新教材高中生物选择性必修3第3章 基因工程：单元检测卷(三)(人教版)

单元检测卷(三)(时间：90分钟满分：100分)一、选择题：本题共20小题，第1～10小题每小题2分，第11～20小题每小题3分，共50分。每小题给出的四个选项中，只有一个选项是最符合题目要求的。1.(2021·洛阳一中高二期末)下图表示一项重要的生物技术，对图中物质a、b、c、d的描述，正确的是(

)AA.通常情况下，a与d需要用同一种限制酶进行切割B.b能识别特定的核苷酸序列，并将A与T之间的氢键切开C.c连接双链间的A和T，使黏性末端处碱基互补配对D.b代表的是限制性内切核酸酶，c代表的是RNA聚合酶解析b是限制性内切核酸酶，能识别特定的核苷酸序列并使DNA分子的每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，而不是使氢键断开，B错误；c是DNA连接酶，能连接两个DNA片段，C、D错误。2.(2021·北京海淀区模拟)科研人员利用农杆菌转化法将抗病毒蛋白基因C导入番木瓜，培育出转基因抗病毒番木瓜，Ti质粒结构模式图如图所示。下列叙述正确的是(

)AA.农杆菌的T－DNA与番木瓜基因发生重组B.构建重组质粒需要限制酶和DNA聚合酶C.含重组Ti质粒的农杆菌具有四环素抗性D.转基因抗病番木瓜不具有卡那霉素抗性解析构建重组质粒需要限制酶和DNA连接酶，B错误；抗病毒蛋白基因C的插入位点位于四环素抗性基因内部，插入抗病毒蛋白基因C后，重组Ti质粒的四环素抗性基因被破坏，含重组Ti质粒的农杆菌不具有四环素抗性，C错误；转基因抗病番木瓜含有卡那霉素抗性基因，故转基因抗病番木瓜具有卡那霉素抗性，D错误。3.(2021·江苏盐城期中)下列关于高中生物实验的叙述，正确的是(

)A.鉴定DNA时，将析出的丝状物与二苯胺试剂混合后进行沸水浴观察颜色变化B.洋葱鳞片叶内表皮作为实验材料无法观察到植物细胞的质壁分离与复原C.使用高倍显微镜观察线粒体、叶绿体的实验中，转换高倍镜后应缩小光圈D.脂肪鉴定实验必须使用显微镜才能观察到细胞内被染成橘黄色或红色的脂肪颗粒D解析鉴定DNA时，需将析出的丝状物(DNA)溶解在2mol/L的NaCl溶液中后再与二苯胺试剂混合并进行沸水浴加热，A错误；洋葱鳞片叶内表皮细胞为成熟的植物细胞，因此以洋葱鳞片叶内表皮作为实验材料能够观察到植物细胞的质壁分离与复原，B错误；高倍显微镜下的视野较低倍显微镜下的暗，使用高倍显微镜观察线粒体、叶绿体的实验中，转换高倍镜后应增大光圈，以增加进光量，C错误；脂肪鉴定实验，若观察细胞内被染成橘黄色的脂肪颗粒，则必须制作子叶临时切片，用显微镜观察子叶细胞的着色情况，D正确。4.(2021·福建莆田期中)以下有关蛋白质工程的叙述，不正确的是(

)A.蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程B.蛋白质工程的原理是从预期的蛋白质结构出发最终找到脱氧核苷酸序列的过程C.干扰素结构中改变某个氨基酸提高了它的保存时间是蛋白质工程应用的体现D.蛋白质工程不是对蛋白质结构的直接改造B解析蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程，A正确；蛋白质工程的原理是从预期的蛋白质功能出发最终找到脱氧核苷酸序列的过程，B错误；干扰素结构中改变某个氨基酸提高了它的保存时间是蛋白质工程应用的体现，C正确；蛋白质工程不是对蛋白质结构的直接改造，而是对基因进行改造或基因合成，D正确。5.(2021·玉溪市开学考试)PCR技术中，如何设计引物(

)A.PCR引物要根据需要扩增的目标DNA的碱基序列来设计B.PCR引物要根据已知的DNA序列对应的RNA序列来设计C.PCR引物要根据已知的DNA序列对应的tRNA的序列来设计D.以上都不是正确方法解析设计引物就是直接根据基因序列来设计，即根据需要扩增的目标DNA的碱基序列来设计，A正确。A6.(2021·北京西城区模拟)如图是RT—PCR过程示意图，①和②表示逆转录酶催化的逆转录过程，③表示PCR过程。据图分析下列说法错误的是(

)BA.逆转录酶具有DNA聚合酶的能力B.③过程只需要引物bC.RT—PCR不可直接检测基因表达水平D.RT—PCR可检测新型冠状病毒等RNA病毒解析逆转录酶能催化合成DNA，即具有DNA聚合酶的能力，A正确；③表示PCR过程，需要引物a、b，B错误；RT—PCR可检测基因的转录情况，从而推知基因的表达水平，不可直接检测基因表达水平，C正确；RT—PCR过程是先由RNA逆转录得到cDNA，再通过PCR扩增，故可用于检测新型冠状病毒等RNA病毒，D正确。7.(2021·泉州市期末)下列表示抗凝血酶乳腺生物反应器的制备过程，下列说法正确的是(

)AA.其中①表示受精卵B.其中②表示性别为雄性的胚胎C.常用农杆菌转化法将基因导入受体细胞D.在②发育的任何阶段都可以进行胚胎移植解析图中受体细胞为动物细胞，故①表示受精卵，A正确；该过程是为了制备乳腺生物反应器，故②表示雌性的胚胎，B错误；常用显微注射法将目的基因导入动物细胞，C错误；常在桑葚胚或囊胚期进行胚胎移植，D错误。8.(2021·河北衡水期末)科学家将含人体α-­抗胰蛋白酶基因的表达载体注射到羊的受精卵中，该受精卵发育的雌羊乳汁中含有α-­抗胰蛋白酶。下列有关转基因羊细胞的叙述，不正确的是(

) A.乳腺细胞的高尔基体参与α­-抗胰蛋白酶的分泌 B.胚胎干细胞内α­-抗胰蛋白酶基因能进行复制 C.卵细胞中都含有α­-抗胰蛋白酶基因 D.浆细胞内不表达α­-抗胰蛋白酶基因C解析高尔基体是细胞内蛋白质的加工包装车间，乳腺细胞的高尔基体参与α­-抗胰蛋白酶的分泌，A正确；胚胎干细胞内α­-抗胰蛋白酶基因能随着细胞的分裂而进行复制，B正确；基因工程导入的基因一般为单个基因，减数分裂过程中同源染色体分离，卵细胞中不一定含有α­-抗胰蛋白酶基因，C错误；浆细胞的作用是产生抗体，不表达α­-抗胰蛋白酶基因，D正确。9.(2021·江苏南通期末)蛋白质工程是新崛起的一项生物工程，又称第二代基因工程。下图示意蛋白质工程流程.下列有关叙述错误的是(

)AA.蛋白质工程就是根据人们需要，直接对蛋白质进行加工改造B.蛋白质工程是通过基因改造或基因合成等方法，对现有蛋白质进行改造或制造一种新的蛋白质C.①②过程为转录和翻译D.蛋白质工程是从④开始的解析蛋白质工程并不是直接对蛋白质进行改造的，A错误；由概念可知，蛋白质工程是通过基因改造或基因合成等方法，对现有蛋白质进行改造或制造一种新的蛋白质，B正确；基因通过①转录形成mRNA，之后经过②翻译形成多肽链，C正确；蛋白质工程是从预期蛋白质功能开始的，即④，D正确。10.(2021·北京师大附中期中)现代生物技术应用的叙述，不正确的是(

)A.植物组织培养技术可用于转基因植物的培育B.胚胎移植技术可用于家畜为熊猫等濒危动物代孕C.单克隆抗体技术可用于制备治疗癌症的“生物导弹”D.蛋白质工程可用于改造自然界现有的蛋白质解析转基因植物中要将含有目的基因的受体细胞培养成植株，需要植物组织培养技术，A正确；胚胎移植中的供体与受体应为同一物种，此技术应用于人类，解决了某些不孕症患者的生育问题，应用于家畜则是为了提高家畜的繁殖能力，B错误；“生物导弹”即是单克隆抗体＋放射性同位素、化学药物或细胞毒素，C正确；蛋白质工程可通过对现有基因进行改造而合成自然界中不存在的蛋白质，D正确。B11.(2021·江苏苏州期末)下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点，请分析下列叙述正确的是(

)BA.一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有0个和4个游离的磷酸基团B.若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越高C.用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，可以使用SmaⅠ切割D.使用EcoRⅠ限制酶同时处理质粒、外源DNA可防止质粒和外源DNA发生自身环化解析由于质粒在切割前是一个环状DNA分子，因此上面没有游离的磷酸基团；当质粒被切割后形成了两个末端各有1个游离的磷酸基团，故共有2个游离的磷酸基团，A错误；SmaⅠ酶切位点越多，表示G和C这一对碱基对所占的比例就越高，而G和C之间含有三个氢键，故其热稳定性越高，B正确；质粒中抗生素抗性基因为标记基因，由图可知，标记基因和外源DNA目的基因中均含有SmaⅠ酶切位点，都可以被SmaⅠ酶破坏，故不能使用该酶剪切质粒和含有目的基因的DNA，C错误；构建含目的基因的重组质粒时，使用EcoRⅠ限制酶同时处理质粒、外源DNA会产生相同的黏性末端，不能防止质粒和外源DNA发生自身环化，D错误。12.(2021·四川绵阳月考)金花茶是一种观赏品种，但易得枯萎病。科学家在某种植物中找到了抗枯萎病的基因，通过如图所示的方法培育出了抗枯萎病的金花茶新品种。下列相关叙述正确的是(

)BA.图中②③在基因工程中依次称为目的基因、标记基因B.图中①是载体，具有一个或多个限制酶识别位点C.检测到受体细胞含有目的基因就标志着基因工程操作成功D.抗枯萎病这一性状在后代中能稳定遗传解析图中②③在基因工程中依次称为目的基因、基因表达载体，A错误；图中①是质粒，具有一个或多个限制酶识别位点，可作为载体，B正确；检测到金花茶新品种具有抗枯萎病的特点才能说明基因工程操作成功，C错误；通过基因工程获得的抗枯萎病新品种一般是杂合子，抗枯萎病这一性状在后代中不能稳定遗传，D错误。13.(2021·江苏南通期末)下图是培育抗冻番茄的过程示意图。下列相关叙述正确的是(

)BA.过程①和过程②所用的酶相同B.转基因抗冻番茄植株的获得是定向变异的结果C.重组质粒转入农杆菌的主要目的是筛选目的基因D.可用PCR技术检测抗冻基因是否在番茄植株中表达出相应蛋白质解析过程①获得抗冻基因(目的基因)的过程需要逆转录酶和DNA聚合酶参与，过程②构建重组质粒的过程中需要用到限制性内切核酸酶和DNA连接酶，A错误；转基因抗冻番茄植株的获得是借助基因工程导致定向变异的结果，B正确；重组质粒转入农杆菌的主要目的是将抗冻基因(目的基因)导入受体细胞，C错误；可用PCR技术检测抗冻基因是否插入番茄细胞的染色体的DNA上以及是否转录出mRNA，D错误。14.(2021·合肥市质检)科学家培养出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。下列说法正确的是(

) A.将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，可以用花粉管通道法 B.人的生长激素基因只存在于小鼠的膀胱上皮细胞中 C.进行基因转移时，通常要将外源基因转入受精卵中 D.采用抗原－抗体杂交技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组

解析花粉管通道法用于将目的基因导入植物细胞，A错误；小鼠的体细胞是由同一个受精卵分裂和分化来的，核遗传物质相同，故小鼠的体细胞几乎都含有人的生长激素基因，B错误；由于受精卵的全能性最高，所以进行基因转移时通常将外源基因转入受精卵中，C正确；检测外源基因是否插入了小鼠的基因组通常采用PCR等技术，D错误。C15.(2021·江苏南通质检)基因疫苗是将编码外源性抗原的基因插入到质粒上，然后将质粒直接导入人或动物体内，让其在受体细胞中表达抗原蛋白，诱导机体产生免疫反应。下列说法正确的是(

) A.疫苗经注射进入人体后，可被人体的浆细胞识别 B.接种基因疫苗只能预防特定微生物的感染 C.基因疫苗是指机体能识别特定的基因，从而引起机体产生免疫反应 D.利用蛋白质工程生产的蛋白质疫苗就是基因疫苗B解析浆细胞不能识别抗原，A错误；基因疫苗发挥作用是促使机体产生抗体作用于相应的抗原，这属于特异性免疫，因此接种基因疫苗只能预防特定微生物的感染，B正确；基因疫苗是将编码外源性抗原的基因插入到质粒上，然后将质粒直接导入人或动物体内，让其在受体细胞中表达抗原蛋白，诱导机体产生免疫反应，C错误；利用蛋白质工程生产的蛋白质疫苗不是基因疫苗，D错误。16.(2021·湖北黄冈期中)科学家利用耐盐碱植物中的耐盐基因，培育出了耐盐水稻新品系，过程如图所示。下列说法不正确的是(

)DA.阶段Ⅰ、Ⅱ分别采用重组DNA技术、植物组织培养技术B.可采用抗原—抗体杂交技术对耐盐基因的表达产物进行检测C.水稻细胞内检测到耐盐基因的表达产物，并不能说明育种已成功D.常采用显微注射法将目的基因导入水稻细胞解析阶段Ⅰ表示将目的基因导入水稻细胞中，采用了重组DNA技术；阶段Ⅱ表示利用植物组织培养技术将水稻细胞培养成完整植株，采用了植物组织培养技术，A正确；耐盐基因的表达产物是蛋白质，可用抗原—抗体杂交技术进行检测，B正确；水稻细胞内检测到耐盐基因的表达产物，并不能说明育种已成功，还要进一步检测该水稻是否能够在盐碱地中生长，C正确；将目的基因导入植物细胞常采用花粉管通道法或农杆菌转化法，将目的基因导入动物细胞常采用显微注射法，D错误。17.(2021·山东枣庄三中月考)如图为形成cDNA和PCR扩增的过程示意图。据图分析，下列说法正确的是(

)CA.催化②⑤过程的酶都是DNA聚合酶，都能耐高温B.催化①过程的酶是RNA聚合酶C.④过程发生的变化是引物与单链DNA结合D.如果图中RNA单链中A与U之和占该链碱基总数的40%，则图中一个双链DNA中，A与U之和也占该双链DNA碱基总数的40%解析图中②⑤过程为DNA复制，这两个过程都需要DNA聚合酶的催化，其中⑤过程进行的温度是70～75℃，因此催化该过程的DNA聚合酶能耐高温，但催化③过程的酶不耐高温，A错误；①为逆转录过程，该过程需要逆转录酶的催化，B错误；④为复性过程，发生的变化是引物与互补DNA链结合，C正确；根据碱基互补配对原则，如果图中RNA单链中A与U之和占该链碱基总数的40%，则图中一个双链DNA中，A与T之和也占该双链DNA碱基总数的40%，DNA分子中不含碱基U，D错误。18.运用转基因技术，将奶牛细胞中编码凝乳酶的基因转移到大肠杆菌细胞中，达到大规模生产凝乳酶的目的。下图表示用作载体的质粒和目的基因所在DNA片段。下列操作与实验目的不符的是(

)BA.用限制酶BamHⅠ、Pst

Ⅰ和DNA连接酶构建基因的表达载体B.用含氨苄青霉素的培养基筛选出的即为导入目的基因的细菌C.可用PCR技术大量扩增目的基因D.用Ca2＋处理大肠杆菌使其易于转化解析限制酶不能破坏目的基因，也不能破坏质粒上的标记基因，且应该用不同的限制酶进行切割，以防止质粒和目的基因自身的黏性末端连接或防止目的基因与载体反向连接，所以构建图示的重组质粒的酶切位点应该选BamHⅠ、Pst

Ⅰ，用DNA连接酶将重组基因连接，A正确；载体和导入目的基因的载体上都存在氨苄青霉素抗性基因，因此不能依此来确定筛选出的是否为导入目的基因的细菌，B错误；可用PCR技术大量扩增目的基因，C正确；用Ca2＋处理大肠杆菌使其成为感受态细胞，易于转化，D正确。19.为提高大豆对磷元素的吸收能力，研究人员利用农杆菌转化法将水稻的耐低磷基因OsPTF转移到大豆植株中，下图为重组Ti质粒上T－DNA的序列结构示意图。下列相关叙述不正确的是(

)BA.以水稻RNA为模板通过逆转录及PCR扩增可获得大量OsPTF基因B.RNA聚合酶与启动子1识别并结合后，启动抗除草剂基因的转录C.可通过含除草剂的选择培养基筛选含有目的基因的大豆愈伤组织D.用EcoRⅠ、BamHⅠ双酶切重组Ti质粒后，经电泳分离至少得到两条带解析以水稻RNA为模板通过逆转录可以合成cDNA，然后再以cDNA为模板利用PCR扩增可获得大量OsPTF基因，A正确；识图分析可知，抗除草剂基因位于启动子2的后面，因此RNA聚合酶与启动子2识别并结合后，启动抗除草剂基因的转录，B错误；由于图中T­-DNA的序列中含有目的基因和抗除草剂基因，故可通过含除草剂的选择培养基筛选含有目的基因的大豆愈伤组织，C正确；用EcoRⅠ、BamHⅠ双酶切重组Ti质粒后，经电泳分离至少得到两条带，即含耐低磷基因OsPTF的片段和含有除草剂基因的片段，D正确。20.(2021·天津一中期末)如图为某种质粒的简图，小箭头

所指分别为限制性内切核酸酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶

切位点，P为转录的启动部位。已知目的基因的两端有

EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，受体细胞为无任何抗

药性的原核细胞。下列有关叙述正确的是(

) A.将含有目的基因的DNA与质粒分别用EcoRⅠ酶切，在DNA连接酶作用下，生成由两个DNA片段之间连接形成的产物有两种 B.DNA连接酶的作用是将酶切后得到的黏性末端连接起来形成一个重组质粒，该过程形成两个磷酸二酯键 C.为了防止目的基因反向连接和质粒自身环化，酶切时可选用的酶是EcoRⅠ和BamHⅠ D.能在含青霉素的培养基中生长的受体细胞表明该目的基因已成功导入该细胞C解析将含有目的基因的DNA与质粒分别用EcoRⅠ酶切，在DNA连接酶作用下，可生成由两个含目的基因的原DNA片段之间进行连接、由含目的基因的DNA片段与质粒周长等长的链状DNA相互连接形成的链状DNA、二倍于原质粒周长的环状DNA三种类型，A错误；DNA连接酶的作用是将酶切后得到的具有相同黏性末端连接起来形成一个重组质粒，该过程形成四个磷酸二酯键，B错误；EcoRⅠ和BamHⅠ的识别序列不同，获取目的基因和切割质粒时，同时选用EcoRⅠ和BamHⅠ切割，目的基因两端形成的末端不同，切割开的质粒两端形成的末端也不同，再用DNA连接酶连接，可以防止目的基因反向连接和质粒自身环化，C正确；题图显示，在构建基因表达载体的过程中质粒中的青霉素抗性基因和四环素抗性基因都不会被破坏，因此能在含青霉素和四环素的培养基中生长的受体细胞不能表明目的基因已成功导入该细胞，D错误。二、非选择题：本题包括5小题，共50分。21.(10分)(2021·山东青岛期中)研究发现，新冠病毒为有包膜病毒，基因组为单股正链RNA，基于其特异性的基因组序列，科研工作者研制的新冠病毒核酸检测试剂盒(RT—PCR荧光探针法)为新冠病毒感染的肺炎疫情防控提供了快速、简便、精准的核酸检测方案。RT—PCR荧光探针法即实时荧光定量PCR技术，通过荧光标记的特异性探针，对PCR产物进行标记跟踪，实时在线监控反应过程，通过仪器和相应的软件分析结果，对待测样品通过检测荧光信号的累积(以Ct值表示)来确定样本中是否有病毒核酸。新冠病毒检测的具体操作过程如图。根据所学知识，请回答下列相关问题：(1)新冠病毒的相关蛋白能在宿主细胞中正常合成及发挥作用的理论基础是____________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)该反应体系中，过程①需要用到________酶，在该体系中使用TaqDNA聚合酶而不使用大肠杆菌DNA聚合酶的主要原因是______________________。(3)过程③使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是________，其作用是破坏了DNA双链分子中的________，引物A、B的作用是___________________________________________________________________________________。(4)采集新冠肺炎疑似患者的咽部细胞样本提取核酸进行上述RT—PCR过程，每一个扩增出来的DNA序列，都可与预先加入的一段荧光标记探针结合，产生荧光信号，扩增出来的目的基因越多，观察到的Ct值就越________。(5)RNA病毒分两类，一类以自身RNA为模板直接进行RNA的复制；另一类以自身RNA为模板逆转录合成DNA，再以DNA为模板合成RNA，即逆转录病毒。请利用同位素标记法设计实验检测新冠病毒是否是逆转录病毒。(现有放射性同位素标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸及其他必要试剂，请简要写出实验思路)_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。答案(1)生物的遗传物质都是核酸，具有相似的组成成分和结构；遗传信息的传递都遵循中心法则(或都遵循碱基互补配对原则)；所有生物共用一套密码子(2)逆转录TaqDNA聚合酶耐高温，而大肠杆菌DNA聚合酶在高温下会失活(3)加热至90℃以上氢键定位目的基因的位置，与模板链结合并为子链的延伸提供起点(4)大(5)实验思路：设法将新冠病毒破碎，获取其提取液，置于试管中，向试管中加入适量的放射性同位素标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸、逆转录酶、ATP等，并将其放在适宜的温度和pH条件下，一段时间后检测试管中DNA分子有无放射性。解析(1)生物的遗传物质都是核酸，具有相似的组成成分和结构，遗传信息的传递都遵循中心法则(都遵循碱基互补配对原则)，所有生物共用一套密码子，故新冠病毒的相关蛋白能在宿主细胞中正常合成及发挥作用。(2)过程①表示mRNA逆转录形成cDNA，需要逆转录酶的催化，由于TaqDNA聚合酶耐高温，而大肠杆菌DNA聚合酶在高温下会失活，故在PCR体系中使用TaqDNA聚合酶而不使用大肠杆菌DNA聚合酶。(3)过程③使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是加热至90℃以上，使碱基对之间的氢键断裂，引物A、B的作用是定位目的基因的位置，与模板链结合并为子链的延伸提供起点。(4)由于通过RT—PCR扩增出来的DNA序列都可与预先加入的一段荧光标记探针结合，产生荧光信号，故扩增出来的靶基因越多，荧光就越强，观察到的Ct值就越大。(5)要利用同位素标记法检测新冠病毒是否是逆转录病毒，可利用DNA和RNA之间的物质组成差异设计实验，由于T属于DNA特有的碱基，故可设法将新冠病毒破碎，获取其提取液，置于试管中，向试管中加入适量的放射性同位素标记的胸腺嘧啶脱氧核苷酸、逆转录酶、ATP等，并将其放在适宜的温度和pH条件下，一段时间后检测试管中DNA分子有无放射性，若子代DNA有放射性，说明新冠病毒属于逆转录病毒。22.(10分)(2021·北京海淀区模拟)抗体的结构如图所示，

它有两条H链和两条L链。同一物种C区氨基酸序列

恒定，不同抗体的结合抗原的V区氨基酸序列有差异。(1)抗体结构中的肽键数目为p，氨基酸数目为a，二者的关系式为________。(2)取免疫后小鼠的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，经筛选得到杂交瘤细胞。将得到的杂交瘤细胞进行克隆化培养和______检测以获得_____________的杂交瘤细胞。将得到的杂交瘤细胞进行体内培养或放入________培养箱进行体外培养，从细胞培养液中提取出单克隆抗体。(3)由于小鼠单克隆抗体会使人产生免疫反应，导致其治疗效果大大降低，科学家制备了嵌合性单克隆抗体，初步解决了这一问题。推测嵌合性抗体应由小鼠单克隆抗体的________区和人抗体的________区组合而成。(4)为进一步获得更符合治疗要求的单克隆抗体，科研人员对抗体结构进行精细研究，找到既不影响抗体空间结构又降低免疫排斥反应的________序列，通过基因工程技术对抗体结构进行改造以降低人体的免疫排斥反应，得到的单克隆抗体属于________工程的产物。答案(1)p＝a－4(或“a＝p＋4”)

(2)抗体能迅速大量增殖并产生所需抗体CO2(恒温)

(3)V

C

(4)氨基酸蛋白质解析(1)抗体包含4条肽链，肽键数目为p，氨基酸数目为a，由于蛋白质分子中肽键数＝氨基酸数－肽链数，二者的关系式为p＝a－4(或“a＝p＋4”)。(2)将得到的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，获得既能迅速大量增殖又能产生所需抗体的杂交瘤细胞。杂交瘤细胞的体外培养需要温度、pH适宜的培养液，可放入CO2(恒温)培养箱中培养。(3)取免疫后小鼠的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，生产单克隆抗体；识别抗原的关键部位是V区，不应改变，嵌合性抗体应由小鼠单克隆抗体的V区和人抗体的C区组合而成，以降低免疫排斥反应。(4)通过基因工程技术对抗体结构进行改造以降低免疫排斥反应，首先应找到既不影响抗体空间结构又降低免疫排斥反应的氨基酸序列，得到的单克隆抗体是自然界中原本没有的，属于蛋白质工程的产物。23.(10分)(2020·丹江口高二期末)基因工程在农业中的应用发展迅速，基因可导入农作物中，用于改良该农作物性状。通过多重PCR技术可扩增并检测转基因农作物的外源基因成分。多重PCR是在一个PCR反应体系中加入多对引物，针对多个DNA模板或同一模板的不同区域，扩增多个目的基因的PCR技术。请回答： (1)我国科学家将Bt毒蛋白基因、鱼的抗冻蛋白基因、控制果实成熟的基因导入农作物，可获得________、________、延熟的转基因作物。 (2)每种基因扩增需要一对引物的原因是_________________。下表是A、B、C三种基因的引物，据表分析，引物特异性主要体现在_________________。A基因引物15′GCTCCTACAAATGCCATCATTGC3′引物25′GATAGTGGGATTGTGCGTCATCCC3′B基因引物15′TGAATCCTGTTGCCGGTCTT3′引物25′AAATGTATAATTGCGGGACTCTAATC3′C基因引物15′CCTTCATGTTCGGCGGTCTCG3′引物25′GCGTCATGATCGGCTCGATG3′(3)PCR过程中温度从90℃以上降到55℃左右的目的是____________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)检测人员通过多重PCR技术确定农作物中是否含有A、B、C三种转基因。将A、B、C三种基因和待测的农作物基因样品进行PCR，扩增后的产物再进行电泳，结果如图。1为已知A、B、C三种基因对照，2、3、4为待测农作物样品据图分析：含有三种转基因的农作物是___________，判断依据是___________________________________________________________________。(5)与PCR技术相比，多重PCR技术的优势是___________________________________________________________________________________________。答案(1)抗虫抗冻(2)DNA在加热后得到的两条单链均作为PCR扩增的模板，其序列不同，每一单链对应一条引物核苷酸的数目不同，序列不同且每对引物之间不能互补配对(3)使引物与模板链(或“单链”)相应序列互补结合(4)样品4样品4的PCR扩增后的结果与已知三种基因的电泳结果一致(5)一次检测效率高(可同时检测多种基因)解析(1)Bt毒蛋白基因表达可提高农作物棉花抵抗棉铃虫的能力，鱼的抗冻蛋白基因表达可提高农作物的抗冻能力，控制果实成熟的基因表达有利于果实延熟，故将Bt毒蛋白基因、鱼的抗冻蛋白基因、控制果实成熟的基因导入农作物，可获得抗虫、抗逆、延熟的转基因作物。(2)每种基因扩增都需要一对引物(两种)，其原因是DNA在加热后得到的两条单链均作为PCR扩增的模板，其序列不同，每一单链对应一条引物。根据表中A、B、C三种基因引物的碱基序列可知，引物的特异性主要体现在核苷酸的数目不同，序列不同且每对引物之间不能互补配对。(3)PCR过程中温度从90℃以上降到50℃左右的目的是使引物与模板链(或“单链”)相应序列互补结合，即复性。(4)根据电泳结果可知，样品4的PCR扩增后的结果与已知三种基因的电泳结果一致，可知含有三种转基因的农作物是样品4。(5)根据题意，多重PCR是在一个PCR反应体系中加入多对引物，针对多个DNA模板或同一模板的不同区域，扩增多个目的基因的PCR技术。可知与PCR技术相比，多重PCR技术的优势是一次检测效率高(可同时检测多种基因)。24.(10分)(2021·浙江效实中学期中)为解除柑橘黄龙病对柑橘产业的严重影响，美国科学家近日从菠菜中获得了一种能抵抗柑橘黄龙病的蛋白质的基因，并已经成功地进行了一系列培育转基因植株的研究。其过程大致如下，请分析后作答。(1)有两种识别切割序列完全不同的限制酶E和F从菠菜基因组DNA上切下目的基因并取代Ti质粒(4.0kb)上相应的EF区域(0.2kb)形成重组质粒，该过程还必须用到的酶是________，形成的重组质粒________(填“能”或“不能”)被E酶切割。(2)若图中Ti质粒上限制酶G切割位点与E的切割位点距离0.9kb，限制酶H切割位点距F切割位点0.5kb，分别用限制酶G和限制酶H酶切两份重组质粒样品，结果如下表。据此可判断目的基因的大小为________kb；并将目的基因内部的限制酶H切割位点标注在下图中。GH1.8kb3.2kb1.3kb3.7kb(3)在上述培育过程中两次用到农杆菌，它与柑橘细胞相比较，在结构上最主要的区别是____________，导入重组质粒后的农杆菌的作用是____________。答案(1)DNA连接酶能(2)1.2标记如图(3)无核膜包被的细胞核感染植物，将目的基因转移到受体细胞中解析(1)将两个DNA片段连接起来需要DNA连接酶；重组质粒中含有E酶的识别序列和切割位点，因此形成的重组质粒能被E酶切割。(2)已知Ti质粒的长度为4kb，其中EF区域长度为0.2kb，所以切去EF段后的质粒长度为4－0.2＝3.8kb。现用限制酶G切割重组质粒样品，结果被酶G切割成1.8kb和3.2kb两个片段，可知重组质粒的总长度为1.8＋3.2＝5kb，所以目的基因长度为5－3.8＝1.2kb。重组质粒中G的切割位点距E的切割位点0.9kb，单独用限制酶G切割后产生1.8kb和3.2kb两个片段，说明在重组质粒中