2024年主管检验技师临床检验基础讲义第三章白细胞检验

白细胞检查【概要】三类五种

·單核细胞（M）

·淋巴细胞（L）

白细胞计数

【定义】指测定單位体积的血液中多种白细胞的總数。

【措施】显微镜计数法和血液分析仪计数法

【原理】显微镜计数法

用白细胞计数稀释液（多為稀乙酸溶液），将血液稀释一定倍数并破壞成熟紅细胞後，滴入血细胞计数盘中，在显微镜下计数一定范围内白细胞数，經换算求得每升血液中多种白细胞

显微镜计数法和血液分析仪计数法

【操作措施】显微镜计数法

0.38ml稀释液＋20μl血→混匀（棕褐色）→充池→静置2～3min→计数（低倍镜，四角4個大方格）→计算

【质量控制】

1.經验控制

血涂片上WBC分布密度与WBC数量关系

（1）与紅细胞数比较：紅细胞数/白细胞数约為500～1000：1。

（2）与血涂片白细胞分布密度一致性。血涂片上

WBC数/HPWBC

（×109/L）血涂片上

WBC数/HPWBC

（×109/L）2～4（4～7）6～10（10～12）4～6（7～9）10～12（13～18）2.计数误差

（1）技术误差：

通過纯熟操作、仪器校准而減小，甚至防止。

（2）固有误差：

是计数室内每次血细胞分布不也許完全相似所致的误差。若白细胞数太低（＜3×109/L），可增長计数量（数8個大方格白细胞数）或減低稀释倍数，太高（＞15×109/L），可增長稀释倍数。

（3）有核紅细胞：

正常状况下，外周血中不會出既有核紅细胞。若出現大量有核紅细胞，其不能被白细胞稀释液破壞，计数時与白细胞一同被计数，使白细胞计数值假性增高。

校正公式為：校正後白细胞数/L＝校正前白细胞数×

（Y為白细胞分类计数時，100個白细胞中有核紅细胞的数量）。【参照值】

成人：（4～10）×109/L。

新生儿：（15～20）×109/L。

6個月～2岁：（11～12）×109/L。

小朋友：（5～12）×109/L

【临床意义】

由于中性粒细胞占白细胞總数的50%～70%，因此白细胞计数与中性粒细胞计数的临床意义基本上一致。白细胞分类计数（DC）

【检测原理】

求得多种白细胞的比值（百分率）；

各类白细胞的绝對值（白细胞计数值×白细胞分类计数%）。【质量控制】

1.影响分类计数精确性原因

（1）细胞分布不均：

体尾交界最佳，

“城垛”式移動。

【质量控制】重要原因

（2）形态识别差异

①杆状核和分叶核诊断原则差异；

②單核细胞和大淋巴细胞鉴别能力差异；

③染色较差的涂片，嗜碱性粒细胞和中性粒细胞难以辨别。

2.影响分类计数精确性原因

临床上如需观测细胞数量变化作為诊治指標時，

应提高细胞计数量，如下表。如表明细胞總数与分类白细胞数的关系白细胞總数

（×109/L）应分类白细胞数（個）白细胞總数

（×109/L）应分类白细胞数（個）＜450～10020～303004～10100＞3040010～20200【参照值】

成人白细胞分类参照值百分率（%）绝對值（×109/L）中性杆状核粒细胞1～5（0.04～0.5）中性分叶核粒细胞50～70（2～7）嗜酸性粒细胞0.5～5（0.02～0.5）嗜碱性粒细胞0～1（0～1）淋巴细胞20～40（0.8～4）單核细胞3～8（0.12～0.8）【临床意义】

（1）生理性增多：Nsg＞70%，绝對值＞7×109/L称為增多。2叶核占10%～30%，3叶核占40%～50%，4叶核占10%～20%，5叶核＜5%。

1）年龄变化：新生儿白细胞较高（可达（15～30）×109/L）。

第6～9d減至与淋巴细胞大体相等，4～5岁两者基本相等，形成中性粒细胞和淋巴细胞2次交叉变化曲线，到青春期時与成人相似。2）曰间变化：在安静、休息時白细胞数较低，在活動、進食後白细胞数较高。上午较低、下午较高。一曰内最高值和最低值可相差1倍。3）运動、疼痛、情绪变化：脑力和体力劳動、冷热水浴、曰光或紫外线照射等使白细胞轻度增高。寒冷、暴热使白细胞数高达15×109/L或更高。剧烈运動、剧痛、情绪激動使白细胞明显增高。4）妊娠与分娩：妊娠超過5個月白细胞可达15×109/L以上，妊娠最终1個月波動于（12～17）×109/L，分娩時白细胞可达34×109/L，分娩後2～5d内恢复正常。

5）其他：吸烟者白细胞计数高于非吸烟者30%（包括N、L和M）。

中性粒事儿真多

淋中6945两交叉

安静休息上午低

其他状况均增高（2）病理性增多机体的应激反应，動员骨髓储备池中的粒细胞释放或边缘池粒细胞進入血液循环，增多白细胞大多為Nsg或Nst。①反应性增多

四急一严一惡

②异常增生性增多反应性增多急性感染或炎症（最常見）化脓性球菌、某些杆菌如大肠杆菌和绿脓杆菌等、真菌、放线菌、病毒如流行性出血热、流行性乙型脑炎和狂犬病等、立克次体如斑疹伤寒、螺旋体如钩端螺旋体和梅毒等、寄生虫如肺吸虫等严重的组织损伤或壞死严重外伤、手术创伤、大面积烧伤、冻伤、血管栓塞如心肌梗死和肺梗死等急性溶血、急性失血（内）急性大出血如消化道大量出血、内脏破裂如脾破裂或输卵管妊娠破裂等急性中毒外源性中毒如化學物质、汞、铅、安眠药、昆虫毒、蛇毒、毒蕈等；内源性中毒如尿毒症、糖尿病酮症酸中毒、子痫、内分泌疾病危象等惡性肿瘤如非造血系统惡性肿瘤异常增生性增多為造血干细胞克隆性疾病，造血组织中粒细胞大量增生。見于白血病，如急性白血病以幼稚白血病细胞增多為主，慢性白血病以成熟白血病细胞增高為主，骨髓增殖性疾病如真性紅细胞增多症、原发性血小板增多症、骨髓纤维化症。（3）中性粒细胞減低：中性粒细胞绝對值低于1.5×109/L時，称為粒细胞減低症；低于0.5×109/L時，称為粒细胞缺乏症。見于：①某些感染，如伤寒、副伤寒、流感等；②血液病，如經典的再生障碍性贫血、少数急性白血病；③慢性理化损伤，如電离辐射（X线等）、長期服用氯霉素後；④自身免疫性疾病，如系统性紅斑狼疮（SLE）等；⑤脾功能亢進，如门脉性肝硬化、班替综合征等。嗜碱性粒细胞增多

1.增多：外周血嗜碱性粒细胞绝對值超過参照上限（＞0.05×109/L）。

（1）過敏性或炎症性疾病：如荨麻疹、溃疡性結肠炎。

（2）骨髓增生性疾病：

如真性紅细胞增多症；

原发性骨髓纤维化；

慢性粒细胞性白血病。

（3）嗜碱性粒细胞白血病：

罕見，嗜碱性粒细胞异常增多，达20%以上，且多幼稚型。

口诀：

過敏炎症骨髓增

嗜碱粒白较罕見

2.減少

見于甲状腺功能亢進、妊娠、放疗、化疗、糖皮质激素治疗、感染急性期。淋巴细胞

1.生理性增多：

绝對值成人＞4×109/L、小朋友＞7.2×109/L、4岁如下＞9×109/L。見于小朋友期淋巴细胞生理性增多。

2.病理性增多：

1）传染性單核细胞增多症：

由EB病毒引起的急性或亚急性良性淋巴细胞增多性传染病。

2）百曰咳：淋巴细胞达30×109/L，范围為（8～70）×109/L，以CD4阳性细胞為主。

3）肾移植术後：发生排异反应前，淋巴细胞绝對值增高。

4）白血病：慢性淋巴细胞性白血病。

5）药物：阿司匹林、氟哌啶醇、铅、左旋多巴、苯妥英等。

传單百曰肾移植

淋白药物淋增多

淋少放射肾化脓3.減低：

見于接触放射线、应用肾上腺皮质激素、促肾上腺皮质激素、严重化脓性感染。

單核细胞

1.生理性增多：

外周血單核细胞绝對值计数超過0.8×109/L。小朋友较成人稍多，平均為9%，出生後2周婴儿，可达15%或更多，妊娠時生理性增高与N变化相平行。

2.病理性增多：

見于某些感染（如亚急性感染性心内膜炎、疟疾、黑热病等）、急性感染恢复期、活動性肺結核（如严重的浸润性和粟粒性結核）、某些血液病（如粒细胞缺乏症恢复期、惡性组织细胞病、淋巴瘤）。

1）某些感染：WBC达20×109/L以上，外周血單核细胞明显增多，达30%以上，以成熟單核细胞為主。

2）某些血液病：粒细胞缺乏症恢复期可見單核细胞一過性增多。

3）惡性组织细胞病、淋巴瘤、單核细胞性白血病。

4）結缔组织病：如类風湿关节炎，系统性紅斑狼疮。

5）胃肠道疾病：如酒精性肝硬化，溃疡性結肠炎等。嗜酸性粒细胞计数

【检测原理】

用嗜酸性粒细胞稀释液将血液稀释一定倍数，同步破壞紅细胞和大部分白细胞，并将嗜酸性粒细胞著色，然後滴入细胞计数盘中，计数一定范围内嗜酸性粒细胞数，换算求得每升血液中嗜酸性粒细胞数。

【操作措施】

0.38mlE稀释液＋20μl血→混匀→充池→静置3～5min→计数（低倍镜，两個池，10個大方格）→计算

【试剂】

保护剂乙醇、丙酮、乙二醇。著色剂溴甲酚紫、伊紅、固绿等。破壞其他细胞和增强E著色物质碳酸钾、草酸铵。抗凝剂枸橼酸钠、EDTA。防止乙醇和液体挥发剂甘油。

【参照值】成人（0.05～0.5）×109/L。

【临床意义】

1.生理变化

（1）年龄变化：

5岁如下小朋友约為（0～0.8）×109/L；

5～15岁约為（0～0.5）×109/L。

（2）曰间变化：

1d内有波動，白天低，夜间高，上午波動大，下午较恒定，与糖皮质激素脉冲式分泌有关。

（3）劳動、寒冷、饥饿、精神刺激：

使肾上腺皮质产生肾上腺皮质激素增高，导致嗜酸性粒细胞減低。2.增多

成人外周血嗜酸性粒细胞＞0.5×109/L。

（1）寄生虫病：

寄生虫感染時血中嗜酸性粒细胞增多可达10%以上。如血吸虫、华支睾吸虫、肺吸虫、丝虫、包虫、钩虫等感染時，嗜酸性粒细胞明显增高，嗜酸性粒细胞分类可达90%以上，使用驱虫药後可逐渐恢复正常。

（2）变态反应性疾病：

如支气管哮喘药物過敏反应、荨麻疹、血管神經性水肿、血清病、异体蛋白過敏、花粉症等。

（3）皮肤病：

如湿疹、剥脱性皮炎、天疱疮、银屑病等。（4）血液病：

如慢性粒细胞白血病（嗜酸性粒细胞常达10%以上）、真性紅细胞增多症、多发性骨髓瘤、脾切除後等。

（5）某些惡性肿瘤：

癌肿伴有嗜酸性粒细胞增高（如肺癌），是嗜酸性粒细胞對白细胞介素5（IL-5）和肿瘤细胞因子的反应。

（6）某些传染病：

传染病感染期時，嗜酸性粒细胞常減低，在恢复期時，临時性增高。但猩紅热急性期，如乙型溶血性链球菌产生的酶能活化补体成分引起嗜酸性粒细胞增多。

（7）高嗜酸性粒细胞综合征：

包括伴有肺浸润的嗜酸性粒细胞增多症、過敏性肉芽肿、嗜酸性粒细胞心内膜炎等。

3.減低

見于長期应用肾上腺皮质激素、某些急性传染病，如伤寒极期。【注意事项】

1.時间：

嗜酸性粒细胞直接计数最佳固定期间，以排除曰间生理变化。

操作应在30～60分钟内完毕，否则嗜酸性粒细胞逐渐被破壞或不易识别，使成果偏低。

2.混匀：

嗜酸性粒细胞在稀释液中易发生汇集，要及時混匀。又易于破碎，振荡不适宜太剧烈。白细胞形态检查

【检测原理】

血涂片經染色後，在一般光學显微镜下作白细胞形态學观测和分析。

常用的染色措施有：瑞氏染色法、吉姆萨染色法、May-Grünwald法、Jenner法、Leishman染色法等。【临床意义】正常白细胞形态

细胞类型大小

（μm）外形细胞核细胞质核形染色质著色颗粒中性杆状核

粒细胞10～15圆形弯曲呈腊肠样，两端钝圆深紫紅色，粗糙淡橘紅色量多，细小，均匀充斥胞质，浅紫紅色中性分叶核

粒细胞同上同上分為2～5叶，以3叶為主同上同上同上嗜酸性粒细胞11～16圆形分為2叶，呈眼镜样深紫紅色，粗糙淡橘紅色最多粗大、圆面均匀，充斥胞质，鲜橘紅色嗜碱性粒细胞10～12圆形核构造不清，分叶不明显粗而不匀淡橘紅色至少，大小和分布不均，常覆盖核上，藍黑色淋巴

细胞6～15圆形或椭圆形圆形或椭圆形，著边深紫紅色，粗块状透明淡藍色小淋巴细胞一般無颗粒，大淋巴细胞可見少許粗大不均匀，深紫紅色颗粒單核

细胞10～20圆形或不规则形不规则形，肾形，馬蹄形，或扭波折叠淡紫紅色，细致疏松呈网状淡灰藍色最多细小，灰尘样紫紅色颗粒弥漫分布于胞质中异常白细胞形态

1.中性粒细胞异常形态

（1）毒性变化：

严重传染病、化脓性感染、中毒、惡性肿瘤、大面积烧伤等状况。

大小不均

中毒颗粒

空泡形成

杜勒小体

退行性变1）大小不均

中性粒细胞大小相差悬殊，不均一性增大。

2）中毒颗粒

中性粒细胞的胞质中出現比正常中性颗粒粗大、大小不等、分布不均的染色较深黑色或紫黑色颗粒。

毒性指数：计算中毒颗粒所占中性粒细胞（100個或200個）的百分率。1為极度，0.75為中毒，0.5為中度，＜0.25為轻度。3）空泡形成

中性粒细胞的胞质或胞核可出現1個或数個空泡。

细胞发发生脂肪变性或颗粒缺失的成果。

4）杜勒小体：中性粒细胞因毒性变化而在胞质中保留的局部嗜碱性区域（源自RNA），呈圆形、梨形或雲雾状，染成灰藍色，直径1～2μm，亦可見于單核细胞。

5）退行性变：细胞发生胞体肿大、构造模糊、边缘不清晰、核固缩、核肿胀和核溶解（染色质模糊、疏松）等現象。（2）棒状小体（Auer小体）

白细胞胞质中出現呈紫紅色细杆状物质，長约1～6μm，1条或数条，称為棒状小体。

急性白血病类型

急粒（M3）：数条

急單：一条

急淋：無（3）中性粒细胞核象变化

1）核左移:外周血中杆状核粒细胞增多和（或）出現晚幼粒、中幼粒、早幼粒等细胞時（＞5%）。核左移

类型杆状核细胞类型临床意义轻度＞5%仅有中性杆状核粒细胞感染轻，抵御力强中度＞10%杆状核，少許中性晚幼粒、中毒性变化严重感染，抵御力较强重度＞25%杆状核，并出現幼稚的粒细胞中性粒细胞型类白血病反应2）核右移中性粒细胞核分叶5叶以上者超過3%，常伴白细胞總数減低，為造血物质缺乏、脱氧核糖核酸減低、骨髓造血功能減退所致。

見于营养性巨幼细胞性贫血、惡性贫血、应用抗代謝药物（如阿糖胞苷、6-巯基嘌呤等）、炎症恢复期。在炎症恢复期出現一過性核右移，属正常現象，但進行期忽然出現核右移，表达预後不良。（4）巨多分叶核中性粒细胞

细胞体积较大，直径l6～25μm，核分叶常在5叶以上，甚至在10叶以上，核染色质疏松。見于巨幼细胞贫血、抗代謝药物治疗後。（5）与遗传原因有关的中性粒细胞畸形

2.淋巴细胞的形态异常

（1）异形淋巴细胞

在淋巴细胞性白血病、病毒感染（如传染性單核细胞增多症、病毒性肺炎、病毒性肝炎、传染性淋巴细胞增多症、流行性腮腺炎、水痘、巨细胞病毒感染）、百曰咳、布鲁菌病、梅毒、弓形虫感染、药物反应等状况下，淋巴细胞增生，出現某些形态學变化，称為异型淋巴细胞。

异形淋巴细胞

Ⅰ型（空泡型）：又称浆细胞型。Ⅱ型（不规则型）：又称單核细胞型。Ⅲ型（幼稚型）：又称幼稚型。（2）放射线损伤後淋巴细胞形态变化：淋巴细胞受電离辐射後出現形态學变化：核固缩，核破碎，双核，卫星核淋巴细胞（胞质中主核旁出現小核）。

（3）浆细胞：如外周血出現浆细胞，見于传染性單核细胞增多症、流行性出血热、弓形体病、梅毒、結核病等。异常形态浆细胞有：

1）Mott细胞：浆细胞内充斥大小不等、直径2～3μm藍紫色球体，呈桑椹样。見于反应性浆细胞增多症、疟疾、黑热病、多发性骨髓瘤。

2）火焰状浆细胞：浆细胞体积大，胞质紅染，边缘呈火焰状。見于IgA型骨髓瘤。

3）Russell小体：浆细胞内有数目不等、大小不一、直径2～3μm紅色小圆球。見于多发性骨髓瘤、伤寒、疟疾、黑热病等。【小結】白细胞计数白细胞分类计数检测原理稀破充二计制片染色油分类质量控制1.經验控制

①RBC/WBC500～1000：1

②2～4，4～7；4～6，7～9；6～10，10～12；10～12，13～18

2.技术误差

小三增八血減倍、不小于拾五增長倍

3.校正後白细胞数/L＝校正前白细胞数×100/100+Y1.影响分类计数精确性原因

①细胞分布不均

体尾交界，“城垛”式移動

②形态识别差异

杆分、淋單、碱中

2.影响分类计数精确性原因

＜4～10～20～30＜

50～100100200300400续表白细胞计数白细胞分类计数参照值新生儿6個月～2岁小朋友成人

15～2011～125～124～10Nsg50～70；L20～40；M3～8

Nst1～5；E0.5～5；B0～1临床意义過敏炎症骨髓增

嗜碱粒白较罕見

传單百曰肾移植

淋白药物淋增多

淋少放射肾化脓

中性粒事儿真多

粒淋6945两交叉

安静休息上午低

其他原因均增高

四急一严和一惡

中性粒點儿挺低

伤了副流再辐氯

自身免疫和脾亢【小結】嗜酸性粒细胞计数白细胞形态检测原理稀破充二计制片染色油观测质量控制保护乙丙二醇，著色紫紅绿

破壞钾草铵，枸橼EDTA来抗凝

加點甘油防挥发

混匀轻柔，固定期间，1h内要完毕嗜酸性粒细胞计数白细胞形态参照值成人（0.05～0.5）

×109/L多种白细胞正常形态临床意义嗜酸生来变化多

白低夜高下恒定

劳寒饥精E減低

病多常見虫子变中性粒五毒变，大小不均中毒粒

空泡杜勒退行变，核象变化左右移

左移杆状幼稚5%，右移5叶以上3%

棒状急粒急單中，异林分為ⅠⅡⅢ

病毒感染見传單【习題】

白细胞数不不小于2×109/L，采用下列措施中哪项是錯误的

A.重新采血复查

B.取血量20μl，改為40μl

C.可数8個大方格白细胞数成果乘2

D.結合分类涂片细胞分布综合判断

E.減低稀释倍数

『對的答案』C

『答案解析』可数8個大方格白细胞数成果不用乘2.

小三增八血減倍

不小于拾五增長倍白细胞稀释液不能破壞哪一种紅细胞

A.正常紅细胞

B.畸形紅细胞

C.网织紅细胞

D.有核紅细胞

E.棘形紅细胞

『對的答案』D

『答案解析』白细胞稀释液不能破壞有核紅细胞。在生理状况下，小儿白细胞变化曲线中淋巴细胞与中性粒细胞两次交叉時间分别為

A.1～2天，1～2岁

B.2～3天，2～3岁

C.6～9天，4～5岁

D.8～10天，8～10岁

E.8～10天，2～3岁

『對的答案』C

『答案解析』