浅析五色糯米饭中6 种合成着色剂检测方法

浅析五色糯米饭中6种合成着色剂检测方法制作食用五色糯米饭，这一风味美食与祭祖娱神活动融合在一起，充满着民族、地方情趣。饱含植物受广西壮家人的喜爱，被看作吉祥如意、五谷丰登的象征。面对如此色鲜味美的食物，是否会市民能否放心食用?针对这个问题，本研究开展了五色糯米饭专项风险监测工作。目前，《食品中合成着色剂的测定》 (GB/T5009.35—2016)采用聚酰胺吸附法测定合成着色剂，操作较为烦琐、耗时，且主要适用于酒类、汽水类、糖于容易吸附着色剂而干扰测定[4-6],所以该方法不太适用于五色糯米饭等成品粮中合成色素的测1.1仪器与试剂耗材超高效液相色谱仪(WatersAcquityUPLCH-Class),PDA检测器；十万分之一电子天平(梅特勒-托利多XS205DU);超声波清洗器(昆山市超声波仪器有限公司);离心机(Sigama)。1.1.2试剂耗材(1)乙酸铵溶液(0.02mol/L);柠檬酸溶液；甲醇-甲酸溶液(6+4);氨水；乙醇一氨水溶液。1.1.3标准品1.2色谱条件资生堂MGⅢ-C18,直径x长度(mm):(2.0×150)mm;PDA检测器，检测波长(柠檬黄430nm,新红、苋菜红、胭脂红、日落黄520nm,亮蓝625nm);流动相，以乙洗脱(0~4min:A96%～80%;4~7min:A80%～5%;7~1030℃;进样量10μL。1.3样品预处理称取5.000g(精确至0.001g)粉碎样品，置于50mL刻度离心管中，加入乙醇-氨溶液10mL,涡旋5min,5000rpm离心5min,将上清液过滤，残渣再重复提取1次，合并上清液作为样品溶液。将样品溶液置于预处理过的固相萃取柱中，待试样全部流出，依次用5mL10%甲酸甲酯溶液、5mL水清洗，弃去全部流出液，再用5mL25%氨化甲醇洗脱，收集洗脱液，置50℃浓缩至近干，用水溶解并定容至25mL,经0.45μm微孔滤膜过滤，滤液上机分析。1.4测定法精密吸取标准曲线溶液和样品提取液各10μL,注入超高效液相色谱仪测2.1波长选取GB5009.35—2016方法中采用254nm的波长最终确定6种合成着色剂(胭脂红、苋菜红、新红、柠檬黄、日落黄、亮蓝),检测波长如表1所示。同时，6种合成着色剂标准溶液在3个波长通道(430、520、625nm)的色谱图，如图1所示。2.2检出限的确定在最低浓度标准溶液液相色谱图中，按3倍信噪比浓度作为检出限。采用本方法处理，6种合成着色剂在不同波长测定时的检出限见表2。由表2可以看出，在多波长下测定的检出限，均较254nm单波长下要低，尤其是亮蓝。由此可见，本研究设定的波长可以用来测定这6种合成色素，有效提高检测灵敏度。2.3标准曲线绘制以浓度为横坐标、峰面积为纵坐标做标准曲线进行线性回归，结果见表3。表3标准曲线结果表由表3可以看出，在0.25~20mg·L-1的范围内，6种合成着色剂均具有较好的线性关系。2.4加标回收测定精确配制6种合成着色剂浓度均为10.0mg·L-1的混合标准溶液，加入空白五色糯米饭样品基质中进行加标回收实验，结果见表4。表4样品加标回收试验结果表由表4可以看出，本方法回收率为83%～104%,且实验所得回收率较稳定。因此，该方法具有较高的准确度和本研究确立了五色糯米饭中6种合成着色剂的高效液相色谱检测方法，用添加乙醇的碱化试液，提取五色糯米饭中的合成着色剂，并进行固相萃取柱净化。用0.02mol·L-1醋酸铵溶液作为流动相A、甲醇作为流动相B,进行梯度洗脱，并采用不同波长同时测定提取液中的6种合成着色剂(胭脂红、苋菜红、新红