微生物的基本培养技术课件高二下学期生物人教版选择性必修3

第1章发酵工程第2节微生物的培养技术及应用第2节微生物的培养技术及应用难以用肉眼观察的微小生物的统称，包括细菌、真菌、病毒及一些原生生物等。衣藻本章中提及的微生物主要指用于发酵的细菌和真菌。微生物：大肠杆菌酵母菌毛霉草履虫新冠病毒无细胞结构原核细胞真核细胞病毒：SARS病毒、新冠病毒等RAN病毒；噬菌体等DNA病毒微生物的类群细菌：蓝细菌、大肠杆菌、乳酸菌等；放线菌：链霉菌等真菌：酵母菌、毛霉等；原生生物：草履虫、变形虫等课本P9传统发酵技术以混合菌种进行发酵制作食品，并且利用的菌种很多是原材料中天然存在的微生物。

向经过杀菌处理的牛奶中添加某些对人体有益的细菌，再经过发酵就可以制成酸奶。由于制作工艺并不复杂，一些人会在家里自制酸奶。自制酸奶虽然方便，但是食用自制酸奶导致肠胃不适的事例屡见不鲜，主要原因是在制作过程中有杂菌混入。那么，怎样才能保证无处不在的杂菌不混入发酵物中呢？应该先对制作用具和原料进行灭菌处理，再接种纯的菌种，并控制发酵条件，避免杂菌进入。防止杂菌污染，获得纯净的微生物培养物是研究和应用微生物的前提，也是发酵工程的重要基础。在实验室培养微生物需要遵循下列要求：培养基的配制无菌技术微生物的纯培养为人们需要的微生物提供合适的营养和环境条件；要确保其他微生物无法混入，并将需要的微生物分离出来。课本P9知识浏览1.培养基的概念、作用与基本类型。重要程度：难度：学习方法：理解诵背3.无菌技术——消毒与灭菌的区别以及各类型的适用范围。重要程度：难度：学习方法：背诵2.培养基的营养构成与四个特殊实例。重要程度：难度：学习方法：理解诵背

培养基的配制一课本P91.培养基的概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。2.培养基的作用：用以

、

、

、

微生物或

其代谢物。培养分离鉴定保存积累加凝固剂（琼脂）3.培养基的类型：液体培养基固体培养基特点不含凝固剂（如琼脂）呈液体状态呈固体状态实验室常用用途扩大培养、常用于工业生产常用于分离、计数、鉴定等

培养基的配制一课本P91.培养基的概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。2.培养基的作用：用以

、

、

、

微生物或

其代谢物。培养分离鉴定保存积累3.培养基的类型：a.液体培养基中加入琼脂后制成的

是实验室最常用的培养基之一。b.微生物在琼脂固体培养基表面或内部生长，可以形成肉眼可见的

。琼脂固体培养基菌落菌落：

培养基的配制一课本P91.培养基的概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。2.培养基的作用：用以

、

、

、

微生物或

其代谢物。培养分离鉴定保存积累3.培养基的类型：a.液体培养基中加入琼脂后制成的

是实验室最常用的培养基之一。b.微生物在琼脂固体培养基表面或内部生长，可以形成肉眼可见的

。琼脂固体培养基菌落菌落：2.特征：不同菌落的形状、大小、颜色等不同。3.功能：菌落是鉴定菌种的重要依据。一个菌落就是一个种群1.概念：单个或少数同种菌体在固体培养基表面或内部大量繁殖，形成肉眼可见的子细胞群体。A：支原体的菌落

B：酵母菌的菌落

C：细菌的菌落

D：细菌和霉菌混杂的菌落

E：放线菌的菌落

F：霉菌的菌落划分标准培养基种类特点用途物理性质化学成分用途不加凝固剂加凝固剂，如琼脂工业生产观察微生物的运动、分类鉴定微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种含化学成分不明确的天然物质工业生产培养基成分明确分类、鉴定在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长培养、分离出特定微生物在培养基中加入某种指示剂或化学药品,用以鉴别不同种类的微生物鉴别不同种类微生物选择培养基液体培养基半固体培养基固体培养基天然培养基合成培养基鉴别培养基常见培养基类型

培养基的配制一课本P10（4）培养基的营养构成：各种培养基的配方不同，但一般都含有水、无机盐、碳源和氮源等营养物质。培养基组成含量提供的主要营养牛肉膏5g碳源、磷酸盐和维生素等蛋白胨10g氮源和维生素等NaCl5g无机盐H2O定容至1000mL水1000mL牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成牛肉膏和蛋白胨来源于动物，含有糖、维生素和有机氮等营养物质。一、培养基的配制组分含量提供的主要营养物质牛肉膏5g碳源、氮源、磷酸盐和维生素等蛋白胨10g碳源、氮源和维生素等NaCl5g无机盐H2O定容至1000mL水▼1000mL牛肉膏蛋白胨培养基的营养结构称取去皮的马铃薯200g，切成小块，加水1000mL，加热煮沸至马铃薯软烂，用纱布过滤。向滤液中加入20g葡萄糖（也可用蔗糖代替）、15~20g琼脂，用蒸馏水定容至1000mL。▼

马铃薯琼脂培养基的配方注：牛肉膏和蛋白胨来源于动物，含有糖、维生素和有机氮等营养物质。100g马铃薯中含有：水75-80g，蛋白质约2g，碳水化合物17-20g、

维生素、无机盐等上述两种培养基的营养构成有哪些相同点？又有哪些不同？都含有水、碳源、氮源、无机盐和维生素等，其中马铃薯琼脂培养基中主要由糖类提供碳源，蛋白质提供氮源；牛肉膏蛋白胨培养基中主要由牛肉膏提供碳源，主要由蛋白胨提供氮源。

培养基的配制一课本P10一、培养基的配制4.培养基的营养构成：各种培养基的配方不同，但①一般都含有水、无机盐、碳源和氮源等营养物质。碳源氮源水无机盐无机碳源--CO2、CO32-、HCO3-有机碳源--葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等自养微生物异养微生物无机氮源--N2、NH4＋、NO3-、NH3等（有机碳既是碳源又是异养微生物的能源物质。）有机氮源--蛋白胨、尿素、氨基酸等含C、H、O、N的有机物是异养型微生物的碳源、氮源、能源。--微生物生长和代谢必不可少的营养物质。--提供无机营养、调节酸碱平衡、

维持渗透压。

培养基的配制一课本P10可以为硝化细菌提供能量不提供能量固氮微生物一、培养基的配制（1）为什么培养基需要氮源？思考：氮是微生物合成蛋白质、核酸等物质所必需的。（2）培养微生物时，培养基中是否必须有碳源和氮源？不一定。例如，培养自养型微生物时，一般不需要添加碳源，微生物可以利用空气中的二氧化碳；培养固氮微生物时，一般不需要添加氮源，微生物可以利用空气中的氮气。微生物碳源氮源能源蓝细菌CO2NH4＋、NO3-等光能硝化细菌CO2NH3NH3的氧化根瘤菌糖类等有机物N2有机物大肠杆菌糖类、蛋白质等有机物蛋白质等有机物自养微生物异养微生物

培养基的配制一课本P10（4）培养基的营养构成：①概念：（1）碳源②种类：凡是能提供碳元素的物质，统称为碳源。无机碳源：有机碳源：CO2、CO32-、HCO3-等含碳无机物。糖类、脂质、蛋白质、有机酸、石油等含碳有机物，常用：糖类，尤其是葡萄糖。③功能：主要用于构成细胞物质和一些代谢产物；有机碳既是碳源又是异养微生物的能源物质。自养微生物异养微生物

培养基的配制一课本P10（4）培养基的营养构成：【说明】含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源，又可以作为氮源，如氨基酸等。①概念：（2）氮源②种类：③功能：凡是能提供氮元素的物质，统称为氮源。主要用于合成蛋白质、核酸及含氮代谢产物等NH4＋、NO3-、NH3等牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等无机氮源：有机氮源：

培养基的配制一课本P10（4）培养基的营养构成：（3）水（4）无机盐①良好的溶剂；②维持生物大分子结构的稳定。①提供无机营养；②调节pH；③维持渗透压。微生物碳源氮源能源蓝细菌CO2NH4＋、NO3-等光能硝化细菌CO2NH3NH3的氧化根瘤菌糖类等有机物N2有机物大肠杆菌糖类、蛋白质等有机物蛋白质等有机物几种微生物的营养和能量来源分析用无碳培养基可以筛选培养什么微生物？

用无氮培养基可以筛选培养什么微生物？

自养微生物固氮微生物

培养基的配制一课本P10

培养基的配制一课本P104.培养基的营养构成：①各种培养基一般都含有

、

、

和

等营养物质。水碳源氮源无机盐②培养基还需要满足微生物生长对

、

以及

的需求。pH特殊营养物质O2培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加

；培养霉菌时，需要将培养基调至

；培养细菌时，需要将培养基调至

；培养厌氧微生物时，需要提供

的条件。维生素酸性中性或弱碱性无氧主要指生长因子：维生素、氨基酸、碱基等（4）培养基的营养构成：

培养基的配制一课本P10例题：根据所学知识回答下列问题:1.自养型微生物与异养型微生物培养基的主要差别在于

；自养型微生物所需的碳源来自

碳源，异养型微生物所需的碳源来自

碳源2.无机氮源不但能给自养型微生物提供

，也能作为

，例如NH3既作为硝化细菌的氮源，也作为能源（NH3氧化释放的化学能）；3.含有C、H、O、N的有机物可作为

微生物的碳源、氮源、能源。碳源无机有机氮源能源物质异养型具体处理原理目的选择培养基加入青霉素青霉素能抑制细菌生长，对真菌无作用不加氮源固氮微生物能利用空气中的氮气不加有机碳源自养型微生物能利用无机碳源鉴别培养基加入酚红培养基尿素被分解产生氨，培养基呈碱性，酚红指示剂变红。加入刚果红刚果红与纤维素能形成红色复合物，当纤维素被分解后，复合物就无法形成，培养基中会出现以菌落为中心的透明圈。分离酵母菌、霉菌等真菌分离固氮菌分离自养微生物鉴别分解尿素的细菌鉴别纤维素分解菌

对培养基的成分进行控制可以起到不同的作用：微生物种类繁多，培养条件也各不相同。下列关于微生物培养基的描述正确的是(

)A．同一物质不可能既作碳源又作氮源B．凡是碳源都能提供能量，氮源有些也能提供能量C．牛肉膏蛋白胨培养基是培养细菌、病毒等常用的培养基D．培养硝化细菌，可用无机碳源的培养基D该表为某培养基的配方，下列叙述错误的是()成分NaNO3KH2PO4MgSO4·7H2O(CH2O)蒸馏水青霉素含量3g1g0.5g30g定容至1000mL0.1万单位A．根据物理性质划分，该培养基属于液体培养基B．根据用途划分，该培养基属于选择培养基C．根据培养基的配方可知，该培养基培养的微生物的同化作用类型是异养型D．固体培养基中加入少量水即可形成液体培养基D无菌技术septictechnique获得纯净的微生物培养物的关键是。无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括消毒和灭菌。防止杂菌污染

无菌技术二课本P10无菌技术除用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么作用？无菌技术还能有效避免操作者被微生物感染。获得纯净的微生物培养物的关键是。无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括消毒和灭菌。防止杂菌污染

无菌技术二课本P10消毒灭菌消毒获得纯净的微生物培养物的关键是。无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括消毒和灭菌。防止杂菌污染

无菌技术二课本P10消毒灭菌获得纯净的微生物培养物的关键是。无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括消毒和灭菌。防止杂菌污染

无菌技术二课本P10消毒灭菌获得纯净的微生物培养物的关键是。无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括消毒和灭菌。防止杂菌污染

无菌技术二课本P10消毒灭菌烤箱火力全开烘烤几小时获得纯净的微生物培养物的关键是。无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括消毒和灭菌。防止杂菌污染

无菌技术二课本P10消毒灭菌获得纯净的微生物培养物的关键是。无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括消毒和灭菌。防止杂菌污染

无菌技术二课本P10消毒灭菌获得纯净的微生物培养物的关键是。无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括消毒和灭菌。防止杂菌污染

无菌技术二课本P10消毒灭菌使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物。使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。（芽孢—休眠体、孢子—繁殖体，都具有很高的抗性）1.对操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒；2.将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。

无菌技术二课本P10芽孢：有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫作芽孢。

芽孢壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如，有的细菌的芽孢，煮沸3小时以后才死亡。孢子：细菌、原生动物、真菌和植物等产生的一种有繁殖或休眠作用的生殖细胞。能直接长成新个体。知识拓展

无菌技术二课本P10-11项目主要方法应用范围消毒

例如对家庭餐具等生活用品的消毒。例如牛奶。可以杀死牛奶中的绝大多数微生物，并且不破坏牛奶的营养成分。化学药剂消毒法：用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源等。紫外线消毒法：接种室、接种箱或超净工作台在使用前可用紫外线照射30min，以杀死物体表面或空气中的微生物。损伤细菌的DNA生物消毒法：指利用生物或其代谢物除去环境中的部分微生物的方法。例1：有的微生物能够寄生于多种细菌体内，是细菌裂解，因此可以用他们来净化污水、污泥。例2：利用嗜热细菌繁殖时产生的热量来杀灭病原微生物。嗜热菌能够在高温下生长，例如在堆肥过程中，嗜热菌的发育会使温度升高，从而杀灭大多数病毒和除芽胞以外的病原菌。缺点：过程较缓慢，对某些微生物的杀灭效果不完全可靠，尤其对细菌芽孢通常无杀灭作用。课本P10

无菌技术二课本P11项目主要方法应用范围消毒

巴氏消毒法

℃消毒30min或

℃处理15s或

℃处理10～15s

、啤酒、果酒和酱油等不耐高温的液体煮沸消毒法100℃煮沸

min家庭餐具等生活用品紫外线消毒30W紫外灯照射

min(损伤细菌的DNA)化学药物消毒

擦拭实验者双手水源牛奶63～6572～76

5～630体积分数为70%～75%的酒精氯气接种室、接种箱或超净工作台80～85

项目主要方法应用范围灭菌

无菌技术二课本P11湿热灭菌法干热灭菌法灼烧灭菌法高压蒸汽灭菌锅干热灭菌箱接种环灼烧灭菌利用沸水、流通蒸汽、高压蒸汽进行灭菌的方法。高压蒸汽灭菌效果最好：160~170℃的热空气中，1~2h进行灭菌的方法耐高温和需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（如吸管、培养皿等）、金属用具等。充分燃烧层（外焰）接种工具（接种环、涂布器等）、其他金属工具及接种过程实验室常用的高压蒸汽灭菌锅就是以水蒸气为介质，在压力为100kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30min来灭菌的。项目主要方法应用范围灭菌灼烧灭菌直接在酒精灯火焰的

层灼烧干热灭菌干热灭菌箱中，

℃的热空气中维持

。高压蒸汽灭菌(湿热灭菌)充分燃烧接种工具，如涂布器、接种环、接种针或其他金属用具、试管口或瓶口等160～170

1～2h100kPa、121℃的条件下，维持15～30min培养基等耐高温的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿、金属用具等

无菌技术二课本P11

思考1、培养基灭菌为什么采用高压蒸汽灭菌而不采用干热灭菌？

分析：干热灭菌箱内的高温会导致培养基的_________丧失，而高压蒸汽锅内的_________较大，不会导致培养基的_________散失。思考2、如何制备一瓶无菌水？

分析：对一瓶有菌水进行___________________处理。

思考3、某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时，若压力达到设定要求，而锅内并没有达到相应温度，最可能的原因是？

分析：_____________________。思考4、某同学从高压蒸汽灭菌锅内拿出培养基后发现，培养基已经溅满了锥形瓶的瓶壁，最可能的原因是？

分析：___________________________________________，就提前打开了高压蒸汽锅。思考5：用紫外线可以给接种室消毒，其原理是紫外线能___________________。在照射前，适量喷洒石炭酸或煤酚皂溶液等_________，可以加强消毒效果。水分湿度水分高压蒸汽灭菌未将锅内冷空气排尽高压蒸汽锅的压力表读数还未降至零损伤细菌的DNA消毒液随堂训练1.无菌技术的具体内容（1）对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和_______。（2）将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行________。（3）实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与______________接触。（4）为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在_______________并在

_______________附近进行。消毒灭菌周围的物品酒精灯火焰超净工作台上2.以下物品所采用的灭菌或消毒方法依次是：

培养基:

培养皿:

接种环:实验操作者的双手:

实验室:牛奶:

湿热灭菌（高压蒸汽灭菌）干热灭菌灼烧灭菌化学药剂消毒（酒精）紫外线消毒巴氏消毒法课本P10(1)生物消毒法是指利用生物或其代谢物去除环境中的部分微生物的方法(

)(2)与消毒相比，灭菌对微生物的杀灭更彻底(

)(3)无菌操作的对象只要是没有生物活性的材料(如培养基、接种环等)，都可采用干热灭菌法进行灭菌(

)√√×培养基的灭菌一般采用湿热灭菌法。1.关于消毒、灭菌的方法，下列描述错误的是（

）A.接种用的无菌操作台要进行灭菌处理B.用巴氏消毒法处理牛奶是因为高温易破坏牛奶的营养成分C.煮沸半小时后的凉开水中可能仍含有部分芽孢和孢子D.先喷洒消毒液，再用紫外线照射可增强消毒效果B2.生产、生活和科研实验中常用到无菌技术。下列相关叙述不正确的是()A.腌制泡菜时，泡菜坛内缺氧、呈酸性的环境不利于杂菌生长B.实验室中的玻璃涂布器、吸管、培养基等均可以用干热灭菌法处理C.生活中用巴氏消毒法处理牛奶既可消毒，又基本不会破坏牛奶中的营养成分D.湿热灭菌是一种利用沸水、流通蒸汽或高压蒸汽进行灭菌的方法B√教材P10〔相关信息〕生物消毒法是指利用生物或其代谢物除去环境中的部分微生物的方法。例如，有的微生物能够寄生于多种细菌体内，使细菌裂解，因此可以用它们来净化污水、污泥。3.(2023·山西阳泉高二期中)无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开。下列说法正确的是A.在100℃条件下煮沸5～6min属于灭菌方法B.对接种室、涂布器、操作者的衣着和双手只需要进行消毒处理C.培养基可借助高压蒸汽灭菌锅或干热灭菌箱进行灭菌D.利用某些寄生于细菌体内的微生物裂解细菌来净化污水属于生物消毒法微生物的纯培养Purecultivationofmicroorganisms

微生物的纯培养三课本P11纯培养物培养物纯培养在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体称为培养物获得纯培养物的过程由单一个体繁殖所获得的微生物群体配制培养基灭菌接种分离培养

微生物的纯培养三课本P12平板划线法、稀释涂布平板法(1)原理：微生物群分散或稀释单个细胞单个菌落繁殖(2)获得单菌落的方法：酵母菌的纯培养(3)材料用具：酵母菌培养液提供接种用的酵母菌配制酵母菌固体培养基马铃薯葡萄糖（或蔗糖）蒸馏水琼脂

微生物的纯培养三课本P12(4)方法步骤：第

1步：制备培养基：配制培养基→灭菌→倒平板。去皮切块加水(1000mL)加热煮沸软烂马铃薯纱布过滤加琼脂（15～20g）酵母菌培养基加水定容(1000mL)马铃薯块滤液加葡萄糖/蔗糖（20g）调pH

微生物的纯培养三课本P12(4)方法步骤：a.培养基——高压蒸汽灭菌转移灭菌15~30min皮筋勒紧包牛皮纸放入高压蒸汽灭菌锅中（100kPa、121℃）酵母菌培养基锥形瓶加棉塞①避免因水蒸气凝结而浸湿棉塞②避免再次污染第

1步：制备培养基：配制培养基→灭菌→倒平板。

微生物的纯培养三课本P12(4)方法步骤：b.培养皿——干热灭菌灭菌2h几层牛皮纸包紧放入干热灭菌箱（160～170℃）5～8套培养皿干热灭菌箱第

1步：制备培养基：配制培养基→灭菌→倒平板。(4)方法步骤：

微生物的纯培养三课本P12第

1步：制备培养基：配制培养基→灭菌→倒平板。(4)方法步骤：培养基冷却到50℃左右，在酒精灯火焰附近倒平板。1拔出锥形瓶的棉塞。2将瓶口迅速通过火焰。3用拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，将培养基倒入培养皿（10～20mL），立即盖上皿盖。4等待培养基冷却凝固后，将培养皿倒过来放置。①防止培养基水分过快蒸发。②防止皿盖上冷凝水滴落，造成污染。通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。不能完全打开，以免杂菌污染培养基。温度过高会烫手，温度过低培养基会凝固。思考：⑤在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？不能。因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。第

1步：制备培养基：配制培养基→灭菌→倒平板。

微生物的纯培养三课本P13(4)方法步骤：分离的方法平板划线法

通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。经过数次划线后培养，可以分离到单菌落。连续划线法分区划线法第

2步：接种和分离酵母菌

微生物的纯培养三课本P13(4)方法步骤：第

2步：接种和分离酵母菌平板划线法的具体操作1将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环的金属丝烧红。2在火焰旁冷却接种环。同时，拔出装有酵母菌培养液的试管的棉塞。将试管口通过火焰。34在火焰附近用接种环蘸取一环菌液。防止温度太高杀死菌种。避免接种环上可能存在的微生物污染培养基。

微生物的纯培养三课本P13(4)方法步骤：平板划线法的具体操作5将试管口通过火焰，并塞上棉塞。在火焰附近将皿盖打开一条缝隙，用接种环在培养基表面基表面迅速划三至五条平行线，盖上皿盖。6

灼烧接种环，待其冷却后，从第一次划线的末端开始作第二次划线。重复以上操作，作第三、四、五次划线。注意不要将最后一次的划线与第一次的划线相连。7注意：划线时不能划破培养基表面第

2步：接种和分离酵母菌

微生物的纯培养三课本P13(4)方法步骤：平板划线法的具体操作5将试管口通过火焰，并塞上棉塞。在火焰附近将皿盖打开一条缝隙，用接种环在培养基表面基表面迅速划三至五条平行线，盖上皿盖。6

灼烧接种环，待其冷却后，从第一次划线的末端开始作第二次划线。重复以上操作，作第三、四、五次划线。注意不要将最后一次的划线与第一次的划线相连。712345第

2步：接种和分离酵母菌

微生物的纯培养三课本P13(4)方法步骤：平板划线法的具体操作5将试管口通过火焰，并塞上棉塞。在火焰附近将皿盖打开一条缝隙，用接种环在培养基表面基表面迅速划三至五条平行线，盖上皿盖。6

灼烧接种环，待其冷却后，从第一次划线的末端开始作第二次划线。重复以上操作，作第三、四、五次划线。注意不要将最后一次的划线与第一次的划线相连。712345第

2步：接种和分离酵母菌

微生物的纯培养三课本P13(4)方法步骤：平板划线法的具体操作5将试管口通过火焰，并塞上棉塞。在火焰附近将皿盖打开一条缝隙，用接种环在培养基表面基表面迅速划三至五条平行线，盖上皿盖。6

灼烧接种环，待其冷却后，从第一次划线的末端开始作第二次划线。重复以上操作，作第三、四、五次划线。注意不要将最后一次的划线与第一次的划线相连。7第

2步：接种和分离酵母菌

微生物的纯培养三课本P13(4)方法步骤：平板划线法的具体操作5将试管口通过火焰，并塞上棉塞。在火焰附近将皿盖打开一条缝隙，用接种环在培养基表面基表面迅速划三至五条平行线，盖上皿盖。6

灼烧接种环，待其冷却后，从第一次划线的末端开始作第二次划线。重复以上操作，作第三、四、五次划线。注意不要将最后一次的划线与第一次的划线相连。7使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。最后一次划线已经将细菌稀释成单个的细胞，如果与第一次划线相连，则增加了细菌的数目，达不到纯化的效果。第

2步：接种和分离酵母菌

微生物的纯培养三课本P13灼烧时期目的取菌种前每次划线前接种结束后【问题探究】为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？杀死接种环上残留的菌种，避免微生物污染环境和感染操作者杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下一次划线的菌种直接来源于上次划线的末端杀死接种环上原有微生物，防止外来杂菌污染培养基接种环共需灼烧几次？6次

微生物的纯培养三课本P13(4)方法步骤：

完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放入28℃左右（培养温度因酵母菌种类的不同而稍有差异）的恒温培养箱中培养24~48h。在实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防止被微生物感染。使用后的培养基在丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境。警示对照：说明培养基是否被杂菌污染。第

3步：培养酵母菌

微生物的纯培养三课本P13①在未接种的培养基表面是否有菌落生长？如果有，说明了什么？②在接种酵母菌的培养基上，如果你观察到了不同形态的菌落，可能是由哪些原因引起的？如果有，说明培养基被杂菌污染。如果观察到了不同形态的菌落，可能是接种的菌种不纯或者无菌操作不规范等原因引起的。（5）结果分析与评价：评估论点的可信程度

所谓“酵素”，就是“酶”的另一种说法。“酵素”制作就是利用微生物进行无氧呼吸的原理，进行像制作泡菜一样的发酵。这样制作的“酵素”中可能有糖类(包括一些简单的糖和膳食纤维等)、蛋白质(包括多种酶)、有机酸等成分，不存在它独有的、特殊的营养物质，其中甚至可能含有微生物发酵产生的有毒物质，食用后可能会危害人体健康。因此，“吃水果酵素可以美容、减肥、促进消化和提高免疫力”的论点值得怀疑。有一段时间，水果“酵素”风靡各地，水果“酵素”制作的大致过程是：将洗净、切成块状的水果，放入洁净的容器，再加入糖和水，密封，置于阴凉处发酵一至两周。有人说，吃水果“酵素”可以美容、减肥、促进消化和提高免疫力。请评估这一论点是否可信。1.微生物的纯培养既需要适宜的培养基，又要防止杂菌污染。判断下列相关表述是否正确。（1）培养基中的营养物质浓度越高，对微生物的生长越有利。（）

（2）消毒和灭菌的杀菌程度存在差异。（）（3）微生物的纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物。（）

×√×一、概念检测练习与应用2.日常生活中保存食品的方法有哪些？这些方法是如何阻止或抑制微生物生长的？

日常生活中保存食品的方法有干制、腌制、低温储存等。干制可以降低食品的水分含量；腌制可以通过食盐、糖等制造高渗环境，从而抑制微生物的生长和繁殖；低温则是通过降低微生物的代谢速率来抑制微生物的生长和繁殖。一、概念检测练习与应用1.某同学将5个手指尖在贴有“洗手前”标签的培养基上轻轻按一下。然后用肥皂将该手洗干净，再将5个指尖在贴有“洗手后”标签的同种培养基上轻轻按一下。将这两个培养皿放入37℃恒温培养箱中培养24h后，发现贴有“洗手后”标签的培养皿中菌落较少。请分析回答下列问题。(1)这个实验中需要进行灭菌处理的材料用具有？培养皿和培养基(2)“将指尖在培养基上轻轻按一下”相当于微生物培养中的哪一步操作？接种二、拓展应用练习与应用1.某同学将5个手指尖在贴有“洗手前”标签的培养基上轻轻按一下。然后用肥皂将该手洗干净，再将5个指尖在贴有“洗手后”标签的同种培养基上轻轻按一下。将这两个培养皿放入37℃恒温培养箱中培养24h后，发现贴有“洗手后”标签的培养皿中菌落较少。请分析回答下列问题。二、拓展应用练习与应用(3)从实验结果来看,洗手后我们就能进行无菌操作了吗？操作时，我们可以采用什么方法来避免手上微生物的污染？通过实验结果可以看到，洗手后手上还有一些微生物，不能直接进行无菌操作。可以通过用酒精棉球擦拭双手，或戴消过毒的手套等方法来避免手上微生物的污染。二、拓展应用练习与应用2.某生物兴趣小组将从葡萄皮上成功分离来的野生酵母菌分别接种于3个盛有等量同种液体培养基的锥形瓶中，并放置在摇床上培养，摇床转速分别为210r/min，230r/min和250r/min。培养时间与酵母菌种群密度的关系如下图所示。请分析回答下列问题。(1)摇床转速不同,意味着培养条件有什么不同？意味着培养液中02含量不同。摇床转速越高，培养液中的溶氧量越多，促进酵母菌的有氧呼吸，还能增加酵母菌获得营养物质的机会，有利于其生长繁殖。二、拓展应用练习与应用2.某生物兴趣小组将从葡萄皮上成功分离来的野生酵母菌分别接种于3个盛有等量同种液体培养基的锥形瓶中，并放置在摇床上培养，摇床转速分别为210r/min，230r/min和250r/min。培养时间与酵母菌种群密度的关系如下图所示。请分析回答下列问题。(2)从图中数据你可以得出什么结论?其原因是什么？培养液中02含量越高,酵母菌种群密度越大。(3)为什么培养8h后，其中2个锥形瓶中酵母菌的种群密度基本达到稳定?这时候已经达到了环境容纳量（K值）。培养液中的溶氧量和营养物质都有限(1)只有平板划线法接种培养后可获得单菌落(

)×获得单菌落的方法有平板划线法和稀释涂布平板法。(2)每次划线都要从上一次划线的起始端开始(

)×在第二次以及其后的划线操作时，总是从上一次划线的末端开始划线。(3)经培养后，只有在最后一次划线上才会出现单菌落(

)×经培养后，在稀释度高的区域都会出现单菌落，不一定只有在最后一次划线上才会出现单菌落。跟踪训练5.(2023·海南三沙高二期末)下列有关微生物的分离与培养的叙述，错误的是A.获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染B.倒置平板可防止培养皿皿盖上的冷凝水落入培养基C.倒平板时将培养皿的皿盖拿开，以便于将锥形瓶中的培养基倒入培养皿D.检验培养基是否被杂菌污染的最有效方法是将未接种的培养基放在恒

温培养箱中培养√倒平板时用食指和拇指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，将培养基倒入培养皿，立即盖上皿盖，C错误。跟踪训练6.在分离、纯化细菌的实验中，划线接种(甲)、培养结果(乙)如图，a、b、c、d是划线的四个区域。下列叙述错误的是