《医学微生物学》课件-分枝杆菌

分枝杆菌、其他细菌1.破伤风梭菌的致病条件是什么？2.说出破伤风梭菌所致疾病及防治原则。3.说出肉毒梭菌和产气荚膜梭菌所致疾病。复习回顾1.说出结核分枝杆菌的生物学性状。2.比较肺结核的原发感染和原发后感染。3.说出结核菌素试验的意义。教学内容和目标分枝杆菌属Mycobacterium分枝杆菌属的分类

分类生长特性主要对人致病的分枝杆菌结核分枝杆菌复合群生长缓慢结核分枝杆菌、牛分枝杆菌非结核分枝杆菌Ⅰ组生长缓慢、光产色堪萨斯分枝杆菌、海分枝杆菌Ⅱ组生长缓慢、暗产色瘰疠分枝杆菌Ⅲ组生长缓慢、不产色鸟-胞内分枝杆菌Ⅳ组生长快速、偶发分枝杆菌麻风分枝杆菌人工培养基上不生长分枝杆菌属显著特征

细长稍弯的G+杆菌，有分枝生长的趋势。细胞壁含有大量脂质，与染色性、抵抗力、致病密切相关。

染色困难，但一经着色则有抗酸性。

生长缓慢，专性需要，营养要求高。

不产毒素，其致病性与菌体成分有关。所致疾病多为慢性且伴有肉芽肿。结核分枝杆菌（M.tuberculosis)

引起结核病的病原体；可侵犯全身各器官，但以肺结核最多见1882年由科霍（Koch）发现。RobertKoch1843-1910,NobelPrizein1905forhisworkontuberculosis,Anthrax,Cholera,Tuberculebacillus目前该病是全球尤其是发展中国家危害最为严重的慢性传染病之一，每年约有800万例新病例发生,每年死于结核病的人数达300万人之多,其中95%发生在发展中国家。

细长微弯，分枝状排列或聚集成团细胞壁脂质含量较高（影响染料深入），特别是有大量分枝菌酸。

抗酸染色(acid-fastbacilli)：呈红色，其他非抗酸性细菌及细胞呈蓝色。其荚膜对菌体有一定保护作用一、生物学性状1、形态与染色2.培养特性

专性需O2，营养要求高

生长缓慢（12-24小时繁殖一代），在含有蛋黄、马铃薯、甘油和天门冬酰胺等的固体培养基上才能生长；常用罗氏培养基（Lowenstein-Jensen)

液体培养基呈粗糙皱纹状菌膜或索状生长菌落乳白色或米黄色，呈颗粒状、结节状或花菜状馋、懒、丑

罗氏固体培养基罗氏（Lowenstein-Jensen）固体培养基，内含蛋黄、甘油、马铃薯、无机盐和孔雀绿等。孔雀绿可抑制杂菌生长，便于分离和长期培养。蛋黄含脂质生长因子，能刺激生长。根据接种菌多少，一般2～4周可见菌落生长。菌落呈颗粒、结节或花菜状，乳白色或米黄色，不透明。3.生化反应不发酵糖类

合成烟酸和还原硝酸盐（与牛分枝杆菌鉴别）热触酶实验阴性（与非结核分枝杆菌鉴别）4.抵抗力四怕四不怕四怕：对湿热敏感，可用巴氏消毒法；在70%～75%乙醇中数分钟即被杀死；对紫外线敏感；对抗痨药敏感。四不怕：细胞壁中含大量脂质，因此耐干燥（干燥痰中可存活6～8月）、耐酸、耐碱、耐青霉素等抗生素。馋、懒、丑+顽二、致病性与免疫性（一）致病物质索状因子：引起慢性肉芽肿。2.磷脂：形成结核结节（干酪样坏死）。3.蜡质D：诱发迟发型超敏反应。4.硫酸脑苷酯：导致不完全吞噬（抑制吞噬体和溶酶体的结合）。5.分枝菌酸：与抗酸染色有关。脂质是主要致病物质：脂质、蛋白质、荚膜蛋白质

最重要的是结核菌素蛋白有抗原性，与蜡质D结合能诱发超敏反应在结核结节的形成中发挥一定作用荚膜

与吞噬细胞表面的CR3结合，有助于菌体粘附与入侵降解组织中的大分子物质，为菌体提供营养防止宿主的有害物质进入菌体（二）所致疾病肺结核可分为原发感染和原发后感染两大类结核分枝杆菌可通过呼吸道、消化道和破损的皮肤黏膜进入机体,侵犯多种组织器官,引起相应器官的结核病,以肺结核最为常见。

多见于儿童表现为原发感染灶、淋巴管炎和肺门淋巴结肿大为特征的原发综合症原发灶大多可钙化、纤维化而自愈，免疫力低下者，结核分枝杆菌可经淋巴、血流扩散至全身可发生全身粟粒型结核或结核性脑膜炎原发感染原发后感染

多见于成年人，以内源性感染为主

病灶局限，常在肺尖，不易累及周围淋巴结主要表现为慢性肉芽肿性炎症，形成结核结节，发生纤维化或和干酪样坏死肺外感染

部分患者，菌可经血液、淋巴液扩散，引起脏器结核，如脑、肾、骨、关节等痰菌被咽入消化道或食用消毒不严的牛奶，引起肠结核、结核性腹膜炎等1.骨与关节结核是一种继发性病变,约90%继发于肺结核.2.绝大多数是通过血液传播的.3.全身抵抗力降低时-发病.4.好发于儿童和青少年,30岁以下者占80%以上.5.好发于脊柱,占1/2,其次是膝、髋、肘关节。6.好发部位胸腰椎椎体及长骨骨端等.指结核性关节炎溃疡型肠结核皮肤结核（三）免疫力

细胞免疫为主，迟发性超敏反应同时存在。两种免疫反应的强弱，决定感染结果及预后。诱导免疫和超敏反应的物质不同。结核菌素蛋白+蜡质D变态反应结核菌核蛋白体RNA免疫性三、微生物学检查1.标本的采集

根据感染部位选择浓缩集菌以提高检出率2.直接涂片镜检

直接或集菌后涂片，抗酸染色阳性即可初步诊断3.分离培养：培养基、时间（2~4周后见结果）4.快速诊断：PCR检测、用ELISA法等检测可疑患者血清特异性抗体进行结核病的辅助诊断等四、防治原则

发现并治疗痰菌阳性者新生儿接种卡介苗（BCG），OT试验转阳率可达96%-99%，维持5年但BCG的剂型及活菌数会影响免疫效果，且成年人保护率不高新型疫苗在研发中坚持早期、联用、适量、规律、全程的原则，一线抗结核药包括利福平、异烟肼、乙胺丁醇、链霉素等治疗过程中应以药敏结果指导用药结核菌素试验通过检测机体对结核菌素的超敏反应来了解机体对结核分枝杆菌的细胞免疫水平。结核菌素注入皮内后如受试者已感染结核杆菌，则结核菌素与致敏淋巴细胞特异性结合，形成迟发型超敏反应性炎症；若受试者未感染过结核杆菌则无反应。结核菌素纯蛋白衍生物和卡介苗纯蛋白衍生物各5U分别注射于两侧前臂屈侧皮内，48-72h后观察

目的

原理

方法结核菌素试验注射部位结核菌素试验注射方法结核菌素皮肤试验

红肿、硬结直径<5mm为阴性

未感染过结核杆菌，机体没有免疫力，但应考虑：①原发感染初期；②老年人；③严重结核病人或有其它传染病，使机体免疫功能低下者；④器官抑制等使用免疫抑制剂者，艾滋病患者。

5mm<红肿、硬结直径<15mm为阳性（+），机体曾经感染过或接种过疫苗，有一定免疫力;红肿、硬结直径>15mm为强阳性（+++），可能有活动性感染需进一步检查;

结果判断

选择卡介苗的接种对象及测定接种效果在未接种卡介苗的人群中做流行病学调查诊断婴幼儿结核病测定肿瘤患者的细胞免疫功能

应用麻风分枝杆菌（M.laprae)

该菌是引起慢性传染病-麻风病的病原体。麻风是潜伏期很长的慢性传染病，主要侵犯皮肤、黏膜和外周神经组织，晚期可侵入深部组织和脏器。麻风病流行广泛，主要分布于亚洲、非洲和拉丁美洲。组织内的麻风分枝杆菌与结核分枝杆菌相似，抗酸阳性。为典型的胞内寄生菌。是至今唯一不能体外培养的细菌。致病性与免疫性

自然状态下只感染人主要传播途径方式包括呼吸道、破损的皮肤黏膜和密切接触等该病潜伏期长、发病缓慢、病程长、迁延不愈大部分患者为瘤型和结核样型麻风，少数介于二者之间的称为界限类和未定类麻风的免疫主要依靠细胞免疫斑疹、皮肤丧失感觉外周神经变粗微生物学检测

涂片染色镜检：瘤型和界线类患者标本中找到抗酸阳性杆菌有诊断意义；结核样型患者很难找到菌；金胺染色可提高阳性率麻风菌素试验诊断意义不大，主要用于评价患者的免