大豆种质资源抗胞囊线虫病鉴定技术规程

ICS65.020.20

CCSB05

14

山西省地方标准

DB14/T1613—2023

代替DB14/T1613-2018

大豆种质资源抗胞囊线虫病鉴定技术规程

2023-11-13发布2024-02-13实施

山西省市场监督管理局发布

DB14/T1613—2023

大豆种质资源抗胞囊线虫病鉴定技术规程

1范围

本文件规定了大豆种质资源抗胞囊线虫鉴定技术的病圃建设、鉴定试验准备、鉴定方法、鉴定圃管

理和抗性评价标准。

本文件适用于大豆种质资源抗胞囊线虫抗性鉴定和抗性评价。

2规范性引用文件

本文件没有规范性引用文件。

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

胞囊线虫病

指大豆胞囊线虫病，是由病原物大豆胞囊线虫（HeteroderaGlycinesIchinode）感染引起的土传

病害，其主要症状为叶片变黄，发育不良，植株矮小，开花少，结荚少甚至不结荚。大豆根系根瘤数明

显减少，且不发达。在感病初期，根系附着白色、黄褐色小颗粒，后期根系开始腐烂，导致地上部分枯

死。

生理小种

简称为“小种”，在形态上相似而在培养性状、生理、生化、病理（致病力）或其他特性上有差异

的生物型或生物群型。

鉴别寄主

用于鉴别病原物生理小种（菌系、毒系）的抗病性不同的一套寄主植物品种。

4病圃建设

立地条件

病圃所在地块应地势平整，形状规正，肥力均匀，排灌方便，不受阴庇，具有人工灌溉措施。

面积

根据鉴定规模确定病圃面积，但不应小于100m2。

5鉴定前准备

1

DB14/T1613—2023

塑钵制备

将厚度0.1mm的透气性塑料膜裁为宽26cm，高22.5cm的小块，用订书机将其制成宽11cm，高22

cm的袋状塑料钵。

接种病土制备

根据试验需要在病圃取适量的病土（大豆胞囊线虫密度≥30个胞囊/100g风干土），将病土与无菌

20目细沙以2:1的比例充分混匀后制备成试验病土。

6鉴定方法

田间病圃法

6.1.1选择大豆胞囊线虫密度≥30个胞囊/100g风干土的病圃，当气温大于20℃时播种。

6.1.2穴播，行距50cm，株距13cm。每份材料播种10穴。

6.1.3每穴留苗1株。

6.1.4每30个材料设1个感病对照。

6.1.5同时种植1套生理小种鉴别材料。

病土塑钵法

6.2.1将试验病土装入塑钵至距钵口1cm处。

6.2.2将装好土的塑钵依次装入塑料箱中，放于温室。

6.2.3将塑料钵中土壤浇透，待钵内土壤干湿程度适宜后开始播种。每钵留苗3粒种子，表面覆盖病

土1cm。

6.2.4出苗后每钵留苗2株，每个品种3个重复。

6.2.5每30个材料设1个感病对照。

6.2.6同时种植1套生理小种鉴别材料，随机摆放。

6.2.7温室温度保持在25℃～30℃，含水量控制在50%～60%。

人工接种鉴定法

6.3.1试验在温室中进行。将待鉴定的种质在育苗盘中育苗，同时播种小种鉴别材料。

6.3.2将出苗后子叶展开、根系发达、健壮一致的植株移栽到装有灭菌沙土的塑钵中，每钵2株，三

次重复。

6.3.3每30个材料设1个感病对照。

6.3.4提前在病土中种植感病品种，在胞囊显盛期，将根系上的胞囊冲洗下来，制备成浓度为1000

个/ml的卵悬浮液。

6.3.5待鉴定材料在移栽后3天接种卵悬浮液2mL。

6.3.6温室温度保持在25℃～30℃，含水量控制在50%～60%。

7鉴定圃管理

播种后，应及时补充水分，保持土壤湿润。及时中耕除草，鉴定期间不使用杀菌剂和除草剂。

2

DB14/T1613—2023

8调查

待感病对照白色胞囊突破根系表皮时即可调查。将待调查植株根系上的土轻轻抖掉或用水冲洗干

净、晾干，统计其根上的胞囊数。鉴定调查表格见附录A。

9抗性评价

生理小种鉴别

大豆胞囊线虫生理小种划分具体见附录B。

鉴定有效性评价

感病对照品种Lee根系上的胞囊数应在30.0个以上，抗性级别达高感，视为该次鉴定有效。

抗性级别划分

根据根系平均胞囊数进行抗性级别划分，划分依据见表1。

表1大豆对胞囊线虫的抗性级别划分依据

抗性级别抗性类别胞囊数与症状

0免疫（I）（根系胞囊数为0，植株生长正常）

1高抗（HR）（0＜根系胞囊数≤3.0，植株正常生长）

3抗（R）（3.0＜根系胞囊数≤10.0，植株生长基本正常或部分矮黄）

7感（S）（10.0＜根系胞囊数≤30.0，植株矮小，叶片发黄、结实少）

9高感（HS）（根系胞囊数＞30.0，植株不结实，干枯死亡）

重复鉴定

当鉴定结果为抗或高抗时（抗性级别划分依据见表1），应进行重复鉴定确定其抗性。若重复鉴定

结果有差异，以抗性级别低的结果为准。确定抗性后，将抗性品种移栽。

3

DB14/T1613—2023

附录A

（资料性）

调查用表

A.1大豆抗胞囊线虫鉴定调查表

大豆抗胞囊线虫鉴定调查表见表A.1。

表A.1年大豆抗胞囊线虫鉴定调查汇总表

播种日期：

鉴定胞囊数平均胞病情抗性

品种名称出苗日期调查日期

编号12345678910囊数指数评价

1

2

3

4

5

……

调查人：记载人：

4

DB14/T1613—2023

附录B

（资料性）

生理小种鉴别

B.1大豆胞囊线虫生理小种的鉴别

B.1.1一种为传统的Riggs鉴别模式（大豆胞囊线虫生理小种Riggs鉴别模式见表B.1），共4份材料，分

别为Pickett、Peking、PI88788、PI90763，根据寄主根系平均胞囊指数来确定大豆胞囊线虫小种。

B.1.2一种为HG分类系统（大豆胞囊线虫生理小种HG鉴别模式见表B.2），辅助鉴别线虫是否变异，共

7份材料，分别为PI548402、PI88788、PI90763、PI437654、PI209332、PI89772、PI548316。根据寄主

根系平均胞囊数计算胞囊指数（FI），按照表B.1和表B.2划分标准确定生理小种。

FI=（供试品种胞囊数/感病对照品种胞囊数）×100%·······························(B.1)

表B.1大豆胞囊线虫生理小种Riggs鉴别模式

小种类型

鉴别寄主

12345678910111213141516

Pickett-+-+++--++---++-

Peking-+-+----+-++++-+

PI88788++-+-+---+---++

PI90763----+--++-+-+-+++

注：“+”表示FI大于等于10%；“-”表示FI小于10%。

表B.2大豆胞囊线虫生理小种HG鉴别模式

HG分型

鉴别寄主

01234567

Pickett

Peking+