新教材高中生物选择性必修3课件：1 2 2 微生物的选择培养和计数(人教版)

第2课时微生物的选择培养和计数知识点1知识点2课时作业随堂检测///////1245/////////////////////网络构建·晨读必背3///////选择培养基和微生物的选择培养1联想质疑自主梳理1.选择培养基允许抑制阻止目的菌抑制阻止脲酶尿素提醒：有些微生物可以利用其他微生物的代谢产物生长繁殖，因此能在选择培养基上生长的微生物不一定都是所需的微生物，还需进一步验证。2.微生物的选择培养——稀释涂布平板法900.1酒精酒精燃尽冷却吸收恒温培养箱单菌落两种接种方法的比较项目平板划线法稀释涂布平板法用途一般用于菌种的纯化一般用于筛选菌株优点可对混合菌进行分离可以计数缺点不能计数操作复杂，若平板不干燥，则效果不好；若菌液浓度大，则长不出单菌落培养结果(1)筛选分解尿素的细菌的培养基以尿素为唯一氮源，且为液体培养基。()提示：选择培养基一般为固体培养基。(2)能分解尿素的细菌之所以能分解尿素，是因为其能产生脲酶。()(3)稀释涂布平板法能分离细菌，也能计数(

)(4)平板划线法不仅能纯化细菌，也能计数(

)×√√×[典型例题]

(2021·陕西汉中模拟)利用稀释涂布平板法纯化的大肠杆菌，经培养后发现培养基上出现了多种菌落，不可能的原因是(

) A.培养基制备过程中被杂菌污染 B.接种过程中，无菌操作不符合要求 C.系列稀释时，无菌操作不符合要求 D.使用涂布器时涂布不均匀

解析出现杂菌污染的原因可能有培养基制备过程中被杂菌污染；接种过程中，无菌操作不符合要求；系列稀释时，无菌操作不符合要求等，A、B、C不符合题意；使用涂布器时涂布不均匀会导致菌落分布比较集中，不会导致杂菌污染，D符合题意。D[变式训练]

某学者欲研究被石油污染过的土壤中的细菌数并从中筛选出能分解石油的细菌。下列有关操作错误的是(

) A.利用平板划线法对细菌进行计数 B.利用以石油为唯一碳源的培养基筛选能分解石油的细菌 C.采用稀释涂布平板法分离菌种 D.称取土壤和稀释土壤溶液时应在酒精灯火焰旁操作

解析平板划线法能对细菌分离纯化但不能计数，通常将被石油污染过的土壤浸出液稀释后，采用稀释涂布平板法分离分解石油的细菌菌种，并对菌种进行计数，A错误，C正确；筛选能分解石油的细菌只能利用以石油为唯一碳源的选择培养基，B正确；称取土壤和稀释土壤溶液过程中的每一步都要在酒精灯火焰旁操作，D正确。A尿素为该培养基的唯一氮源，只有能产生脲酶的微生物才能将尿素分解为氨供自身利用，其他微生物由于缺少氮源而无法生长繁殖。

如何进一步鉴定选择培养基上的菌落是分解尿素的细菌？提示：在培养基中添加酚红指示剂，培养基变红则可以初步鉴定为分解尿素的细菌。要设置空白对照实验，且一定要涂布至少3个平板作为重复组，才能增强实验的说服力与准确性。

1.铲取土样的铁铲和纸袋是否也需要灭菌？为什么？提示：需要，因为也会造成杂菌污染，影响实验结果。2.对接种环和涂布器进行灼烧灭菌，在操作上有何区别？提示：接种环灭菌时，应将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环的金属丝烧红；涂布器灭菌时，应先将涂布器浸在酒精中，再放在火焰上灼烧，直到酒精燃尽。微生物的数量测定2联想质疑自主梳理素养提升1.微生物数量测定的基本方法一活菌30～300平均值少菌落细菌计数板血细胞计数板显微镜活菌死菌快速直观2.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数(1)实验原理：绝大多数微生物都能利用葡萄糖，但是只有能合成______的微生物才能分解尿素。利用以______作为唯一氮源的选择培养基，可以从土壤中分离出分解尿素的细菌。脲酶尿素(2)方法步骤中性3～81×1041×1051×1061×103～1×10730～30030～37菌落数目稳定特征(1)从土壤中取样时，土层越浅越好()(2)来自土壤的微生物稀释倍数越大越好(

)(3)测定不同微生物数量时，接种的土壤悬浮液的稀释度相同(

)(4)菌落特征是鉴别菌种的重要依据()(5)利用显微镜直接计数法统计的细菌数量就是活菌的数量()×××√×科学探究——土壤中分解尿素的细菌的分离与计数甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数。在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下两种统计结果。(1)甲同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为230，该同学的统计结果是否真实可靠？为什么？提示不真实可靠。为增加实验的说服力与准确性，应设置重复实验，在同一稀释度下至少涂布3个平板，统计结果后计算平均值。(2)乙同学在该浓度下涂布了3个平板，统计的菌落数分别为21、212、256，该同学将21舍去，然后取平均值。该同学对实验结果的处理是否合理？为什么？提示不合理。微生物计数时，如果实验中出现重复实验的结果差别很大的情况，应分析实验过程中可能的影响因素，找出差异的原因，而不能简单地将结果舍弃后进行计数。(3)某同学在三种稀释度下吸取0.1mL的菌液涂布平板，统计菌落数，得到以下的数据，试计算1g样品的活菌数。提示

105的稀释度下取0.1mL的菌液涂布的三个平板上的菌落数在30～300之间，计算其平均值为(212＋234＋287)/3≈244。进一步可以换算出1g样品中活菌数为(244÷0.1)×105＝2.44×108(个)。(4)为什么统计的菌落数比活菌的实际数目低？提示当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。微生物筛选过程中必要的两种对照培养基及其作用[典型例题1]

(2021·四川绵阳期末)某同学将1mL土壤样液稀释100倍，在3个平板上用稀释涂布平板法分别接入0.1mL稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、57和58。下列叙述错误的是(

) A.可得出土壤样液中活菌大约为5.7×107个/L B.此方法统计的菌落数往往比实际的活菌数目低 C.一般选择菌落数为30～300的平板进行计数 D.显微镜直接计数法统计的是稀释液中的活菌数D解析将1mL样品稀释100倍，在3个平板上分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、57和58，据此可得出每升样品中的活菌数为(56＋57＋58)÷3÷0.1×1000×100＝5.7×107，A正确；由于两个或多个细胞连在一起时，在平板上观察到的只是一个菌落，所以统计的菌落数往往比实际的活菌数目低，B正确；为保证结果准确，一般选择菌落数为30～300的平板进行计数，C正确；显微镜直接计数法统计的是稀释液中所有菌体的数目，包括活菌和死菌，D错误。[典型例题2]

(2021·山东淄博月考)下列关于土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的叙述.正确的是(

) A.只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素 B.统计样品中的活菌数目一般用平板划线法 C.筛选分解尿素的细菌时，应以尿素作为培养基中唯一的营养物质 D.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变蓝，则表明筛选到了分解尿素的细菌

解析统计样品中的活菌数目时一般用稀释涂布平板法，B错误；筛选分解尿素的细菌时应以尿素作为培养基中的唯一氮源，培养基中还应含有水、无机盐、碳源等营养物质，C错误；在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，则表明筛选到了分解尿素的细菌，D错误。A[变式训练]

(2021·襄阳五中调研)下列关于“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验操作的叙述，错误的是(

) A.利用稀释涂布平板法准确估计菌落数目的关键是有恰当的稀释度 B.若要判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置未接种的牛肉膏蛋白胨培养基作为对照 C.该实验应采用稀释涂布平板法 D.用以尿素为唯一氮源且添加了酸碱缓冲剂的培养基来培养该细菌后不会使酚红指示剂变红B解析利用稀释涂布平板法估算菌落数目的关键是有恰当的稀释度，若稀释倍数太低，菌落太多，会长在一起，稀释倍数太高，平板上菌落数目过少，都不宜进行计数，A正确；若要判断选择培养基是否起到了选择作用，需设置接种在没有选择作用的牛肉膏蛋白胨培养基上培养作为对照，B错误；因要对细菌进行计数，所以该实验应采用稀释涂布平板法，C正确；分解尿素的细菌能合成脲酶，将尿素分解产生氨，使培养基的碱性增强，用以尿素为唯一氮源且添加了酸碱缓冲剂的培养基来培养该细菌，则能维持pH稳定，不会使酚红指示剂变红，D正确。显微镜直接计数法本身不能区分细菌的死活，因此一般用来统计总菌数。但是，通过一定的辅助处理，可以实现活菌计数，如在计数前用台盼蓝染液进行染色，可以通过统计无色细胞的个数来对活菌进行计数。

1.为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？提示：土壤中各种微生物的数量是不同的，为获得不同类型的微生物，就需要按不同的稀释度进行分离。2.应如何设置对照，判断选择培养基是否起到了选择作用？提示：在全营养培养基上接种。3.用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时，为什么通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中的活菌数？

提示：当样品稀释度足够高时，平板上的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌。(1)样品稀释液的最佳浓度为培养后每个平板上有30～300个菌落的浓度。细菌一般选用104、105、106倍的稀释液进行培养。(2)为排除非测试因素(培养基)的干扰，实验需设置不接种的全营养培养基进行空白对照。(3)每一稀释倍数的菌液都至少要涂布3个平板，作为重复实验，求其平均值，若其中有菌落数与其他平板差别很大的，则需要重新实验。

(1)分解尿素的细菌能够合成脲酶，脲酶可将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高。因此，在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，培养分解尿素的细菌时，培养基出现红色。(2)在含有纤维素的培养基中加入刚果红，刚果红与纤维素形成红色复合物；而当纤维素被纤维素分解菌分解后，复合物就无法形成，培养基中会出现以这些细菌为中心的透明圈。网络构建·晨读必背3思维导图特定种类稀释涂布晨读必背1.在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。2.一些细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶，脲酶能催化尿素分解产生NH3，NH3可作为这些细菌的氮源。3.当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少个细菌。4.为了保证结果准确，一般选择菌落数为30～300的平板进行计数；在同一稀释度下，应至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值。随堂检测41.分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是(

) ①加尿素②不加尿素③加琼脂④不加琼脂⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦加硝酸盐⑧不加硝酸盐 A.①③⑤⑦ B.②④⑥⑧ C.①③⑤⑧ D.①④⑥⑦

解析要分离土壤中分解尿素的细菌，培养基中尿素应是唯一的氮源，不能加硝酸盐；在固体培养基上形成菌落，要加琼脂作凝固剂；分解尿素的细菌是异养生物，要加有机碳源(如葡萄糖)。C2.下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是(

)A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板B.取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL，分别涂布于各组平板上C.将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24～48hD.确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数解析检测细菌总数，用蒸馏水配制培养基，常用高压蒸汽灭菌法灭菌后，取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL，分别涂布于各组平板上，将实验组和对照组放置在适宜条件下培养，在确定对照组无菌后，选择菌落在30～300的平板为代表进行计数，D错误。D3.(2021·青岛二中期末)在涂布有大肠杆菌的培养基上进行抑菌实验，在a、b、c处分别贴浸有不同抗生素(浓度相同)的无菌滤纸片，d处滤纸片浸有无菌水。培养后的结果如图。以下判断错误的是(

)

A.a处抑菌效果小于b处

B.b处的滤纸片没有沥干 C.c处抗生素无效

D.d为对照

解析a与b形成的透明圈大小相近，因此a、b处抑菌效果相似，A错误；b处透明圈不规则，可说明b处的滤纸片没有沥干，B正确；c处的与d处相同，说明c处抗生素无效，C正确；d处用浸有无菌水的滤纸片，作为对照组，D正确。A4.(2021·湖北仙桃期末改编)如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。请据图分析，下列说法错误的是(

)AA.③号试管的稀释倍数为103B.④号试管中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数可能为⑤号试管的10倍C.⑤号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×109D.将涂布器在酒精灯火焰上灼烧冷却后，再进行涂布解析③号试管的稀释倍数是104，A错误；④号试管中稀释液进行平板培养，稀释倍数是⑤号试管的1/10，如果稀释倍数适当，得到的菌落平均数可能是⑤号试管的10倍，B正确；⑤号试管利用稀释涂布平板法计数的结果表明每克土壤中的菌株数为(168＋175＋167)÷3÷0.1×106＝1.7×109，C正确；将涂布器在酒精灯火焰上灼烧冷却后再进行涂布，以免温度过高杀死细菌，D正确。5.(2017·全国Ⅰ卷)某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。回答下列问题： (1)有些细菌能分解尿素，有些细菌则不能，原因是前者能产生___________。能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源，原因是___________________________________________________________________ _______________________________________________________________，

但可用葡萄糖作为碳源，进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是____________ ___________________________________________________(答出两点即可)。(2)为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培养基时，应选择________(填“尿素”、“NH4NO3”或“尿素＋NH4NO3”)作为氮源，不选择其他两组的原因是_______________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有______________________________________________________________________________________________________________________(答出两点即可)。答案(1)脲酶分解尿素的细菌是异养生物，不能利用CO2来合成有机物为细胞生命活动提供能量，为其他有机物的合成提供原料(2)尿素其他两组都含有NH4NO3，能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3，不能起到筛选作用(3)为细菌生长提供无机盐离子，作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定解析(1)只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。能分解尿素的细菌是一种分解者，属于异养型生物，不能以尿素的分解产物CO2作为碳源。能分解尿素的细菌可以以葡萄糖作为碳源，进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是：一方面可氧化分解为细胞生命活动提供能量，另一方面其代谢中间产物可为多种有机物的合成提供原料。(2)为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培养基时，应选择以尿素作为唯一氮源的选择培养基，而其他两组都含有含氮物质NH4NO3，能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3，不能起到筛选作用。(3)用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用：KH2PO4和Na2HPO4构成缓冲对，可维持培养基的pH相对稳定；KH2PO4和Na2HPO4能为微生物生长提供无机盐。课时作业5知识点1选择培养基1.(2021·江西九江联考)最常用的接种微生物的方法是平板划线法和稀释涂布平板法，下列关于二者的比较，正确的是(

)A

平板划线法稀释涂布平板法①需在无菌条件下操作不需无菌操作②培养基中不加琼脂培养基中加有琼脂③不可计算菌液中的活菌数可计算菌液中的活菌数④需要接种环需要涂布器A.③④ B.②④

C.①④ D.②③解析两种方法都需要在无菌条件下操作，①错误；两种方法都需要配制固体培养基，均需要添加琼脂，②错误；平板划线法不能对菌落进行计数，稀释涂布平板法能进行活菌计数，③正确；平板划线法的接种工具是接种环，稀释涂布平板法的接种工具是涂布器，④正确，A符合题意。2.(2021·山东菏泽调研)在筛选纤维素分解菌的培养基中加入刚果红染料，研究者观察到几个有透明圈的菌落。据图分析正确的是(

) A.透明圈内的刚果红染料已被分解 B.菌落②中的菌株降解纤维素能力最强 C.图中菌落可能是细菌也可能是真菌 D.图中培养基可用牛肉膏、蛋白胨配制

解析根据分析可知，透明圈不显红色的原因是其中的纤维素已被分解，A错误；菌落①形成的透明圈直径与菌落直径之比最大，说明菌落①降解纤维素能力最强，B错误；根据题干信息不能判断图中菌落的微生物类型，可能是细菌也可能是真菌，C正确；图中培养基应以纤维素为唯一碳源，不可用牛肉膏、蛋白胨配制，D错误。C3.(2021·北京高二期末)禾草灵(FE)是一种现代农业常用除草剂，大量使用后造成的环境污染日益严重，为获得能高效降解FE的菌株，科学家通过实验获得W1菌株并利用紫外分光光度计检测其对FE的降解效果(FE特征吸收峰在239nm处)，以下说法不正确的是(

)BA.应从大量使用FE的土壤中获取菌株B.将土壤稀释液灭菌后接种到选择性培养基上C.应使用以FE作为唯一碳源的培养基进行筛选D.据吸收光谱可知，W1菌株对FE有明显降解能力解析由于只有被除草剂严重污染过的土壤才可能含有高效降解该除草剂的分解菌，所以为了获取能高效降解该除草剂的菌株，应从大量使用FE的土壤采集土壤样品，A正确；土壤稀释液中含有能高效降解FE的菌株，若灭菌将无法得到目的菌株，B错误；为获得能高效降解FE的菌株，培养基应以FE作为唯一碳源，这样才能抑制或淘汰不能分解FE的微生物，C正确；据吸收光谱可知，经W1菌株降解后在239nm处的特征吸收峰明显减弱，说明W1菌株对FE有明显降解能力，D正确。知识点2微生物的选择培养4.(2021·山东青岛期末)筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳

源的培养基。接种培养后，若细菌能分解淀粉，培养平板

经稀碘液处理，会出现以菌落为中心的透明圈(如图)，实验

结果见下表。菌种菌落直径：C(mm)透明圈直径：H(mm)H/C细菌Ⅰ5.111.22.2细菌Ⅱ8.113.01.6有关本实验的叙述，错误的是(

)A.培养基除淀粉外还含有氮源等其他营养物质B.筛选分解淀粉的细菌时，菌液应稀释后涂布C.以上两种细菌均不能将淀粉酶分泌至细胞外D.H/C值反映了两种细菌分解淀粉能力的差异解析培养基一般含有碳源、氮源、水、无机盐和生长因子等成分，A正确；筛选淀粉分解菌时，需要对菌液进行一系列的梯度稀释，再将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基上进行培养，B正确；由题意可知，以上两种菌均会产生透明圈，说明两种菌均可以产生淀粉酶并分泌到细胞外分解淀粉，C错误；淀粉分解菌的H/C越大，说明其产生的淀粉酶分解的淀粉相对越多，可说明该淀粉分解菌分解淀粉的能力越强，D正确。C5.(2021·山东菏泽期末)有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学打算从受原油污染的土壤中筛选高效降解原油的菌株，下列有关做法错误的是(

) A.纯化菌种时，为了得到单菌落，只能采用平板划线法 B.无菌技术要求实验操作应在酒精灯火焰附近进行，以避免周围环境中微生物的污染 C.在筛选过程中应选用选择培养基，即将土壤样品稀释液接种到以原油为唯一碳源的固体培养基上 D.在微生物培养过程中，实验室常用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌A解析纯化菌种时，为了得到单菌落，可采用平板划线法和稀释涂布平板法，A错误；无菌技术要求实验操作应在酒精灯火焰附近进行，以避免周围环境中微生物的污染，B正确；在筛选过程中应选用选择培养基，即将土壤样品稀释液接种到以原油为唯一碳源的固体培养基上，从而提高该菌的筛选率，C正确；在微生物培养过程中，实验室常用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌，D正确。6.(2021·河南名校联盟)用稀释涂布平板法来统计样品中尿素分解菌的数目，为了提高实验结果的可信度，往往要设置对照实验，对于对照组的要求不包括(

) A.对照组培养基也严格灭菌，且不接种任何微生物 B.倒平板时，培养基的用量与实验组必须完全相同 C.所用培养基成分及pH大小与实验组保持一致 D.对照组和实验组均放在相同且适宜的条件下培养

解析对照组培养基也要严格灭菌，且不接种任何微生物，为空白对照，A不符合题意；进行倒平板时对照组培养基用量的大小与实验组不一定绝对相同，且对实验结果无影响，B符合题意；pH为无关变量，因此对照组所用培养基的成分及pH应与实验组完全一致，C不符合题意；对照组和实验组的培养基都要置于相同条件下培养，以保证单一变量，D不符合题意。BB知识点3微生物的计数7.(2021·河北邢台期末)下列有关土壤中分解尿素的细菌的分离和计数的实验操作，错误的是(

) A.取土壤用的小铁铲和盛土样的信封在使用前都需要灭菌 B.测定土壤中细菌的数量一般选用1×102、1×103、1×104倍的稀释液进行平板培养 C.鉴定分解尿素的细菌，利用了尿素可被分解产生氨，从而使培养基pH升高的原理 D.每隔24h统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果解析取土壤用的小铁铲和盛土样的信封在使用前都需要灭菌，A正确；土壤中细菌比真菌多，在测定土壤中细菌的数量时，一般选用1×104、1×105和1×106倍的稀释液进行平板培养，B错误；鉴定分解尿素的细菌的原理是该种细菌能产生脲酶，脲酶能将尿素分解产生氨，从而使培养基pH升高，使酚红指示剂变红，C正确；为防止遗漏菌落，应选取菌落数目稳定时的记录作为结果，D正确。8.(2021·山东淄博月考)某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验，包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察与计数。下列与此实验相关问题的叙述，正确的是(

) A.实验用过的带菌培养基经过加热后才能倒掉 B.可利用平板划线法对细菌进行分离纯化并计数 C.培养基中含有的蛋白胨主要为细菌培养提供氮源和维生素等 D.观察细菌培养的实验时，最好是在另一平板上接种清水作为对照实验

解析带菌的培养基经高压蒸汽灭菌后才能倒掉，以免污染环境，加热不能达到灭菌的目的，A错误；利用稀释涂布平板法对细菌进行分离纯化并计数，平板划线法不能用于细菌的计数，B错误；培养基中含有的蛋白胨主要为细菌培养提供了氮源和维生素等，C正确；要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种无菌水作为对照进行实验，D错误。C9.(2021·河北省张家口一中期初)下列有关土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验的叙述，正确的是(

) A.实验中采集的土样经高温灭菌后，可以用于制取土壤稀释液 B.分离土壤中能分解尿素的细菌时，应选择以尿素为唯一氮源的培养基 C.测定土壤样品中的活菌数目，常用显微镜直接计数法 D.接种土壤微生物稀释液时，平板划线法通过连续划线的操作使微生物均匀分布B解析在分离土壤中的尿素分解菌实验中，采集的土样经高温灭菌后，土样中的微生物被杀死，再制取土壤稀释液接种并培养，不会得到菌落，A错误；分离土壤中能分解尿素的细菌时，应选择以尿素为唯一氮源的培养基，只有能利用尿素的细菌才能生长繁殖，B正确；测定土壤样品中的活菌数目，常用稀释涂布平板法，显微镜直接计数法是将活菌和死菌一同计数，C错误；接种土壤微生物稀释液时，稀释涂布平板法的操作使微生物均匀分布，D错误。10.(2021·中原名校联考)研究人员从土壤中筛选得到酵母菌纤维素酶高产菌株，并对其降解纤维素的条件进行了研究。据图分析正确的是(

)BA.筛选该高产菌株需要在牛肉膏蛋白胨培养基中添加纤维素B.探究最适温度时应尽可能将发酵液的pH控制在9左右C.该酵母菌高产菌株产生纤维素酶的最适温度是35℃D.利用该高产菌株降解纤维素时需严格保持厌氧环境解析要筛选酵母菌纤维素酶高产菌株应在以纤维素为唯一碳源的培养基培养，A错误；探究该酶的最适温度时，pH为无关变量，应控制在最适pH，即将发酵液的pH控制在9左右，B正确；由于图中随着温度的升高，纤维素酶活性逐渐增高，还没有到达顶点，故35℃不一定是其最适温度，C错误；酵母菌属于兼性厌氧型生物，既能进行有氧呼吸，也能进行无氧呼吸，故利用该高产菌株降解纤维素时不需严格保持厌氧环境，D错误。11.(2021·广东东莞调研)S型菌有荚膜且具有毒性，R型菌无荚膜也无毒性，二者对青霉素敏感。已知在多代培养的S型菌中存在能抗青霉素的突变型(记为PenrS型，且对青霉素的抗性不是荚膜产生的)。现用PenrS型菌和R型菌进行如图所示实验，下列分析最合理的是(

)DA.甲组中部分小鼠患败血症，可用青霉素治疗B.乙组中加入青霉素后有两种菌落继续生长C.丙组培养基中生长的菌落是PenrS型菌D.甲组小鼠体内分离的菌接种到含青霉素的培养基上只能产生一种菌落解析甲组中部分R型菌可转化为PenrS型菌，使部分小鼠患败血症，由于PenrS型菌能抗青霉素，故不可注射青霉素治疗，A错误；乙组中可观察到两种菌落，加青霉素后只有被PenrS型的DNA转化的R型菌的菌落能继续生长，B错误；丙组培养基中含有青霉素，R型菌不能生长也不能发生转化，所以不会出现菌落，C错误；甲组小鼠体内分离的菌为PenrS型菌和R型菌，由于R型菌对青霉素敏感，PenrS型菌抗青霉素，所以将分离的菌接种到含青霉素的培养基上只能产生一种菌落，D正确。12.(2018·全国卷Ⅰ，37)将马铃薯去皮切块，加水煮沸一定时间，过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂，用水定容后灭菌，得到M培养基。

回答下列问题： (1)M培养基若用于真菌的筛选，则培养基中应加入链霉素以抑制________的生长，加入了链霉素的培养基属于________培养基。 (2)M培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质，营养物质类型除氮源外还有____________(答出两点即可)。氮源进入细胞后，可参与合成的生物大分子有____________(答出两点即可)。(3)若在M培养基中用淀粉取代蔗糖，接种土壤滤液并培养，平板上长出菌落后可通过加入显色剂筛选出能产淀粉酶的微生物。加入的显色剂是________，该方法能筛选出产淀粉酶微生物的原理是_______________________________________________________________________________________________。(4)甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量，在同一稀释倍数下得到以下结果：甲同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是110、140和149，取平均值133；乙同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是27、169和176，取平均值124。有人认为这两位同学的结果中，乙同学的结果可信度低，其原因是___________________________________________________________________________________________________________________________________。答案(1)细菌选择(2)碳源、无机盐蛋白质、核酸(3)碘液淀粉遇碘液显蓝色，产淀粉酶的菌落周围淀粉被水解，形成透明圈(4)乙同学的结果中，1个平板的计数结果与另2个相差悬殊，结果的重复性差解析(1)在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。若M培养基是用于真菌的筛选，则应加入链霉素以抑制细菌的生长，其属于选择培养基。(2)马铃薯浸出液中含有淀粉、蛋白质、脂质、无机盐、水等多种物质，因此，除氮源外其中还有微生物生长所需要的碳源、无机盐