PSA的检测及临床意义.ppt

1、a,1,PSA的检测及临床意义,微生物科 肖征,a,2,前列腺特异抗原(Prostate Specific Antigen, PSA)是与前列腺癌相关的一种抗原。它是公认的诊断前列腺癌的较好的肿瘤标志物。前列腺癌在男性所有类型癌中占10%20%,是男性最常见的癌肿。该病进展缓慢,是威胁50岁以上男性生命的主要癌症,在西方国家占男性死亡率的第二位。美国FDA已批准将PSA检测作为50岁以上男性的普查指标。 流行病学调查表明,随着我国居民生活水平的改善,环境污染的加剧以及饮食结构的改变,前列腺癌的发病率日趋上升,已引起临床上的高度重视。,a,3,PSA的表达及生物学特性,1.PSA是Wang等于1

2、979年首先采用免疫沉淀技术从前列腺组织中分离出来的。其主要由前列腺组织上皮细胞分泌,尿道周围腺体也分泌PSA,但后者很少进入血液。近来研究发现,PSA并非前列腺组织特异性,甲状腺也可分泌PSA。而Kamenov Z等报道,在女性的乳腺,卵巢,子宫内膜等组织以及其血清、乳汁和胎儿羊水中都可检测到PSA,并认为PSA与女性体内的类固醇激素尤其是雄激素和孕激素的水平调节密切相关,并推测PSA可能是一种表明正常组织以及肿瘤生长情况的因子。,a,4,2.PSA为单链糖蛋白,分子量为3234Kd,由237个氨基酸残基组成。编码PSA的mRNA全长为1729bp。PSA为一种中性丝氨酸蛋白激酶,有酶的活性

3、,但活性水平较低,能溶解精液中的蛋白质,在精囊包的分裂和精液的液化上发挥生理作用。PSA能刺激前列腺癌细胞产生活性氧,该效应有浓度依赖性,PSA浓度愈高,刺激作用愈明显,而抗PSA抗体可抑制PSA的刺激作用。F-PSA在血液中的半衰期为110min,而TPSA的半衰期则为23d。,a,5,3.结构与表达 PSA是人类组织激肽释放酶基因家族的一个成员,位于染色体19q13.4上。人类组织激肽释放酶已被识别的有三个：hK1（胰、肾激肽释放酶），hK2（腺体激肽释放酶），hK3（PSA）。人类基因组序列测定显示在染色体19q13.3/q13.4上有15个组织激肽释放酶基因，并有相似的氨基酸序列。hK

4、2基因与hK3相邻，基氨基酸序列与PSA有80%同源，它具有胰蛋白酶样活性，在前列腺中也有具分泌功能的上皮组织。hK2在血清中的水平如果升高，前列腺癌的风险也会增加。,a,6,4.同构型: PSA在前列腺管腔内可被蛋白酶分裂而变为同构型PSA（PSA isoforms）,也可有以proPSA被去顶（truncated form of proPSA）的形式存在，又叫-2pPSA。-2pPSA似乎也和前列腺癌有相关性。,a,7,PSA在血清中形态 1.非结合形态，即游离PSA（freePSA,FPSA）。2.结合形态 PSA在血液中有60-90%与多种内源性蛋白酶抑制物结合形成复合形PSA（C-P

5、SA）： 与1抗糜蛋白酶(1-antichymotrypsin)结合,称为PSA-ACT，分子量约80-90kda. 与2巨球蛋白(2-macroglobulin)结合，称为PSA-AMG， 与蛋白酶C抑制体(protease C inhibitor)结合,称为PSA-PCI， 与1抗胰蛋白酶（1-antitrypsin）结合，称为PSA-AAT。,a,8,其中，PSA-ACT是血清中C-PSA的主要构成形式，也是目前免疫学方法能测到的主要成分.其它几种结合形式，由于抗原决定部位被掩蔽，不能为检测抗体所识别。 在精液中,PSA还与蛋白抑制物构成复合物。,a,9,二、检测,目前检测的方法主要有放

6、射免疫法、ELISA法及发光法。放射免疫法应用较早，其检测灵敏度高，准确性也较好。ELISA法的检测试剂国内外都有生产。,a,10,由于PSA的浓度较低，而且测到的值（绝对值）直接关系到对患者病情的判断，对检测试剂要求稳定性好，也就是重复性要好。但ELISA方法的影响因素比较多，尤其是低浓度标本的OD值容易受操作条件的影响。所以在用ELISA方法作检测的时候，要严格控制实验条件，操作人员要有一定的经验。另外，每块酶标板必须作单独的标准曲线，以保证结果的准确性。对于酶标法，接近本底孔的OD值所算出来的PSA值其准确性已大打折扣。一般来说OD值在0.15以上的结果就比较具有可比性了。按我们的经验，

7、也就是2.0ng/ml以上的结果。,a,11,而发光法一般是应用在全自动分析仪上的，准确性和重复性都是比较好的，比较适合于对PSA这样微量又必须定量的指标进行测定。要注意的是，如要对TPSA和FPSA都进行测定的话，应选用同一厂家出厂的产品。不同测定原理的方法（等克分子法或等重量法）所测出的结果，不适宜用来计算F/T比值。即使只对于总PSA，不同厂家的产品因针对的抗原不同，测出的结果也不太适宜用来直接比较。 国外还有一些产品，用金标试纸条作半定量检测，适用于家庭和门诊。但由于结果不太精确，只适合于初筛。,a,12,美国临床生化委员会（National Academy of Clinical B

8、iochemistry,NACB）和欧洲肿瘤标志小组（European Group on Tumour Markers, EGTM ）建议对常规肿瘤标志物测定的变异系数： 批内CV50ml 25ml 25ml 50ml 50ml 25ml 25ml BPH 100 4.75 9.23 4.31 9.66 0.139 0.113 0.336 0.212 PCa 53 0.85 10.95 12.26 10.88 0.358 0.162 1.174 0.339 注:检验,两组比较,均为0 01,a,24,数据表明，当前列腺体积50Ml时,BPH与PCa组间PSA均值的差异有显著性(0.05)。 随前列腺及移行带体积的增加,无论BPH还是PCa组中的PSA平均值都增加,而PSAD和PSA-TZ的均值则有所下降。 不论前列腺或移行带体积大小,BPH组和PCa组间的PSAD及PSA-TZ值间的差异均有显著性(10ng/ml时,IGF-1水平和PCa不再相关。,a,45,IGFBP-3被前列腺的上皮细胞生产,而且