集反应 分类,正向间接凝集反应（ Ag ）,反向间接凝集反应(Ab),间接凝集抑制反应(Ag和Ab),协同凝集反应(IgG-SPA),间接血凝试验(RBC),抗球蛋白试验 冷凝集反应,明胶凝集试验（粉红色明胶颗粒）,自身红细胞凝集试验,致敏载体的Ag 或Ab,载体,特殊的凝集反应,1凝集反应的定义是什么？ 2什么叫直接凝集反