广东省佛山市S6高质量发展联盟2023-2024学年高二下学期期中联考生物学试卷（含答案）

广东省佛山市S6高质量发展联盟2023-2024学年高二下学期期中联考生物学试卷姓名：__________班级：__________考号：__________题号一二总分评分一、选择题：本题共16小题，共40分。第1-12小题，每小题2分；第13—16小题，每小题4分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。1．2023年广东某省级自然保护区在调查工作中新增记录的野生植物共有15种，其中包括首次发现的极小种群野生植物短穗刺蕊草。下列叙述正确的是（）A．该15种植物的全部基因构成了该自然保护区的遗传多样性B．短穗刺蕊草与该地区的所有植物和动物共同构成了生物群落C．极小种群野生植物也具有重要的直接价值和间接价值D．保护该自然保护区生物多样性就要禁止资源的开发和利用2．生态工程以生态系统的自组织、自我调节功能为基础，遵循着整体、协调、循环、自生等生态学基本原理。下列关于生态工程的叙述，错误的是（）A．生态工程中有效选择生物组分并合理布设遵循自生原理B．“无废弃物农业”能够实现土壤有机质中养分和能量循环利用C．建设人工湿地应合理搭配植物以提高生态系统的生物多样性D．恢复矿区生态环境关键在于植被恢复和土壤微生物群落的重建3．早在9000年前，我们的祖先就会运用发酵技术获得发酵产品。下列叙述正确的是（）A．制作果酒利用了醋酸菌在无氧条件下产生乙醇B．制作果醋时要隔离空气，防止空气中杂菌污染C．泡菜坛装料五成满，留出足够空间防止发酵液溢出D．微生物发酵产生不同的代谢物使腐乳具有独特的风味4．下表为1000mL牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成。下列叙述错误的是（）组分牛肉膏蛋白胨NaClH2O含量5.0g10.0g5.0g定容至1000mLA．蛋白胨为微生物生长提供的主要营养是碳源、氮源和维生素等B．该培养基灭菌可采用高压蒸汽杀死其中所有的微生物C．若用该培养基倒平板，培养基中应加入适量的琼脂D．若用该培养基培养大肠杆菌应将培养基的pH调至酸性5．生长图形法是一种测定微生物营养需求的简便方法。为探究某嗜热菌所需生长因子的种类，研究人员将该菌的悬浮液与不含任何生长因子、但含有其他必需营养物质的培养基混合后倒平板，然后在平板上划分数区，再将甲、乙、丙三种生长因子分别添加到不同区域，培养结果如图所示。根据图示结果分析，该嗜热菌生长需要的生长因子是（）A．甲和丙 B．乙和丙 C．甲和乙 D．甲、乙和丙6．发酵工程在医药上的应用非常广泛，其中青霉素的发现和产业化生产进一步推动了发酵工程在医药领域的应用和发展。青霉菌是一种广泛存在于自然界中的霉菌，是生产青霉素的重要工业菌种。下列相关叙述错误的是（）A．利用发酵工程生产青霉素的中心环节是高产青霉菌的选育B．工业生产青霉素过程中需要对温度、pH和溶氧量等进行监测和控制C．由于工业发酵罐容积大，在发酵之前需要对菌种进行扩大培养D．发酵过程中若受到杂菌污染，某些杂菌会分泌青霉素酶将青霉素分解7．如图为利用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种实验流程图。下列相关叙述错误的是（）A．进行①处理时使用纤维素酶和果胶酶B．②过程用PEG处理能获得杂种细胞C．融合后杂种细胞可直接发育成完整植株D．进行新品种选择时要将植株接种病原菌8．熊猫是我国的国宝。由于大熊猫的繁殖能力低，幼仔成活率低，限制大熊猫数量的增长。科学家尝试采用细胞工程技术来克隆大熊猫。下列相关叙述正确的是（）A．克隆动物主要应用体外受精和胚胎移植技术B．克隆动物的性状与提供卵母细胞的供体基本相同C．尝试克隆大熊猫违背了我国政府提倡的“四不原则”D．通常胚胎细胞核移植和体细胞核移植难易程度不同9．科学家以病毒A的外壳蛋白为抗原，制备出了单克隆抗体。下列相关叙述错误的是（）A．可利用选择培养基筛选出能产生抗体的杂交瘤细胞B．用病毒A的外壳蛋白对小鼠进行免疫，可获得产生特定抗体的B细胞C．用灭活的病毒诱导获得的融合细胞都具有浆细胞和骨髓瘤细胞的特性D．运用该单克隆抗体可以诊断人体是否感染病毒A10．单峰骆驼在野外几乎灭绝，科学家欲通过胚胎工程的方法拯救野化单峰骆驼，进行了图示研究。下列叙述错误的是（）A．为使A野化单峰骆驼超数排卵，可注射适量的促性腺激素B．图中①操作可将采集到的新鲜精子与成熟的卵子共同培养C．胚胎移植前，C受体雌性骆驼需要进行同期发情处理D．早期胚胎的卵裂期，胚胎总体积不增加，有机物总量减少11．“工欲善其事，必先利其器”。进行基因工程操作需要依靠三种分子工具。下列叙述正确的是（）A．这三种工具的化学本质都是蛋白质B．这三种工具都来自原核生物，不能从其他生物中获取C．这三种工具都能识别DNA分子的特定脱氧核苷酸序列D．E.coliDNA连接酶不能连接具有平末端的DNA片段12．“DNA粗提取与鉴定”的实验步骤是：研磨→去杂质→析出→鉴定；某研究小组欲探究不同的去杂质方法对实验结果的影响，实验结果如表所示。下列叙述错误的是（）去杂质方式沉淀质量（g）DNA浓度（ng/μL）OD260/OD280二苯胺鉴定离心0.06881.51.53蓝色4℃冰箱静置0.1028336.41.41注：OD260与OD280的比值可检查DNA纯度。纯DNA的OD260/OD280为1.8，当存在蛋白质污染时，这一比值会明显降低。A．猪肝和菜花均可作为提取DNA的材料B．对研磨液进行离心是为了加速DNA的沉淀C．离心法可以获得更高纯度的DNAD．离心或沉淀后应取上清液进一步提取DNA13．如图表示某质粒的结构示意图。下列叙述错误的是（）

A．构建基因表达载体时目的基因插入在启动子和终止子之间B．由该质粒的限制酶识别位点可知，可选择EcoRI和HindⅢ切割质粒C．启动子能与RNA聚合酶结合，驱动相关基因转录出相应的mRNAD．该质粒中标记基因的作用是便于重组DNA分子的筛选14．瘤胃是牛、羊等反刍动物具有的特殊的器官，其中的微生物多为厌氧菌，接触空气后会死亡。如图表示从牛的瘤胃中分离和鉴定纤维素分解菌。下列叙述错误的是（）A．从牛体内提取的瘤胃液需要湿热灭菌防止杂菌污染B．甲和乙的培养基应以纤维素为唯一碳源培养目的菌C．乙和丁的接种方法分别是平板划线法和涂布平板法D．实验中培养基表面加入一层无菌石蜡能促进目的菌生长15．广东盛产香蕉，束顶病毒感染会引起香蕉的严重病害。某农科所用感病植株的茎尖作为外植体培养获得脱毒苗，实验结果如图所示。下列相关叙述正确的是（）

A．感病植株的茎尖一定无病毒，因此作为外植体B．超低温保存能够提高脱毒率，从而提高成活率C．生长素与细胞分裂素的用量比例影响愈伤组织的分化D．获得的脱毒苗移栽后会提高对束顶病毒的抵抗能力16．如图表示生物工程常用技术的流程。下列叙述正确的是（）A．若图中3表示融合的杂种细胞，则4可表示胚状体B．若图中3表示受精卵，可对4阶段的原肠胚进行胚胎分割C．若图中3表示杂交瘤细胞，则4培养过程会发生接触抑制D．若图中3表示核质重组细胞，则4可表示重构胚激活和培养二、非选择题：本题共5小题，共60分。17．佛山半月岛湿地公园位于广东省佛山市三水区，是珠江上一处独特的翡翠绿洲。半月岛湿地公园拥有广阔的绿地和湿地，植被茂盛，绿树成荫，这里有各种珍稀植物和鸟类，包括珍稀濒危物种。回答下列问题：（1）半月岛湿地生态系统具有丰富的淡水资源，人们遵从自然生态系统的规律，把生态与社会、经济结合起来，建设生态工程发展立体养殖，充分体现了生态工程中的的基本原理。（2）半月岛湿地公园还拥有丰富的历史文化遗迹，这里有许多古代水利工程和文化遗产，反映了当地的历史和文化传统，这些遗迹不仅具有历史价值，也为游客提供了丰富的文化体验，这体现了生物多样性的价值。（3）为了保护和利用好这片宝贵的湿地资源，半月岛湿地公园采取了一系列措施。对湿地生态系统进行保护和修复。其中保护该地区珍稀植物和鸟类最有效的措施是（填“易地保护”或“就地保护”）。（4）维持半月岛生态湿地的稳定性需要我们每个人的努力，请举出几个能改善生态环境的措施（答出两点即可）。18．野生型菌株X能在基本培养基上生长，亮氨酸缺陷型突变株无法合成亮氨酸，只能在完全培养基上生长。如图是运用影印培养法（一种类似“盖章”的接种方法，使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落）纯化亮氨酸缺陷型突变株的部分流程图。回答下列问题：（1）培养微生物的培养基通常应含有水、无机盐、等营养成分，培养基灭菌常用的方法是，基本培养基与完全培养基相比，成分不同的是。（2）进行过程②操作时，必须先将丝绒布转印至（填“基本培养基”或“完全培养基”）上，从培养基上可获得亮氨酸缺陷型突变菌株。（3）利用影印法培养的优点是不同培养基中同种菌株的接种位置相同，所以应挑取（填“菌落A”或“菌落B”）获得亮氨酸缺陷型突变菌株。将该菌种在培养液中扩大培养时，需将菌液充分振荡，目的是。19．花椰菜常因感染真菌而患黑腐病，导致产量和品质受到严重影响。为解决菜农困扰，研究人员用一定剂量紫外线照射含黑腐病抗性基因的某植物叶肉细胞，使其染色体片段化从而失去细胞分裂能力，再与花椰菜幼根细胞进行体细胞杂交，进而培育抗黑腐病杂种花椰菜。操作过程如图所示。回答下列问题：（1）图中叶肉细胞原生质体与根细胞原生质体融合的原理是。除图中②所示的方法外，通常诱导原生质体融合的化学方法是。（2）融合较好的原生质体呈哑铃型。研究人员用不同浓度PEG诱导，然后用光学显微镜观察融合原生质体，获得结果如表。PEG质量分数原生质体状态25%有破碎现象，哑铃型原生质体比例<0.01%30%形态正常，哑铃型原生质体比例0.03%35%原生质体出现缩小现象，哑铃型原生质体比例0.01~0.02%40%原生质体出现缩小现象，哑铃型原生质体比例0.01~0.02%当PEG质量分数为35%和40%时原生质体出现缩小现象，原因是。若想确定PEG溶液诱导原生质体融合的最适浓度，需在范围内缩小浓度梯度继续实验。（3）PEG诱导后需要筛选。筛选时用光学显微镜挑选出含（填细胞器）且形态为哑铃型的原生质体，在黑暗的环境中进一步培养获得愈伤组织。愈伤组织先诱导生芽还是生根取决于。20．我国中科院利用细胞工程和基因编辑技术，成功培育出世界上首例只有双母亲来源的孤雌小鼠和双父亲来源的孤雄小鼠，实现了哺乳动物的同性繁殖。实验流程如图所示。回答下列问题：（1）科学家将卵细胞、精子所需要的营养物质按照种类和所需量严格配制的培养基用来激活、培养和转化，这类培养基叫作。卵细胞、精子分别转化为phFSC、ahFSC，它们类似胚胎干细胞，胚胎干细胞具有的潜能。（2）在培养孤雄小鼠过程中，需要对卵母细胞进行去核操作，目前普遍使用的去核方法是。ahESC与去核的卵细胞融合后再进行体外受精，此过程中需要ahESC与去核的卵细胞融合的原因是。（3）不考虑致死情况，得到的孤雄小鼠性染色体组成为。利用胚胎分割的方法对乙进行处理得到了多只孤雄小鼠，利用这些孤雄小鼠作为实验材料进行医学研究的优点是。21．科学家利用基因工程改造的大肠杆菌基因组生产人胰岛素，如图是运用基因工程生产人胰岛素过程中使用的质粒及目的基因的部分结构。回答下列问题：（1）适合作为目的基因的载体需要满足一些条件，根据基因表达载体的组成分析，图中质粒没有标出的结构是，该结构的作用是。（2）大肠杆菌内目的基因转录时，转录的模板是（填“a链”或“b链”），目的基因表达产物没有生物学活性的原因是。（3）某同学尝试用PCR扩增目的基因。PCR利用的原理是，一次PCR一般要经历30次循环，每次循环的步骤是。（4）在PCR反应体系中，主要成分有缓冲液、4种脱氧核苷酸、两种引物、等。其中引物的作用是。（5）PCR的产物一般通过来鉴定。影响DNA分子在凝胶中的迁移速率的因素有等（例举出2点即可）。

答案解析部分1．【答案】C【解析】【解答】A、遗传多样性是指该自然保护区的所有生物的全部基因，A错误；

B、短穗刺蕊草与该地区的所有生物构成生物群落，B错误；

C、极小种群野生植物也具有重要的直接价值和间接价值，C正确；

D、保护该自然保护区生物多样性并不是禁止资源的开发和利用，而是要合理利用和开发自然资源，D错误。

故答案为：C

【分析】生物多样性的价值：①直接价值：对人类有食用、药用和工业原料等实用意义，以及有旅游观赏、科学研究和文学艺术创作等非实用意义的；②间接价值：对生态系统起重要调节作用的价值（生态功能）；③潜在价值：目前人类不清楚的价值。2．【答案】B【解析】【解答】A、生态工程的自生原理是指由生物组分而产生的自组织、自我优化、自我调节、自我更新和维持的一种生态系统原理，生态工程中有效选择生物组分并合理布设遵循自生原理，A正确；

B、“无废弃物农业”能够实现土壤有机质中养分循环利用，但能量是不能循环利用的，B错误；

C、建设人工湿地应合理搭配植物以提高生态系统的生物多样性，增强生态系统稳定性，C正确；

D、恢复矿区生态环境关键在于植被恢复和土壤微生物群落的重建，即生产者和分解者的重建，D正确。

故答案为：B

【分析】生态工程的原理包括循环原理、自生原理、整体原理和协调原理。①循环原理：通过系统设计实现不断循环，使前一个环节产生的废物尽可能地被后一个环节利用，减少整个生产环节“废物”的产生。②自生原理：把很多单个生产系统通过优化组合，有机地整合在一起，成为一个新的高效生态系统。③整体原理：充分考虑生态、经济和社会问题。3．【答案】D【解析】【解答】A、醋酸菌是好氧型生物，制作果醋利用了醋酸菌在有氧条件下产生醋酸，制作果酒利用了酵母菌在无氧条件下产生乙醇，A错误；

B、醋酸菌是好氧型生物，制作果醋时要及时通入空气，B错误；

C、泡菜坛装料八成满，留出足够空间防止发酵液溢出，C错误；

D、微生物发酵产生不同的代谢物使腐乳具有独特的风味，D正确。

故答案为：D

【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18~30℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。

果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30~35℃。

4．【答案】D【解析】【解答】A、蛋白胨为微生物生长提供的主要营养是碳源、氮源和维生素等，A正确；

B、该培养基灭菌可采用高压蒸汽灭菌法，杀死其中所有的微生物，包括芽孢和孢子，B正确；

C、若用该培养基倒平板，培养基中应加入适量的琼脂，C正确；

D、大肠杆菌生长的最适pH为中性或微碱性，D错误。

故答案为：D

【分析】微生物的营养物质主要有碳源、氮源、水和无机盐等。培养基灭菌可采用高压蒸汽灭菌法。

5．【答案】B【解析】【解答】图示结果菌落集中在加了乙和丙的交界区域，说明该细菌所需的生长因子为乙和丙，分析得知B正确，ACD错误。

故答案为：B

【分析】倒平板前先要对培养基和培养皿进行灭菌，倒成平板后不需要再灭菌；倒成平板后不进行接种直接培养可判断有无污染。6．【答案】A【解析】【解答】A、发酵工程中，生产青霉素的中心环节是发酵罐内的发酵，A错误；

B、工业生产青霉素过程中需要对pH、温度、溶氧量等进行监测和控制，B正确；

C、因为工业发酵罐容积大，在发酵之前需要对菌种进行扩大培养，C正确；

D、发酵过程中若受到杂菌污染，某些杂菌会分泌青霉素酶将青霉素分解，D正确。

故答案为：A

【分析】

发酵工程的基本环节有：发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌，接种，发酵，产品的分离、提纯等方面。

发酵工程的中心环节应该注意：

发酵罐内的发酵是发酵工程的中心环节，要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程。还要及时添加必需的营养组分，要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件。环境条件不仅会影响微生物的生长繁殖，而且会影响微生物代谢产物的形成。7．【答案】C【解析】【解答】A、图中过程①是用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得有活力的原生质体，A正确；

B、过程②用PEG处理诱导原生质体融合，以获得杂种细胞，B正确；

C、融合后杂种细胞先诱导形成愈伤组织，再发育成完整植株，C错误；

D、进行新品种选择时要将植株接种病原菌，D正确。

故答案为：C

【分析】过程①表示用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得有活力的原生质体，过程②表示诱导原生质体的融合。

8．【答案】D【解析】【解答】A、克隆动物主要应用核移植技术和胚胎移植技术，克隆动物没有应用体外受精技术，A错误；

B、克隆动物的性状与提供细胞核的供体基本相同，B错误；

C、“四不原则”是关于禁止生殖性克隆人的态度，尝试克隆大熊猎并没有违背我国政府提倡的“四不原则”，C错误；

D、胚胎细胞的分化程度低于体细胞，因此成年动物细胞核移植成功率比胚胎细胞核移植成功率低，D正确。

故答案为：D

【分析】

将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。原理是动物细胞的细胞核具有全能性。9．【答案】C【解析】【解答】A、可利用选择培养基筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，A正确；

B、用病毒A的外壳蛋白对小鼠进行免疫，可获得产生特定抗体的B细胞，B正确；

C、融合的细胞可能是浆细胞与骨髓瘤细胞的融合、浆细胞与浆细胞的融合、骨髓瘤与骨髓瘤细胞的融合，因此不一定都具有浆细胞和骨髓瘤细胞特性，C错误；

D、运用该单克隆抗体可以诊断人体是否感染病毒A，D正确。

故答案为：C

【分析】单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞，利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，在经过两次筛选①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群；两次抗体检测：专一抗体检验阳性，获得能产生特异性抗体、又能大量增殖杂交瘤细胞，最后从培养液或小鼠腹水中提取单克隆抗体。10．【答案】B【解析】【解答】A、给A野化单峰骆驼注射适量的促性腺激素，可使其超数排卵，A正确；

B、图中①操作可将采集到的新鲜精子经过获能处理，再与成熟的卵子共同培养，B错误；

C、胚胎移植前，C受体雌性骆驼需要进行同期发情处理，C正确；

D、卵裂期，细胞数量不断增加，细胞体积缩小，但胚胎总体积并不增加，有机物总量减少，D正确。

故答案为：B

【分析】胚胎移植主要包括供体、受体的选择和处理，配种或人工授精，胚胎的收集、检查、培养或保存，胚胎的移植，以及移植后的检查等步骤。胚胎移植的优势是可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力。

11．【答案】D【解析】【解答】A、限制性核酸内切酶、DNA连接酶的化学本质是蛋白质，而载体的化学本质是DNA或RNA，A错误；

B、限制性核酸内切酶主要来自原核生物，DNA连接酶来自原核生物和真核生物，载体来自原核生物和真核生物，B错误；

C、限制性核酸内切酶能识别DNA分子的特定脱氧核苷酸序列，DNA连接酶不能识别DNA分子的特定脱氧核苷酸序列，C错误；

D、E.coliDNA连接酶不能连接具有平末端的DNA片段，D正确。

故答案为：D

【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因——DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA——分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质——抗原—抗体杂交技术；个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。12．【答案】B【解析】【解答】A、应选择富含DNA的材料，进行DNA粗提取与鉴定的实验，猪肝和菜花均可作为提取DNA的材料，A正确；

BC、离心研磨液的目的是加速沉淀，离心能够加速细胞膜、细胞器、一些较大杂质的沉淀，离心法可以获得更高纯度的DNA，B错误，C正确；

D、离心或沉淀后应取上清液进一步提取DNA，D正确。

故答案为：B

【分析】DNA的粗提取与鉴定的实验原理是：①DNA的溶解性，DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同，利用这一特点可以选择适当浓度的盐溶液可以将DNA溶解或析出，从而达到分离的目的；②DNA不溶于酒精溶液，细胞中的某些蛋白质可以溶解于酒精，利用这一原理可以将蛋白质和DNA进一步分离；③在沸水浴的条件下DNA遇二苯胺会呈现蓝色。

13．【答案】B【解析】【解答】A、构建基因表达载体时目的基因插入在启动子和终止子之间，A正确；

B、EcoRI会破坏质粒的复制原点，由该质粒的限制酶识别位点可知，应选择AInI和Hinmdlll切割质粒，B错误；

C、启动子能与RNA聚合酶结合，驱动相关基因转录出相应的mRNA，C正确；

D、标记基因的作用是供重组DNA的鉴定和选择，D正确。

故答案为：B

【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因——DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA——分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质——抗原—抗体杂交技术；个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。14．【答案】A【解析】【解答】A、从牛体内提取的瘤胃液不能灭菌，会杀死其中的微生物，A错误；

B、从牛的瘤胃中分离和鉴定纤维素分解菌，则甲和乙的培养基应以纤维素为唯一碳源培养目的菌，B正确；

C、乙和丁的接种方法分别是平板划线法和涂布平板法，C正确；

D、由于瘤胃液中微生物多为厌氧菌，培养基表面加入一层无菌石蜡能促进目的菌生长，D正确。

故答案为：A

【分析】实验室中目的菌株的筛选原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。

15．【答案】C【解析】【解答】A、感病植株的茎尖感染病毒极少甚至无病毒，A错误；

B、经过超低温处理后，感病植株的脱毒率增加，但成活率由93.75%下降至55%，B错误；

C、培养基中生长素与细胞分裂素的浓度、用量比例影响愈伤组织的分化，C正确；

D、获得的脱毒苗不含病毒，但抗病毒能力没有提高，因此获得的脱毒苗移栽后不会提高对束顶病毒的抵抗能力，D错误。

故答案为：C

【分析】

植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。16．【答案】D17．【答案】（1）整体（2）直接（3）就地保护（4）植树造林，增大绿化面积；节能减排，减少二氧化碳的排放等【解析】【解答】（1）生态工程以生态系统的自组织、自我调节功能为基础，遵循着整体、协调、循环、自生等生态学基本原理；人们遵从自然生态系统的规律，把生态与社会、经济结合起来，建设生态工程发展立体养殖，充分体现了生态工程中的整体的基本原理。

（2）直接价值：对人类有食用、药用和工业原料等使用意义，以及有旅游观赏、科学研究和文学艺术创作等非实用意义的，生态系统在旅游、历史研究等方面的重要作用，体现了生物多样性的直接价值。

（3）保护该地区珍稀植物和鸟类最有效的措施是就地保护，包括建立自然保护区以及风景名胜区等。

（4）改善生态环境的措施：植树造林，增大绿化面积；节能减排，减少二氧化碳的排放等。

【分析】生态工程是指人类应用生态学和系统学等学科的基本原理和方法，通过系统设计，调控和技术组装，对已被破坏的生态环境进行修复，重建，对造成环境污染和破坏的传统生产方式进行改善，并提高生态系统的生产力，从而促进人类社会和自然环境的和谐发展。

生态工程建设的目的是遵循物质循环规律，充分发挥资源的生产潜力，防止环境污染，达到经济效益和生态效益同步发展。

生物多样性的价值：①直接价值：对人类有食用、药用和工业原料等实用意义，以及有旅游观赏、科学研究和文学艺术创作等非实用意义的；②间接价值：对生态系统起重要调节作用的价值（生态功能）；③潜在价值：目前人类不清楚的价值。18．【答案】（1）碳源、氮源；高压蒸汽灭菌法；不添加亮氨酸（2）基本培养基；完全（3）菌落A；提高溶解氧，同时使菌体分散和营养物质均匀分布，让菌体与营养物质充分接触19．【答案】（1）细胞膜具有一定的流动性；高Ca2+-高pH融合法（2）PEG浓度过高导致原生质体失水皱缩；25%-35%（3）叶绿体；生长素和细胞分裂素的浓度和比例【解析】【解答】（1）由于细胞膜具有一定流动性，因此可以用一定的促融合剂促进原生质体之间的融合。除图中②所示的方法（PEG融合法）外，通常诱导原生质体融合的化学方法是高Ca2+-高pH融合法。

（2）原生质层具有选择透性，PEG浓度过高导致原生质体失水皱缩，因此当PEG质量分数为35%和40%时原生质体出现缩小现象；30%时形态正常，说明原生质体既不吸水也不失水，有助于维持其正常形态，该浓度诱导原生质体融合效果最好；25%时有破碎现象，说明25%浓度较小，原生质体有的吸水涨破，35%时原生质体出现缩小现象，说明35%浓度较大，原生质体失水皱缩，因此需要在质量分数为25%-35%之间的PEG溶液重复上述实验。

（3）叶肉细胞原生质体含有叶绿体，光学显微镜下可见，可挑选出含叶绿体且形