2025年高考备考生物复习之发酵工程

第1页（共1页）2025年高考备考生物复习之发酵工程一．选择题（共6小题）1．（2023春•商丘期末）如表表示某培养基的配方（生长在此培养基上的大肠杆菌菌落呈深紫色，并有金属光泽），下列叙述不正确的是（）成分蛋白胨葡萄糖KH2PO4伊红亚甲基蓝蒸馏水琼脂含量10g10g2g0.4g0.0655g1000mL15gA．从用途分析该培养基属于选择培养基 B．培养基中提供碳源的物质主要是葡萄糖，提供氮源的物质是蛋白胨 C．该培养基含有水、无机盐、碳源和氮源等营养物质 D．该培养基pH值应调节至中性或弱碱性2．（2023春•镇沅县校级期末）如图是微生物平板划线示意图，划线的顺序为1→2→3→4→5．下列操作方法正确的是（）A．操作前不用做任何处理 B．划线操作必须在火焰上进行 C．在5区域中才可以得到所需菌落 D．在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌3．（2023春•谯城区校级期末）利用卷心菜发酵制作泡菜过程中，乳酸菌和酵母菌的细胞数量和pH的变化如图所示。下列叙述正确的是（）A．酵母菌和乳酸菌均有核膜包被的细胞核 B．发酵初期酵母菌菌建立了明显的菌种优势 C．前6dpH下降主要由酵母菌代谢引起 D．发酵中期酵母菌通过无氧呼吸进行增殖4．（2023春•城关区校级期中）在制作泡菜的过程中，下列描述错误的是（）A．所用食盐水的质量百分比为5%～20% B．制作泡菜时，原料要接种乳酸菌 C．盐水入坛前要煮沸冷却，以防污染 D．在坛盖边沿的水槽中要注满水，以保证坛内的无氧环境5．（2024春•石景山区期末）关于白酒、啤酒和果酒的生产，下列叙述不正确的是（）A．在酿制白酒、啤酒和果酒的发酵初期需通入空气 B．酿制过程中温度控制在25℃左右更利于酒精发酵 C．葡萄糖转化为乙醇所需的酶既存在于细胞质基质，也存在于线粒体 D．生产三种酒的原材料不同，但发酵过程中起主要作用的都是酵母菌6．（2024春•海淀区校级期中）下列关于制作果酒的叙述，错误的是（）A．酒精是酵母菌进行无氧呼吸产生的 B．果酒制作应选取含糖量较高的新鲜水果 C．制作过程中将瓶盖拧松是为了让空气进入瓶内 D．果酒制作利用的酵母菌存在于许多新鲜水果表面二．多选题（共5小题）（多选）7．（2024春•东湖区校级期中）酵母菌的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。下列相关叙述不正确的是（）A．纯培养物是由单一酵母菌繁殖所获得的酵母菌群体分泌的代谢物 B．在配制固体培养基时需要先进行灭菌，再对pH进行调节 C．倒平板时冷却后的培养皿须倒置主要是为了方便观察 D．利用平板划线法接种时，接种环蘸取五次酵母菌液（多选）8．（2024•石家庄模拟）在涂布有敏感宿主细菌的固体培养基表面接种噬菌体，一个噬菌体先侵染和裂解一个细菌，然后以此为中心，再侵染和裂解周围大量的细菌，最终在培养基上形成肉眼可见的透明圈，称为噬菌斑，如图所示。不同种噬菌体形成的噬菌斑形状、大小、边缘和透明度不同。研究者在涂布有敏感宿主细菌的固体培养基上接种0.1ml相应噬菌体的106倍稀释液进行相关实验。下列叙述正确的是（）A．接种细菌后的平板培养一段时间后变为不透明状态，是由细菌大量繁殖造成的 B．噬菌体样品应有足够的稀释度，以保证初期一个细菌最多被一个噬菌体侵染 C．若平均每个平板的噬菌斑量为150，则该样品的噬菌体密度为1.5×108个/mL D．根据噬菌斑的形状、大小等特征可判断是否需要进一步纯化噬菌体（多选）9．（2024•江苏模拟）研究小组采用预加菌液法探究氮苄青霉素（Amp）和卡那霉素（Kan）对大肠杆菌的选择作用，即将菌液直接加入培养基中，摇匀倒平板，冷却后在相应区域放置圆形滤纸片，一段时间后测量抑菌圈直径，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ代筛选实验结果如图所示。下列相关叙述正确的有（）A．为防止培养基凝固，加入菌液时培养基温度不得低于65℃ B．抑菌圈内有两个菌落，可能是具有抗药性的大肠杆菌或其他杂菌形成的 C．Kan较Amp对大肠杆菌的抑菌效果强，且随培养代数增多两者抑菌效果减弱 D．一定浓度的抗生素会诱导细菌产生耐药性的变异，故使用抗生素时需适量（多选）10．（2024•张家界模拟）高强度超声可以通过破坏细胞结构、干扰基因表达等杀死细胞；低强度超声可以通过提高酶活性、改变细胞膜通透性等调控细胞生长。果酒制作过程中，常利用超声处理。下列有关叙述中，不正确的是（）A．果酒发酵的温度一般控制在18～30℃ B．果酒发酵前期通入无菌空气的目的是进行酒精发酵 C．果酒发酵结束后，可选择高压蒸汽灭菌处理发酵液 D．果酒发酵过程中，可选择适宜强度的超声处理（多选）11．（2024•湖南模拟）与传统发酵技术相比，发酵工程的产品种类更加丰富，产量和质量明显提高。下列有关说法正确的是（）A．发酵工程与传统发酵技术最大的区别就是前者可以利用微生物来进行发酵 B．发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身 C．在发酵工程的发酵环节中，发酵条件变化不仅会影响微生物的生长繁殖，也会影响微生物的代谢途径 D．通过发酵工程可以从微生物细胞中提取单细胞蛋白三．填空题（共6小题）12．（2022春•鸡冠区校级期中）实验室常用的消毒方法：；灭菌方法：。13．如图所示是划线分离法的操作，其中正确的是。14．（2022秋•朝阳期末）传统工艺酿造的醋不但含有丰富的营养成分，还具有独特的缓解疲劳、改善脂质代谢、增强食欲、保护肠胃等功能。《尚书•说命下》中提到：“若作酒醴，尔惟曲囊；若作和羹，尔惟盐梅。”说明古人用酒醋酿造谷物酒以及用梅子作酸味料。这些都与果醋的制作有关。回答下列问题：（1）根据醋酸菌的代谢特点，果醋酿制过程需控制适宜的环境条件，如（答两点）。（2）较高初始乙醇浓度对醋酸菌的生长和代谢会产生抑制作用，选育高性能优良醋酸菌株能提高醋的含量和品质，某同学开展耐乙醇菌性的筛选研究，配制了两种培养基：培养基种类成分富集培养基3%葡萄糖、2%酵母粉、0.01%Mg2SO4、自然pH筛选培养基0.5%葡萄糖、1%酵母膏、2%CaCO3、2%琼脂、10%无水乙醇、自然pH①对两种培养基常采用法进行灭菌；筛选培养基中，为醋酸菌提供氮源的是，该培养基中葡萄糖的含量低于富集培养基，原因是。②某同学从富集培养基中吸取少量菌液，经过后滴加到筛选培养基上进行涂布，适宜条件下培养后挑选产生透明圈的单菌落，得到耐乙醇的醋酸菌菌株。透明圈可用于鉴别醋酸菌的理由是。（3）乙醇脱氢酶（ADH）催化乙醇生成乙醛是醋酸发酵的第一阶段，乙醛脱氢酶（ALDH）催化乙醛生成乙酸是醋酸发酵的第二阶段，ADH和ALDH是醋酸发酵的两种关键酶。某同学从FY﹣24，DY﹣5，AS﹣4三种耐乙醇菌株中分别提取ADH和ALDH，分别用高浓度的乙醇处理后测酶活性，由此可根据进一步筛选出耐乙醇醋酸高产菌株15．（2023•北京）自然界中不同微生物之间存在着复杂的相互作用。有些细菌具有溶菌特性，能够破坏其他细菌的结构使细胞内容物释出。科学家试图从某湖泊水样中分离出有溶菌特性的细菌。（1）用于分离细菌的固体培养基包含水、葡萄糖、蛋白胨和琼脂等成分，其中蛋白胨主要为细菌提供和维生素等。（2）A菌通常被用做溶菌对象，研究者将含有一定浓度A菌的少量培养基倾倒在固体培养平板上，凝固形成薄层。培养一段时间后，薄层变浑浊（如图），表明。（3）为分离出具有溶菌作用的细菌，需要合适的菌落密度，因此应将含菌量较高的湖泊水样后，依次分别涂布于不同的浑浊薄层上。培养一段时间后，能溶解A菌的菌落周围会出现。采用这种方法，研究者分离、培养并鉴定出P菌。（4）为探究P菌溶解破坏A菌的方式，请提出一个假设，该假设能用以下材料和设备加以验证。。主要实验材料和设备：P菌、A菌、培养基、圆形滤纸小片、离心机和细菌培养箱。16．若想筛选出能分解石油的微生物，可以以为唯一的碳源，以LB全营养培养基为对照，观察全营养培养基生长的菌落数比选择培养基的菌落数（填“多”或“少”）。17．玉米芯残渣含有大量的木质纤维素（由纤维素、半纤维素和木质素组成），通常被焚烧处理，不但造成严重的环境污染，还导致大量能量浪费。某科研团队从树林土壤中筛选，得到野生的季也蒙毕赤酵母，并进行多次筛选以期获得优良菌株。优良菌株以玉米芯残渣为原料可发酵生产洁净燃料﹣乙醇。下图为筛选过程，请分析回答：（1）图中对土壤菌液进行系列梯度稀释的目的是。稀释后将菌液接种到以作为唯一碳源的培养基中进行培养。待长出菌落后，提取其基因组DNA进行扩增并测序，鉴定为季也蒙毕赤酵母。（2）发酵生产时需先将玉米芯残渣进行预处理，该过程会产生许多抑制物。因此，研究人员在②的液体培养基中加入抑制物，并在③多次筛选时不断提高抑制物的浓度，是为了。培养过程中从②的液体培养基中定期取样并用的方法进行菌落计数，评估菌株增殖状况。此外，选育优良菌株的方法还有和等。（3）刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不与水解后的葡萄糖等发生这种反应，从而在纤维素分解菌周围出现透明的水解圈。将经过多次实验所获得的4种优良菌株后接种到含纤维素、刚果红、高浓度抑制物的固体培养基中，结果如右图。可选择菌株作为目标菌株进行发酵生产，原因是。四．判断题（共5小题）18．制作泡菜所用的菌种主要是醋酸菌。（判断对错）19．牛肉膏与蛋白胨不仅能为微生物提供碳源、氮源、无机盐，还能为微生物提供生长因子．（判断对错）．20．一个由KH2PO4、Na2HPO4、H2O、NH4HCO3配制的培养基中含有4种营养物质．（判断对错）．21．培养微生物的培养基中都必须含有碳源、氮源、水和无机盐，有些微生物的培养基中还需要加入生长因子．（判断对错）．22．发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。（判断对错）五．实验题（共2小题）23．为了获得β﹣胡萝卜素产品，某小组开展了产ß﹣胡萝卜素酵母的筛选与色素提取实验。请回答下列问题：（1）实验用的培养皿常用的两种灭菌方法是；为了减少灭菌后器皿被污染，灭菌前应该。（2）为了筛选出酵母菌，培养基中添加了青霉素，其目的是。（3）图是灭菌锅及其局部剖面示意图，图中甲、乙、丙指示的依次是。（填序号）①安全阀、放气阀、压力表②放气阀、安全阀、压力表③安全阀、放气阀、温度表④放气阀、安全阀、温度表（4）为了将分离到的菌株纯化，挑取了菌落在3块相同平板上划线，结果其中一块平板的各划线区均未见菌生长，最可能的原因是。（5）为增加胡萝卜素提取量，在研磨酵母细胞时，添加石英砂的目的是；研磨时（填“需要”或“不需要”）添加CaCO3，理由是。24．（2022春•雁峰区校级月考）某研究小组将一组相同圆纸片放入不同浓度的麦迪霉素（一种抗生素）溶液中浸泡后，放在接种有大肠杆菌的培养基上培养．实验结果如图1．请分析并回答下列问题．（1）将装有培养基的灭菌包装入高压蒸汽灭菌锅时，注意不要装得太挤，以免因而影响灭菌的效果．加热初期，必须将灭菌锅内的冷空气排尽，否则将因而影响灭菌的效果．倒平板时，待平板冷却凝固后，应将平板倒过来放置，并将记号笔在上标明培养基的种类、培养日期、平板上样品的稀释度、培养微生物名称及制作者姓名等信息．（2）实验结果表明，对大肠杆菌抑制作用最明显的是浓度为（填图1中数字）的麦迪霉素；（3）该实验中，宜使用方法接种大肠杆菌，在培养和接种大肠杆菌时要特别注意进行无菌操作，为了避免无关变量对实验结果的影响，对圆纸片的要求是；（4）该研究小组运用上述实验方法，还研究了相同浓度的三种不同抗生素A、B、C对大肠杆菌生长的影响，请在图2中表示这一处理方案（可模仿图1中图示并加以必要注解的方法）．．六．解答题（共2小题）25．（2024春•焦作期末）十溴联苯醚（DBDPO）是一种添加型高效阻燃剂，为白色或淡黄色粉末，不溶于水及一般有机溶剂，具有热稳定性好、毒性低等优点。但在使用DBDPO时需注意其可能对环境造成的影响，并遵循相关的安全规定。科研人员为了从被DBDPO严重污染的土壤中分离出能高效降解DBDPO的好氧细菌，进行了相关实验。请回答下列问题：（1）将10g土样中的微生物稀释10倍的操作是。（2）将土样稀释液置于恒温培养箱中3天，然后取上层样液接种到含一定DBDPO的培养液中，再置于恒温培养箱中3天，循环上述操作的过程中，缓慢增加DBDPO的浓度。该循环操作过程中，每次取上层样液的原因是。从平板上挑选高效降解DBDPO的好氧细菌，挑选的依据是。（3）土壤是微生物的“天然培养基”。该科研人员欲研究DBDPO污染对土壤中微生物种类数的影响，请利用DBDPO污染土样、未污染土样、普通培养基等为材料拟定一个实验，需写出实验思路、预期结果及结论（注：实验过程中不能使用显微镜）。实验思路：。预期结果及结论：。26．（2024•深圳模拟）自然界中不同微生物之间存在着复杂的相互作用。有些细菌具有溶菌特性，能够破坏其他细菌的结构使细胞内容物释出。科学家试图从某湖泊水样中分离出有溶菌特性的细菌。（1）用于分离细菌的固体培养基包含多种营养成分，其中蛋白胨主要为细菌提供和维生素等。（2）A菌通常被用做溶菌对象。研究者将含有一定浓度A菌的少量培养基倾倒在固体培养平板上，凝固形成薄层。培养一段时间后，薄层变浑浊（如图1），表明。（3）为分离出具有溶菌作用的细菌，需要合适的菌落密度，因此应将含菌量较高的湖泊水样后，依次分别涂布于不同的浑浊薄层上。培养一段时间后，能溶解A菌的菌落周围会出现。采用这种方法，研究者分离、培养并鉴定出P菌。（4）为探究P菌溶解破坏A菌的方式，请提出一个假设，该假设能用以下材料和设备加以验证。主要实验材料和设备：P菌、A菌、培养基、圆形滤纸小片、离心机和细菌培养箱。（5）为大量获取P菌制成菌剂，请补充P菌应用于发酵工程的基本环节。

2025年高考备考生物复习之发酵工程参考答案与试题解析一．选择题（共6小题）1．（2023春•商丘期末）如表表示某培养基的配方（生长在此培养基上的大肠杆菌菌落呈深紫色，并有金属光泽），下列叙述不正确的是（）成分蛋白胨葡萄糖KH2PO4伊红亚甲基蓝蒸馏水琼脂含量10g10g2g0.4g0.0655g1000mL15gA．从用途分析该培养基属于选择培养基 B．培养基中提供碳源的物质主要是葡萄糖，提供氮源的物质是蛋白胨 C．该培养基含有水、无机盐、碳源和氮源等营养物质 D．该培养基pH值应调节至中性或弱碱性【考点】培养基的配制；选择培养基．【专题】微生物的分离、培养和应用．【答案】A【分析】1、微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。2、鉴别、培养大肠杆菌可使用伊红﹣亚甲基蓝培养基，菌落呈黑色或紫黑色有金属光泽。【解答】解：A、该培养基中添加伊红﹣亚甲基蓝，从用途分析，该培养基属于鉴别培养基，可以鉴别大肠杆菌，A错误；B、该培养基中提供碳源的物质主要是葡萄糖，提供氮源的物质是蛋白胨，B正确；C、微生物的营养物质主要包括氮源、碳源、水和无机盐等，有的还需要特殊营养物质如维生素，蛋白胨还可以提供维生素等，C正确；D、由于该培养基用于培养细菌，所以pH值应调节至中性或弱碱性，D正确。故选：A。【点评】本题考查结合表格数据，考查培养基的相关知识，要求考生识记培养基的营养构成、种类及功能，能结合题干和表格信息准确判断各选项。2．（2023春•镇沅县校级期末）如图是微生物平板划线示意图，划线的顺序为1→2→3→4→5．下列操作方法正确的是（）A．操作前不用做任何处理 B．划线操作必须在火焰上进行 C．在5区域中才可以得到所需菌落 D．在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌【考点】微生物的选择培养（稀释涂布平板法）；微生物的选择培养和计数．【答案】D【分析】阅读题干和题图可知，本题是与平板划线操作有关的题目，先梳理平板划线操作的相关知识，然后结合选项描述分析判断。【解答】解：A、进行平板划线操作之前，用将接种环在酒精灯火焰上进行灼烧灭菌，A错误；B、平板划线操作应在火焰旁进行，不能在火焰上进行，B错误；C、由题图可知，5区域是最后一个区域，有可能在5区域获得所需要的菌落，在4区域也有可能得到所需要的菌落，C错误；D、在1、2、3、4区域中划线前都要对接种环进行灼烧灭菌，保证每次划线的菌种来自上一区域的末端，5区域划线前都要对接种环进行灼烧灭菌目的是防止杂菌污染，1区域划线后进行灼烧灭菌是防止污染环境及操作者，D正确。故选：D。【点评】本题的知识点是平板划线操作划线前后的灭菌及目的，平板划线法接种的结果预期，主要考查学生对平板划线法的掌握程度。3．（2023春•谯城区校级期末）利用卷心菜发酵制作泡菜过程中，乳酸菌和酵母菌的细胞数量和pH的变化如图所示。下列叙述正确的是（）A．酵母菌和乳酸菌均有核膜包被的细胞核 B．发酵初期酵母菌菌建立了明显的菌种优势 C．前6dpH下降主要由酵母菌代谢引起 D．发酵中期酵母菌通过无氧呼吸进行增殖【考点】制作泡菜．【专题】坐标曲线图；果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作．【答案】D【分析】泡菜在腌制过程中，乳酸菌、乳酸和亚硝酸盐的变化：①发酵初期：以不抗酸的大肠杆菌和酵母菌的活动为主，同时还有一部分硝酸盐还原菌活动。该时期利用了氧气，产生了厌氧环境，乳酸菌才开始活动。此时乳酸菌和乳酸的量都比较少，而由于硝酸盐还原菌的活动，亚硝酸盐含量有所增加。②发酵中期：由于乳酸菌产生了大量乳酸，其他细菌活动受到抑制，只有乳酸菌活动增强。此时期乳酸菌数量达到最高峰，乳酸的量继续积累。由于硝酸盐还原菌受抑制，同时形成的亚硝酸盐又被分解，因而亚硝酸盐含量下降。所以在整个发酵过程中，亚硝酸盐的含量表现为先增加后下降的趋势。③发酵后期：由于乳酸的积累，酸度继续增长，乳酸菌活动也受到抑制。乳酸菌数量下降，而硝酸盐还原菌完全被抑制。【解答】解：A、酵母菌属于真核细胞，具有成形的细胞核，而乳酸菌属于原核细胞，不具有成形的细胞核，A错误；B、由曲线图分析可知，发酵初期由于pH的迅速下降，其他杂菌的生长受到了严重影响，乳酸菌的数量快速增加，成为优势种群，B错误；C、乳酸菌能够将葡萄糖分解为乳酸，前6天pH下降主要由乳酸菌代谢引起，C错误；D、酵母菌属于兼性厌氧微生物，也能够进行无氧呼吸，发酵中期酵母菌通过无氧呼吸为细胞增殖提供能量，D正确。故选：D。【点评】本题考查制作泡菜，要求学生识记制作泡菜的原理、影响亚硝酸盐含量的因素等知识，对于泡菜制作过程及原理的掌握及种群数量变化因素的理解是结题的关键。4．（2023春•城关区校级期中）在制作泡菜的过程中，下列描述错误的是（）A．所用食盐水的质量百分比为5%～20% B．制作泡菜时，原料要接种乳酸菌 C．盐水入坛前要煮沸冷却，以防污染 D．在坛盖边沿的水槽中要注满水，以保证坛内的无氧环境【考点】制作泡菜．【专题】实验原理；果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作．【答案】B【分析】泡菜的制作过程：按照清水与盐的质量比为4：1的比例配制盐水，将盐、水煮沸冷却。将经过预处理的新鲜蔬菜混合均匀，装入泡莱坛内，装至半坛时，放入蒜瓣、生姜及其他香辛料，继续装至八成满，再徐徐注入配制好的盐水，使盐水没过全部菜料，盖好坛盖。向坛盖边沿的水槽中注满水，以保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。在发酵过程中要注意经常向水槽中补充水。发酵时间长短受室内温度的影响。【解答】解：A、所配制盐水的质量百分比为5%～20%，A正确；B、家庭制作泡菜时，原料不需要接种乳酸菌，菌种来自于蔬菜表面，B错误；C、配制好的盐水，需煮沸并冷却，煮沸可以杀死盐水中的微生物，盐水入坛前煮沸后需要冷却，是为了防止杀死乳酸菌，C正确；D、乳酸菌是厌氧菌，需要在无氧环境中将葡萄糖分解为乳酸，故在坛盖边沿的水槽中要注满水，可以保证坛内的无氧环境，D正确。故选：B。【点评】本题考查制作泡菜，要求考生识记制作泡菜的原理和制作过程，意在考查考生的识记能力和分析能力。5．（2024春•石景山区期末）关于白酒、啤酒和果酒的生产，下列叙述不正确的是（）A．在酿制白酒、啤酒和果酒的发酵初期需通入空气 B．酿制过程中温度控制在25℃左右更利于酒精发酵 C．葡萄糖转化为乙醇所需的酶既存在于细胞质基质，也存在于线粒体 D．生产三种酒的原材料不同，但发酵过程中起主要作用的都是酵母菌【考点】果酒、果醋的制作．【专题】正推法；果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作．【答案】C【分析】酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。【解答】解：A、在白酒、啤酒和果酒的发酵初期需要提供一定的氧气，有利于酵母菌大量繁殖，A正确；B、酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃，温度控制在25℃左右更利于酒精发酵，B正确；CD、酒精发酵利用的菌种是酵母菌，其原理是酵母菌进行无氧呼吸产生酒精，葡萄糖转化为乙醇所需的酶存在于细胞质基质，不存在线粒体中，C错误，D正确。故选：C。【点评】本题考查发酵技术及其应用的相关知识，要求考生理解识记有关技术的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能将教材中的知识结合题中信息进行迁移应用。6．（2024春•海淀区校级期中）下列关于制作果酒的叙述，错误的是（）A．酒精是酵母菌进行无氧呼吸产生的 B．果酒制作应选取含糖量较高的新鲜水果 C．制作过程中将瓶盖拧松是为了让空气进入瓶内 D．果酒制作利用的酵母菌存在于许多新鲜水果表面【考点】果酒、果醋的制作．【专题】正推法；果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作．【答案】C【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～25℃；反应中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。2、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30～35℃。【解答】解：A、酵母菌在无氧条件下，酵母菌进行无氧呼吸，能进行酒精发酵，无氧呼吸产生的是酒精和二氧化碳，A正确；B、酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵，在该过程中需要消耗较多的糖类，故通常把含糖量较高的水果用来制作果酒，这样既可以为果酒发酵提供原料，又可以为酵母菌的代谢提供能源，B正确；C、制作果酒利用的是酵母菌的无氧呼吸，而酵母菌的有氧呼吸和无氧呼吸都会产生二氧化碳，为了防止瓶子炸裂，在使用带盖瓶子制作果酒时，每隔一段时间拧松瓶盖，以释放出二氧化碳，C错误；D、传统的果酒制作中，菌种的来源是附着在水果皮上的天然野生型酵母菌，这说明果酒制作利用的酵母菌存在于许多新鲜水果表面，D正确。故选：C。【点评】本题考查果酒和果醋的制作，要求考生识记参与果酒和果醋制作的微生物及其代谢类型，掌握果酒和果醋制作的原理及条件，能够运用所学知识完成分析判断。二．多选题（共5小题）（多选）7．（2024春•东湖区校级期中）酵母菌的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。下列相关叙述不正确的是（）A．纯培养物是由单一酵母菌繁殖所获得的酵母菌群体分泌的代谢物 B．在配制固体培养基时需要先进行灭菌，再对pH进行调节 C．倒平板时冷却后的培养皿须倒置主要是为了方便观察 D．利用平板划线法接种时，接种环蘸取五次酵母菌液【考点】微生物的纯培养．【专题】对比分析法；微生物的分离、培养和应用．【答案】ABCD【分析】微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经溶化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。【解答】解：A、在微生物培养过程中，由一个细胞繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物，A错误；B、在配制固体培养基时需要先对pH进行调节，再进行灭菌，B错误；C、倒平板冷却后的培养皿要倒置在恒温培养箱中，既能防止培养皿盖上的水珠落在培养基表面造成污染，又能防止培养基中的水分过快蒸发，C错误；D、利用平板划线法接种时，接种环只在菌液中蘸取一次，之后每次都从上一区的末端开始划线，D错误。故选：ABCD。【点评】本题考查微生物培养的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。（多选）8．（2024•石家庄模拟）在涂布有敏感宿主细菌的固体培养基表面接种噬菌体，一个噬菌体先侵染和裂解一个细菌，然后以此为中心，再侵染和裂解周围大量的细菌，最终在培养基上形成肉眼可见的透明圈，称为噬菌斑，如图所示。不同种噬菌体形成的噬菌斑形状、大小、边缘和透明度不同。研究者在涂布有敏感宿主细菌的固体培养基上接种0.1ml相应噬菌体的106倍稀释液进行相关实验。下列叙述正确的是（）A．接种细菌后的平板培养一段时间后变为不透明状态，是由细菌大量繁殖造成的 B．噬菌体样品应有足够的稀释度，以保证初期一个细菌最多被一个噬菌体侵染 C．若平均每个平板的噬菌斑量为150，则该样品的噬菌体密度为1.5×108个/mL D．根据噬菌斑的形状、大小等特征可判断是否需要进一步纯化噬菌体【考点】微生物的选择培养（稀释涂布平板法）．【专题】模式图；微生物的分离、培养和应用．【答案】ABD【分析】间接计数法（活菌计数法）：①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。②计算公式：每克样品中的菌株数＝（C÷V）×M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。【解答】A、根据题意可知，在噬菌体裂解细菌后，形成圆形透明斑，这说明在噬菌体裂解细菌前，透明的平板培养一段时间后变为不透明状态，是由细菌大量繁殖造成的，A正确；B、噬菌体样品应有足够的稀释度，以保证初期一个细菌最多被一个噬菌体吸附，如果稀释度不够，会出现两个或多个噬菌体吸附同一个细菌，B正确；C、若平均每个平板的噬菌斑数量为150，则该样品的噬菌体密度为：150÷0.1×106＝1.5×109个/mL，C错误；D、不同噬菌体噬斑的形态大小不同，根据培养基上噬菌斑的形状等特征可判断是否需要进一步纯化噬菌体，D正确。故选：ABD。【点评】本题综合考查了微生物的筛选与分离、接种与培养等知识，意在强化学生对微生物的实验室培养的相关过程的理解与运用。（多选）9．（2024•江苏模拟）研究小组采用预加菌液法探究氮苄青霉素（Amp）和卡那霉素（Kan）对大肠杆菌的选择作用，即将菌液直接加入培养基中，摇匀倒平板，冷却后在相应区域放置圆形滤纸片，一段时间后测量抑菌圈直径，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ代筛选实验结果如图所示。下列相关叙述正确的有（）A．为防止培养基凝固，加入菌液时培养基温度不得低于65℃ B．抑菌圈内有两个菌落，可能是具有抗药性的大肠杆菌或其他杂菌形成的 C．Kan较Amp对大肠杆菌的抑菌效果强，且随培养代数增多两者抑菌效果减弱 D．一定浓度的抗生素会诱导细菌产生耐药性的变异，故使用抗生素时需适量【考点】选择培养基；探究抗生素对细菌的选择和作用．【专题】坐标曲线图；微生物的分离、培养和应用．【答案】BC【分析】细菌抗药性是由基因突变产生的，抗生素起到了选择作用。抑菌圈的直径越小，说明细菌对抗生素的抗性逐渐增强，抗生素的抑菌效果越差。【解答】解：A、温度超过65℃会影响菌种的生存，甚至高温能杀死菌种，因此加入菌液时培养基温度不能太高，A错误；B、抑菌圈源于抗生素或其他抑菌物质对细菌生长的抑制作用，抑菌圈内有两个菌落，可能是具有抗药性的大肠杆菌或其他杂菌形成的，B正确；C、据柱状图可知，Kan较Amp组抑菌圈的直径更大，说明其对大肠杆菌的抑菌效果强，且随培养代数增多，两者菌圈的直径都减小，抑菌效果都减弱，C正确；D、细菌繁殖过程中会发生基因突变，产生抗药性变异和不抗药性变异，一定浓度的抗生素会杀死不抗药性变异，抗药性变异保留下来，不是抗生素会诱导细菌产生耐药性的变异，D错误。故选：BC。【点评】本题主要考查培养基的配制以及抗生素对细胞的作用的相关知识，意在考查学生对基础知识的理解掌握，难度适中。（多选）10．（2024•张家界模拟）高强度超声可以通过破坏细胞结构、干扰基因表达等杀死细胞；低强度超声可以通过提高酶活性、改变细胞膜通透性等调控细胞生长。果酒制作过程中，常利用超声处理。下列有关叙述中，不正确的是（）A．果酒发酵的温度一般控制在18～30℃ B．果酒发酵前期通入无菌空气的目的是进行酒精发酵 C．果酒发酵结束后，可选择高压蒸汽灭菌处理发酵液 D．果酒发酵过程中，可选择适宜强度的超声处理【考点】果酒、果醋的制作．【专题】正推法；果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作．【答案】BC【分析】果酒制作的原理是利用酵母菌无氧呼吸分解有机物产生酒精和CO2，酒精发酵时需控制无氧环境。【解答】解：A、酵母菌的最适生长温度约为28℃，故果酒发酵的温度一般控制在18～30℃，A正确；B、果酒发酵前期通入无菌空气的目的是让酵母菌大量繁殖，B错误；C、高压蒸汽灭菌可能会破坏果酒的品质，故不能用该方法对发酵液灭菌，C错误；D、低强度超声可以通过提高酶活性、改变细胞膜通透性等调控细胞生长，从而增强发酵效果，提高果酒品质，故果酒发酵过程中，可选择适宜强度的超声处理，D正确。故选：BC。【点评】本题考查果酒果醋制作的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。（多选）11．（2024•湖南模拟）与传统发酵技术相比，发酵工程的产品种类更加丰富，产量和质量明显提高。下列有关说法正确的是（）A．发酵工程与传统发酵技术最大的区别就是前者可以利用微生物来进行发酵 B．发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身 C．在发酵工程的发酵环节中，发酵条件变化不仅会影响微生物的生长繁殖，也会影响微生物的代谢途径 D．通过发酵工程可以从微生物细胞中提取单细胞蛋白【考点】发酵工程的基本环节；发酵工程在食品、医药、农牧业等工业上的应用．【专题】正推法；果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作．【答案】BC【分析】1、发酵工程生产的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。2、产品不同，分离提纯的方法一般不同。（1）如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来；（2）如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取。3、发酵过程中要严格控制温度、pH、溶氧、通气量与转速等发酵条件。4、发酵过程一般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小，反应专一性强，因而可以得到较为专一的产物。【解答】解：A、发酵工程与传统发酵技术都需要利用微生物来进行发酵，A错误；B、由分析可知，发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身，B正确；C、在发酵工程的发酵环节中，发酵条件不仅影响微生物的生长繁殖，也会通过影响酶的活性影响微生物的代谢途径，C正确；D、单细胞蛋白是指利用发酵工程获得的大量的微生物菌体，D错误。故选：BC。【点评】本题考查发酵工程的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，难度不大。三．填空题（共6小题）12．（2022春•鸡冠区校级期中）实验室常用的消毒方法：；灭菌方法：。【考点】无菌技术常用的消毒和灭菌方法．【专题】正推法；微生物的分离、培养和应用．【答案】煮沸消毒法，巴氏消毒法，化学药剂消毒法，紫外线消毒法；灼烧灭菌，干热灭菌，高压蒸汽灭菌（湿热灭菌）法【分析】1、无菌技术的主要内容：①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌；③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。2、灭菌：使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物。灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌法适用于接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等。3、消毒：煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法。【解答】解：实验室常用的消毒方法：煮沸消毒法，巴氏消毒法，化学药剂消毒法，紫外线消毒法；实验室常用的灭菌方法：灼烧灭菌，干热灭菌，高压蒸汽灭菌（湿热灭菌）法。故答案为：煮沸消毒法，巴氏消毒法，化学药剂消毒法，紫外线消毒法；灼烧灭菌，干热灭菌，高压蒸汽灭菌（湿热灭菌）法【点评】本题主要考查无菌技术的内容，要求考生识记相关知识，并结合所学知识准确答题。13．如图所示是划线分离法的操作，其中正确的是。【考点】微生物的选择培养（稀释涂布平板法）；微生物的选择培养和计数．【专题】模式图；微生物的分离、培养和应用．【答案】见试题解答内容【分析】划线分离操作中的有关问题：（1）在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环，在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环。①第一次灼烧每次划线之前灼烧划线结束灼烧目的避免接种环上可能存在的微生物污染培养基杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染或感染操作者②在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线，以免接种环温度太高，杀死菌种。③在进行第二次以及其后的划线操作时要从上一次划线的末端开始划线。每次划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。（2）平板划线操作：①挑取他含菌样品：选用平整、圆滑的接种环，按无菌操作法挑取少量菌种。②划A区：将平板倒置于煤气（酒精）灯旁，左手拿出皿底并尽量使平板垂直于桌面，有培养基一面向着煤气灯（这时皿盖朝上，仍留在煤气灯旁），右手拿接种环先在A区划3﹣4条连续的平行线（线条多少应依挑菌量的多少面定）。划完A区后应立即烧掉环上的残菌，以免因菌过多而影响后面各区的分离效果。在烧接种环时，左手持皿底并将其覆盖在皿盖上方（不要放入皿盖内），以防止杂菌的污染。③划其他区：将烧去残菌后的接种环在平板培养基边缘冷却一下，并使B区转到上方，接种环通过A区（菌源区）将菌带到B区，随即划数条致密的平行线。再从B区作C区的划线。最后经C区作D区的划线，D区的线条应与A区平行，但划D区时切勿重新接触A、B区，以免极该两区中浓密的菌液带到D区，影响单菌落的形成。随即将皿底放入皿盖中。烧去接种环上的残菌。【解答】解：A、平板划线法一般要画几个区域，而不是一个区域，A错误；BCD、在进行第二次以及其后的划线操作时'要从上一次划线的末端开始划线，B正确，CD错误。故选：B。【点评】本题结合图解，考查微生物分离和培养，重点考查接种微生物常用的两种方法，尤其是平板划线法，要求考生掌握平板划线的具体操作过程及注意事项，能正确分析图解。14．（2022秋•朝阳期末）传统工艺酿造的醋不但含有丰富的营养成分，还具有独特的缓解疲劳、改善脂质代谢、增强食欲、保护肠胃等功能。《尚书•说命下》中提到：“若作酒醴，尔惟曲囊；若作和羹，尔惟盐梅。”说明古人用酒醋酿造谷物酒以及用梅子作酸味料。这些都与果醋的制作有关。回答下列问题：（1）根据醋酸菌的代谢特点，果醋酿制过程需控制适宜的环境条件，如（答两点）。（2）较高初始乙醇浓度对醋酸菌的生长和代谢会产生抑制作用，选育高性能优良醋酸菌株能提高醋的含量和品质，某同学开展耐乙醇菌性的筛选研究，配制了两种培养基：培养基种类成分富集培养基3%葡萄糖、2%酵母粉、0.01%Mg2SO4、自然pH筛选培养基0.5%葡萄糖、1%酵母膏、2%CaCO3、2%琼脂、10%无水乙醇、自然pH①对两种培养基常采用法进行灭菌；筛选培养基中，为醋酸菌提供氮源的是，该培养基中葡萄糖的含量低于富集培养基，原因是。②某同学从富集培养基中吸取少量菌液，经过后滴加到筛选培养基上进行涂布，适宜条件下培养后挑选产生透明圈的单菌落，得到耐乙醇的醋酸菌菌株。透明圈可用于鉴别醋酸菌的理由是。（3）乙醇脱氢酶（ADH）催化乙醇生成乙醛是醋酸发酵的第一阶段，乙醛脱氢酶（ALDH）催化乙醛生成乙酸是醋酸发酵的第二阶段，ADH和ALDH是醋酸发酵的两种关键酶。某同学从FY﹣24，DY﹣5，AS﹣4三种耐乙醇菌株中分别提取ADH和ALDH，分别用高浓度的乙醇处理后测酶活性，由此可根据进一步筛选出耐乙醇醋酸高产菌株【考点】果酒、果醋的制作．【专题】实验性简答题；微生物的分离、培养和应用；果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作．【答案】（1）温度、pH、氧气（2）①高压蒸汽灭菌酵母膏有利于筛选耐乙醇菌性高的目的菌株②梯度稀释耐乙醇的醋酸菌可以将乙醇转化为醋酸，醋酸可以分解碳酸钙，从而产生透明圈（3）酶活性高低【分析】1、实验室常用的灭菌方法：①灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌。②干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌。③高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30min。2、微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。3、果醋制作原理：利用醋酸菌有氧呼吸将葡萄糖或者乙醇转化为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30～35℃。【解答】解：（1）醋酸菌是需氧生物，其代谢过程受到温度、pH、氧气等的影响。（2）①对培养基常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。筛选培养基中，为醋酸菌提供氮源的是酵母膏。选择培养基中加入了10%的无水乙醇，其中葡萄糖的含量低于富集培养基，原因是有利于筛选耐乙醇菌性高的目的菌株。②培养分离菌株是，应将菌液经过梯度稀释后滴加到筛选培养基上进行涂布，适宜条件下培养后挑选产生透明圈的单菌落，得到耐乙醇的醋酸菌菌株。耐乙醇的醋酸菌可以将乙醇转化为醋酸，醋酸可以分解碳酸钙，从而产生透明圈。（3）该同学提取了ADH和ALDH，并测定了酶活性，由此可根据酶活性高低进一步筛选出耐乙醇醋酸高产菌株。故答案为：（1）温度、pH、氧气（2）①高压蒸汽灭菌酵母膏有利于筛选耐乙醇菌性高的目的菌株②梯度稀释耐乙醇的醋酸菌可以将乙醇转化为醋酸，醋酸可以分解碳酸钙，从而产生透明圈（3）酶活性高低【点评】本题考查微生物培养与分离的相关知识，要求考生理解并识记有关的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能将教材中的知识结合题中信息进行迁移应用。15．（2023•北京）自然界中不同微生物之间存在着复杂的相互作用。有些细菌具有溶菌特性，能够破坏其他细菌的结构使细胞内容物释出。科学家试图从某湖泊水样中分离出有溶菌特性的细菌。（1）用于分离细菌的固体培养基包含水、葡萄糖、蛋白胨和琼脂等成分，其中蛋白胨主要为细菌提供和维生素等。（2）A菌通常被用做溶菌对象，研究者将含有一定浓度A菌的少量培养基倾倒在固体培养平板上，凝固形成薄层。培养一段时间后，薄层变浑浊（如图），表明。（3）为分离出具有溶菌作用的细菌，需要合适的菌落密度，因此应将含菌量较高的湖泊水样后，依次分别涂布于不同的浑浊薄层上。培养一段时间后，能溶解A菌的菌落周围会出现。采用这种方法，研究者分离、培养并鉴定出P菌。（4）为探究P菌溶解破坏A菌的方式，请提出一个假设，该假设能用以下材料和设备加以验证。。主要实验材料和设备：P菌、A菌、培养基、圆形滤纸小片、离心机和细菌培养箱。【考点】微生物的选择培养（稀释涂布平板法）．【专题】模型思想；微生物的分离、培养和应用．【答案】（1）氮源、碳源（2）A菌能在培养平板中生长繁殖（3）稀释溶菌圈（4）假设P菌通过分泌某种化学物质使A菌溶解破裂【分析】培养基从物理状态可分为液体培养基和固体培养基。培养基的成分中一般含有碳源、氮源、水、无机盐等成分。【解答】解：（1）用于分离细菌的固体培养基包含水、葡萄糖、蛋白胨和琼脂等成分，其中蛋白胨主要来源于动物原料，蛋白胨主要为细菌提供碳源。氮源和维生素等。（2）将含有一定浓度A菌的少量培养基倾倒在固体培养平板上，凝固形成薄层。培养一段时间后，薄层若变浑浊说明菌体数量增加，表明A菌能在培养平板中生长繁殖。（3）因为湖泊水样中含菌量较高，所以若从其中分离具有溶菌作用的细菌，需要合适的菌落密度，应将含菌量较高的湖泊水样稀释后依次分别涂布于不同的浑浊薄层上。培养一段时间后，能溶解A菌的菌落周围不会出现菌体（菌体被破坏），则其周围会出现透明圈（溶菌圈）。因此采用这种方法研究者分离和培养并鉴定出P菌。（4）为探究P菌溶解破坏A菌的方式，可假设P菌通过分泌某种化学物质使A菌溶解破裂。若培养过P菌的培养液可使A菌溶解破裂，即可得到证明。故答案为：（1）氮源、碳源（2）A菌能在培养平板中生长繁殖（3）稀释溶菌圈（4）假设P菌通过分泌某种化学物质使A菌溶解破裂【点评】本题考查了微生物的培养和分离的相关知识，掌握微生物培养和分离的方法是解题的关键。16．若想筛选出能分解石油的微生物，可以以为唯一的碳源，以LB全营养培养基为对照，观察全营养培养基生长的菌落数比选择培养基的菌落数（填“多”或“少”）。【考点】选择培养基．【专题】正推法；微生物的分离、培养和应用．【答案】见试题解答内容【分析】培养基按功能分：种类制备方法特征用途选择培养基培养基中加入某种化学成分根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌鉴别培养基加入某种试剂或化学药品依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计鉴别和区分菌落相似的微生物伊红和美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌【解答】解：选择培养基是根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基，使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率。因此，若想筛选出能分解石油的微生物，可以以石油为唯一的碳源，以LB全营养培养基为对照，观察全营养培养基生长的菌落数比选择培养基的菌落数多。故答案为：石油多【点评】本题考查微生物的分离和培养，重点考查培养基的相关知识，要求考生识记培养基的组成成分，掌握培养基的种类及功能，能结合所学的知识准确答题。17．玉米芯残渣含有大量的木质纤维素（由纤维素、半纤维素和木质素组成），通常被焚烧处理，不但造成严重的环境污染，还导致大量能量浪费。某科研团队从树林土壤中筛选，得到野生的季也蒙毕赤酵母，并进行多次筛选以期获得优良菌株。优良菌株以玉米芯残渣为原料可发酵生产洁净燃料﹣乙醇。下图为筛选过程，请分析回答：（1）图中对土壤菌液进行系列梯度稀释的目的是。稀释后将菌液接种到以作为唯一碳源的培养基中进行培养。待长出菌落后，提取其基因组DNA进行扩增并测序，鉴定为季也蒙毕赤酵母。（2）发酵生产时需先将玉米芯残渣进行预处理，该过程会产生许多抑制物。因此，研究人员在②的液体培养基中加入抑制物，并在③多次筛选时不断提高抑制物的浓度，是为了。培养过程中从②的液体培养基中定期取样并用的方法进行菌落计数，评估菌株增殖状况。此外，选育优良菌株的方法还有和等。（3）刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不与水解后的葡萄糖等发生这种反应，从而在纤维素分解菌周围出现透明的水解圈。将经过多次实验所获得的4种优良菌株后接种到含纤维素、刚果红、高浓度抑制物的固体培养基中，结果如右图。可选择菌株作为目标菌株进行发酵生产，原因是。【考点】发酵工程在食品、医药、农牧业等工业上的应用．【专题】正推法；微生物的分离、培养和应用．【答案】（1）保证每个菌落都是由一个单细胞发育而来木质纤维素PCR（2）筛选出对抑制物不敏感的菌株稀释涂布平板法平板划线法诱变育种法（3）B菌落最小，但抑菌圈最大【分析】1、从土壤中分离纤维素分解菌的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株．筛选纤维素分解菌需要使用一纤维素为唯一碳源的选择培养基．刚果红和纤维素结合能形成红色复合物，纤维素分解菌可以产生纤维素酶而分解纤维素使菌落周围出现透明圈，所以可以用刚果红鉴别纤维素分解菌．酵母菌无氧发酵产生的酒精可以用酸性的重铬酸钾检验，呈灰绿色．2、微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．【解答】解：（1）稀释的目的是保证每个菌落都是由一个单细胞发育而来，以保证计数的准确性。接种到以木质纤维素为唯一碳源的培养基上，长出菌落后，提取DNA进行PCR扩增，测序鉴定。（2）加抑制物是为了筛选出对抑制物不敏感的菌株。用稀释涂布平板法进行计菌落数，每个菌落代表一个单细胞菌体，还有平板划线法和诱变育种法。（3）选择菌株B作为目标菌株生产，因为菌落最小，但抑菌圈最大。故答案为：（1）保证每个菌落都是由一个单细胞发育而来木质纤维素PCR（2）筛选出对抑制物不敏感的菌株稀释涂布平板法平板划线法诱变育种法（3）B菌落最小，但抑菌圈最大【点评】本题考查了土壤中纤维素分解菌分离和培养的有关知识，要求考生能够识记微生物培养过程中灭菌的方法以及微生物分离与纯化的接种方法，能够区分两种接种方法的接种工具的区别，能够结合图示获取解题的关键信息．四．判断题（共5小题）18．制作泡菜所用的菌种主要是醋酸菌。（判断对错）【考点】制作泡菜．【专题】正推法；果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作．【答案】×【分析】制作传统泡菜是利用植物体表面天然的乳酸菌来进行发酵的。发酵期间，乳酸会不断积累，当它的质量分数为0.4%～0.8%6时，泡菜的口味、品质最佳。【解答】解：制作传统泡菜是利用植物体表面天然的乳酸菌来进行发酵的。本题说法错误。故答案为：×。【点评】本题考查泡菜的制作的相关知识，属于基础知识的考查，本题简单。19．牛肉膏与蛋白胨不仅能为微生物提供碳源、氮源、无机盐，还能为微生物提供生长因子．（判断对错）．【考点】微生物的选择培养（稀释涂布平板法）；微生物的选择培养和计数．【答案】见试题解答内容【分析】微生物的营养物质主要有碳源、氮源、水和无机盐等．有些微生物培养过程中还需要添加生长因子等物质．【解答】解：牛肉膏与蛋白胨培养基是一种应用十分广泛的天然培养基，其中的牛肉膏为微生物提供碳源、磷酸盐和维生素，蛋白胨主要提供氮源和维生素，还可以提供生长因子．故答案为：正确【点评】本题主要考查微生物的营养物质，意在强化学生对微生物营养物质的识记、理解与运用．20．一个由KH2PO4、Na2HPO4、H2O、NH4HCO3配制的培养基中含有4种营养物质．（判断对错）．【考点】微生物的选择培养（稀释涂布平板法）；微生物的选择培养和计数．【答案】见试题解答内容【分析】微生物的营养物质主要有碳源、氮源、水和无机盐等．【解答】解：题干所述的培养基配方中有微生物营养物质中必须有的水，NH4HCO3可以提供碳源与氮源，KH2PO4、Na2HPO4可以提供无机盐．故答案为：正确．【点评】本题主要考查微生物的营养物质的组成，意在强化学生对所学知识的识记、理解与运用．21．培养微生物的培养基中都必须含有碳源、氮源、水和无机盐，有些微生物的培养基中还需要加入生长因子．（判断对错）．【考点】微生物的选择培养（稀释涂布平板法）；微生物的选择培养和计数．【答案】见试题解答内容【分析】微生物的营养物质主要有碳源、氮源、水和无机盐等，有的微生物培养基中还需要添加生长因子等物质．【解答】解：微生物的营养物质主要有碳源、氮源、水和无机盐等，有的微生物培养基中还需要添加生长因子等物质，但并不是说培养基配方中必须有这些物质，如自养型微生物的培养基中可以不必添加碳源，自生固氮菌的培养基中可以不添加氮源．故答案为：错误【点评】本题主要考查微生物的配方，因子强化学生对相关知识的识记、理解与运用．22．发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。（判断对错）【考点】发酵工程在食品、医药、农牧业等工业上的应用．【专题】正推法；微生物的分离、培养和应用．【答案】√【分析】发酵工程生产的产品主要包括微生物的代谢产物、酶及菌体本身。产品不同，分离提纯的方法一般不同：（1）如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来；（2）如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取。【解答】解：由以上分析可知，发酵工程生产的产品主要包括微生物的代谢产物、酶及菌体本身。故答案为：√【点评】本题考查发酵工程的相关知识，比较基础，只要考生识记相关知识点即可正确答题，属于考纲识记层次的考查。五．实验题（共2小题）23．为了获得β﹣胡萝卜素产品，某小组开展了产ß﹣胡萝卜素酵母的筛选与色素提取实验。请回答下列问题：（1）实验用的培养皿常用的两种灭菌方法是；为了减少灭菌后器皿被污染，灭菌前应该。（2）为了筛选出酵母菌，培养基中添加了青霉素，其目的是。（3）图是灭菌锅及其局部剖面示意图，图中甲、乙、丙指示的依次是。（填序号）①安全阀、放气阀、压力表②放气阀、安全阀、压力表③安全阀、放气阀、温度表④放气阀、安全阀、温度表（4）为了将分离到的菌株纯化，挑取了菌落在3块相同平板上划线，结果其中一块平板的各划线区均未见菌生长，最可能的原因是。（5）为增加胡萝卜素提取量，在研磨酵母细胞时，添加石英砂的目的是；研磨时（填“需要”或“不需要”）添加CaCO3，理由是。【考点】微生物的选择培养（稀释涂布平板法）；微生物的选择培养和计数．【专题】实验性简答题；微生物的分离、培养和应用．【答案】见试题解答内容【分析】1、微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。2、消毒和灭菌消毒灭菌概念使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子）使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子）常用方法煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌适用对象操作空间、某些液体、双手等接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等【解答】解：（1）灭菌常用方法有高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌等，培养皿常用高压蒸汽灭菌、干热灭菌。将培养皿放入灭菌锅之前通常用牛皮纸或报纸包扎避免灭菌后的再次污染。（2）青霉素能破坏细菌的细胞壁并在细菌的繁殖期起杀菌作用，因此添加青霉素可抑制细菌的生长。（3）乙连接软管为排（放）气阀，甲为安全阀，丙是压力表。（4）三块平板有两块平板长有菌落，说明含有菌株并可在培养基上生长；而其中一块未见菌落，说明菌株死亡。因此，应在接种过程中接种环灼烧后未冷却或未足够冷却，使菌株因温度过高被杀死。（5）石英砂有助于研磨充分。CaCO3用于中和酸性物质，β﹣胡萝卜素较耐酸，因此不需添加。故答案为：（1）干热灭菌和湿热灭菌（高压蒸汽灭菌）用牛皮纸包扎器皿（2）抑制细菌（放线菌）生长（3）①（4）接种环温度过高，菌被杀死（5）有助于研磨充分不需要β﹣胡萝卜素较耐酸【点评】本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记无菌技术；试剂接种微生物常用的两种方法，能结合所学的知识准确答题。24．（2022春•雁峰区校级月考）某研究小组将一组相同圆纸片放入不同浓度的麦迪霉素（一种抗生素）溶液中浸泡后，放在接种有大肠杆菌的培养基上培养．实验结果如图1．请分析并回答下列问题．（1）将装有培养基的灭菌包装入高压蒸汽灭菌锅时，注意不要装得太挤，以免因而影响灭菌的效果．加热初期，必须将灭菌锅内的冷空气排尽，否则将因而影响灭菌的效果．倒平板时，待平板冷却凝固后，应将平板倒过来放置，并将记号笔在上标明培养基的种类、培养日期、平板上样品的稀释度、培养微生物名称及制作者姓名等信息．（2）实验结果表明，对大肠杆菌抑制作用最明显的是浓度为（填图1中数字）的麦迪霉素；（3）该实验中，宜使用方法接种大肠杆菌，在培养和接种大肠杆菌时要特别注意进行无菌操作，为了避免无关变量对实验结果的影响，对圆纸片的要求是；（4）该研究小组运用上述实验方法，还研究了相同浓度的三种不同抗生素A、B、C对大肠杆菌生长的影响，请在图2中表示这一处理方案（可模仿图1中图示并加以必要注解的方法）．．【考点】微生物的选择培养（稀释涂布平板法）；微生物的选择培养和计数．【专题】图文信息类简答题；微生物的分离、培养和应用．【答案】见试题解答内容【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．【解答】解：（1）将装有培养基的灭菌包装入高压蒸汽灭菌锅时，注意不要装得太挤，以免因影响蒸汽流通而影响灭菌的效果．加热初期，必须将灭菌锅内的冷空气排尽，否则将因达不到规定温度而影响灭菌的效果．倒平板时，待平板冷却凝固后，应将平板倒过来放置，并将记号笔在皿底上标明培养基的种类、培养日期、平板上样品的稀释度、培养微生物名称及制作者姓名等信息．（2）图1中⑤的透明圈最大，说明对大肠杆菌抑制作用最明显的是浓度为⑤的麦迪霉素．（3）根据图1可知，该实验中宜使用稀释涂布平板法方法接种大肠杆菌，在培养和接种大肠杆菌时要特别注意进行无菌操作，为了避免无关变量对实验结果的影响，对圆纸片的要求是大小、质地相同．（4）该方案的自变量为相同浓度的A、B、C三种不同抗生素，注意在图中要标记清楚．具体图解见答案．．故答案为：（1）影响蒸汽流通达不到规定温度皿底（2）⑤（3）稀释涂布平板法大小、质地相同（4）【点评】本题主要考查微生物的培养基相关的实验操作，意在强化学生对无菌操作及微生物的培养的相关知识的识记、理解与运用．六．解答题（共2小题）25．（2024春•焦作期末）十溴联苯醚（DBDPO）是一种添加型高效阻燃剂，为白色或淡黄色粉末，不溶于水及一般有机溶剂，具有热稳定性好、毒性低等优点。但在使用DBDPO时需注意其可能对环境造成的影响，并遵循相关的安全规定。科研人员为了从被DBDPO严重污染的土壤中分离出能高效降解DBDPO的好氧细菌，进行了相关实验。请回答下列问题：（1）将10g土样中的微生物稀释10倍的操作是。（2）将土样稀释液置于恒温培养箱中3天，然后取上层样液接种到含一定DBDPO的培养液中，再置于恒温培养箱中3天，循环上述操作的过程中，缓慢增加DBDPO的浓度。该循环操作过程中，每次取上层样液的原因是。从平板上挑选高效降解DBDPO的好氧细菌，挑选的依据是。（3）土壤是微生物的“天然培养基”。该科研人员欲研究DBDPO污染对土壤中微生物种类数的影响，请利用DBDPO污染土样、未污染土样、普通培养基等为材料拟定一个实验，需写出实验思路、预期结果及结论（注：实验过程中不能使用显微镜）。实验思路：。预期结果及结论：。【考点】微生物的选择培养（稀释涂布平板法）．【专题】正推法；微生物的分离、培养和应用．【答案】（1）将10克土样加入盛有90ml无菌水的锥形瓶中，充分摇匀（2）能高效降解DBDPO的好氧细菌分布在上层DBDPO被降解之后会形成透明圈（3）将DBDPO污染土样和未污染土样制成土壤浸出液，接种在普通培养基上，分别编号甲和乙，置于相同条件下培养一段时间后统计菌落的种类若甲的菌落种类数多于乙，说明DBDPO污染会增加土壤中微生物种类数；若甲的菌落种类数小于乙，说明DBDPO污染会减少土壤中微生物种类数【分析】选择培养原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。【解答】解：（1）将10g土样中的微生物稀释10倍的操作是将10克土样加入盛有90ml无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。（2）能高效降解DBDPO的好氧细菌分布在上层，所以需要取上层样液。DBDPO为白色或淡黄色粉末，被降解后会产生透明圈，故筛选依据是DBDPO被降解之后会形成透明圈，透明圈越大，降解的效果越好。（3）欲研究DBDPO污染对土壤中微生物种类数的影响，可以将DBDPO污染土样和未污染土样制成土壤浸出液，接种在普通培养基上，分别编号甲和乙，置于相同条件下培养一段时间后统计菌落的种类。若甲的菌落种类数多于乙，说明DBDPO污染会增加土壤中微生物种类数；若甲的菌落种类数小于乙，说明DBDPO污染会减少土壤中微生物种类数。故答案为：（1）将10克土样加入盛有90ml无菌水的锥形瓶中，充分摇匀（2）能高效降解DBDPO的好氧细菌分布在上层DBDPO被降解之后会形成透明圈（3）将DBDPO污染土样和未污染土样制成土壤浸出液，接种在普通培养基上，分别编号甲和乙，置于相同条件下培养一段时间后统计菌落的种类若甲的菌落种类数多于乙，说明DBDPO污染会增加土壤中微生物种类数；若甲的菌落种类数小于乙，说明DBDPO污染会减少土壤中微生物种类数【点评】本题考查微生物培养的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力是解答本题的关键。26．（2024•深圳模拟）自然界中不同微生物之间存在着复杂的相互作用。有些细菌具有溶菌特性，能够破坏其他细菌的结构使细胞内容物释出。科学家试图从某湖泊水样中分离出有溶菌特性的细菌。（1）用于分离细菌的固体培养基包含多种营养成分，其中蛋白胨主要为细菌提供和维生素等。（2）A菌通常被用做溶菌对象。研究者将含有一定浓度A菌的少量培养基倾倒在固体培养平板上，凝固形成薄层。培养一段时间后，薄层变浑浊（如图1），表明。（3）为分离出具有溶菌作用的细菌，需要合适的菌落密度，因此应将含菌量较高的湖泊水样后，依次分别涂布于不同的浑浊薄层上。培养一段时间后，能溶解A菌的菌落周围会出现。采用这种方法，研究者分离、培养并鉴定出P菌。（4）为探究P菌溶解破坏A菌的方式，请提出一个假设，该假设能用以下材料和设备加以验证。主要实验材料和设备：P菌、A菌、培养基、圆形滤纸小片、离心机和细菌培养箱。（5）为大量获取P菌制成菌剂，请补充P菌应用于发酵工程的基本环节。【考点】微生物的纯培养；发酵工程的基本环节．【专题】实验性简答题；微生物的分离、培养和应用．【答案】（1）氮源、碳源（2）A菌能在培养平板中生长繁殖（3）稀释溶菌圈（4）假设P菌通过分泌某种化学物质使A菌溶解破裂（5）【分析】微生物的营养成分主要有碳源、氮源、水和无机盐等。微生物的培养基按其特殊用途可分为选择性培养基和鉴别培养基，培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类。【解答】解：（1）微生物的营养成分主要有碳源、氮源、水和无机盐等，蛋白胨主要为细菌提供氮源、碳源和维生素等。（2）将含有一定浓度A菌的少量培养基倾倒在固体培养平板上，凝固形成薄层，培养一段时间后，薄层变浑浊，表明A菌能在培养平板中生长繁殖。（3）将含菌量较高的湖泊水样稀释后，依次分别涂布于不同的浑浊薄层上。培养一段时间后，能溶解A菌的菌落周围会出现溶菌圈。（4）根据实验实验材料和设备，圆形滤纸小片可用于吸收某种物质，离心机可用于分离菌体和细菌分泌物，为探究P菌溶解破坏A菌的方式，可假设P菌通过分泌某种化学物质使A菌溶解破裂。（5）发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌，接种，发酵，产品分离、提纯等方面，因此P菌应用于发酵工程的基本环节为：故答