天然药物化学第三节

1、(1)根据物质溶解度的不同分离1 .原理：类似者相溶2 .方法： 1)结晶和重结晶法的温度不同，溶解度不同2 )混合溶剂法：改变溶液的极性，进行脱掺杂(H2O-EtOH、EtOH-H2O、EtOH-Et2O )，三、生药有效成分的滴加少量易溶解样品溶剂样品溶液、难溶性样品溶剂，放置、沉淀、粗成分、3 )酸碱法，4 )沉淀法、酸水液、无机酸盐、H2O、H2S、有机酸盐、重金属硫化物、有机酸、有机溶剂提取、有机溶剂提取、生物碱、酸碱沉淀法：酸碱沉淀法碱性成分形成苦味酸盐、苦酮酸盐、雷氏盐沉淀。 利用原理：物质互不相容的2种溶剂中的分配系数的差异进行分离，2 )分离系数(值)和容易分离的关系，K=C

2、U/CL、b=KA/KB、k值与提取次数成反比，即k值越大提取次数越少，相反，越多，1 提取次数的关系根据(二)物质在两相溶剂中的分配比进行分离，在(KAKB )、 100次的提取中，基本上10 Rp-8Rp-2流动相：水和甲醇等强极性有机溶剂比较常用：甲醇-水、乙腈-水、(三)物质的吸附性不同物理吸附化学吸附半化学吸附，1 .吸附色谱的种类，2 .物理吸附1 )基本规律：“类似者容易吸附”。 2 )基本特征：无选择性，无可逆吸附，速度快。 3 )基本原理：吸附和装卸的往返循环。 4 )三要素吸附剂、溶质(被分离物)、溶剂。 常用吸附剂：硅胶、氧化铝、活性炭。 硅胶：使用面广，也可以用于碱性弱

3、的生物碱。 氧化铝：有酸性、中性、碱性成分。 具有载体量多、吸附力强等优点，多用于生物碱的分离。 极性吸附剂、非极性吸附剂、活性炭、吸附力与吸附剂、溶出剂、分离物质的关系： a、极性吸附剂容易被极性大的溶质吸附； 极性大的溶剂溶出能力高b .非极性吸附剂容易吸附于极性小的溶质； 极性大的溶剂溶出能力弱； c、溶质即使吸附在硅胶和氧化铝上，如果加入极性强的溶剂，也会被后者置换而溶出。 吸附剂含水量吸附力溶出易Rf值溶出剂极性溶出易Rf值分离物极性吸附力溶出难Rf值：，溶剂的极性-由介电常数决定。 环己烷石油醚氯仿乙酸乙酯1.88.89.29.47.20.11n-丁醇丙酮乙醇甲醇水17.8.726

4、.031.281.0，分离物质的极性顺序： COOHArOHROHRNH2 a、游离型化合物极性弱，有亲油性，解离型化合物极性强，有亲水性。 b .对于骨架相同的化合物，从所含的取代基的极性判断分子的极性的强弱。 亲水性基团与极性成正比，亲油性基团与极性成反比c，骨架相同，取代基的数量和种类不同，如果数量不太变化，含有极性最大的官能基的化合物的极性最强。 d、骨架不同，取代基的数量大时，必须具体分析具体情况。CHO，CH2OH，OH，OH，HO，CH3(CH2)14COOH，极性，1，2，3，5，7，4，6，活性炭经常用于黄酮糖苷的精制，杂质的除去(脱色)，污水处理以及来自水的化学成分的浓缩等

5、。吸附力与结构的关系：分子量大分子量小芳香族脂肪族吸附力与洗脱剂的关系(洗脱能力): 吡啶15%酚/醇7%酚/水醇含水醇水甲醇提取液活性炭、搅拌、静置、黄酮不与上清液反应为止，活性炭、7%酚/水、1 醚，醚，黄酮苷(可以用吡啶溶出糖苷)第一章总论，柱应用上的注意事项柱安装前的吸附剂的选择和使用量：酸性成分，碱成分吸附剂的粒度：常压， 加压柱的选择安装柱时尽量少极性的柱溶剂溶解试料和安装柱时难以溶解于柱溶剂，用少量极性大的溶剂在安装柱时溶解成功，柱变得均匀结实溶出时溶出溶剂混合溶剂多，极性逐渐增大， 在分离跳跃不变大的碱性物质时防止拖尾的溶出条件选择TLC，3 .化学吸附1 )基本特征：选择性，

6、有不可逆吸附。 2 )基本原理：发生化学反应。 酸性物质和Al2O3发生化学反应碱性物质和硅胶发生化学反应Al2O3容易引起结构的异构化。 3 )必须尽量避免。 4 .半化学吸附1 )基本特征：物理吸附和化学吸附之间2 )基本原理：以氢键的形式吸附3 )吸附剂：聚酰胺。 3聚酰胺吸附色谱、聚酰胺的性质和吸附原理：聚酰胺是高分子聚合物，不溶于水、甲醇、乙醇、醚等常用溶剂，对碱稳定。 对酸，特别是无机酸的稳定性差，可溶于浓盐酸、冰醋酸和甲酸。 一般为氢键吸附。 适用于酚类、醌类、黄酮类的分离。 结构和吸附力的关系a、形成氢键的基团数越多，吸附能力越强，b、容易形成分子内氢键的人、吸附力下降、c、芳

7、香化的程度越高，吸附力越强，d， 糖苷是相同的。糖苷，单糖苷，糖苷，糖苷，糖苷，糖苷，糖苷，糖苷，糖苷，糖苷，糖苷，糖苷，糖苷，糖苷，糖苷，糖苷，糖苷黄酮类吸附可逆鞣质的不可逆性用于生物碱、萜烯类、类固醇、糖类、氨基酸，多孔吸附树脂(1)的性质和吸附原理：性质：不溶于酸碱和有机溶剂，对有机物的选择性大，不受无机盐和低分子化合物的影响。 机制：氢健，分子筛。 (2)影响吸附的因素：树脂的因素：极性、比表面积、孔径。 溶剂性质化合物的性质、分子量、极性、形成氢键的能力。 (3)应用：主要用于活性部位的浓缩、有效部位和单体化合物的分离、极性化合物的分离等。 (4)根据物质分子大小的不同进行分离，1

8、.凝胶过滤法： -凝胶渗透、分子筛过滤、排块色谱(1)原理：分子筛原理凝胶不溶于水，但是可以膨胀的球形粒子具有三维空间的网状结构，根据分子筛的过滤作用以分子量的大小分离化合物。 适合于糖苷成分的分离。 (2)柱的顺序：从分子量大到小。 (3)一般载体：葡聚糖凝胶(Sephadex G-25 )是葡聚糖和甘油基通过醚桥交叉的多孔网状结构，只适合在水中应用。 羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20 )不仅可以用于水，也可以用于有机溶剂和水与有机溶剂的混合溶剂。 根据-oh-och2ch2oh、羟丙基化(5)物质的解离程度进行分离，原理：离子交换原理是利用酸、碱化合物处于解离状态时与阴、阳离

9、子树脂进行离子交换的原理进行分离的方法。 适用于酸、碱性化合物的分离。固定相：离子交换树脂流动相：水或含水溶剂，(5)根据物质解离的程度分离，R-SO3-H BH，rso3-hbb，OH-，r-n (CH3 ) 3cl-rCOO -，R-N (CH3)3-OOCR， r-n(ch3)3clcooh HCl根据离子交换基，生成阳离子交换树脂的强酸性(-SO3-H )、弱酸性(-SO3-H )和阴离子交换树脂的强碱性-N (CH3)3Cl -弱碱性(-NH2，-NHR， -NRR )和离子交换法的应用、用于不同电荷离子的分离的强碱性阴离子交换树脂、强碱性阴离子交换树脂、强酸性阳离子交换树脂、样品、

10、流出液(酸性和中性化合物)、流出液(中性化合物)、流出液(碱性化合物)、溶出液(酸性化合物)、溶出液(酸性化合物)、溶出液(两性化合物)， 氨水溶出液的碱性及两性化合物、稀ZaOH溶出、稀HCl溶出、碱性的强弱为a、b、c，将三者混合物的水溶液通过弱酸性树脂，然后水洗后，流出顺序为CBA、色谱总结，第五节结构研究法、一、化学结构研究的目的和意义中药有效成分的光谱测定、意义：为研究有效成分的生物活性、结构效果关系、体内代谢及结构改造、人工合成等提供必要的依据。 前提：必须是单体的化学成分。 这是鉴定化学结构的前提。 单体化合物的生物活性、人工合成和结构修饰等工作都是在单体化合物的结构明确的前提下

11、确立的。 一、化学结构研究的目的和意义，(一)文献(二)化合物纯度的测定1 .外观：晶型和色相2.Mp 3.TLC (三)物理常数测定包括熔点、沸点、比旋转度、折射率和比重等。 (4)分子式的确定1 .元素分析法2 .质量分析法 HR-MS 3.同位素丰度法(5)不饱和度的计算可以含有的双键数或环数(6)分子结构骨架的测定主要是各种中药化学成分的显色反应(7)功能团的判断1 .化学法2 .分光法，2 .结构研究的步骤和方法，(1)红外光谱(IR ) 分子价键通过红外光照射的伸缩振动和弯曲振动的红外吸收的特征频率区域： 40001500 cm-1 (特征官能团)指纹区域： 1500600 cm-

12、1官能团判定(羟基、氨基、羰基、芳香环)、三、中药的有效成分的光谱测定， 各基红外光谱33003000弱吸收：氢、氢、C=N强吸收： O-H、N-H 30002700饱和C-H 24002100不饱和三键19001650 C=O及其衍生物16801500 C=C及芳香核骨架振动， C=N等15001300饱和C-H面内弯曲振动1000650不饱和C-H面外弯曲振动、(二)紫外可见吸收光谱(UV )、电子迁移(向激发态的激发)产生的电子能级光谱，在不饱和共轭系化合物的问题光谱范围：波长4800nm、近紫外(三)质谱法，确定分子式、分子量、碎片离子峰EI-MS FD-MS FAB-MS，现主要利用

13、高分辨率质谱法(HI-MS )，被测定物质的质量数精确到小数点以下第三位。 一般的实测值与计算机给出的理论值相比较，取数值接近的值。 (4)核磁共振谱(NMR )、核磁共振：具有磁矩的(1H，13 C )原子核在磁场中吸收一定频率的电波引起核自旋能级转变的现象。 核磁共振氢谱(1HNMR )核磁共振碳谱(13 cnmr )二维核磁共振(2D-NMR )、1 .核磁共振氢谱(1HNMR )、化学位移耦合常数J (coupling constant )，1H-NMR化学位移(chemical shift )，定义：以四甲基硅烷TMS为内标物，其化学位移为0，测定各质子的谐振频率及其相对距离，该相对

14、值，化学位移1H周围的化学环境不同(电子云密度) 被称为1H-NMR 1-10 ppm sp3 12 sp2 68，一般来说，氢乙炔氢、1H-NMR耦合常数j、偕偶J=16Hz左右的相邻J=68Hz的远程耦合J=13Hz通过耦合而信号分裂，不同的分裂，s (s 耦合常数的其他简化判定方法：相当于核脱偶NOE位移试剂和积分曲线(积分面积)相当于分子中的全质子数。 1H-NMR的光谱分析分析步骤光谱有几个峰值？ 几种氢？ 各种氢核的个数是？ 各峰的归属？ 指出常见结构化学位移的大致范围：(苯氢)，(与羰基相连的甲基氢)，(与氧原子相连的亚甲基氢)例子： C6H5CH2CH2OCOCH3的NMR光谱

15、中各峰的归属。 2、核磁共振碳光谱(13 C -NMR )、13C光谱的特征灵敏度低、分辨率高光谱图容易解析(1)化学位移 (1)的范围为1250ppm，分辨率高(2)影响化学位移的因素ac混合方式(s 电子的流动向电负性强的方向移动)一般的电子云密度越小，化学位移越大电子云密度越大，化学位移越小。 常见的糖苷位移，酰基位移，第一章总论，常见的碳化学位移，(2)积分曲线与碳的个数成比例，与碳的种类(伯、仲、叔、季)有关，积分曲线的高度不能正确反映c的数量。 (3)耦合常数j一般被认为不存在。 13C自然界的存在比例为1.1%，13C的连接机会极小，偶联小，因此埋没在噪声中，几乎观察不到j。 虽然JC-H很常见，但(4)常见的13C -NMR频谱类型和特征噪声解耦合、全氢解耦合(COM )、宽带解耦合(BBD )由于1H照射后产生的NOE效果，1H的