广西《富硒虫草生产技术规程》编制说明

广西地方标准《富硒虫草生产技术规程》（征求意见稿）编制说明一、任务来源和起草单位根据广西壮族自治区市场监督管理局《关于下达2017年第四批广西地方标准制定（修订）项目计划的通知》的通知要求，《富硒虫草生产技术规程》（编号：2017-0460）广西地方标准于2017年6月获得立项。《富硒虫草生产技术规程》标准由广西壮族自治区农业科学院提出，广西壮族自治区农业科学院微生物研究所、广西宜州市农科所负责起草。其中广西壮族自治区农业科学院微生物研究所负责标准研究方案制定及具体编制，广西宜州市农科所协助实施部分试验，收集数据及相关资料等工作。二、制定标准的必要性虫草是传统名贵中药，具有抗癌、抗菌、调节免疫、降血脂、降血糖等广泛的药理作用，是一类十分重要的药用真菌，传统上和鹿茸、人参并称三大珍贵补品。硒是人体必需的微量元素，被称为微量元素中的“生命奇效元素”。众多研究表明，硒具有调节免疫、抗肿瘤、抗HIV等病毒、保护大脑、增强男性生殖功能等作用。硒的生理活性取决于它的化学形态，自然界的硒分为有机硒和无机硒两大类，有机硒的生物活性要好于无机硒，生物体内主要以有机硒的形式存在。无机硒毒性强、在体内不易吸收，有机硒吸收率高、毒性小。因而科学补硒应补有机硒，而非无机硒。虫草菌具有较强的元素有机转化能力，以虫草为载体将无机硒转化为虫草有机硒，将传统名贵中药“虫草”与奇效元素“硒”有机结合起来，发挥虫草菌和硒固有的以及协同的生理作用，生产功能更好的富硒虫草无论是作为药品、保健品以及补硒功能食品均具有重要意义。富硒虫草研究从20世纪90年代兴起，已有二十多年，有关富硒虫草的研究报道众多，仅富硒虫草生产的相关专利就多达51件，其中关于富硒虫草的培养方法就有18个。但是，目前国内并没有富硒虫草的的生产技术规范，且硒的食用量的安全标准较窄，市场上各类富硒虫草及相关产品中的硒含量也各不相同。因此，健全富硒虫草相关的生产技术规范和保障体系显尤为重要。通过本标准的制定实施，可指导富硒虫草生产企业、合作社和农户规范生产，保障富硒虫草的品质和安全，对我国富硒虫草相关产品的开发以及产业的发展具有重要意义。课题研究工作和标准征求意见稿的起草经过1、研究工作基础（1）培养基、培养条件的规范研究关于虫草富硒培养基的优化研究相对较多，培养条件的优化相对较少，在参考虫草优化培养基础上对虫草富硒进行了研究，但研究尚不够系统。虫草的富硒培养方式可分为固体培养和液体培养，目前以液体优化富硒培养相对较多，专利中以固体培养较多；硒源一般采用亚硒酸钠、动植物硒、硒泉水、硒酵母等。本标准计划综合考察富硒虫草不同培养原料、硒源等栽培试验及研究进展，确定富硒虫草适宜的培养原料；（2）富硒虫草菌种规范研究目前的富硒虫草研究中，所涉及的虫草种类仅见蛹虫草和冬虫夏草两种，其它虫草都还没有涉及。传统中药群众认可度很高，蛹虫草作为卫生部认定的新资源食品和药品应用非常广泛。本标准综合研究蛹虫草的富硒生产规程，制定相关标准。（3）富硒虫草培养条件规范研究几乎所有研究都表明低浓度硒促进虫草的生长，而高浓度硒对虫草生长产生抑制作用。然而对于何种浓度的硒对虫草生长起最佳作用，何种浓度的硒对虫草生长起抑制，各研究者结果不完全相同。此外研究表明硒不会改变虫草营养成分类别，但可以改变其各营养成分含量。本标准计划开展虫草富硒稳定性研究，考察原料种类、培养条件、硒添加量等对虫草富硒率、硒含量的影响，确定富硒虫草培养技术规范；2、标准征求意见稿的起草经过2017年5月至12月按照广西壮族自治区质量技术监督局《关于下达2017年第四批广西地方标准制定（修订）项目计划的通知》精神，为做好标准的编制工作，我单位成立标准起草工作小组；部署了制标工作方案和小组成员分工负责标准起草工作时间安排表，全面开展《富硒虫草生产技术规程》广西地方标准的编制工作。2018年1月至12月，课题组对多年来的研究资料进行了汇合、分析和总结，并查阅了大量的国内文献资料，确定了《富硒虫草生产技术规程》广西地方标准的基本内容和思路。经过反复研讨，形成了标准的编制原则及纲要。2019年1月至12月，课题组对南丹县寿菌种植专业合作社、融水县鼎农生态有限公司、融水苗坪岭药材种植专业合作社等从事食药用菌生产加工的企业进行了调研。2020年1月至4月经广西农业科学院微生物研究所、广西宜州市农科所编制小组成员的反复讨论和写作、修改，完成了《富硒虫草生产技术规程》广西地方标准的征求意见稿。四、标准编制原则及技术依据1、编制原则课题编制遵循“科学、适度、可行”原则，考虑标准前瞻性又顾及生产实际，确保标准可以作为政府部门监督、指导生产的依据，在生产上切实可行。（1）科学性标准的制定过程中采用文案调查法、专家座谈法、现场调查实验等多种研究方法，科学的研究方法为标准内容的科学性提供了有力保障。（2）客观性因各地不同原料、不同品种富硒水平具有一定的差异性，因此在标准制定过程中研究小组充分考虑不同原料来源、不同生产方式和不同品种等实际情况，尽量做到标准内容切合大多数生产企业富硒虫草生产实际，在保证安全和产品质量的基础上，不对富硒虫草所采用的具体工艺方法和设备做过多要求。（3）可操作性标准中所涉及的操作流程清晰，量化指标科学合理，提出的方法、要求易于操作，对于富硒虫草企业能够起到一定的引导和规范作用。2、技术依据本标准按照GB/T1.1－2009给出的规则要求编制，并依据前期研究成果及应用资料，符合国家产业可持续发展的有关规定。关键数据如下。（1）蛹虫草对亚硒酸钠的耐受性评价虫草基础培养基配方为：马铃薯200g，蛋白胨10g，葡萄糖10g，磷酸二氢钾2g，硫酸镁1g，蛹虫草富硒营养添加剂1号5g，琼脂粉12个，自来水1000mL，pH6.0～6.5。在基础培养基中添加一定量亚硒酸钠制成平板培养基，使培养基中亚硒酸钠质量浓度分别为0，50，100，150，200，250，300，350，400和450mg/L，在无菌条件下接种直径5mm的蛹虫草菌饼不同质量浓度亚硒酸钠对蛹虫草菌落特征的影响见表１。由表１及图１可见，当亚硒酸钠质量浓度为0～450mg/L时，蛹虫草菌丝均能生长，但其菌落形态与直径有明显差异。随着亚硒酸钠质量浓度的增大，蛹虫草菌落直径逐渐减小，当培养基中亚硒酸钠质量浓度为50mg/L时，菌落直径是对照的98.1％，气生菌丝较为稀疏，同心圆不太明显；当亚硒酸钠质量浓度为100mg/L时，菌落直径是对照的97％，气生菌丝稀疏，同心圆多且清晰，菌落呈淡黄色，边缘整齐，表明此时蛹虫草的菌落生长基本正常；当亚硒酸钠质量浓度≧150mg/L时，菌落已不能正常转色，且菌落边缘呈锯齿形，表明蛹虫草的菌丝生长受到了较大的影响。因此，从生产富硒蛹虫草的角度考虑，培养基中亚硒酸钠的质量浓度应低于100mg/L。表１不同质量浓度亚硒酸钠对蛹虫草菌落特征的影响图1不同浓度亚硒酸钠对蛹虫草菌落形态的影响（2）亚硒酸钠对蛹虫草长势、子座产量及硒含量的影响蛹虫草的长势评分综合了蛹虫草子座的生长密度、长度、子座形态及其健壮程度等指标，能反映亚硒酸钠对蛹虫草生长、转色、子座分化及生长的综合效应。不同质量浓度亚硒酸钠对蛹虫草长势评分的影响见图2。随着亚硒酸钠质量浓度的增大，蛹虫草的长势评分呈先增加后减小趋势，其中当亚硒酸钠质量浓度小于100mg/L时，蛹虫草长势变化幅度较小；当亚硒酸钠质量浓度大于100mg/L时，蛹虫草长势评分下降幅度较大，表明过量的添加亚硒酸钠会影响蛹虫草的生长，表现出一定的毒害作用。图2不同质量浓度亚硒酸钠对蛹虫草长势评分的影响不同质量浓度亚硒酸钠对蛹虫草子座产量的影响见图3。适量添加亚硒酸钠有利于子座产量的提高，过量的添加则会使其子座产量下降。在栽培营养液中亚硒酸钠质量浓度＜100mg/L时，蛹虫草的子座产量较高。当栽培营养液中亚硒酸钠质量浓度为58.17mg/L时，蛹虫草的子座产量最高，为22.4g/瓶。不同质量浓度亚硒酸钠对蛹虫草子座硒含量的影响见图4。在栽培营养液中添加不同质量浓度的亚硒酸钠，对蛹虫草子座硒含量影响较大。当栽培营养液中亚硒酸钠质量浓度较低时（＜50mg/L），蛹虫草子座硒含量增长幅度较小；当亚硒酸钠质量浓度在50～150mg/L时，子座硒含量随着亚硒酸钠质量浓度的增加迅速增大；当亚硒酸钠质量浓度在150～200mg/L时，子座含硒量增加幅度不明显；当亚硒酸钠质量浓度≥200mg/L时，子座硒含量趋于稳定，表明蛹虫草对硒的富集量有一定限度。经计算亚硒酸钠质量浓度为200mg/L时，子座中硒含量最大，为92.68mg／kg。表明蛹虫草是人工生产富硒产品的优良载体，同时也说明蛹虫草菌株CM-003有较强的富硒能力。图４亚硒酸钠浓度对蛹虫草图５亚硒酸钠浓度对蛹虫草子座产量的影响