2021-2022学年高二下学期期中检测卷 生物（二）解析版

此卷只装订不密封班级姓名准考此卷只装订不密封班级姓名准考证号考场号座位号此卷只装订不密封班级姓名准考证号考场号座位号生物（二）注意事项：1．答题前，先将自己的姓名、准考证号填写在试题卷和答题卡上，并将准考证号条形码粘贴在答题卡上的指定位置。2．选择题的作答：每小题选出答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑，写在试题卷、草稿纸和答题卡上的非答题区域均无效。3．非选择题的作答：用签字笔直接答在答题卡上对应的答题区域内。写在试题卷、草稿纸和答题卡上的非答题区域均无效。4．考试结束后，请将本试题卷和答题卡一并上交。第Ⅰ卷（选择题）一、选择题（本题共12小题，每小题2分，共24分，每小题只有一个选项最符合题意）1．在古代，新鲜蔬菜不易保存，人们将其制作成泡菜，既改变其口味又增加了储存时间。《中馈录》中记载：“泡盐菜法，定要覆水坛。此坛有一外沿，如暖帽式，四周内可盛水；坛口覆一盖，浸于水中……则所泡之菜不坏矣。泡菜之水，用花椒和盐素沸。加烧酒少许……坛沿外水须隔日一换，勿令其干。”下列说法不正确的是（）A．“坛口覆一盖，浸于水中”有利于保持坛内的无氧环境B．“泡菜之水，用花椒和盐煮沸”的目的之一是消毒杀菌C．泡菜制作的过程需要用到的乳酸菌属于厌氧菌，发酵会产生乳酸D．“坛沿外水须隔日一换，勿令其干”可以保证坛内适宜湿度【答案】D【解析】A．“坛口覆一盖，浸于水中”目的是阻止空气进入坛内，有利于保持坛内的无氧环境，A正确；B．“泡菜之水，用花椒和盐煮沸”的目的包括提升泡菜味道、减少水中的溶氧量和消毒杀菌防止杂菌污染，B正确；C．泡菜的制作离不开乳酸菌，乳酸菌代谢类型是异养厌氧型，发酵过程中进行无氧呼吸产生乳酸，C正确；D．“坛沿外水须隔日一换，勿令其干”可以保证坛内的无氧环境，D错误。故选D。2．将没有吃完的西瓜盖上保鲜膜后放入冰箱，是很多人日常储藏西瓜的办法。有人认为盖上保鲜膜储藏的西瓜中的细菌种类和数目反而比没用保鲜膜的多。某生物研究小组针对上述说法进行了探究，他们将盖保鲜膜保存了三天的西瓜的瓜瓤制备成浸出液，再将浸出液接种到培养基平板上进行观察。下列说法正确的是（）A．培养基可不加碳源是因为接种的浸出液中含糖B．可采用稀释涂布平板法或平板划线法进行接种C．只需要设置未接种瓜瓤浸出液的空白平板作对照D．培养一段时间后应统计培养基上的菌落的种类和数量【答案】D【解析】A．浸出液虽然含有糖类，但接种是取少量的浸出液，因此可利用的糖含量少，因此培养基中要加入碳源，A错误；B．欲对微生物进行计数，应采用稀释涂布平板法进行接种，因为稀释涂布平板法能使单菌落分离，便于计数，而平板划线法不易分离出单个菌落，B错误；C．探究盖上保鲜膜储藏的西瓜中细菌的种类和数目是否比没用保鲜膜的多，除了需要设置未接种瓜瓤浸出液的空白平板作对照外，还需要设置接种没用保鲜膜盖上的瓜瓤浸出液的平板作对照，C错误；D．由题意可推知该实验的因变量是菌落的种类和数量，所以培养一段时间后应统计培养基上的菌落的种类和数量，D正确。故选D。3．石油污染、农药滥用等因素导致近海沉积物中含有大量有毒害的烃类化合物（碳氢化合物的统称）。研究者从我国东海和南海近海沉积物中筛选和分离出能够降解烃类化合物的菌株，并对这些菌株的降解能力进行了鉴定。下列说法错误的是（）A．东海和南海近海沉积物中含有大量适应不同温度的微生物，有利于筛选菌株B．筛选和鉴定降解菌株时均需使用以相应烃类化合物为唯一碳源的培养基C．可采用稀释涂布平板或平板划线法进行烃类化合物降解菌的纯化培养D．分离得到的烃类化合物降解菌株可接种在液体培养基中于常温下长期保存【答案】D【解析】A．目的菌株的筛选应在该目的菌株适宜生长的环境中筛选，东海和南海近海沉积物中含有大量适应不同温度的微生物，有利于筛选菌株，A正确；B．要想筛选和分离出能够降解烃类化合物的菌株，需要配置以相应烃类化合物为唯一碳源的培养基，在此培养基中只有能够分解烃类化合物的菌株才能生长，B正确；C．菌种纯化的接种方法有稀释涂布平板或平板划线法，C正确；D．对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。在3mL的甘油瓶中，装入1mL甘油后灭菌。将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后，放在-20℃的冷冻箱中保存，D错误。故选D。4．如图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的过程示意图，有关叙述正确的是（）A．在配制步骤②③的培养基时，都应添加琼脂作凝固剂B．步骤③采用涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素C．步骤③纯化分解尿素细菌的原理是将聚集的细菌分散，可以获得单细胞菌落D．步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，分解尿素能力高的会产生更多的NH3，溶液PH更低【答案】C【解析】A．②培养基是液体培养基，不需要添加琼脂，A错误；B．步骤③筛选分解尿素的细菌，培养基中应以尿素为唯一氮源，不能用牛肉膏蛋白胨（含有氮源）培养基，B错误；C．步骤③纯化分解尿素细菌的接种方法是稀释涂布平板法，其原理是通过系列稀释操作将聚集的细菌分散，再通过涂布平板获得由单细胞繁殖而来的菌落，C正确；D．步骤④鉴定细菌分解尿素的能力时，挑取③中不同种的菌落分别接种，分解尿素能力高的会产生更多NH3，溶液PH更高，D错误。故选C。5．野生型大肠杆菌能够在基本培养基中生长，突变菌株A和突变菌株B由于不能自己合成某些营养素，而不能在基本培养基上生长。科学工作者利用菌株A和菌株B进行了如下两个实验。实验一：将菌株A和菌株B混合后，涂布于基本培养基上，结果如图1；实验二：将菌株A和菌株B分别置于U型管的两端，中间由过滤器隔开。加压力或吸力后，培养液可以自由流通，但细菌细胞不能通过。经几小时培养后，将菌液A、B分别涂布于基本培养基上，结果如图2。下列推测错误的是（）A．菌株之间可能发生类似有性杂交的现象B．不同菌株间接触后才可能交换遗传物质C．混合培养的菌株不一定都能在基本培养基上生长D．菌株A和菌株B含有相同的突变基因【答案】D【解析】A．突变菌株A和突变菌株B由于不能自己合成某些营养素而不能在基本培养基上生长。实验一中将菌株A和菌株B混合后，涂布于基本培养基上，基本培养基上有菌落产生；实验二中将菌株A和菌株B分别置于U型管的两端，中间由过滤器隔开，培养液可以自由流通，但细菌细胞不能通过，将菌液A、B分别涂布于基本培养基上，培养基上无菌落产生，综合实验一和二可知，图1培养基上的菌落的产生原因不可能是菌株A、B互相提供营养素产生的，因此推测其可能是A和B混合后产生了新的菌株类型。A正确；B．由图2看出，将菌株A和菌株B分别置于U型管的两端，中间由过滤器隔开，使细菌细胞不能通过，结果培养基上无菌落产生，说明不同菌株间不接触就不能交换遗传物质，而图1中，不同菌株间接触后培养基上出现了菌落，说明不同菌株间接触后才可能交换遗传物质，导致产生变异，B正确；C．据图可知，混合培养液中有可在基本培养基上生长的菌株，但不能说明混合培养的菌株都能在基本培养基上生长，C正确；D．若菌株A和菌株B含有相同的突变基因，则两者不可能产生可在基本培养基上生长的菌株，D错误。故选D。6．通过发酵罐发酵可大规模生产谷氨酸，生产中常用的菌种是好氧的谷氨酸棒状杆菌。下面有关谷氨酸发酵过程的叙述，正确的是（）A．配制的含高浓度营养物质的培养基，会使谷氨酸棒状杆菌大量繁殖B．常用的谷氨酸棒状杆菌为好氧菌，因此培养基中需严格控制溶解氧、通气量等发酵条件C．排出发酵罐中的谷氨酸，不利于谷氨酸的合成和产量的提高D．发酵液的pH呈碱性时，谷氨酸棒状杆菌易形成乙酰谷氨酰胺【答案】B【解析】A．配制的含高浓度营养物质的培养基，会使谷氨酸棒状杆菌失水，进而影响其代谢过程，因此不会使谷氨酸棒状杆菌大量繁殖，A错误；B．常用的谷氨酸棒状杆菌为好氧菌，因此培养基中需严格控制溶解氧、通气量等发酵条件，以保证谷氨酸棒状杆菌代谢正常进行，B正确；C．谷氨酸发酵过程中，当谷氨酸合成量过多时，就会抑制谷氨酸脱氢酶的活性，从而使谷氨酸的合成过程中断，因此需要及时地排出谷氨酸，才可以解除抑制作用，即排出发酵罐中的谷氨酸，有利于谷氨酸的合成和产量的提高，C错误；D．谷氨酸发酵过程中，当发酵液的pH为酸性时，谷氨酸棒状杆菌会产生乙酰谷氨酰胺，D错误。故选B。7．如图是植物组织培养的过程，相关说法错误的是（）A．外植体若是月季的花药，则经培养后获得的植株为单倍体B．过程①一般不需要光照，后续培养中每日需给予适当光照C．外植体若是菊花的根尖组织，培养成的新植株叶片为无色D．过程②和③接种的培养基中植物激素的比例不同，影响细胞分化【答案】C【解析】A．由配子直接发育形成的个体为单倍体，外植体若是月季的花药，则经培养后获得的植株为单倍体，A正确；B．外植体脱分化形成愈伤组织的过程一般不需要光照，愈伤组织再分化可形成胚芽，故后续培养中每日需给予适当光照，以促进胚芽的光合作用，B正确；C．外植体若是菊花的根尖组织，其细胞中虽然没有叶绿体，但其培养成的新植株叶片有叶绿体，因此培养成的新植株叶片为绿色，C错误；C．在组织培养过程中，使用激素的顺序和比例都影响细胞的发育，细胞分裂素与生长素的比值低时有利于根的分化，比值高时有利于芽的分化，故图中②③两个过程培养基中的植物激素的种类和比例不同，D正确。故选C。8．分别将未分化细胞群培养在植物激素X和植物激素Y浓度比不同的培养基中，未分化细胞群的变化情况如图所示。据图分析下列叙述正确的是（）A．植物激素X是生长素B．植物激素Y可诱导芽的生成C．实验所用的未分化细胞群可来自不同种植物D．激素X和Y浓度比为1时细胞不能分化【答案】D【解析】A．在植物组织培养中生长素的主要作用是促进细胞生长、分裂和分化，细胞分裂素的主要作用是促进细胞分裂、诱导芽的形成，二者共同起作用，故植物激素Y是生长素，植物激素X是细胞分裂素，A错误；B．植物激素Y是生长素，可以诱导细胞群分化成根，B错误；C．该实验研究植物激素X和植物激素Y在植物组织培养中的作用，未分化的细胞群应来自同种植物，C错误；D．由图可知，植物激素X与植物激素Y的浓度比为1时，利于愈伤组织的形成，细胞不能分化；比值大于1时，利于细胞群分化出芽；比值小于1时，利于细胞群分化出根，D正确。故选D。9．下列有关植物细胞工程应用的叙述，不正确的是（）A．利用组织培养技术培育脱毒苗，可获得具有抗病毒的新品种B．利用组织培养技术获得人工种子，能保持亲本的优良性状C．利用细胞培养技术获得紫草素，实现了细胞产物的工厂化生产D．利用植物体细胞杂交技术获得“萝卜—甘蓝”植株，克服了不同生物远缘杂交不亲和的障碍【答案】A【解析】A．因为分生组织的病毒极少，甚至没有病毒，所以将分生组织（如根尖、茎尖）进行离体培养能获得脱毒植株，但不能获得抗病毒植株，A错误；B．组织培养技术为无性繁殖，能保持亲本的优良性状，因此利用该技术获得的人工种子，能保持亲本的优良性状，B正确；C．利用细胞培养技术获得紫草素是植物细胞工程的应用，实现了细胞产物的工厂化生产，C正确；D．利用植物体细胞杂交技术获得“萝卜—甘蓝”植株，其重要意义在于克服了不同生物远缘杂交不亲和的障碍，D正确。故选A。10．细胞直接共培养是指将2种或2种以上的细胞接种在同一孔中进行培养，以达到模拟体内不同种类的细胞直接接触来探究它们信息交流方式的目的，具体操作如图。下列分析错误的是（）A．成块的组织中，细胞与细胞靠在一起，在培养前需先将组织块分散成单个细胞B．细胞培养需要对培养液进行灭菌，对所有培养用具进行消毒，以保证无菌无毒的培养环境C．推测第二种细胞会贴壁到无细胞区，两种细胞分裂生长到表面相互接触时停止分裂D．通过检测混合培养液中是否存在信息类物质可初步推测两种细胞间的信息交流方式【答案】B【解析】Ａ．成块的组织中细胞与细胞靠在一起，在培养前需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，将组织块分散成单个细胞后才能进行培养，Ａ正确；Ｂ．细胞培养需要对培养液、培养用具进行灭菌，需要往培养液中添加抗生素防止细菌污染，并定期更换培养液以防止细胞代谢产物造成毒害，Ｂ错误；Ｃ．动物细胞在培养过程中均会出现细胞贴壁和接触抑制的现象，由此推测第二种细胞会贴壁到无细胞区，两种细胞分裂生长到表面相互接触时停止分裂，Ｃ正确；Ｄ．细胞膜表面上可能存在接受邻近细胞信号的受体，以完成细胞间的信息交流，通过检测混合培养液中是否存在信息类物质可初步推测两种细胞间的信息交流方式，Ｄ正确。故选B。11．我国科研人员利用大鼠、小鼠两个远亲物种创造出世界首例异种杂合二倍体胚胎干细胞（AdESCs），过程如下图所示。该细胞可分化成各种杂种体细胞，为研究不同物种性状差异的分子机制提供了模型。相关叙述错误的是（）A．单倍体囊胚1最可能由小鼠的卵母细胞经体外诱导培养获得B．体外培养AdESCs需向培养液中添加动物血清等天然成分C．该项技术突破生殖隔离获得了哺乳动物远亲物种的杂种细胞D．AdESCs的染色体组数与大鼠—小鼠体细胞融合的杂种细胞的相同【答案】D【解析】A．单倍体囊胚1能发育成孤雌单倍体胚胎干细胞，因此单倍体囊胚1最可能是由小鼠的卵母细胞经体外诱导培养获得的，所采用的技术应为早期胚胎培养技术，A正确；B．动物细胞培养过程中，使用的培养液除需含有一些无机盐和有机盐外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分以及动物血清等天然成分，因此体外培养AdESCs需向培养液中添加动物血清等天然成分，B正确；C．由于物种间存在生殖隔离，因此自然情况下哺乳动物远亲物种间的配子往往无法完成受精作用，或者即便能完成也不能发育，该项技术突破生殖隔离获得了哺乳动物远亲物种的杂种细胞，C正确；D．分析可知，该AdESCs是“杂合二倍体胚胎干细胞”，所以体内有2个染色体组，但小鼠—大鼠杂交细胞，是由体细胞融合产生的，因此杂交细胞中通常含有4个染色体组，两者染色体组数不同，D错误。故选D。12．世界第一例体细胞核移植克隆动物“多利”的培育过程如图所示。下列说法错误的是（）A．乳腺细胞应选取传代培养10代以内的细胞，以保证其正常的遗传基础B．卵母细胞去核的过程需保证透明带和卵母细胞质膜功能的完整性C．乳腺细胞核移植到去核卵母细胞需要用显微注射法和细胞融合技术D．克隆羊“多利”的遗传物质全部来自芬兰多赛特白面母绵羊【答案】D【解析】A．由于10代以内的细胞一般能保证正常的二倍体核型，保证了供体细胞正常的遗传基础，因此用于核移植的供体细胞一般都选用10代以内的细胞，A正确；B．卵母细胞去核的过程需保证透明带和卵母细胞质膜功能的完整性，B正确；C．乳腺细胞核移植到去核卵母细胞需要用显微注射法，再用细胞融合技术使供体核进入受体卵母细胞，构建重组胚胎，C正确；D．克隆羊“多利”的核遗传物质全部来自芬兰多赛特白面母绵羊，D错误。故选D。二、选择题：（本题共4小题，每小题4分，共16分。在每小题给出的四个选项中，有的只有一项符合题目要求，有的有多项符合题目要求。全部选对的得4分，选对但不全得的得2分，有选错的得0分）13．如图是食用醋的生产工艺流程。下列表述不正确的是（）A．酒精发酵阶段需要通入无菌空气，这有利于酵母菌的繁殖B．食醋生产工艺流程只存在酵母菌、醋酸菌两种微生物参与C．糖化阶段添加酶制剂可促进淀粉水解产生葡萄糖D．醋酸发酵阶段需要通气的原因是醋酸菌通过有氧呼吸把葡萄糖氧化为醋酸【答案】ABD【解析】A．酒精发酵阶段需要无氧环境，A错误；B．老醋生产流程中，酒精发酵主要是靠酵母菌，醋酸发酵主要是靠醋酸菌，此外还有其他微生物的参与，B错误；C．糖化阶段添加酶制剂可促进淀粉水解产生葡萄糖，C正确；D．醋酸发酵阶段需要通气的原因是醋酸杆菌为好氧菌，在缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸，D错误。故选ABD。14．图甲为利用酵母菌酿制葡萄酒的实验装置，在其他条件相同且适宜的情况下，测得一段时间内装置中相关物质含量的变化如曲线图图乙所示。下列有关叙述，不正确的是（）A．图乙中的曲线①②可分别表示装置甲中O2浓度、酒精浓度的变化B．用装置甲进行果醋发酵时，需同时打开阀A、bC．甲瓶中的葡萄汁装量不要超过D．果酒、果醋所用的菌种都含有线粒体，都能进行有氧呼吸【答案】CD【解析】A．酵母菌起初进行有氧呼吸，不断消耗氧气，因此曲线①表示装置甲中O2浓度的变化，氧气不足或为0时，酵母菌开始进行无氧呼吸，发酵不断产生酒精，因此曲线②表示装置甲中酒精浓度的变化（氧气充足时主要进行有氧呼吸，此时不进行无氧呼吸，故一段时间内没有酒精产生），A正确；B．果醋发酵需要充足的氧气并需要排出产生的二氧化碳，因此用装置甲进行果醋发酵时，需同时打开阀A、b，B正确；C．为避免发酵液溢出，甲瓶中的葡萄汁装量不应超过2/3，C错误；D．参与果醋制作的微生物为醋酸菌，醋酸菌属于原核生物，没有线粒体，D错误。故选CD。15．网传酵素能够减肥、美颜，某同学搜索“水果酵素”得到下面的信息：①酵素本义是酶的别称。②《酵素产品分类导则》中将酵素定义为：以动物、植物、菌类等为原料，经微生物发酵制得的含有特定生物活性的产品。③把水果小块和水按比例放入容器，密封，注意容器内留下20%空间；置于阴凉处6个月后，过滤得到的滤液即为酵素。下列有关叙述不合理的是（）A．酵素中的氨基酸、维生素等是发挥功能的有效成分B．在制作酵素时容器内留下的20%空间有防止发酵液溢出造成杂菌污染的作用C．由于水果酵素富含蛋白酶、脂肪酶，因此酵素被人体吸收后具有减肥功能D．发酵装置在阴凉处放置，需要间隔一定时间放气，后期间隔时间可适当缩短【答案】CD【解析】A．酵素是通过发酵制成的含有特定生物活性的产品，所以酵素中的氨基酸、维生素等，是发挥功能的有效成分，A正确；B．由题可知酵素是通过酵母菌发酵制成的，在制作酵素时容器内留下的20%空间既可保证酵母菌大量繁殖时对氧的需求，又能防止发酵旺盛时发酵液溢出造成杂菌污染，B正确；C．酵素本义是酶的别称，可推测酵素是大分子物质，不能被人体细胞直接吸收，C错误；D．发酵装置放置在阴凉处，需要间隔一定时间放气，后期间隔可适当延长，原因是发酵前期微生物有氧呼吸产生较多CO2，到发酵后期营养物质减少，代谢废物积累，微生物数量减少，其呼吸释放的CO2减少，D错误。故选CD。16．“茎尖脱毒”是少有的可以应用于大多数植物，清除植物体内病毒的最有效的生物技术，但其深层机理一直未被揭示。近来，中国科学技术大学研究发现植物茎尖存在大量干细胞无法被病毒侵染，是因为植物干细胞免疫病毒关键因子——WUSCHEL（WUS）蛋白的作用，机制如图。以下说法正确的是（）A．“茎尖脱毒”诱导愈伤组织的过程需要给予适宜光照B．WUS可能存在于多种植物细胞中C．WUS蛋白抑制了病毒蛋白的合成D．植物茎尖干细胞具有自我更新和分化的潜能【答案】BCD【解析】A．“茎尖脱毒”诱导愈伤组织过程属于脱分化过程，脱分化需要避光处理，A错误；B．据题干信息“植物茎尖存在大量干细胞无法被病毒侵染，是因为植物干细胞免疫病毒关键因子WUS蛋白的作用”可知，WUS可能存在于多种植物细胞中，B正确；C．据题图可知，WUS因子可以抑制病毒蛋白质的合成，进而导致病毒颗粒不能组装，C正确；D．植物茎尖干细胞具有自我更新和分化的潜能，属于全能性较高的细胞，故在植物组织培养过程中是较好的材料，D正确。故选BCD。第Ⅱ卷（非选择题）三、非选择题：（本题包括5小题，共60分）17．某同学发现超市里袋装牛奶的灭菌方式有两种：一种是巴氏灭菌，保质时间短；一种是超高温灭菌，保质时间长。该同学想通过实验的方法验证超高温灭菌的牛奶所含的细菌比巴氏灭菌的牛奶少（不考虑奶牛品种、产地等因素），以下是相关检测实验，回答下列问题：（1）一般来说，培养基中的营养成分应含有__________________________。（写出四种）（2）对培养基进行灭菌的方法是________________，在对培养基进行灭菌后，待培养基冷却至50℃，需要在_____________附近倒平板，平板冷凝后，要将平板__________，这样放置的原因是：__________。（3）待测牛奶在涂布前需进行系列稀释，原因是__________________________。（4）下表为一些实验工具和灭菌方法，涂布牛奶稀释液应选择的工具是_________（填数字），该涂布工具最适合的灭菌方法是_________（填字母）。实验工具灭菌方法A．高温高压灭菌B．火焰均烧C．紫外线照射D．酒精擦拭（5）实验结束后，统计的菌落数目比实际活菌的数目要_________（填“多”或“少”）。（6）实验结果表明，超高温灭菌的牛奶形成的菌落数要比巴氏灭菌的少，从细菌中酶的角度理解，这体现了酶的_________的特性。【答案】（1）碳源、氮源、水和无机盐（2）高压蒸汽灭菌酒精灯火焰倒置防止皿盖冷凝水落入培养基，也可以避免水分过快地挥发。（3）在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物易于分散成单个细胞（4）③B（5）少（6）作用条件比较温和【解析】（1）各种培养基的具体配方不同，一般来说，培养基中的营养成分应含有碳源、氮源、水和无机盐。（2）对培养基的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法；在对培养基进行灭菌后，待培养基冷却至50℃，需要在酒精灯火焰附近倒平板；平板冷凝后，要将平板倒置，防止皿盖冷凝水落入培养基，也可以避免水分过快地挥发。（3）待测牛奶在涂布前需进行系列稀释，原因是在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物易于分散成单个细胞。（4）涂布牛奶稀释液应选择的工具是涂布器，即数字③代表的工具；涂布器、接种针、接种环一般用灼烧灭菌法灭菌，B正确。（5）由于当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此实验结束后，统计的菌落数目比实际活菌的数目要少。（6）超高温灭菌的牛奶形成的菌落数要比巴氏灭菌的少，是由于相比之下巴氏灭菌温度（75℃左右）要明显低于超高温灭菌温度（135℃以上），酶的作用温度更加温和，微生物更容易存活。因此，体现了酶的作用条件比较温和的特性。18．多氯联苯是一种对人体有很大危害的有机物，呈油状液体，污染土壤后很难清除。研究发现部分酵母菌具有分解多氯联苯的作用。为消除这种污染，科研人员计划从受污染的土壤中筛选出能高效分解多氯联苯的菌株。（1）筛选分解多氯联苯的菌株时，应将土壤样品_____________，接种到以__________为唯一碳源的培养基上，从功能上讲，该培养基属___________。（2）微生物的纯化培养操作方法有两种，如图是_________法。该操作方法在做第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？___________。（3）若要测定培养液酵母菌的菌体数，可在显微镜下直接计数。若用___________法统计菌落数，在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板进行培养一段时间，这样做的目的是_____________。（4）将1mL酵母菌溶液稀释100倍，在3个平板上用稀释涂布平板法分别接入0.1mL稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、57、58，据此可得出每升溶液中酵母菌活菌数为_____个/L。【答案】（1）稀释多氯联苯选择培养基（2）平板划线法将聚集的菌体逐渐稀释（分散）以便获得单个菌落（3）稀释涂布平板法检验培养基灭菌是否成功（平板是否感染杂菌或是否彻底灭菌）（4）5.7×107【解析】（1）筛选分解多氯联苯的菌株时，应将土壤样品进行梯度稀释，接种到以多氯联苯为唯一碳源的培养基上；只有能分解多氯联苯的菌株才能在这样的培养基中生存，因此从功能上讲，该培养基属于选择培养基。（2）对初步提取到的菌株要进行分离纯化，一般操作方法有两种，即平板划线法和稀释涂布平板法，图示是利用平板划线法进行微生物接种。因划线后线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，这样就能将聚集的菌体逐渐稀释（分散）以便获得单个菌落。因此，在做第二次以及其后的划线操作时，总是从上一次划线的末端开始划线。（3）若要测定培养液酵母菌的菌体数，可在显微镜下用血细胞计数板直接计数。若用稀释涂布平板法统计菌落数，在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板进行培养一段时间，这样做的目的是检验培养基平板灭菌是否成功。（4）由题意知1mL水样中的菌落数是（56＋57＋58）÷3÷0.1×100=5.7×104个，每升水样中的活菌数为5.7×104×103=5.7×107个。19．中国科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H，以糖蜜（甘蔗榨糖后的废弃液，含较多蔗糖）为原料，在实验室发酵生产PHA等新型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的整体利用价值。工艺流程如图。回答下列问题：（1）为提高菌株H对蔗糖的耐受能力和利用效率，可在液体培养基中将蔗糖作为______，并不断提高其浓度，经多次传代培养（指培养一段时间后，将部分培养物转入新配的培养基中继续培养）以获得目标菌株。培养过程中定期取样并用______的方法进行菌落计数，评估菌株增殖状况。此外，选育优良菌株的方法还有______（答出两种方法即可）等。（2）基于菌株H嗜盐、酸碱耐受能力强等特性，研究人员设计了一种不需要灭菌的发酵系统，其培养基盐浓度设为60g/L，PH为10，菌株H可正常持续发酵60d以上。该系统不需要灭菌的原因是__________________（答出两点即可）。（3）研究人员在工厂进行扩大培养，在适宜的营养物浓度、温度、PH条件下发酵，结果发现发酵液中菌株H细胞增殖和PHA产量均未达到预期，并产生了少量乙醇等物质，这说明发酵条件中，______可能是高密度培养的限制因素。发酵工程的中心环节是______。（4）菌株H还能通过分解餐厨垃圾（主要含蛋白质、淀粉、油脂等）来生产PHA，说明其能分泌______________。【答案】（1）唯一碳源稀释涂布平板法诱变育种、基因工程育种（2）盐浓度为60g/L的条件下，其他杂菌会因失水过多而死亡；pH为10的条件下，其他杂菌的酶会变性失活，生长繁殖会受抑制（3）氧气（O2或溶解氧）发酵罐内发酵（4）蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等【解析】（1）根据题意分析，该实验的目的是提高菌株H对蔗糖的耐受能力和利用效率，结合微生物的代谢需求，其液体培养基应该以蔗糖作为唯一碳源。并不断提高其浓度，经多次传代培养可筛选出目标菌株；稀释涂布平板法可以通过系列稀释和涂布平板最终获得由单个细胞繁殖来的菌落，因此培养过程中可定期取样并用稀释涂布平板法将菌液接种到固体培养基上，待形成菌落后进行菌落计数，评估菌株增殖状况；此外，选育优良菌株的方法还有诱变育种（利用物理或化学方法诱变处理，从中筛选优良菌株）、基因工程育种（利用转基因技术将优良基因导入受体细胞，定向改造菌株性状）等。（2）已知菌株H具有嗜盐、酸碱耐受能力强等特性，因此当培养基的盐浓度为60g/L，pH为10时，菌株H可正常持续发酵60d以上，而盐浓度为60g/L的条件下，其他杂菌因会失水过多而死亡；PH为10的条件下，其他杂菌的酶会变性失活，生长繁殖会受抑制，故该系统不需要灭菌。（3）分析题意，扩大培养时，营养物浓度、温度、PH等条件适宜，而发酵液中菌株H的细胞增殖和PHA产量均未达到预期，并产生了少量乙醇等物质，说明发酵过程中氧气不足，使菌种进行了无氧呼吸，产生乙醇，即氧气（O2或溶解氧）是限制高密度培养的重要因素；发酵工程一般包括菌种选育、扩大培养、培养基的配置、灭菌、接种、发酵、产品的分离和提纯等，其中心环节是发酵罐内发酵。（4）根据酶具有专一性特点可知，菌株H之所以能通过分解主要含蛋白质、淀粉、油脂等的餐厨垃圾来生产PHA，说明其能分泌蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等。20．狼爪瓦松是一种具有观赏价值的野生花卉，其生产的黄酮类化合物可入药。狼爪瓦松野生资源有限，难以满足市场化需求。因此，目前一般通过植物细胞工程手段进行培养，具体过程如图所示，其中的数字序号代表处理或生理过程。（1）狼爪瓦松植株乙、丙、丁的获得都利用了_______技术，三种植株中，核遗传物质与甲相同的是_______。（2）①选择幼嫩的叶用于接种的原因是_______，启动②③的关键激素是_______。（3）⑤需要用________处理，原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇，请从细胞吸水与失水的角度分析原因_______。（4）正常愈伤组织中几乎没有黄酮类化合物，加入茉莉酸甲酯和水杨酸会明显促进愈伤组织中黄酮类化合物的积累，且细胞中与黄酮类化合物合成相关酶的含量显著升高，从基因控制生物性状的角度推测，茉莉酸甲酯和水杨酸的作用途径是______________。【答案】（1）植物组织培养乙、丁

（2）幼嫩的叶分裂能力强，分化程度低生长素和细胞分裂素

（3）纤维素酶、果胶酶维持细胞膜内外渗透压平衡（防止原生质体皱缩或破裂）（4）茉莉酸甲酯和水杨酸诱导了细胞内与黄酮类化合物合成相关酶的基因的表达，使酶含量升高，催化生成更多的黄酮类化合物【解析】（1）狼爪瓦松植株乙、丙、丁的获得都经过了在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的