基因工程基础知识填空

专题一基因工程1.1DNA重组技术基础工具一、基因工程基础概念1.概念:基因工程是指根据大家愿望,进行严格设计,并经过_____________和___________等技术,给予生物以新__________,从而发明出更符合大家需要新__________和___________。因为基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工,所以又叫做_________________。2.基础原理:______________3.理论基础(1)不一样生物基因能够拼接结构基础——细胞生物遗传物质都是_______,都是以_____________为基础单位组成双链大分子。(2)目基因转入后能够表示基础——全部生物共用一套__________。(3)生物遗传信息表示都遵照_________。4.优点(1)目性强,能_______改造生物性状。(2)克服________________障碍。二、限制性核酸内切酶——分子手术刀1.简称:__________。2.起源:关键是从__________中分离纯化而来。3.功效特点:特异性,即识别双链DNA分子某种特定__________,而且使每一条链中____________两个核苷酸之间_________断开。4.酶切结果:_______末端和_______末端。画出EcoRⅠ酶切后结果:↓GAATTCCTTAAG↑三、DNA连接酶——“分子缝合针”1.作用实质:将双链DNA片段“缝合”起来,恢复被限制酶切开了两个核苷酸之间________。2.作用前提:两个DNA分子必需含有_________。3.种类(1)E·coliDNA连接酶①起源:___________②功效:只能连接___________(2)T4DNA连接酶①起源:____________②功效:既能够连接___________,又能够连接_________,但连接_________时效率比较低。【拓展】比较DNA连接酶与DNA聚合酶DNA连接酶DNA聚合酶作用实质都是催化两个核苷酸之间形成_______是否需模板______________连接DNA链____链____链作用过程在两个DNA片段之间形成__________将_________加到已存在核苷酸链上,形成____________作用结果将两个DNA片段连接成__________合成___________四、基因进入受体细胞载体——“分子运输车”1.基因工程中最常见载体——_______(1)起源:________等微生物(2)结构:裸露、结构简单、独立于___________之外,并含有_______________________分子。2.基因载体必需含有条件(1)有______________个限制酶切割位点,供外源DNA片段（基因）插入其中。(2)能在宿主细胞内_________,或整合到染色体DNA上,随染色体DNA进行________。(3)有特殊___________,如四环素抗性基因等,供重组DNA判定和选择。(4)必需是______,不会对受体细胞有害。(5)_______适合,方便提取和在体外进行操作。3.载体种类:除质粒外,还有____________、__________________等。4.在进行基因工程操作中,真正被用作载体质粒,都是在天然质粒基础上进行过_________。1.2基因工程基础操作程序一、基因工程基础操作程序1._____________获取。2._____________构建。3.将目基因_____________。4.目基因_____________。二、目基因获取1.目基因关键是_________结构基因。2．获取目基因方法(1)从基因文库中获取目基因①基因文库概念:将含有某种生物不一样基因很多__________,导入_______群体中储存,各个_______分别含有这种生物不一样基因,称为基因文库。②基因文库分类:可分为______文库和________文库(如cDNA文库)。(2)利用PCR技术扩增目基因①PCR技术是_____________缩写。PCR是一项在生物体外_____________核酸合成技术。②PCR技术原理:DNA_________。③PCR扩增前提:要有一段已知目基因_______,方便依据这一序列合成引物。④PCR扩增条件:_____、_____(目基因),原料——_______________(即dCTP、dATP、dGTP、dTTP),耐高温__________酶(Taq酶)。⑤PCR扩增过程a.变性:加热到90-95℃b.复性（退火）:冷却到55-60℃c.延伸:加热到70-75℃⑥结果:目基因以____方法成指数形式扩增。(3)人工合成法:假如基因比较___,且________,能够经过___________用化学方法直接人工合成。【拓展】PCR技术和DNA复制比较PCR技术DNA复制相同点原理__________________原料__________________条件_____、_____、_____不一样点解旋_____解旋_______催化场所_____复制________酶热稳定DNA聚合酶细胞内含有DNA聚合酶结果在短时间内形成_________形成__________三、基因表示载体构建基因表示载体构建是实施基因工程第二步,也是基因工程_______1.基因表示载体构建目:使目基因在受体细胞中__________,而且能够_______给下一代,同时,使目基因能够__________。2.基因表示载体组成:除了目基因外,还必需有_______、_______以及__________等。(1)开启子:位于目基因_______,是一段有特殊结构DNA序列,是_____________识别和结合部位,有了它才能驱动基因转录出mRNA,最终取得所需蛋白质,即转录开始部位。(2)终止子:位于目基因______,也是一段有特殊结构DNA序列,使转录在所需地方停止下来,即转录停止部位。(3)标识基因:用于判别受体细胞中是否________,从而将含有目基因细胞_______出来,常为_____________,如氨苄青霉素抗性基因、四环素抗性基因。3．表示载体构建过程中,获取目基因与切割质粒时通常见_______限制性核酸内切酶,目是产生相同___________,方便于连接。四、将目基因导入受体细胞______概念:目基因进入受体细胞内,而且在受体细胞内维持稳定和表示过程,称为_______。1.将目基因导入植物细胞(1)常见受体细胞:植物________或________。(2)方法:____________法、_________法、_________法,其中,___________法是导入植物细胞最常见方法。①农杆菌特点:易感染双子叶植物和裸子植物。当植物体受到伤害是,伤口处细胞会分泌大量___________,吸引农杆菌移向这些细胞,这时农杆菌中________上________(可转移DNA)可转移到受体细胞染色体DNA上。②转化过程:将_________插入到___________上,经过农杆菌转化作用,能够使目基因进入植物细胞,并将其插入到植物细胞中染色体DNA,使目基因遗传特征得以_________________。2.将目基因导入动物细胞(1)常见受体细胞:__________。(2)常见方法:______________。(3)基础操作程序:_____含有目基因表示载体→______(受精卵)→__________→胚胎移植→新性状动物3.将目基因导入微生物细胞(1)常见受体细胞:________细胞,其中________最为广泛。(2)原核生物特点:①________;②多为单细胞;③遗传物质相对______(3)转化方法:_____________法。(4)转化过程①用_________处理受体细胞（如大肠杆菌）,使细胞处于一个能吸收周围环境中DNA分子生理状态,这种细胞称为____________。②将重组表示载体DNA分子溶于_______中与________混合,在一定_____下促进__________吸收DNA分子,完成转化过程。

五、目基因检测与判定目基因导入受体细胞是否能够______________,只有经过检测与判定才能知道,这是基因工程第四步,也是检验基因工程是否成功一步。类型步骤检测内容方法结果显示____检测第一步检测转基因生物染色体上是否插入了目基因_________________(DNA探针＋转基因生物DNA)是否___________第二步检测目基因是否转录__________________(DNA探针＋转基因生物mRNA)是否___________第三步检测目基因是否翻译成蛋白质___________________是否_______________水平检测包含抗虫、抗病接种试验,以确定是否含有抗性及抗性程度;基因工程产品需要与天然产品功效进行活性比较等1.3基因工程应用一、植物基因工程硕果累累植物基因工程技术关键用于提升农作物____________(如抗除草剂、抗虫、抗病、抗干旱和抗盐碱等),以及改良农作物______和利用植物生产_______等方面。动物基因工程前景宽广动物基因工程关键应用于动物品种______、建立________、器官移植等多方面。(1)用于提升动物生长速度:将_______________导入动物体内,以提升动物生长速率。(2)用于改良畜产品品质。(3)用转基因动物生产药品:将药用蛋白基因与____________开启子等调控组件重组在一起,经过__________等方法,导入哺乳动物_______中,然后,将受精卵送入母体内,使其生长发育成________。转基因动物进人泌乳期后,能够经过分泌______来生产所需要药品,称为乳腺(房)生物反应器。(4)用转基因动物作器官移植供体:将器官供体基因组导入某种调整因子,抑制_____________或设法除去___________,再结合__________,培育出没有_________________转基因克隆动物器官。三、基因工程在医学、药学上应用1．基因工程药品:利用“工程菌”生产基因工程药品包含__________、______、______、______、______等。工程菌:用基因工程方法,使外源基因得到高效率表示菌类细胞株系通常称为“工程菌”。2．基因诊疗:是把_________导入病人体内,使该基因________发挥功效,从而达成诊疗疾病目,这是诊疗遗传病最有效手段,包含___________和____________。补1:用于基因诊疗基因有三种类型:①_______________________________;②_______________________________;③_______________________________.补2:基因诊疗。原理:_____________;工具___________1.4蛋白质工程1.实质:依据关系,经过,对现有蛋白质进行改造或发明自然界不存在蛋白质。2.基础原理:预期→设计→推测