DB15T 3609-2024黑土地土壤微生物肥力评价规范

15SpecificationforevaluationofsoilmicrobialfertilityinblacksoilI1黑土地土壤微生物肥力评价规范力评价指标及测定，土壤微生物肥力评价方法土壤微生物肥力soilmicrobialfertility能对土壤的物理和化学特性起到促进和维持作用的微生物，在生物过程中为植物生长发育提供所土壤呼吸强度soilrespirationintensity2土壤微生物取样宜在植物生长旺盛期采样。内蒙古东北区采集时间宜选择在7～8月初进行，在野用定位仪确定采样地点的地理位置(经纬度),每个样地面积原则上应>1hm²,在平原区地形宜设置为100m×100m正方形，在丘陵山区狭长地带宜选择50m×200m的长方形。式、气候条件、耕作以及施肥方式等将所评价样地划分为3个条件相对一致的采样单元。的不锈钢土钻随机采集15～20个0cm~20cm土层的土壤样品，按四分法混合成一个土壤微生物样品，以1kg左右为宜，若采集的样品量过多时，可用四分法(按照NY/T1121.1的规定执行)将多余的土壤弃去，最后保留1kg左右。每个样地分别采集3个微生物混合样作为重复。将采集土样放入无菌袋中，并在袋上写清采样编号后立即放于4℃冷藏箱或者冰存有土样的4℃冷藏箱或者冰袋在48h内运回实验室，并统一保存于4℃环境中。具体评价项目包括土壤微生物数量、微生物生物量碳氮、酶活性和微生物活性(微生物熵),其中3——微生物熵；5.2.1微生物数量测定5.2.2微生物生物量测定5.2.2.1微生物生物量碳5.2.2.2微生物生物量氮5.2.3土壤酶活性测定5.2.3.1纤维素酶活性5.2.3.2蔗糖酶活性蔗糖酶活性以蔗糖为底物，采用3,5-二硝基水杨酸比色法测定，具体方法见附录B中的B.1。5.2.3.3脲酶活性5.2.3.4磷酸酶活性5.2.3.5过氧化氢酶活性5.2.3.6硝酸还原酶活性5.2.3.7多酚氧化酶活性））5.2.4土壤呼吸强度的测定4土壤呼吸强度测定按照LY/T1220的规定执行。6土壤微生物肥力评价方法6.1确定各评价指标权重参照表1规定的层次分析法，建立目标层、准则层和指标层层次结构，构建判断矩阵。经层次单排序及其一致性检验、层次总排序、层次总排序的一致性检验，计算并确定所有评价指标对黑土地微生物肥力(目标层)相对重要性的排序权重值。具体方法按照GB/T33469的规定执行。表1黑土地土壤微生物肥力评价因子总集目标层多酚氧化酶活性6.2计算各指标隶属度6.2.1函数模型选择及隶属度计算土壤微生物数量、微生物生物量碳氮、微生物熵及酶活性均属于S型隶属函数，各评价因素的隶属函数可简化为公式(2):式中：f(u)——隶属函数；uo——评价指标的阈值上限值。6.2.2隶属函数阈值上限的确定采用累积频率曲线确定隶属函数阈值上限，一组样本u,u2,...un,给定某一阈值uo,不大于uo的样本数为m,则称m/n为不大于uo的累积频率，计算得到累积频率曲线。以所有被测指标数据累积频率为75%的指标值作为隶属函数的阈值上限。6.3土壤微生物肥力指数模型采用主成分分析法确定单项评价指标的权重值Ci。根据作用效应曲线，建立隶属函数，计算各评价指标的隶属度Fi。利用累加法建立土壤微生物肥力指数模型，将所选的单个指标的评价结果转换为由各评价指标构成的土壤微生物肥力综合评价。土壤微生物肥力指数模型如公式(3):5MIF=∑(×)(3)——第i个评价指标的组合权重；——第i个评价指标的隶属度。根据6.2.2确定的阈值上限，利用公式(2)计算各个土壤样品的隶属度值。然后应用公式(3)中所建6A.1.1方法原理A.1.2试剂配制A.1.3仪器设备A.1.4水分测定A.1.5样品测定7A.1.6熏蒸），在熏蒸的同时，另称取等量的土壤3份，置于另一干燥器中，除不加A.1.7浸提），A.1.8测定的重铬酸钾，溶液的变色过程是橙黄-蓝绿-棕红，即为终点。记录硫酸亚铁滴定量。A.1.9结果计算8A.1.10精密度A.2.1方法原理A.2.2试剂配制A.2.2.1去乙醇氯仿（CHCl3同A.1.2中的去乙醇氯仿制备。A.2.3仪器设备），A.2.4水分测定9同A.1.4。A.2.5样品测定同A.1.5。A.2.6熏蒸同A.1.6。A.2.7浸提同A.1.7。A.2.8消化A.2.9测定A.2.10结果计算A.2.11精密度B.1.1方法原理土壤蔗糖酶将蔗糖酶促水解为还原糖，还原糖与3,5-二硝基水杨酸在沸水浴中反应而生成橙色的3-氨基-5-硝基水杨酸，颜色深度与还原糖量呈正相关，因而B.1.2试剂配制）：B.1.3仪器设备B.1.4标准曲线绘制），B.1.5测定步骤B.1.5.1水分测定B.1.5.2样品测定注意事项:c)如果样品吸光值超过标曲的最大值，则应该增加分取倍数或减少培养的土样。B.1.6结果计算=…………………(B.1)B.1.7精密度B.2.1方法原理B.2.2试剂配制B.2.2.6次氯酸钠溶液：根据市售次氯酸钠溶液浓度稀释试剂，至活性氯的浓度为0.9%。B.2.3仪器设备B.2.4标准曲线绘制B.2.5测定步骤B.2.5.1水分测定B.2.5.2样品测定注意事项:c)如果样品吸光值超过标曲的最大值，则应该增加分取倍数或减少培养的土样。B.2.6结果计算X=…………………(B.2)f——表示土壤样品干物质含量，单位为百分含量表示（%B.2.7精密度B.3.1方法原理剂反应生成蓝色，颜色深度与酚含量呈正相关，用比色法测定游离的酚含量来表示磷酸酶的活B.3.2试剂配制7·4)3）：）：）：）：B.3.3仪器设备B.3.4标准曲线绘制B.3.5测定步骤B.3.5.1水分测定B.3.5.2样品测定B.3.6结果计算X=…………………(B.3)f——表示土壤样品干物质含量，单位为百分含量表示（%B.3.7精密度B.4.1方法原理B.4.2试剂配制B.4.2.4高锰酸钾（K2B.4.3仪器设备B.4.4测定步骤B.4.4.1水分测定B.4.4.2样品测定色为终点。根据空白和样品的滴定差，求出相当于分解过氧化氢的量所消耗的高锰酸钾标准溶液。B.4.5结果计算X=…………(B.4)f——表示土壤样品干物质含量，单位为百分含量表示（%B.4.6精密度B.5.1方法原理2-。B.5.2试剂配制B.5.2.4铝钾矾饱和溶液。B.5.3