微生物的选择培养（第一课时）课件-高二下学期生物人教版选择性必修3

自然界中微生物数量繁多，种类庞杂，要想从中分离出需要的特定微生物并不容易，尤其当要分离的微生物在混合的菌群中不是优势种群时，仅通过一般的分离方法很难实现。该怎么办呢？先选择，再纯化1.2.2微生物的选择培养和计数WPS,aclicktounlimitedpossibilities汇报人：WPS选择培养基PartOne科学实例：寻找耐高温的DNA聚合酶（P86页）1973年，布鲁克在美国黄石国家公园的一个热泉中发现了耐热的水生栖热菌，并从这种菌种提取出耐高温的DNA聚合酶。美国黄石公园一、选择培养基这种酶目前已被广泛用于体外扩增DNA片段的聚合酶链式反应（PCR）耐高温的DNA聚合酶因为热泉的高温条件淘汰了绝大多数微生物，而水生栖热菌能在70~80℃高温条件下生存。耐高温的酶耐高温生物体高温环境（热泉、火山口）寻找寻找[问题1]筛选水生栖热菌的思路是怎样的？[问题2]为什么水生栖热菌能从热泉中筛选出来呢？启示：根据微生物对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。科学实例：寻找耐高温的DNA聚合酶（P86页）1973年，布鲁克在美国黄石国家公园的一个热泉中发现了耐热的水生栖热菌，并从这种菌种提取出耐高温的DNA聚合酶。美国黄石公园一选择培养基1.概念：选择培养基：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。2.原理：原理：人为提供有利于目的菌生长的条件（包括营养、温度和PH等），同时抑制或阻止其他微生物的生长。一、选择培养基类型条件分离得到的菌种营养不加碳源不加氮源石油是唯一碳源添加某种化学物质加入青霉素高浓度食盐改变培养条件水中高温水生栖热菌酵母菌、霉菌等真菌金黄色葡萄球菌能分解石油的微生物自养型微生物固氮菌一选择培养基CO(NH2)2+H2O CO2+2NH3

脲酶NO3-、NH4＋被植物吸收一、选择培养基【思考·讨论】

选择培养基配方的设计CO(NH2)2+H2OCO2+2NH3NO3-NH4+脲酶转化被植物吸收除以尿素作为唯一氮源外，该培养基的其他营养成分与普通培养基基本相同。1.你如何设计培养基配方，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来？2.该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点？培养基添加尿素作唯一氮源，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素、缺乏氮源而不能生长发育繁殖。任务一二、微生物的选择培养应该设置通用培养基（如牛肉膏蛋白胨培养基）作为对照，若通用培养基中生长的菌落数多于该选择培养基，则该选择培养基具有选择性。通用培养基选择培养基[现学现用]怎么证明一个选择培养基具有选择性呢？二、微生物的选择培养一选择培养基选择培养基与鉴别培养基的比较项目选择培养基鉴别培养基原理用途举例加入不影响甚至促进目标微生物生长，而抑制或阻止其他种类微生物生长的化学物质加入某种指示剂或化学药品(不影响微生物正常生长)，使微生物的某种代谢产物与培养基中的特定指示剂或化学药品发生反应培养、分离出目标微生物鉴别目标微生物培养酵母菌和霉菌时，可在培养基中加入青霉素，抑制细菌的生长；利用以尿素为唯一氮源的培养基来培养可分解尿素的细菌可用伊红美蓝培养基鉴定饮用水或乳制品中是否含有大肠杆菌(若有，则菌落呈黑色)02微生物的选择培养和计数PartTwo二微生物的选择培养和计数怎么分离？如何计数？二、微生物的选择培养（课本P18页）二、微生物的选择培养选择培养基配方二微生物的选择培养和计数分离的原理：绝大多数微生物都能利用葡萄糖，但是只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。利用以尿素作为唯一氮源的选择培养基，可以从土壤中分离出分解尿素的细菌。计数的原理：当样品的稀释度足够高时，通过统计平板上的菌落数，能推测出样品中的活菌数目。组分含量KH2PO41.4gNaH2PO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素CO(NH2)21.0g琼脂15.0g蒸馏水定容到1000ml筛选能分解尿素的细菌【土壤中分解尿素的细菌的分离与计数】二、微生物的选择培养选择培养基配方二微生物的选择培养和计数分离的原理：绝大多数微生物都能利用葡萄糖，但是只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。利用以尿素作为唯一氮源的选择培养基，可以从土壤中分离出分解尿素的细菌。组分含量KH2PO41.4gNaH2PO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素CO(NH2)21.0g琼脂15.0g蒸馏水定容到1000ml筛选能分解尿素的细菌问：如何确定该选择培养基具有选择作用呢？配一种起对照作用的培养基（牛肉膏蛋白胨培养基）土壤微生物都能生存【土壤中分解尿素的细菌的分离与计数】牛肉膏5.0g蛋白胨10.0gNaCl5.0g琼脂20.0g蒸馏水定容到1000mL培养基一KH2PO41.4gNaH2PO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素1.0g琼脂15.0g蒸馏水定容到1000mL培养基二1.从物理性质来讲，两者属于_____培养基，判断依据是__________________；该类培养基的主要用途为___________________________。2.从用途上来讲，____________属于选择培养基，目的是为了获得_____________________。3.两种培养基共有的培养基成分有：

。培养基一的主要碳源为

，主要氮源为

；培养基二的碳源为

，氮源为

。固体添加了凝固剂琼脂分离、鉴定、计数、保存培养基二能分解尿素的微生物碳源、氮源、无机盐、水牛肉膏、蛋白胨牛肉膏、蛋白胨葡萄糖尿素[现学现用]二、微生物的选择培养二微生物的选择培养和计数平板准备好的同时，还需要准备什么？土壤微生物问：土壤微生物存在土壤中，怎么选择合适的土壤？细菌适宜在酸碱度接近中性的潮湿土壤中生长，绝大多数分布在距地表3〜8cm的土壤层。因此，取样时一般要铲去表层土。在城市，常见的是公园里、街道旁、花盆中的土壤；在农村，则容易收集到农田或菜园里的土壤。22个【土壤中分解尿素的细菌的分离与计数】二、微生物的选择培养二微生物的选择培养和计数问：土壤微生物存在土壤中，怎么选择合适的土壤？细菌适宜在酸碱度接近中性的潮湿土壤中生长，绝大多数分布在距地表3〜8cm的土壤层。因此，取样时一般要铲去表层土。在城市，常见的是公园里、街道旁、花盆中的土壤；在农村，则容易收集到农田或菜园里的土壤。问：土壤收集后能不能直接倒入平板内培养？应该怎么操作？将土样加入盛有无菌水的锥形瓶中，充分摇匀,取液体加入平板内培养？？问：如果想知道1g土壤中有多少能分解尿素的细菌，可否直接制备土壤溶液，接种到选择培养基上得到纯培养物？计数的原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的单菌落数，能大致推测出样品中的活菌数目。1×101mL1mL1mL1mL1mL1mL9mL无菌水90mL无菌水10g微量移液器①铲取土样，将样品装入纸袋中。注意：取土样用的小铁铲和盛土样的纸袋在使用前都要灭菌。取1mL上清液加入盛有9mL无菌水的试管中，依次等比稀释。②将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀，制成菌液。1.梯度稀释菌液二、微生物的选择培养稀释涂布平板法1×1021×1031×1041×1051×1061×10702③取0.1mL菌液，滴加到培养基表面。⑥用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿，使涂布均匀。注意：多余的酒精在烧杯中滴尽，然后再放在火焰上灼烧。④将涂布